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高效液相色谱法测定干性食品模拟物中2-羟基-4-正辛氧基二苯甲酮的迁移量
1引言在食品包装外表面总是印刷着各种精美图案与标签,虽然它们并未与食品直接接触,但是其中的低沸点物质非常容易渗透并迁移至食品当中,从而引起被包装食品的污染,造成食品安全问题.UV 固化墨由于不含有机溶剂,再加上它具有固化快、可常温处理、对环境污染低等优点而被广泛用于食品包装印刷行业,尤其是各种纸基食品包装材料的印刷.作为光固化体系的关键组成部分,光引发剂是不可替代的成分,2-羟基-4-正辛氧基二苯甲酮 (UV-531) 能够吸收波长为270-340 nm的紫外线,而且它具有挥发性低、相容性好、容易加工等特点,因此成为光引发剂中重要的品种之一.
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超高效液相色谱紫外法测定水基食品模拟物中双氰胺的特定迁移量
双氰胺(Dicyandiamide)又名氰基胍,是氰胺的二聚体,是一种重要的有机化工原料和精细化工中间体。与三聚氰胺类似,双氰胺作为潜在的非蛋白氮掺假物质,食品添加剂国家标准已禁止双氰胺添加在乳粉中。目前,有关双氰胺的检测主要集中在奶粉样品,已报道的检测方法主要包括HPLC-MS法、UPLC-MS/MS法和HPLC-UV法。易忽视的是食品接触材料中残留的双氰胺单体在使用过程中,也会迁移至食品中直接危害人体健康。2015年3月25日起,欧盟委员会公布的食品接触塑料材料和制品10/2011号法规正式实施,在欧盟10/2011法规主要修订内容中,将双氰胺单体的特定迁移量限定为60 mg/kg。而目前有关双氰胺单体的特定迁移量的检测,国内外未见相关报道。本研究旨在对水基食品模拟物中双氰胺的特定迁移量开展UPLC-UV检测方法研究。
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MiR-132-3p介导FOXO1对内皮祖细胞增殖的调控作用
目的 探讨miR-132-3p对内皮祖细胞增殖的影响及调控机制,为深静脉血栓的治疗提供新的理论依据.方法 随机(随机数字法)挑选血栓患者22例,健康志愿者27例,采集静脉血,分离血浆和内皮祖细胞,实时定量PCR检测miR-132-3p在血浆及内皮祖细胞中的表达;实时定量 PCR检测常氧和低氧条件下内皮祖细胞中miR-132-3p的表达;用电转法将miR-132-3p的模拟物(实验组)与特异性siRNA (对照组)分别转染入内皮祖细胞,MMT和CCK-8法检测miR-132-3p对内皮祖细胞增殖的影响;利用萤光素酶实验和免疫印迹实验分析miR-132-3p对内皮细胞中FOXO1表达的影响.结果 血栓患者血浆中miR-132-3p平均水平为健康志愿者的(0.45 ±0.05)倍(P<0.05);低氧条件下内皮祖细胞中miR-132-3p表达水平为常氧状态下的(0.23 ± 0.13 )倍(P<0.05);实验组中miR-132-3p的表达水平是对照组的(15.72 ± 2.06)倍,MMT法检测结果显示在低氧条件下,实验组细胞增殖是对照组的(7.79±1.37)倍(P<0.01 ),CCK-8法检测结果表明实验组的细胞增殖是对照组的(6.46 ± 0.38)倍(P<0.01);软件分析显示FOXO1为miR-132-3p的直接靶标,在低氧条件下miR-132-3p模拟物mimic转染的内皮祖细胞中荧光素酶活性是siRNA处理组的0.47倍,免疫印迹结果显示在低氧条件下miR-132-3p模拟物mimic转染的内皮祖细胞中FOXO1蛋白表达水平是siRNA处理组的0.18倍.结论 与健康志愿者相比,血栓患者miR-132-3p表达明显降低,结果促进了FOXO1的表达,抑制了内皮祖细胞的增殖,这可能与静脉血栓的形成密切相关.
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MicroRNA-451调控心肌肥厚
目的:MicroRNA-451(miRNA-451)在心肌肥厚中的调控作用。
方法:利用Agilent的miRNA表达谱芯片筛查肥厚型心肌病(HCM)患者心肌与正常心肌的miRNA表达差异,筛查出的miRNA利用TaqMan探针法进行实时定量PCR检测。Lipofecta mine 2000转染miR-451的模拟物或抑制物,在体外培养的新生大鼠心肌细胞中高表达或敲低miR-451。心肌细胞用鬼笔环肽(phalloidin)染色后计算表面积。14-3-3ζ蛋白表达用Western检测。 -
RGD序列模拟物合成研究进展
目的综述近些年RGD序列模拟物合成方面的研究进展.方法查阅1984年~2002年相关文献进行汇总,列举各类典型加以综述.结果与结论通过对较为成熟的RGD受体抑制剂相关合成方法及其构效关系的引证,可以看出含RGD序列的新药研究应有良好的发展和应用前景.
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谷胱甘肽过氧化物酶模拟物研究进展
回顾谷胱甘肽过氧化物酶模拟物的研究进展,为开发新型谷胱甘肽过氧化物酶模拟物提供科学参考.总结了目前研究比较热门的4种代表性谷胱甘肽过氧化物酶模拟物:小分子模拟物、环糊精为酶模型的模拟物、多肽含硒模拟物、多糖为酶模型的模拟物,分析了其发展趋势.
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锰超氧化物歧化酶模拟物的研究进展
超氧化物歧化酶(SOD)因能催化超氧离子(O*2)的歧化反应,而起到抗炎、抗衰老等作用.近年来,小分子化合物作为超氧化物歧化酶的模拟物越来越受到人们的重视.本文对锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的活性部位及其模拟物的研究进展进行综述.
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经颅多普勒监测硒化透明质酸对脑血管痉挛的作用
脑血管痉挛(CVS)是影响脑动脉瘤患者手术预后的主要因素,其病理过程中中脂质过氧化是脑血管痉挛发生、发展的主要机制,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)在抗脂质过氧化反应中至关重要.我们以前在体外试验中,已证实谷胱甘肽过氧化物酶的人工模拟物-硒化透明质酸(SeHA)可以抑制脂质过氧化反应[1],但是作用时间短,活体无法持续给药.
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超氧化物歧化酶修饰改造的研究进展
超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在于自然界一切生物体内,通过催化超氧阴离子自由基(·O-2)发生歧化反应,减轻或消除·O-2对机体的氧化或过氧化损害.研究表明,机体的衰老、病变及辐射伤害都与自由基(包括·O-2)的形成和损伤有关,故SOD有抗衰老[1]、抗辐射、抗炎症、抗自身免疫性疾病、抑制肿瘤和癌症[2,3]的功能.研究还表明,SOD与胃病[2]、帕金森综合症、老年痴呆症、心血管疾病等有着密切关系.目前,在医药、食品、保健品、化妆品、美容等行业也已开始使用SOD.SOD具有许多独特的生物学特性和生理学功能,但天然的SOD稳定性较差,分子量较大,且多来源于异源性,具免疫原性,而限制了其在相关领域的应用[4].目前国内外已有很多的研究,如采用化学修饰、基因重组、SOD模拟化合物来解决天然SOD所带来的问题,这已成为当今SOD研究中的一个热点.本文对目前国内外此方面的研究进行综述.
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肽核酸性质及应用前景
肽核酸(peptide or polyamide nucleic acids,PNA)是脱氧核糖核酸(DNA)的模拟物,由Nielson[1]等人于1991年设计并合成的.因其生物稳定性极高以及其对核酸结合的高度特异性和高度亲和力,故在分子生物学应用和基因治疗中显示了广阔的前景.
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MetaPhore完成SOD模拟物M40403的首项临床研究
关键词: 模拟物 -
超氧化物歧化酶模拟物研究进展
超氧化物歧化酶(SOD)用于许多与活性氧(ROS)损伤有关的疾病已获得有益效果,但酶在治疗过程中所伴随的某些制约因素(免疫原性、有限的生物利用度和溶液的不稳定性等)限制了它的应用.因此,对具有SOD活性的小分子化学物质,即SOD模拟物的研究受到重视.文章简介SOD模拟化合物及其生物活性的研究进展.
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HIV进入抑制剂研究进展
HIV进入抑制剂主要干预病毒包膜与靶细胞膜融合过程,可有效预防HIV感染.在HIV进入细胞过程中,HIV包膜糖蛋白gp120首先与宿主细胞膜上的CD4分子结合,使gp120构型变化,继而与CCR5或CXCR5等辅助受体结合,诱使跨膜亚基gp41构型改变,HIV包膜与细胞膜空间靠近,终融合.基于这一过程,可通过筛选与gp120结合的化合物、设计CD4模拟物、研制CD4或CCR5 l单抗、构建辅助受体抑制剂等方法,从各个方面干预HIV的进入.对HIV进入抑制剂的靶标和药物研发进展进行概述.
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载脂蛋白A-I模拟物的功能
近年,载脂蛋白A-I模拟物疗法这一相对较新的领域取得许多重要进展,支持其不仅有治疗心血管疾病的强大潜力,同时涉及慢性炎症和氧化以及其他疾病状态的治疗.正在开发中的各种载脂蛋白A-I模拟肽均显示出强有力的心脏保护功能,可媲美甚至超越全长载脂蛋白A-I(apoA-I)和高密度脂蛋白(HDL),本文旨在探讨这些肽分别负责哪些不同的功能,同时确定其结构特征和运行机制.
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SOD模拟物抗缺血再灌注损伤的作用
超氧化物歧化酶(SOD)在调节超氧化物水平方面起着主要的作用,这些酶的活性有两种形式:线粒体中的锰酶(SOD2)、细胞内存在的铜锌酶(SOD1)或细胞外表面的铜锌酶(SOD3),其中SOD2为重要[1].超氧化物在体内是通过大量的路径形成的,包括正常细胞呼吸作用、内皮细胞和花生四烯酸的代谢等.在一些缺血器官再灌注后可见到超氧化物阴离子的过量释放并导致了组织损伤,包括肾脏,胃,肠,皮肤和心脏[2,3].
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小鼠microRNA-135a与STAT6靶点作用的体外研究
目的 结合TargetScan软件预测,体外验证小鼠microRNA-135a(miR-135a)与信号传导及转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)的靶点结合作用.方法 将聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增的靶基因STAT6的非编码3'UTR和突变基因分别克隆到双荧光素酶报告载体中,构建野生型和突变型载体.分别将miR-135a模拟物、模拟对照物与靶基因野生型、突变型质粒载体共转染体外培养的293T细胞,测定载体的校正荧光hluc值及报告荧光hRluc值.结果 与模拟对照物相比较,miR-135a模拟物与靶基因STAT6的3'UTR野生型质粒的相互作用能明显降低hRluc/hluc的相对荧光比值,差异有统计学意义(P<0.01);而miR-135a模拟物与突变型质粒相作用则对hRluc/hluc的相对荧光比值比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 小鼠miR-135a与STAT6的3'UTR体外特异性结合作用,为进一步探讨小鼠miR-135a对变应性鼻炎的免疫调控机制提供了依据.
关键词: microRNA 信号传导及转录激活因子 模拟物 小鼠 变应性鼻炎 -
MiR-135a治疗小鼠变应性鼻炎的研究
目的 研究miR-135a对小鼠变应性鼻炎的治疗作用.方法 采用卵清蛋白诱导小鼠的变应性鼻炎,生理盐水为对照.MiR-135a模拟物治疗变应性鼻炎组和模拟对照物变应性鼻炎组分别在诱导小鼠变应性鼻炎的基础上使用特异性miR-135a模拟物及模拟对照物对小鼠的变应性鼻炎进行干预.观察小鼠行为学变化并评分;酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中卵清蛋白特异性IgE的浓度;实时聚合酶链反应检测小鼠鼻黏膜中T-bet、GATA结合蛋白3(GATAbinding prolein 3,GATA-3)和干扰素γ(interferon gamma,IFN"、白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)的mRNA相对表达.结果 与模拟对照物相比较,miR-135a模拟物滴鼻引起变应性鼻炎小鼠的行为学总分均低于5分,引起血清中卵清蛋白特异性IgE浓度的降低,引起鼻黏膜中GATA-3、IL-4的mRNA出现低表达,而T-bet、IFN-γ的mRNA则出现高表达.结论 MiR-135a的功能模拟治疗为microRNA用于变应性疾病的全新基因治疗提供了重要依据.
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BH3-only 模拟物S1通过活化SIRT3分子扰乱卵巢癌细胞糖代谢的机制
癌细胞中葡萄糖代谢的方式为细胞的快速增殖提供了物质和能量基础。去乙酰化酶SIRT3在癌细胞葡萄糖代谢重排和凋亡调控的过程中发挥着重要的作用,有可能成为一个有效的癌症治疗靶点。在本研究中,我们发现BH3-only模拟物S1能够抑制卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的生长,同时能够上调SIRT3的表达。为了探讨S1对卵巢癌细胞糖代谢的影响及其分子机制,通过检测SKOV3细胞在S1作用下线粒体氧耗率( OCR)、胞外泌酸率( ECAR)以及葡萄糖摄入能力的改变,我们发现S1能够损伤线粒体呼吸链和抑制葡萄糖摄取。通过siRNA干扰SIRT3的表达,能够逆转S1对葡萄糖摄入的抑制作用,同时还能缓解S1对SKOV3细胞增殖的抑制效应。合用糖酵解抑制剂2-DG能够加剧SIRT3的活化,同时进一步促进S1对SKOV3细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的发生。综上所述,S1在卵巢癌细胞中抑制细胞增殖作用,可能是通过活化SIRT3以及扰乱葡萄糖代谢来实现的。
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低氧时miR-199 a-5 p通过调节UPR反应发挥神经保护作用的研究
目的:低氧会引起神经元产生内质网应激( ERS),进而引起凋亡,非折叠蛋白反应( UPR)可以缓冲ERS,减轻凋亡。本研究拟探明低氧时脑miR-199a-5p的变化对UPR的调控作用。方法:小鼠在6000 m低压舱中暴露0、3、10 d,或同时给予miR-199a-5p mimic模拟物干预,检测皮层和海马miR-199a-5p表达,及其靶蛋白ATF6和GRP78的mRNA和蛋白水平。利用电镜和TUNEL法检测ERS和凋亡,以及ERS凋亡通路caspase-12表达。结果:低氧增加了海马和皮层ERS和凋亡,3 d组较10 d组显著。 miR-199a-5p的表达随着低氧时间的延长逐渐降低,同时,ATF6和GRP78的表达逐渐增高,以10 d时为显著。在miR-199a-5p mimic的干预下,低氧时ATF6和GRP78的表达被显著抑制,神经元的ERS和凋亡水平,以及caspase-12的表达增高。结论:低氧时脑miR-199a-5p下调导致其靶蛋白ATF6和GRP78表达增加,促进UPR反应,对于保护神经细胞具有重要意义。
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分子印迹技术在给药系统中的应用研究进展
分子印迹技术(Molecular imprinting technique,MIT)系为获得在空间结构和结合位点与模板分子完全匹配的聚合物的一种制备技术,它可以被形象地描绘为制造识别"分子钥匙"的"人工锁"技术.其具有3大特点:构效预定性、特异识别性和广泛实用性[1].因此,MIT在色谱分离、模拟酶、辅助试剂、膜分离、固液萃取、抗体受体模拟物及仿生传感器等较多领域中得以广泛研究和应用,并取得了成果[2].近年来,MIT在给药系统中的应用也已初步展开,并显示出广阔的前景.