室壁瘤对左前分支阻滞的影响

室壁瘤的心肌组织失去了电活动能力,心室除极方向背离室壁瘤而行.本文报道1例室壁瘤并发左前分支阻滞,但心电图呈现电轴右偏、顺钟向转位.

心肌细胞移植治疗心肌梗死的研究现状

在过去的20年里,全世界心肌梗死(心梗)的发病率显著升高,在我国更呈加速上升的趋势.心梗区心肌只能由纤维瘢痕组织代替;残留心肌则肥厚使心室重构,进而发展为心力衰竭.目前,外科治疗心梗的方法有冠状动脉旁路移植术、经皮冠状动脉腔内成形术、激光心肌血运重建术等.但这些方法只改善梗死区局部的血运,对已纤维化的心肌组织没有作用.如何促使梗死区的瘢痕组织再心肌化是心脏外科的新探索.早期有研究[1],在小鼠心梗区移植骨骼肌成肌细胞.但骨骼肌细胞相互之间不能同步收缩,与心肌细胞有着不同的电生理特性,会造成心律失常.亦有研究[2],将胚胎平滑肌细胞植入大鼠心梗区,然而平滑肌细胞与心肌细胞在生理特性方面差别较大,不符合心脏的生理要求.因此,符合心脏生理要求的心肌细胞移植就成了新的研究热点.

3D打印技术在心血管组织工程中的研究进展

近年来，3 D打印技术已成为心血管组织工程领域的研究热点，并取得了一些进展。但是将来如何应用到临床上仍需进一步的研究。本文回顾近年来3D打印技术在心肌组织、心脏瓣膜、冠状动脉应用的研究进展，并对未来的研究进行展望。

组织工程化心肌的研究进展

组织工程学是研究、开发、修复和改善损伤组织和功能的生物替代物的一门科学[1].其发展方向就是制备出功能日益完善的各种组织器官的生物替代物.组织工程化心肌(tissue engineering, myocardium)就是利用心肌细胞和相关的细胞外基质,制备并重建三维心肌组织[2].

多种自身成体干/祖细胞移植治疗缺血性心脏病

缺血性心脏病是当今病死率高的疾病之一[1].近年来,细胞组织工程实现了细胞的体外培养、分化,移植入受损心肌组织中,替代坏死心肌或增加心肌供血,改善心功能.

常温充氧晶体和氧合血停搏液持续灌注对心肌能量代谢的影响

我们从能量代谢角度探讨常温体外循环(CPB)时,常温充氧晶体和氧合血停搏液持续灌注的心肌保护效果,报告如下.方法健康犬15条,随机均分3组,建立体外循环主动脉根部连接灌注装置后,对照组在低温CPB下灌注4℃ St.Thomas液(钾浓度16mmol/L)10ml/kg,20分钟复灌一次;温血组和温晶组参照Menasche方法[1]并加以改进,先快速推入10ml高钾液(K+=8mmol/10ml),继以常温(37℃)中度稀释的机内氧合血[PO2:300～401mm Hg(1mm Hg=0.133kPa)]或常温充氧低钾St.Thomas液(K+=4mmol/L,PO2 360～420mm Hg)每分钟2ml/kg,另管并行滴注上述高钾液每分钟0.5ml.循环共阻断60分钟.于阻断前、阻断15、50分钟、开放20分钟4个时点取心尖部心肌组织立即置于液氮保存,备测定各项指标用.

临产前后产妇子宫平滑肌组织热休克蛋白70的表达化及其意义

分娩的发动与炎症因子有关[1].热休克蛋白70,既是分子伴侣,又是炎症因子--白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)的强力诱导剂和强效的免疫佐剂[2].研究证明,心肌组织中热休克蛋白27表达上调可导致心肌的收缩功能增强[3].为探讨子宫平滑肌组织中热休克蛋白70在临产前后的表达变化及其与分娩发动的关系,我们进行了研究,现将结果报道如下.

小儿暴发型心肌炎合并阿-斯综合征的急救治疗

近年来小儿病毒性心肌炎发病率有上升趋势,由于急性炎症累及心肌组织的广泛性及严重度不同,其临床表现及结局差异甚大.多数普通型病例预后良好,但少数危重病例,起病急骤呈暴发型,可导致心源性休克、急性心功能不全及严重心律失常,后者导致阿-斯综合征,预后严重,本文重点讨论暴发型心肌炎所致阿-斯综合征的临床特点及急救治疗.

病毒性心肌炎心肌组织中骨桥蛋白表达的研究

病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)是常见的心血管疾病之一,近年来发病呈上升趋势.研究表明大量的单个核细胞(T、NK、MΦ等)在局部浸润及其造成的后续免疫损伤在VMC的发病中占有重要的地位[1].骨桥蛋白(OPN)是一种基质功能性非胶原蛋白.已证实OPN在炎症浸润、细胞免疫、组织修复、血管重塑、细胞凋亡等方面扮演着重要角色[2-4].为此,我们以柯萨奇病毒B3(CVB,)感染BALB/c小鼠制作VMC模型,通过实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CVB3感染后0、4、7、9、14和21 d OPN的表达水平,分析其表达与炎症细胞浸润的关系,为VMC发病机制的研究提供依据.

克隆测序鉴定柯萨奇病毒B3m诱导BALB/c小鼠急性心肌炎模型

小儿病毒性心肌炎发病率的逐年增高,越来越受到专家学者的关注.关于病毒性心肌炎的发病机制及药物防治等基础性与应用性研究都需要一个可靠而稳定的动物模型[1].我们以质粒克隆测定BALB/c心肌炎模型小鼠的心肌组织中CVB3m序列,对测序结果与已知CVB3m cDNA全序列进行了比较,并配合病理观察,鉴定小鼠心肌炎模型.材料与方法1. 材料:(1)病毒:CVB3m(上海第二军医大学沈茜教授惠赠),Hela细胞传代,TCID50为3.67×10-4.(2)动物:70只BALB/c小鼠,5～6周龄,雄性,体重18 g左右(中国医科大学动物中心提供,SPF级).(3)仪器:DNA测序仪(ABI PRISMTM 377X)、蛋白核酸分析仪(美国Beckman DU-600)、PCR仪(美国PE-9600),倒置显微镜(德国LEICA)、超薄切片机(LKB-V)、电子显微镜(日本HITACHI H-600)、低温高速离心机(德国Heraeus Biofuge 28RS)、电泳仪(上海天能EPS-300);CMIAS医学图像分析管理系统、天能凝胶分析系统.(4)试剂:TRIZOL总RNA提取试剂(GIBCO公司)、RT-PCR试剂盒(大连宝生物工程有限公司)、AmpliTaq DNA聚合酶循环反应试剂盒(PE公司).(5)引物:CVB3m特异引物为软件设计所得,CVB3m上游引物(2458-2476)为 5＇- GTG GAA GAC GCG ATA ACA - 3＇,下游引物(3286-3269)为5＇- CAT TGT AGT GAT GCT TTG - 3＇,扩增片段计828 bp;测序用引物F(M13-47)与引物R(RV-M),分别为 5＇- CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC- 3＇与5＇- GAG CGG ATA ACA ATT TCA CAC AGG - 3＇.引物由宝生物工程(大连)有限公司合成.2.实验方法:(1)分组与小鼠CVB3m急性心肌炎模型的建立:70只小鼠按体重随机分为对照组(A组)与模型组(B组).B组经腹腔注射接种0.2 ml含TCID50的CVB3m.A组予以等量不含病毒的Hela 细胞培养上清液.(2)取材:各组分别于感染后3、5、7、10、14 d随机活杀6只鼠,取心肌组织,分别用于克隆测序及病理组织学检查.(3) RT-PCR:①提取总RNA:取心肌组织加TROZOL制成匀浆,经超声破碎、提取,氯仿、异丙醇等分离、沉淀,后用适量的无RNase水溶解RNA沉淀.②合成 cDNA:将总RNA 反转录合成第一条cDNA .条件:65℃ 1 min、30 ℃ 5 min、15～30 min内匀速升温至 65 ℃、65 ℃ 15～30 min、98 ℃ 5 min、5 ℃ 5 min.③PCR扩增:将反转录的cDNA进一步扩增,扩增参数:94℃ 3 min,94 ℃ 30 s、56 ℃ 30 s、72℃ 1 min,30个循环后72 ℃ 5 min.④产物测定:选取模型组CVB3m引物RT-PCR扩增产物,再次扩增,以蛋白核酸分析仪测吸光度A值(曾称光密度)并计算DNA产量.⑤ RT-PCR产物检测: 5 V/cm电压电泳45 min,确定目标DNA,以天能凝胶分析系统拍摄、分析.(4) RT-PCR扩增产物克隆与测定序列:①回收目的DNA:切取目的DNA片段,加入Nacl溶液,加热融化,缓冲液反复洗,离心,回收上清液即得.②连接与转化:将DNA、载体(pMD18)及连接酶混匀, 16℃恒温1 h;与JM109感受态细胞冰浴1 h;加葡萄糖和SOB,37 ℃摇床1 h;取20 μl涂平板,培养过夜.③质粒扩增与纯化:将培养的质粒再次扩增,并用碱裂解法提取质粒,限制性内切酶切割,得到纯化的质粒.(5)序列测定与比较:应用DNA测序仪测定克隆序列,将测定序列结果与已知CVB3m cDNA全序列比较[2].

重组人血管内皮抑制素对小鼠肿瘤和心肌中血管结构及血管生成相关因子表达的影响

目的 观察重组人血管内皮抑制素对小鼠肿瘤及心肌中微血管影响的差异.方法 40只小鼠随机分为空白对照组(未荷瘤,生理盐水100 μl/d)、药物对照组(未荷瘤,重组人血管内皮抑制素400 μg/d)、模型组(荷瘤,生理盐水100 μl/d)和实验组(荷瘤,重组人血管内皮抑制素 400 μg/d),分别处理28 d.实验前后称量小鼠体重,测量移植瘤体积.采用免疫组化法检测小鼠心脏和移植瘤组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)以及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达情况,计数微血管密度(MVD).以CD34与Masson双染法观察微血管结构的变化.结果 实验组小鼠肿瘤体积的增加值为(48.18±37.31)mm3,低于模型组[(113.80±73.27)mm3,P＜0.05];各组小鼠体重变化的差异无统计学意义(P＞0.05).应用重组人血管内皮抑制素后,移植瘤组织中MMP-9和VEGF蛋白的表达显著降低,移植瘤组织中MMP-2、HIF-1α以及心肌组织中MMP-2、MMP-9、HIF-1α和VEGF蛋白的表达均无显著变化;移植瘤组织的MVD显著降低,胶原覆盖血管的比例升高,而心肌组织的MVD和结构几乎无变化.结论 重组人血管内皮抑制素可通过下调移植瘤组织中MMPs和VEGF蛋白的表达,降低MVD,抑制移植瘤的生长,并可使移植瘤血管趋向成熟,但不能降低心肌组织中MMPs的表达和成熟血管的MVD.

模拟失重对大鼠心肌组织缝隙连接蛋白表达谱的影响

目的 研究模拟失重对大鼠心肌组织缝隙连接蛋白(CX)亚型表达谱的影响,为探讨模拟失重条件下心律失常部分发生机制提供新的实验依据.方法 将20只成年雄性Wistar大鼠随机平均分为正常对照组(Con)及尾部悬吊模拟失重组(SUS),应用电子透射电镜检测大鼠心肌组织超微结构,RT-PCR、Western bloting检测连接蛋白CX37、CX40、CX43、CX45 mRNA及CX40、CX43、CX45蛋白表达水平.结果 与Con组相比,模拟失重可致部分心肌细胞肌纤维变性,线粒体变性、数量减少,胶原增多,局部间隙连接增宽、结构消失.RT-PCR结果显示,SUS组心肌组织CX各亚型mRNA表达水平普遍显著下降,Western bloting结果显示,模拟失重条件下,CX43和CX45蛋白表达水平亦显著下降.结论模拟失重2 wk,大鼠心肌组织超微结构发生明显改变,缝隙连接出现非均质性结构变化,心肌组织缝隙连接蛋白表达谱普遍下调.结果提示,失重可以导致心肌缝隙连接蛋白重构,其可能影响心肌细胞间电兴奋传导的速度及方向,从而使传导阻滞和微折返易于出现,诱发心律失常.

模拟失重对大鼠心肌组织细胞因子基因表达谱的影响

目的 研究模拟失重对大鼠心肌组织中部分细胞因子基因表达谱的影响,探讨模拟失重条件下心脏结构/功能可能发生的变化机制.方法 将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Con)及尾部悬吊模拟失重组(SUS),应用包含96种基因的细胞因子基因芯片检测各组细胞因子表达水平,选取部分表达变化细胞基因,应用Real time-PCR给予验证.结果与Con组相比,模拟失重可导致心肌组织中17种细胞因子基因表达差异超出2倍,5种(IFNA4、IL-15、IL-1b、LT-b、FGF7)被上调,12种(IGF-1、IGF-II、FGF5、VEGF-D、VEGF-C、IFN r、IL-11、IL-12B、IL-13、IL-17、IL-18、CD40L)被下调.其中,生长因子呈现较普遍下调趋势,炎性类细胞因子表达水平变化不一.结论 模拟失重2 wk可导致心肌组织中细胞因子网络调控平衡偏移,促生长性、保护性细胞因子普遍下调,而致病性、炎性细胞因子部分明显上调,其可能是失重/模拟失重条件下心肌组织功能结构重塑的重要调控机制.

严重烧伤早期心肌组织内皮素和一氧化氮含量变化及其意义

补充松针提取液对小鼠心肌组织自由基代谢的影响

松针为松科松属植物的叶,具有较强的营养价值和保健功能.本实验观察补充松针提取液后小鼠定量负荷运动后心肌自由基代谢的变化,为松针在运动领域的可能应用提供实验依据.

低氧训练对大鼠心肌组织血管内皮祖细胞标记AC133表达的影响

目的:探讨低氧训练对大鼠心肌组织血管内皮祖细胞标记AC133表达的影响.方法:健康雄性SD大鼠16只,随机分为2组:对照组、高住高练组.高住高练组采用10周递增负荷跑台运动训练,每周训练6天,运动量由第1周的速度为15m/min、持续时间为25min递增至第10周速度为28m/min、持续时间为50min,每周二、四、六在相当于海拔1500m的低氧环境中训练,并且在低氧环境中居住,低氧程度由第1周相当于海拔1800m递增至第10周相当于海拔3600m.采用免疫组织化学方法检测CD34,定位心肌组织微血管;采用免疫组织化学及免疫电镜方法,检测微血管上AC133蛋白表达.结果:CD34可较好地标记心肌组织微血管;对照组大鼠心肌组织微血管内皮上有微弱的AC133蛋白表达,高住高练组大鼠心肌组织微血管内皮上有较多的AC133蛋白表达.结论:大鼠心肌内皮祖细胞归巢参与血管新生可能是低氧训练促进心肌血管新生的机制之一.

血糖波动水平对糖尿病大鼠心肌组织相关基因和蛋白表达水平的影响

目的 研究血糖波动对不同血糖状态的大鼠心肌的影响.方法 大鼠禁食用诱导液(链脲佐霉素溶于0.1mmol·L-1柠檬酸缓冲液)按35.3 mg·kg-1定时腹腔注射,空腹血糖(FBG)≥16.7 mmol·L-1表明造模成功.按照随机数表法将大鼠分为4组:正常组、模型组、实验1组与实验2组,每组15只.模型组,持续高血糖的糖尿病大鼠模型,不予治疗.实验1组,实验2组:糖尿病模型大鼠每日定时皮下注射1次胰岛素,分别给予12,23 U,并错时喂予高糖水,致使血糖水平波动范围较大(大于25 mmol·L-1或小于15 mmol·L-1)或较小(大于20 mmol·L-1或小于10 mmol·L-1).用葡糖糖氧化酶法测定FBG,用实时荧光定量核酸扩增法测定GLUT1 mRNA.结果 给药15 d,正常组、模型组、实验1组、 实验2组大鼠FBG分别是(7.24±1.28),(21.60±2.49),(11.50±2.13),(20.11±2.68)mmol·L-1,这4组的GLUT1 mRNA表达水平(OD值)分别是1.17±0.39,0.65±0.06,1.06±0.17,0.66±0.50.模型组FBG明显高于正常组,GLUT1 mRNA明显低于正常组,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验1组FBG明显低于模型组,GLUT1 mRNA明显高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);而FBG、GLUT1 mRNA在实验2组与模型组之间的差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 血糖波动情况能影响到糖尿病大鼠心肌组织相关基因和蛋白质的表达水平.

爱维治对烧伤患者心肌组织缺血缺氧的保护作用

目的:研究爱维治对烧伤患者心肌组织缺血缺氧的影响.方法:本研究为随机、开放、对照性多中心研究.选择烧伤总面积在30%～70%总体表面积(TBSA)且血清乳酸值异常的患者作为研究对象,将70例患者随机分为两组:试验组(n=36)给予爱维治30 mL+生理氯化钠溶液250 mL,静脉滴注,qd,给药7 d;对照组(n=34)仅给予生理氯化钠溶液250 mL,静脉滴注,qd,共7 d.取患者用药前、用药后48 h,72 h和7 d的血样,以血清乳酸值、心肌型肌酸激酶同工酶和肌钙蛋白作为主要监测指标,评价爱维治对烧伤后患者心肌组织的影响.结果:两组血清乳酸值、心肌型肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白阳性率在观测期内均有下降,但试验组下降的时间早且幅度大,有统计学意义.结论:爱维治能够有效而且快速改善大面积烧伤患者心肌组织缺血缺氧状况.

硫普罗宁对急性坏死性胰腺炎伴发心肌细胞损伤研究

目的 通过建立急性坏死性胰腺炎(ANP)动物模型,探讨硫普罗宁对ANP胰腺和心肌细胞的保护作用.方法 将大鼠随机分为3组,A组ANP生理盐水组;B组ANP巯基物质(硫普罗宁)处理组;C组正常对照组(假手术组).备组动物模型分别于诱发ANP后4,6,12 h处死,检测胰腺和心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量.结果 A,B组胰腺组织SOD含量均明显低于C组(P<0.01),B组高于A组(P<0.05,12 h组P<0.01);A,B组胰腺组织MDA含量明显高于C组(P<0.01,P<0.05),B组明显低于A组(P<0.01).A,B组心肌组织SOD含量明显低于C组(P<0.01),B组高于A组(P<0.05);A,B组心肌组织MDA含量均明显高于C组(P<0.01),B组低于A组(P<0.05).结论 ANP胰腺和心肌组织中SOD减少,MDA含量增加明显;外源性巯基物质--硫普罗宁作为抗氧化荆,可使ANP上述胰腺和心肌组织的病变减轻,对胰腺细胞和心肌细胞有一定的保护作用.

针刺对急性心肌缺血大鼠心肌组织氯离子通道调控蛋白CFTR、ClC-2表达的影响

目的 观察循经取穴针刺对急性心肌缺血大鼠心肌组织氯离子(Cl-)通道囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)、ClC-2型氯通道(ClC-2)蛋白表达的影响,探讨经穴效应循经特异性机制.方法 60只SD大鼠随机分为5组:空白组、模型组、内关组、列缺组和非经非穴组.除空白组外,其余4组大鼠均采用多点皮下注射异丙肾上腺素(ISO)方法建立急性心肌缺血模型.造模成功后,内关组、列缺组、非经非穴组大鼠分别电针双侧内关穴、列缺穴、非经非穴(取天枢穴与神阙穴的连线中点),每日1次,连续7d.采用HE染色法物镜下观察各组大鼠心脏组织结构变化,试剂盒方法检测大鼠心肌组织肌酸激酶,同工酶(CK-MB)含量,ELISA法检测大鼠血清丙二醛(MDA)含量,Western blot免疫印迹法检测大鼠心肌组织氯离子通道CFTR、ClC-2的蛋白表达.结果 心肌组织HE染色切片观察显示:模型组、列缺组和非经非穴组心肌细胞心肌纤维断裂、排列紊乱,肌浆肿胀,明显炎症细胞浸润,有许多棕褐色颗粒广泛分布在细胞核中;与模型组比较,内关组则有明显改善.与空白组比较,模型组,列缺组,非经非穴组氯离子通道CFTR和ClC-2蛋白表达显著增多(P＜0.01),CK-MB含量显著升高(P＜0.01),血清MDA含量升高(P＜0.05);与模型组比较,内关组大鼠心肌组织CK-MB含量降低(P＜0.05),血清MDA含量降低(P＜0.05),氯离子通道CFTR、ClC-2蛋白表达显著减弱(P＜0.01).结论 循经针刺内关穴能有效的减轻大鼠心肌缺血引起的病理变化,调节心肌组织氯离子通道CFTR、ClC-2的蛋白表达可能是其作用机制之一.