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功能性消化不良以及病证结合动物模型造模方法研究进展
功能性消化不良(functional dyspepsia,FD),罗马Ⅲ委员会定义为存在一种或多种起源于胃十二指肠区域的消化不良症状,并且缺乏能解释这些症状的任何器质性、系统性或代谢性疾病,可以分为餐后不适综合征和上腹痛综合征.其主要病理生理机制是胃动力和感觉的异常,具体原因不明确,有证据显示消化不良和心理病理因素相关.本病的诊断主要依据患者主诉,临床检查无器质性病变,因动物缺乏语言表达能力,故本病的动物模型设计比较困难,因此相对于临床试验,目前本病的动物实验研究较少.为进一步探讨FD的病因病理机制,制作合理的动物模型极为重要.
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寒证大鼠细胞色素P450亚酶的表征及肉桂的调控
目的:考察寒证大鼠肝脏细胞色素P450(CYP450)亚酶的表征特点及热性中药的调控效果.方法:选取知母-石膏-黄柏-龙胆草制备寒性造模药,对SD大鼠诱导21 d后复制寒证模型;另取肉桂提取物对寒性大鼠进行干预,制备观察组;用生理盐水处理为对照组.钙盐沉淀法制备肝脏微粒体,与混合探针药物温孵,用高效液相色谱(HPLC)法测定探针药物的代谢消除百分率,评价CYP450亚酶活性变化.提取肝脏总RNA,实时荧光定量PCR法测定CYP450亚酶的mRNA表达.结果:寒性中药对大鼠CYP3A1酶的活性和mRNA具有显著的抑制作用,热性肉桂具有一定的调控作用,并且这种调控发生在mRNA水平.结论:本研究从多角度系统评价和验证寒证机体CYP450亚酶的表征特点及热性中药的调控效果.
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氧化应激特征性慢性阻塞性肺疾病大鼠模型建立及评价方法研究
目的:建立稳定、可复制的氧化应激特征性慢性阻塞性疾病(COPD)大鼠模型,规范模型评价方法,为COPD机制研究提供良好的动物实验平台.方法:清洁级SD大鼠30只随机分为正常对照组、模型组及臭氧暴露组.模型组采用被动烟熏、气管内注射脂多糖的方法进行模型制备,臭氧暴露组大鼠在上述方法基础上叠加臭氧暴露制备氧化应激特征性COPD模型.结合大鼠一般活动状态、肺组织病理、支气管肺泡灌洗液炎性细胞计数、肺功能及氧化应激指标检测进行模型的综合评价.结果:模型组和臭氧暴露组大鼠出现呼吸加快加深、口唇紫绀、腹肌痉挛.臭氧暴露组大鼠肺组织病理变化表现出更为明显的损伤,支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞及中性粒细胞计数更高.3组大鼠肺功能检测的阻力性指标(中心气道阻力、组织阻尼及组织迟滞)比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).模型组及臭氧暴露组大鼠对NO的清除率高于正常组,对O2-·的清除率低于正常组,但差异无统计学意义.结论:被动烟熏、气管内注射脂多糖复合臭氧暴露的方法能比较成功的制备出氧化应激特征性COPD大鼠模型,该模型与COPD患者的病理改变及氧化应激状态相类似,可能成为更理想的、更加符合临床实际的COPD模型.
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降血压食品功能因子对造模高血压家兔功效的研究
目的:制备家兔高血压模型;观察降血压食品功能因子(葛根和银杏叶)对模型降压作用.方法:用L-NNA(左旋硝基精氨酸)注射家兔腹腔制备高血压模型,用葛根、银杏叶及中药降血压.结果:由于造模组家兔血压不稳定,银中组及葛+银组分别对收缩压和舒张压有上升趋势;而对其压差有下降作用:模型组、葛根大剂量组和中药组与正常组比较分别P<0.05、P<0.01和P<0.05;对心率有减慢作用:银杏叶大剂量组与正常组比较P<0.01、与模型组比较P<0.05;对心指数有增大作用:葛根大剂量组、中药组心指数增大,与西药比较P<0.01、P<0.05.结论:降血压食品功能因子对人工造模的高血压家兔的压差、心率、心指数等有一定的影响.
关键词： 造模 高血压家兔 降压食品功能因子(葛根、银杏叶) -
大鼠实验性高脂血症两种造模方法的比较
高脂血症,即血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的增高,是脂代谢紊乱的标志,也是动脉粥样硬化、心脏病和中风的主要危害因素.在高脂血症的机制研究、新型保健食品开发及新药研究中,都需要快捷、准确、质量稳定的高脂血症动物模型.为此我们选用了目前市场上出售、功能明确的降血脂食品因子,验证两种大鼠造模方法[1、2],从中选出更为理想的动物模型.
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地塞米松诱导近交系和封闭群Wistar大鼠骨骼肌萎缩效应比较
目的比较近交系和封闭群Wistar大鼠对地塞米松（ dexamethasone， Dex）诱导骨骼肌萎缩的药物效应，探讨建立大鼠糖皮质激素性骨骼肌萎缩症（glucocorticoid-induced muscular atrophy， GIMA）模型的优选方案。方法两品系大鼠各32只采用数字表法随机分为4组：对照组（ C组）肌肉注射0.9％氯化钠注射液1.0 mL／kg，每周3次；低频组（ L组）、中频组（ M组）和高频组（ H组）分别每周1、3、5次肌肉注射Dex 1.0 mg／kg，给药90 d，取腓肠肌进行形态学及糖皮质激素受体（ glucocorticoid receptors， GR）和肌肉萎缩盒F蛋白（muscle atrophy F-box， MAFbx）基因mRNA表达水平检测。结果（1）两品系大鼠H组的体质量[近交系：（158.4±7.3） g，封闭群：（196.5±14.4） g]较对照组[近交系：（223.7±10.5） g，封闭群：（279.5±14.5） g ]显著减小；两品系大鼠 H 组的腓肠肌系数变化率[近交系：（－10.90±0.07）％，封闭群：（－13.60±0.12）％]较对照组[近交系：（±0.05）％，封闭群：（±0.01）％]显著减小； M、 H组肌纤维横截面积变化率[近交系M和H组：（－13.00±2.00）％、（－29.00±2.00）％，封闭群 M 和 H 组：（－31.00±2.00）％、（－35.00±2.00）％较对照组近交系：（±3.40）％，封闭群：（±2.30％）]显著减小；用药组Ⅱ型纤维横截面积变化率[近交系 L、 M 和 H 组：（－18.00±2.00）％、（－25.00±3.00）％、（－38.00±2.00）％，封闭群L、 M和H组：（－45.00±1.00）％、（－53.00±1.00）％、（－44.00±2.00）％较对照组近交系：（±3.00）％，封闭群：（±3.00）％]显著减少。随给药频次增加，近交系大鼠Ⅱ型纤维横截面积变化率减少且组间差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）两品系大鼠各给药组MAFbx mRNA表达变化率[近交系L、 M、 H组：（175.00±10.00）％、（675.00±25.00）％、（2 125.00±25.00）％，封闭群L、 M、 H组：（15.00±2.00）％、（21.00±6.00）％、（33.00±3.00）％]均随给药频次增加而显著增高且组间差异有统计学意义（ P＜0.05）。近交系大鼠M 组GR mRNA表达变化率（400.00±25.00）％和H组GR mRNA表达变化率（750.00±37.00）％较对照组（±37.00）％显著增高，但封闭群大鼠M组GR mRNA表达变化率（－26.00±5.00）％和H组GR mRNA表达变化率（－55.00±6.00）％较对照组（±2.00）％显著下降。结论以Dex 1.0 mg／kg每周1、3、5次肌肉注射均能诱导两品系大鼠不同程度的骨骼肌萎缩病变，但近交系大鼠较封闭群大鼠骨骼肌萎缩病变更为典型。
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解脲支原体造模问题探讨
目的:采用阴道注入菌液的方法观察雌性大、小鼠阴道解脲支原体定植的成功率.方法:每周给大、小鼠分别皮下注射雌二醇一次,在第二次注射雌二醇后分别给予阴道注入解脲支原体菌液,在第四周和第五周取其阴道分泌物进行支原体鉴定实验,计算大、小鼠各自的定植成功率并行统计分析.结果:小鼠的定植成功率明显高于大鼠,据统计学分析P＜0.05,说明大、小鼠两组间比较有显著差异.结论:若采用阴道注入菌液的方法,小鼠比大鼠更容易造模成功.
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苍柏湿毒清对小鼠阴道解脲支原体定植干预研究
目的:旨在比较苍柏湿毒清干预前、干预后小鼠Uu阴道炎造模成功率.方法:A1组先予中药干预,其后Uu阴道炎造模;B1组先予生理盐水干预,其后uu阴道炎造模;A2组造模成功后予中药干预;B2组造模成功后给予生理盐水干预,C组既不进行造模,亦不进行中药干预,清洁级饲料喂养.计算各组小鼠Uu的定植成功率并行统计分析.结果:A1组、A2组造模成功率均低于B1组、B2组,据统计学分析P<0.05,说明组间比较有显著差异.结论:苍柏湿毒清干预前、后均能降低解脲支原体造模成功率,是针对解脲支原体感染的有效药物.
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混合喂养法建立营养性肥胖大鼠模型
目的 探讨用混合喂养法建立营养性肥胖大鼠模型.方法 142只雄性断乳SD大鼠按照体重随机分为对照组(普通饲料喂养,n=40)和模型组(高脂饲料+普通饲料混合喂养,n=102),单笼饲养,每周记录动物体重、体长及摄食量.以普通饲料组lee's index正常值上限x+t,a·s为肥胖确定标准,大于此上限为肥胖.结果 (1)混合喂养法中,大鼠自主平衡营养,根据需要选择普通饲料,根据喜好选择高脂饲料,能量摄入及能量利用率显著高于对照组;(2)混合喂养法能有效促进大鼠摄入和利用能鼍.14周末肥胖个体为52只,肥胖率为51%.(3)模型组肥胖个体与非肥胖个体比较,前者摄食量显著高于后者,其中以高脂饲料摄入增多为主,普通饲料摄人无差异,对高脂饲料的偏好两者无显著差异,但能量利用率前者显著高于后者.(4)与对照组相比,模型组血浆高密度脂蛋白、甘油三酯均低于对照组,总胆固醇及低密度脂蛋白则高于对照,血糖水平无差异.模型组脂肪肝的发生率达100%.结论 混合喂养法由动物自主择食,可摄取较多能量,是建立营养性肥胖大鼠模型的有效方法.
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扩张型心肌病造模方法及机理
扩张型心肌病（DCM）病因迄今不明，预后不良，无特异、有效的治疗方法，严重威胁人类的健康，故建立 DCM 动物模型，研究其发病机制和治疗疗效等必要而迫切。目前 DCM 的造模方法主要包括药物诱导、免疫诱导、分子生物学方法诱导等。本文就目前应用较为普遍、成熟的 DCM 模型的几种造模方法及其机理作一综述。
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脱氢表雄酮诱导SD大鼠多囊卵巢综合征模型的实验研究
目的 运用脱氢表雄酮诱导SD 幼年大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)模型,并在药物注射剂量上对文献报道方法进行改良,研究模型的卵巢形态学和性激素等改变.方法 采用23 日龄SD 雌大鼠,造模组每日皮下注射浓度为30 mg/mL 的脱氢表雄酮,注射量为0.2 mL/100 g 体重,连续注射20 d 后.禁食于第21 天测空腹血糖,处死测激素FSH、LH、T.结果造模组体重显著高于对照组(P ＜ 0.05).造模组卵巢呈多囊样改变、闭锁卵泡增多,闭锁卵泡直径明显大于对照组.造模组血清T、FSH、空腹血糖水平明显高于对照组(P ＜ 0.05).结论 脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征模型的卵巢病理改变和激素改变与PCOS 患者相似,是研究多囊卵巢综合征比较理想的模型.
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线栓法制作大鼠大脑中动脉梗死模型的体会与造模失败原因分析
线栓法制备大脑中动脉梗死(MCAO)模型是目前制备脑梗死模型常用的方法,但目前仍存在诸多制约因素,譬如造模技术要求高、模型死亡率高、存活率和成功率较低、术后个体差异性大等许多亟待解决的问题.从实验动物的选择、麻醉剂的选择、线栓制备选择及插入深度、手术操作 4个方面对模型制备进行探讨,并从术中出血过多,术前、术后干预不足及其他可能导致造模失败的原因进行分析.
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常用脾虚证动物模型造模方法的研究概况
脾虚证在临床上是一种常见证型,其相兼症候也很多见.由于本证涉及许多疾病,且常转化为其他证候,对患者身体伤害较大,故近些年已成为中医学病证研究领域的重点脏腑证候之一.动物实验作为科研的先导,是进一步科学探索的基础.脾虚证动物模型自从1979年由北京师范大学在国内首家研制成功之后,科研工作者继续进行了大量的探索.经过了30多年的发展,已经积累了多方面的经验.本文旨在对脾虚证动物模型常用的造模方法做一较全面的总结.
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拟血管性痴呆大鼠造模中应注意的几点问题
目的:制造拟血管性痴呆大鼠模型.方法:反复夹闭大鼠双侧颈总动脉同时腹腔注射硝普钠制造拟血管性痴呆大鼠模型,采用HE染色和尼氏体染色方法,比较海马CA1区细胞形态学的改变.结果:模型组大鼠海马CA1区细胞数明显降低.
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脊髓挫裂伤模型大鼠造模方式的选择：网状Meta分析
背景：在进行脊髓损伤相关动物实验研究时，均将致伤方式与临床脊髓损伤的相似性作为造模方式选择的一个重要参考指标。
目的：比较使用精密打击器、自制 Al en’s 打击器、脊髓压迫法及钳夹法进行大鼠脊髓损伤造模的异同，为脊髓损伤大鼠模型的造模方式选择提供新的依据。
方法：检索 PubMed、中国知网、万方、维普数据库，检索时间截至2015年6月20日，纳入符合条件的文献，使用 ADDIS 软件进行分析。
结果与结论：26项研究符合纳入标准，包含599只大鼠，对纳入研究进行分析后，各造模方式均可有效造模，优造模方式依次为：精密打击器>钳夹法>自制 Al en’s 打击器>压迫法；低死亡率依次为：精密打击器<自制 Al en’s 打击器<钳夹法。从对功能影响和死亡率角度来说，使用精密打击器为优造模方式，而使用自制 Al en’s 打击器为为经济，钳夹法可在两者之前取得平衡。 -
闭合间断骨钻孔后徒手暴力旋前-外旋型三踝骨折尸体造模
背景:闭合间断骨钻孔截骨方法在临床运用较多,目前却缺少该造模方法的基础实验研究.目的:建立一种旋前-外旋型三踝骨折模型造模新方法,为闭合截骨造模提供一种新思路、新方法.方法:对16例典型的旋前-外旋型三踝骨折X射线片骨折线测量来确定钻孔位置,借助微创截骨导向器沿着骨折线在体表投影进行闭合间断骨钻孔后根据其损伤机制徒手暴力造模,同时测量造模过程中的力学参数,通过X射线摄片对模型进行验证.结果与结论:①16个踝关节尸体标本骨折线符合旋前-外旋型三踝骨折,外踝骨折成功率100％,内踝骨折成功率100％,后踝骨折成功率43.75％,下胫腓分离成功率62.50％;②骨折脱位8例,脱位率50％,其中外后脱位2例,外后脱位率12.5％,外脱位6例,外脱位率37.5％;③结果表明,该造模方法成功率高,具有很好的可重复性和可操作性,同时能很好的保留肌肉、肌腱、皮肤等软组织的完整,为三踝骨折手法复位及生物力学研究提供软组织完整的骨折模型,也能为制作闭合骨折模型提供一种新思路、新方法,供他人借鉴参考.
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建立纤维环穿刺法椎间盘退变模型
背景:目前虽然纤维环穿刺法构建椎间盘退变模型的相关研究报道较多,但缺乏相对完整的影像、病理学以及细胞外基质改变(蛋白多糖含量)的系统对比性研究.所以经腹膜外入路暴露椎间隙纤维穿刺法造模的影像、病理学以及细胞外基质改变是否与人类椎间盘退变类似需进一步探讨.目的:验证采用纤维环穿刺法建立椎间盘退变模型的可行性.方法:将30只新西兰大白兔随机分为2组,每组15只.纤维环穿刺组在经腹膜外入路暴露L1,2,L2,3,L3,4椎间隙后,采用16号针头穿刺;而假手术组只做切开不做穿刺.于造模术后4,8,16周2组均随机抽取5只行MRI检查后,以空气栓塞法处死兔并切取椎间盘髓核组织,苏木精-伊红染色检查组织学变化,Safranin O染色观察髓核蛋白多糖水平改变.结果与结论:①MRI提示:纤维环穿刺组T2WI相椎间盘信号自造模术后开始降低,且随着术后时间延长T2WI相椎间盘信号降低越明显,于术后4周较假手术组有明显改变,术后16周明显;假手术组术后各时间段改变不明显;②苏木精-伊红染色显示:纤维环穿刺组造模术后软骨样细胞减少,纤维样细胞增多且所占比例增大,细胞外纤维排列紊乱,于第4周较假手术组有明显改变,于第16周明显;假手术组术后各时间段改变不明显;③Safranin O染色(髓核蛋白多糖水平):纤维环穿刺组组织着色于造模术后开始变浅,随着术后时间延长着色变浅越明显,于术后4周较假手术组有明显改变,术后16周明显;④结果提示:纤维环穿刺法建立的椎间盘退变模型影像学表现及病理表现与人类椎间盘退变近似,提示纤维环穿刺法是建立椎间盘退变模型的可靠方法.
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构建腰椎三维图像模型兔的特点分析
背景:兔腰椎形态结构特点对腰椎动物实验研究起着重要的作用,但目前缺少兔腰椎形态结构相关的研究.目的:构建兔腰椎三维图像模型,观察其腰椎的形态结构特点,为腰椎动物实验研究提供解剖形态学依据.方法:用西门子64排螺旋CT扫描20只新西兰大白兔,获得140节腰椎扫描资料,构建兔腰椎三维图像模型,测量L1-7椎体的形态学参数,观察腰椎的内外部解剖结构及不同节段的变化特点.结果与结论:①新西兰大白兔腰椎各解剖形态学指标变化:兔L1-7节段椎体高度呈现"两头小中间大"趋势,在L7节段小,其高度仅为(1.12±0.18)cm;L1节段椎体横径小,为(1.03±0.15)cm,L1-7节段各椎体纵径的节段性变化较小;L1-6节段椎管横径和纵径均逐渐增大,L7节段时突然变小;椎弓宽度在L1-7节段逐渐增大,但变化平稳;椎弓根高度在L1-5节段平稳变化,L6-7节段开始突然变小,与其他节段相差甚大,到L7节段时小,仅为(0.58±0.11)cm;棘突宽度和长度在L1-6节段平稳增大,在L7节段变小;横突长度在L1-3节段逐渐增大,L3-6节段较平稳,L6-7节段显著变小;横突夹角在L1-6节段差异度小,但在L7节段显著增大,为(58±2)°.②结果证实:新西兰大白兔腰椎形态学测量可以观察到腰椎的内外部解剖结构及不同节段的形态变化特点,为腰椎动物实验研究提供详细的解剖形态学参数资料.
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输合配穴针刺对LPS脑损伤幼鼠模型脑组织S100B、NSE表达的影响
目的 探讨输合配穴针刺干预对LPS脑损伤幼鼠模型脑组织S100B、NSE表达的影响.方法 将60只SD新生的乳鼠随机分为针刺干预组、模型组和对照组,对干预组采用输合配穴针刺21 d后,对各组大鼠脑组织中S100B、NSE含量进行检测.结果 干预组S100B、NSE的表达明显高于对照组(P＜0.01),且21 d时均低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过对脑损伤模型脑组织S100B、NSE表达检测,明确“输合配穴”针刺法在早期干预有效性.
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S180肉瘤压迫小鼠坐骨神经癌痛模型的建立
目的:建立S180肉瘤压迫小鼠坐骨神经癌痛模型.方法:实验将小鼠分为空白组、对照组、模型组.空白组不做处理,对照组给予等量生理盐水,模型组予坐骨神经肌肉丛中注射每只含有S180细胞2×106个/0.2 mL.各组分别在造模后第1、3、5、7、9、11、13、15、17天用鼠尾压痛法测量小鼠痛阈值.结果:通过鼠尾压痛实验发现,在造模后第9天,对照组与模型组比较P＜0.05.结论:从疼痛行为学研究表明,于造模后第9天,S180肉瘤压迫坐骨神经癌痛模型复制成功.
