首页 > 文献资料
-
枸杞多糖对实验性肝损伤保护作用的研究
枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP) 是从茄科植物枸杞(Lycium chinense Mill.)中提取而得的一种水溶性蛋白多糖,是枸杞的主要活性成分.经研究表明枸杞多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗感染、清除氧自由基、延缓衰老等多种生物活性[1].本实验旨在探讨枸杞多糖对小鼠实验性肝损伤的保护作用和机制,为其应用于病毒性肝损伤提供理论基础和实验依据.
-
核心蛋白聚糖抑制肿瘤生长的研究进展
核心蛋白聚糖(decorin)是一种主要存在于结缔组织中与胶原纤维相关的蛋白多糖(proteoglycan,PG),是蛋白多糖家族中富含亮氨酸的一个小分子组分,具有多种生物活性,可以调节和控制组织形态发生、细胞分化、运动、增生及参与胶原纤维形成等过程,对防止组织和器官纤维化的发生有重要意义[1-5].此外,decorin可通过影响细胞生长中几个关键环节包括基质装配、与生长因子作用、调节酪氨酸激酶受体的活性而影响细胞的生长[6].近年来大量的证据表明decorin无论在体内过度表达或作为重组蛋白均可抑制不同组织来源的肿瘤细胞的生长[7-10].Decorin的水平在大多数细胞中较低,但在肿瘤组织周围基质中显著性增高,这可能是机体对抗肿瘤细胞侵袭的一种自然的生物学反应.本文就近年来decorin抑制肿瘤生长方面的研究进展综述如下.
-
核心蛋白聚糖与肿瘤基因治疗的研究现状
核心蛋白聚糖(decorin,DCN)是一种细胞外基质成份,是蛋白多糖家族中富含亮氨酸的小分子组份,具有多种生物活性[1].DCN表达的水平在大多数细胞中都较低,但在肿瘤组织周围基质中显著升高,这可能是机体对抗肿瘤细胞侵袭的一种自然的生物学反应.
-
选择蛋白及其配体与肿瘤转移
选择蛋白(selectin)是细胞黏附分子中的一个家族,包括3个成员:L-选择蛋白、P-选择蛋白和E-选择蛋白.选择蛋白分子具有糖链结合活性,能通过其分子中的凝集素样结构域与糖蛋白、糖脂或蛋白多糖上的糖配体(ligand)特异结合,在炎症发生时介导白细胞与血管内皮间的起始黏附,在淋巴组织中介导淋巴细胞的归巢,乃至在肿瘤的转移过程中发挥作用.另外,选择蛋白及其配体也可作为信号分子促进肿瘤的转移.因此,通过抑制选择蛋白与其配体的相互作用,或阻断选择蛋白的表达,可以作为防治肿瘤转移的一条重要思路.本研究就选择蛋白及其配体的分子结构、功能特点与肿瘤转移的相关性作一综述.
-
兔关节软骨损伤后关节腔滑液和血清中一氧化氮含量的实验研究
一氧化氮（nitric oxide ，NO ）是体内的重要的信号因子，具有很重要的生物学活性，在体内调节多个系统和器官正常的生物学功能，是细胞新陈代谢生理过程中的重要调节剂，特别是关节软骨的代谢活动［1］。当关节软骨损伤后，胶原网络断裂，软骨细胞暴露，局部大量炎性介质释放，导致关节内NO过量释放，促使基质胶原酶、金属蛋白酶活性明显升高，引起软骨基质的破坏，抑制Ⅱ型胶原和蛋白多糖的合成，促进蛋白多糖的分解，并诱导软骨细胞凋亡的发生，终造成关节软骨不可逆损伤［2-4］。关节软骨受到撞击损伤后，其 N O 的演变规律如何，到目前为止还不十分清楚。
-
复合皮移植的功能重建
复合皮(脱细胞异体真皮和自体皮移植物)大的优点就是具有接近正常的和不断优化的真皮替代物(SD)结构.脱细胞真皮基质(ADM)主要由胶原蛋白、弹性蛋白、非胶原性糖蛋白、蛋白多糖、氨基多糖等5种组分构成的动态大分子复合体,该结构成分在体移植后可充当自体表皮移植物的载体,通过调节宿主细胞的功能和活性,达到改善和提高复合皮结构和功能的目的.＃
-
益气活血法对兔退变髓核中Fas/FasL的表达及基质代谢的影响
目的:观察益气活血法中药对兔退变髓核中Fas/ FasL的表达及基质代谢的影响.方法:建立兔腰椎间盘退变的动物模型,随机分为益气活血法中药治疗组和生理盐水治疗的对照组,治疗后用病理切片观察髓核的组织学变化；测量髓核中蛋白多糖含量；应用逆转录PCR法检测治疗后髓核中Fas/FasL基因mRNA表达.结果:①两组动物治疗后病理切片显示髓核退变均明显,但治疗组软骨终板退变较轻,血管芽较多；②治疗组1、2月和对照组1、2月蛋白多糖含量均减少,两组间对比无显著差异(P＞0.05)；各治疗组内1、2月蛋白多糖含量的组内对比(P＞0.05),具有显著差异.③治疗组和对照组的随时间延长Fas/FasL基因mRNA表达均增强,治疗组和对照组对比无显著差异(P＞0.05)；各组组内对比Fas/FasL基因mRNA表达增强,具有显著差异(P＜0.05).结论:本实验提示益气活血法中药在一定程度上能延缓椎间盘软骨终板退变的发展,但不能根本抑制或逆转髓核形态学退变的发生；不能抑制髓核内Fas/ FasL基因的表达；不能抑制基质中蛋白多糖含量的减少.
-
骨性关节炎软骨组织内蛋白多糖和软骨细胞凋亡数量变化与早期药物干预的影响
目的:观察早期应用硫酸氨基葡萄糖与COX-2抑制剂联合干预对骨性关节炎软骨组织内蛋白多糖含量、软骨细胞凋亡数量的影响.方法:实验于2005-09/2006-10在解放军总医院动物实验室完成.实验分组:新西兰兔30只按随机数字表法分为空白对照组、模型组和治疗组,每组10只.实验干预:模型组选用右后肢石膏过屈位固定的方法造模,治疗组在造模的同时给予硫酸氨基葡萄糖与COX-2抑制剂治疗,空白对照组不予任何处理.所有动物造模后3个月处死取患肢股骨髁,制作组织切片.实验评估:①苏木精-伊红染色方法观察软骨组织的病理变化.②Massion染色法评估软骨组织内蛋白多糖含量(用平均吸光度表示).③TUNEL标记软骨凋亡细胞数量.结果:30只兔全部进入结果分析.①治疗组关节软骨表面不平整,软骨细胞出现排列紊乱,层次不清,细胞核缩小甚至消失,软骨细胞数特别是同源细胞族细胞数较空白对照组减少.模型组软骨细胞排列更加紊乱、稀疏.软骨囊周围基质着色变浅,可见软骨表面碎裂、脱落.②软骨组织内蛋白多糖平均吸光值:模型组低于空白对照组(70.03±3.19,122.55±3.45,P＜0.01);治疗组高于模型组(85.18±4.87,122.55±3.45,P＜0.05).③软骨细胞凋亡数量:模型组高于空白对照组(27.34±1.32,1.00±0.13,P＜0.01);治疗组低于模型组(14.34±1.69,27.34±1.32,P＜0.05)结论:硫酸氨基葡萄糖与COX-2抑制剂联合应用能够增加软骨组织内蛋白多糖的含量,减少软骨细胞凋亡的发生,具有保护关节软骨,预防与延缓骨性关节炎发生的作用.
-
椎间注射转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘蛋白多糖表达的影响
背景:体外研究证实转化生长因子β1可以促进蛋白多糖合成,延缓椎间盘退变,但体内实验鲜见报道.目的:观察局部应用转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘髓核蛋白多糖表达的影响.方法:取30只新西兰大白兔建立兔腰椎间盘退变模型,造模12周,经X射线证实退变后,随机选择6只模型兔及6只未造模正常兔,处死取材.分别向剩余24只模型兔L4~5椎间隙注射转化生子因子β1和生理盐水.末次给药2,4周取材,间苯三酚法测定兔椎间盘髓核内蛋白多糖的水平.结果与结论:造模12周,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖水平明显降低(P < 0.01).经局部注射转化生子因子β1后,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖表达明显增多(P < 0.01).说明在兔椎间注射转化生子因子β1 可以促进髓核蛋白多糖的合成,延缓椎间盘退变.
-
静水压对人椎间盘髓核细胞形态及基质表达的影响
背景:加载在椎间盘上的重力引起的静态压力刺激是椎间盘细胞代谢的重要调节因素.目的:观察静水压对体外单层培养人椎间盘髓核细胞形态学及基质代谢的影响.方法:在静水压加载系统中对体外单层培养的传4 代人髓核细胞施以0.3,0.7,3 MPa 的静压,分别加压30,60,90,120 min,以常压0.1 MPa 为对照.结果与结论:①髓核细胞形态:在静水压干预下细胞体积均变小.0.3,0.7 MPa 静水压下轻微缩小,细胞形态相对完整;3 MPa 静水压下缩小明显,且细胞形态不完整.②髓核细胞存活率:在持续静水压刺激下开始的30 min,不论压力大小存活率都偏低,在0.3,0.7 MPa 时随作用时间延长而增加或维持稳定,细胞增殖逐渐增强,在3 MPa 时随时间趋于下降,终细胞总体数量减少.③髓核细胞蛋白多糖:各组表达量随时间增加逐渐增加,当持续加压120 min 时,在0.3,0.7 MPa静水压下合成量呈高表达状态,在0.1,3 MPa 静压表达相对较少.表明静水压会对髓核细胞形态学、存活率及基质表达产生影响.
-
转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞诱导其向软骨表型的分化
背景:内源性诱导软骨分为就是通过一定的载体将目的基因整合入干细胞内,使其自行分泌诱导因子诱导自身进行分化.目的:观察将转化生长因子β3 通过腺相关病毒载体转染诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨表型转化的能力.方法:取体外培养的第3 代骨髓间充质干细胞进行重组腺相关病毒转染,将转染后3,6,9,12 d 细胞裂解提取蛋白进行酶联免疫检测目的蛋白转化生长因子β3 的体外表达.RT-PCR,免疫印迹western blot 分别从基因和蛋白水平上检测1,2 周Ⅱ型胶原的表达,甲苯胺蓝染色检测1,2 周蛋白多糖的表达.结果与结论:重组腺相关病毒转染后,骨髓间充质干细胞可以较稳定的表达目的蛋白转化生长因子β3,并且转染成功的骨髓间充质干细胞较阴性对照组能够更好的向软骨表型转化.证实转化生长因子β3 可以腺相关病毒为载体转染骨髓间充质干细胞并诱导其向软骨表型分化.
-
三种软骨保护剂在关节开放性手术中对兔关节软骨中蛋白多糖含量的影响
背景:关节的损伤很多需要开放手术治疗.开放手术治疗中,关节软骨暴露于空气中发生干燥,干燥会造成关节软骨的进一步损伤,对已经损伤的关节软骨采取保护措施是非常必要的.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/12在唐山工人医院中心实验室完成.目的:观察复方氯化钠、50g/L甘露醇、透明质酸钠3种不同软骨保护剂在关节切开术中对兔关节软骨中蛋白多糖含量的影响.材料:雌性4月龄新西兰大白兔65只,体质量2.5～3.0 kg.采用随机数字表法分成实验组60只和正常对照组5只,实验组再随机分成4个亚组,软骨暴露无保护组、软骨暴露复方氯化钠保护组、50 g/L 甘露醇保护组、透明质酸钠保护组,每组15只兔.方法:实验组兔膝关节暴露于室温22℃,湿度65%空气中,定量打击器造成股骨内髁软骨低能量钝性损伤模型.保护组手术过程中分别用复方氯化钠、50 g/L 甘露醇、透明质酸钠溶液湿润软骨.无保护组不做处理.术后2 h及第1,2,4,8周末,每个实验组随机各取兔3只,正常对照组各取1只,麻醉后处死,取双膝股骨内侧髁全层软骨.主要观察指标:术后不同时间点各组兔关节软骨蛋白多糖含量.结果:65只兔全部进入结果分析.术后各时间点,无保护组蛋白多糖含量低于对照组(P<0.01).术后即刻,术后1周及2周各保护组蛋白多糖含量低于对照组(P<0.01).术后4周、8周各保护组蛋白多糖含量分别与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05).术后不同时间点,各保护组蛋白多糖含量均高于无保护组同期值(P<0.01).术后8周,各保护组间蛋白多糖含量比较,差异无显著性意义(P>0.05).结论:受到钝性损伤的关节软骨完全暴露于空气条件情况下,软骨蛋白多糖含量进一步减少,8周末未完全恢复.而在复方氯化钠、50 g/L甘露醇、透明质酸钠3种药物定期湿润保护下,软骨蛋白多糖含量损失较少,8周末完全恢复正常,3种药物无明显不同.
-
人骨软骨组织体外冷冻保存的效果
背景:异体骨软骨移植是治疗关节软骨缺损的有效方法,然而由于移植物体外有效保存时间短,限制了临床应用以及移植物的利用效率.目的:观察梯度降温冷冻保存同种异体关节软骨的保存效果.方法:将关节软骨块经体积分数10%二甲基亚砜预处理后,应用程序冷冻仪以-1 ℃/min 行梯度降温至-4 ℃,-10 ℃,-20 ℃,-40 ℃各30 min,后至-80 ℃冷冻保存.结果与结论:保存1,3,6 个月及1 年后检测发现,与新鲜组相比,冷冻后软骨细胞存活率、细胞活性以及浅、中、深层的蛋白多糖水平下降(P < 0.05),且软骨细胞存活率、细胞活性以及浅、中、深层的蛋白多糖水平随冷冻保存时间延长而降低(P < 0.05),提示冷冻保存可有效地延长骨软骨移植物存活时间.
-
软骨修复组织蛋白多糖代谢与一氧化氮合酶抑制剂的影响
目的:应用一氧化氮合酶抑制剂可改善骨性关节炎和风湿性关节炎软骨的代谢,作者前期的实验也证明一氧化氮合酶抑制剂能提高软骨修复组织的质量.实验进一步观察一氧化氮合酶抑制剂对软骨修复组织蛋白多糖代谢的影响.方法:实验于1999-06/2002-02在南方医科大学完成.①实验分组:取雄性新西兰兔24只,8月龄,体质量(2.5±0.2)kg.随机抽签法分为对照组、骨形态发生蛋白组和S-甲基异硫脲组,每组8只.②实验方法:将大白兔双侧股骨髁间关节面造成全层软骨缺损,对照组:软骨缺损不充填任何物质;骨形态发生蛋白组:缺损用骨形态发生蛋白纤维蛋白凝胶复合物充填;S-甲基异硫脲组:缺损应用胶原复合骨形态发生蛋白充填,术后按5 mg/(kg·12 h)皮下注射S-甲基异硫脲.术后1年麻醉后处死动物.③实验评估:应用组织切片番红O-快绿染色和图像分析技术,按照染色百分率、平均灰度(平均染色程度)和染色厚度(软骨厚度)指标来检测糖胺聚糖含量;应用Na235SO4掺入法检测软骨修复组织蛋白多糖合成.结果:纳入新西兰兔24只,均进入结果分析.①术后1年,对照组几乎无红色染色区域;骨形态发生蛋白组可见到少量的不均匀红色区域;S-甲基异硫脲组可见到较多均匀一致的红色染色区域.②S-甲基异硫脲组软骨修复组织番红O染色百分率为89.28%,明显高于骨形态发生蛋白组36.54%和对照组13.4%,S-甲基异硫脲组修复组织番红O-快绿染色平均灰度值134.5,分别为骨形态发生蛋白组平均灰度值56.8的2.5倍,为对照组26.4的7倍.软骨平均厚度S-甲基异硫脲组1.75 cm分别为骨形态发生蛋白组0.76 cm和对照组0.25 cm的2倍和6倍.③Na235SO4掺入法结果显示,S-甲基异硫脲组[35S]摄入量明显高于骨形态发生蛋白组和对照组(P＜0.01).结论:诱导型一氧化氮合酶抑制剂S-甲基异硫脲的应用能明显增加软骨修复组织糖胺聚糖含量和蛋白多糖合成,对于软骨修复质量的提高有积极意义.
-
肩关节周围炎的物理康复
为寻求肩周炎的有效物理康复治疗方法,进一步弄清肩关节周围炎发病机理,本文对肩关节周围炎的物理康复做以综述1 对肩关节周图炎病因的认识目前国内有人从肌腱的非生理性牵引、肌腱慢性疲劳性损伤、超越肌腱强度的损伤及应力的迭加4个方面进行生物力学分析,提高肩部肌肉的活动在肩关节运动中承受拉应力和不同形式的扭距或弯距的影响,使某些肌与腱处于非生理性的不利状态,可能引起肩关节周围的肌肉与肌腱的劳损与外伤,常为临床上多发的重要原因,另有报道认为是无菌性炎症所引起,指出无菌性炎症是软组织劳损疾患的重要病理改变,由于肩关节在全身关节中的活动量大,而形成慢性劳损.进入中老年后,由于长期缺乏运动,引起局部血液循环不畅,加之外伤或风寒湿邪侵袭,累积日久,组织充血、渗出、局部肿胀,形成无菌性炎症.肩关节周围的肌腱挛缩,组织渗出纤维化,导致肩关节周围的软组织广泛粘连,使肩关节活动受限,形成人们常说"冻结肩”[1].随着国内外对肩周炎病因病理研究的日趋深入,大量资料统计表明,蛋白多糖的代谢变化与年龄关系密切.肩周炎好发于50岁左右,而生化研究证明,蛋白多糖的各组成分比值的改变在50岁左右为明显[2].
-
髓核蛋白多糖含量与退行性变腰椎间盘MRI信号强度的相关性
目的:探讨退行性变腰椎间盘MRI信号强度和髓核蛋白多糖含量之间的相关性,评价MRI在椎间盘生化状态评估中的价值.方法:①对象:随机选择的腰椎间盘髓核样本,取自2006-08/2007-01在山东省千佛山医院手术的33例患有腰椎间盘突出症的患者,患者对实验均知情同意.②方法:术前测量腰椎间盘正中矢状面MRIT2WI信号值;术后用紫外分光光度法测量髓核蛋白多糖的含量.③评估指标:对照研究依据Minna tertti法分为Ⅱ类、Ⅲ类腰椎间盘的MRIT2WI信号强度及髓核蛋白多糖含量,并用Pearson相关检验评估两者之间的相关性.结果:Ⅲ类腰椎间盘正中矢状位T2WI信号强度和髓核蛋白多糖含量明显低于Ⅱ类椎间盘(P＜0.001),MRI T2WI信号值和髓核蛋白多糖含量之间的相关系数分别为0.674,0.658(P＜0.001).结论:腰椎间盘MRI T2WI信号强度随髓核蛋白多糖含量的减少而降低,二者之间有明显的相关性.MRI是评价椎间盘生化状态的良好工具.
-
诱导多能干细胞对骨关节炎软骨损伤的修复作用
背景:基于干细胞的细胞治疗对于骨关节炎修复有重要的应用前景,其中诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cel,iPS细胞)具有较强的增殖和分化潜能,且避免了胚胎干细胞的伦理学问题,目前被认为是细胞治疗中有前景的种子细胞之一.目的:拟探索一种iPS细胞向软骨细胞分化的有效方法,并研究iPS细胞来源软骨细胞对骨关节炎的修复作用.方法:运用三步法将人iPS细胞诱导分化成软骨样细胞,并检测软骨细胞特异性基因和蛋白的表达.然后将分化后的iPS细胞移植到谷氨酸钠碘乙酸诱导的骨关节炎大鼠模型中.移植实验分为4组:对照组注射生理盐水,造模组注射谷氨酸钠碘乙酸,iPS细胞移植组注射谷氨酸钠碘乙酸后移植iPS细胞,分化后iPS细胞移植组注射谷氨酸钠碘乙酸后移植软骨分化后的iPS细胞.移植15周后micro-CT行断层扫描,并对移植后的关节进行组织学分析.结果与结论:①与未分化的iPS细胞相比,经过6 d的拟胚体形成和2周的细胞分化,软骨细胞特异性基因和蛋白(Col2A1,GAG和Sox9)的表达量都明显上升;②细胞移植15周后,未观察到免疫反应的发生,micro-CT显示移植细胞后软骨下骨的完整性明显得到改善,组织学分析也表明移植细胞后能产生关节软骨基质.iPS细胞来源软骨细胞的修复效果明显好于iPS细胞;③结果表明,iPS细胞来源软骨细胞移植可促进骨关节炎大鼠软骨再生,改善关节功能.
-
Notch-1基因敲除兔骨髓间充质干细胞可阻止椎间盘退行性变吗？
背景：前期实验证明退变椎间盘内 Notch-1基因高表达，但骨髓间充质干细胞向髓核样细胞转化时 Notch-1的作用尚不明确。
目的：观测Notch-1基因敲除后的骨髓间充质干细胞修复退变椎间盘的作用。
方法：①4只体质量0.4-0.5 kg新西兰兔麻醉后，取股骨骨髓，以密度梯度离心法分离培养骨髓间充质干细胞。②将针对Notch-1的shRNA及无意空质粒shRNA，瞬时转染入骨髓间充质干细胞，转化生长因子β1诱导转染骨髓间充质干细胞分化。③体质量1.0-1.5 kg新西兰兔10只，对兔脊柱L3-4、L4-5、L5-63个椎间盘行穿刺抽吸髓核组织造模，将细胞分为转化生长因子β1诱导转染空质粒组、转化生长因子β1诱导转染shRNA-Notch-1质粒组、转化生长因子β1诱导无转染组细胞，于造模2周后分别移植入L3-4、L4-5、L5-63个椎间盘。
结果与结论：①细胞移植4周后MRI检测发现，L3-4(无转染组)及L5-6(空质粒组)%T2加权像扫描(%ST2WI)值有明显增加，L4-5(shRNA-Notch-1质粒组)%ST2WI值增加为显著，与其他2组比较差异有显著性意义(P<0.05)。②甲苯胺蓝染色可见L4-5(shRNA-Notch-1质粒组)椎间盘组织内蛋白多糖的表达显著高于L3-4(无转染组)及L5-6(空质粒组)。③RT-PCR和Western blot检测发现L4-5(shRNA-Notch-1质粒组)椎间盘内Ⅱ型胶原及蛋白多糖的表达明显高于 L3-4(无转染组)及 L5-6(空质粒组)，差异有显著性意义。结果提示兔退变椎间盘内移植Notch-1基因敲除兔骨髓间充质干细胞，有效修复了退变的椎间盘组织。 -
建立纤维环穿刺法椎间盘退变模型
背景:目前虽然纤维环穿刺法构建椎间盘退变模型的相关研究报道较多,但缺乏相对完整的影像、病理学以及细胞外基质改变(蛋白多糖含量)的系统对比性研究.所以经腹膜外入路暴露椎间隙纤维穿刺法造模的影像、病理学以及细胞外基质改变是否与人类椎间盘退变类似需进一步探讨.目的:验证采用纤维环穿刺法建立椎间盘退变模型的可行性.方法:将30只新西兰大白兔随机分为2组,每组15只.纤维环穿刺组在经腹膜外入路暴露L1,2,L2,3,L3,4椎间隙后,采用16号针头穿刺;而假手术组只做切开不做穿刺.于造模术后4,8,16周2组均随机抽取5只行MRI检查后,以空气栓塞法处死兔并切取椎间盘髓核组织,苏木精-伊红染色检查组织学变化,Safranin O染色观察髓核蛋白多糖水平改变.结果与结论:①MRI提示:纤维环穿刺组T2WI相椎间盘信号自造模术后开始降低,且随着术后时间延长T2WI相椎间盘信号降低越明显,于术后4周较假手术组有明显改变,术后16周明显;假手术组术后各时间段改变不明显;②苏木精-伊红染色显示:纤维环穿刺组造模术后软骨样细胞减少,纤维样细胞增多且所占比例增大,细胞外纤维排列紊乱,于第4周较假手术组有明显改变,于第16周明显;假手术组术后各时间段改变不明显;③Safranin O染色(髓核蛋白多糖水平):纤维环穿刺组组织着色于造模术后开始变浅,随着术后时间延长着色变浅越明显,于术后4周较假手术组有明显改变,术后16周明显;④结果提示:纤维环穿刺法建立的椎间盘退变模型影像学表现及病理表现与人类椎间盘退变近似,提示纤维环穿刺法是建立椎间盘退变模型的可靠方法.
-
建立纤维环穿刺法椎间盘退变模型
背景:目前虽然纤维环穿刺法构建椎间盘退变模型的相关研究报道较多,但缺乏相对完整的影像、病理学以及细胞外基质改变(蛋白多糖含量)的系统对比性研究.所以经腹膜外入路暴露椎间隙纤维穿刺法造模的影像、病理学以及细胞外基质改变是否与人类椎间盘退变类似需进一步探讨.目的:验证采用纤维环穿刺法建立椎间盘退变模型的可行性.方法:将30只新西兰大白兔随机分为2组,每组15只.纤维环穿刺组在经腹膜外入路暴露L1,2,L2,3,L3,4椎间隙后,采用16号针头穿刺;而假手术组只做切开不做穿刺.于造模术后4,8,16周2组均随机抽取5只行MRI检查后,以空气栓塞法处死兔并切取椎间盘髓核组织,苏木精-伊红染色检查组织学变化,Safranin O染色观察髓核蛋白多糖水平改变.结果与结论:①MRI提示:纤维环穿刺组T2WI相椎间盘信号自造模术后开始降低,且随着术后时间延长T2WI相椎间盘信号降低越明显,于术后4周较假手术组有明显改变,术后16周明显;假手术组术后各时间段改变不明显;②苏木精-伊红染色显示:纤维环穿刺组造模术后软骨样细胞减少,纤维样细胞增多且所占比例增大,细胞外纤维排列紊乱,于第4周较假手术组有明显改变,于第16周明显;假手术组术后各时间段改变不明显;③Safranin O染色(髓核蛋白多糖水平):纤维环穿刺组组织着色于造模术后开始变浅,随着术后时间延长着色变浅越明显,于术后4周较假手术组有明显改变,术后16周明显;④结果提示:纤维环穿刺法建立的椎间盘退变模型影像学表现及病理表现与人类椎间盘退变近似,提示纤维环穿刺法是建立椎间盘退变模型的可靠方法.
