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气相色谱-质谱测定尿液中的克伦特罗
拉贝洛尔、克伦特罗属于肾上腺类-受体激动剂(神经兴奋剂),即β2-受体激动剂.我国和欧盟已经禁止其作为生长促进剂,并且规定了克伦特罗在动物组织中的大残留浓度为0.5μg/kg.这些物质在动物性食品中往往以痕量水平(μg/kg)存在,检测样品基质(如尿液和肝脏等)本身也具有复杂性[1~3],本文旨在建立一种简单、快速、灵敏度高、特异性强的分析方法,以满足目前其在生物样品中的检测需要.
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酶联免疫吸附检测克伦特罗条件优化
克伦特罗(CL)是一种强效β-肾上腺素能兴奋剂,已被禁止作为促生长剂用于动物养殖.由于检测技术研究滞后,我国在进出口检疫中使用的β-兴奋剂检测试剂盒完全依赖进口,因此,研制一套准确可靠、具有自主知识产权的药物残留检测试剂盒对动物源食品中兽药残留的监控具有重要意义.本实验就酶联免疫吸附测定方法的有关步骤进行了优化,建立了实用的检测条件.
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尿中苯丙胺类物固相微萃取-气质联用法研究
苯丙胺类化合物是一类人工合成的有机胺类兴奋剂,对中枢神经和交感神经具有"致幻"性,吸毒者滥用的化合物常有苯丙胺(amphetamine,AP),甲基苯丙胺(methamphetamine,MAP),亚甲二氧基苯丙胺(3,4-methylenedioxymphetamine,MDA),亚甲二氧基甲基苯丙胺(3,4-methylenedioxymethamphetamine,MDMA)等.目前检验方法中,气相色谱法[1]的结果需经质谱法确认;气质联用法[2](GC/MS)样品需水解或衍生化,操作烦琐复杂,不利快速分析.本研究采用固相微萃取(SPME)技术[3],以85μm聚丙烯酸酯(Polyacrylate,PA)纤维同时萃取尿中苯丙胺类各组分,与GC/MS联用直接测定,尿样无需衍生化,能较好地满足准确灵敏、快速简便的要求.
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兴奋剂促红细胞生成素免疫检测方法的研究
目的探索兴奋剂促红细胞生成素(EPO)的检测方法.方法制备了抗重组EPO(rHuEPO)的两株单克隆抗体:McAbF8和McAbF11,同时纯化了天然螺旋藻中的藻胆蛋白.以McAbF8作包被抗体,建立了检测血清中EPO浓度的竞争ELISA法;并将藻胆蛋白作为荧光探针标记McAbF8,建立了检测血清中EPO浓度的荧光免疫检测法,其检测线性范围为10-10~10-12mol/L.结果用于同样样本的血清检测,与竞争酶联免疫吸附法所测结果无显著性差异(P>0.05).结论荧光免疫检测法在灵敏度和特异性等方面,并不亚于传统的酶联免疫吸附法(ELISA),而在有些方面还要优于ELISA,它在检测中将获得更大的应用.
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甲基苯丙胺类混合物滥用人群情况调查
0 引言苯丙胺类物质是一组具有类似化学结构的中枢神经系统兴奋剂,甲基苯丙胺(ICE)和亚甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA,俗称"摇头丸")是其中常被滥用的物质[1].为了解北京地区MDMA的滥用情况,将本院住院MDMA滥用者的滥用情况做一调查.
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"摇头丸"中毒的急救护理
"摇头丸"是少数舞厅中滥用的中枢神经系统兴奋剂,近年来滥用有上升的趋势.本文总结了2002年2月-2004年12月在我院急诊科救治的"摇头丸"中毒患者12例急救时的主要护理体会.
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m5 AChR-G11融合蛋白筛选m5受体配体的研究
目的:以m5AChR-G11融合蛋白为工具,筛选m5受体亚型特异性配体,并且探讨m5AChR-G11融合蛋白中两组分相互作用的机制.方法:采用杆状病毒Sf9细胞表达系统,制备m5AChR-G11融合蛋白;通过[3H]QNB放射配体结合实验和[35S]GTPγS替代结合实验,检测m5AChR-G11融合蛋白的功能.结果:m5AChR-G11融合蛋白的表达水平为(60.39±1.95)pmol·mg-1蛋白.不同配体存在时使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化,acetylcholine,McN-A-343,AF-102B,R-(+)-hyoscyamine,tropicamide,alcuronium和atropine存在时以及无配体时,GDP的IC50值分别是134.90,46.77,38.02,10.00,13.80,18.62,5.89,23.40μmol/L.结论:杆状病毒Sf9细胞表达系统表达的m5AChR-G11融合蛋白具备m受体配体结合特性和两组分间的偶联功能.乙酰胆碱是m5受体的完全激动剂,McN-A-343和AF-102B是部分激动剂,R-(+)-hyoscyamine,tropicamide,alcuronium和阿托品是拮抗剂.
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M_2-G_(i1α)融合蛋白在Sf9细胞中的表达及M_2AChR特异性药物的鉴别
目的通过杆状病毒-Sf9细胞系统表达M2-Gi1α融合蛋白,并利用M2-Gi1α融合蛋白为工具筛选毒蕈碱性乙酰胆碱受体亚型2(M2AChR)特异性配体,探讨M2-Gi1α融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法通过两步PCR反应建立M2AChR与Gi1α融合cDNAs,并在Sf9昆虫细胞中表达M2-Gi1α融合蛋白。通过[3H]羟苯二乙酸奎宁酯([3H]QNB)配体饱和结合实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测M2-Gi1α融合蛋白表达水平,并筛选M2AChR的特异性配体。结果 M2-Gi1α融合蛋白的表达水平为(8.44±0.39)nmol·g-1膜蛋白。不同配体使M2-Gi1α融合蛋白中Gi1α与GDP的亲和力发生变化,乙酰胆碱、氧化震颤素、槟榔碱、阿托品、fangchinoline、levitimide的IC50值分别为:21.35,23.86,11.91,0.13,1.05,1.75μmol·L-1,无配体存在时为2.50μmol·L-1。结论杆状病毒-Sf9细胞表达系统表达的M2-Gi1α融合蛋白具备M受体与配体结合的特性和组分间的耦联功能,通过检测GDP亲和力的大小有利于筛选和鉴别M2受体亚型特异性药物。
关键词: 融合蛋白 毒蕈碱型乙酰胆碱受体 G蛋白耦联受体 兴奋剂 拮抗剂 -
AIDS/HIV-1感染与病毒性肝炎
一、丙型肝炎病毒感染如今,全世界大约有1.7亿HCV慢性感染者.同HBV一样,HCV亦系经血直接进入体内而感染,其传播途径为输血、输入含HCV血制品、兴奋剂注射、针灸以及纹身等,特别值得注意的是HCV感染的转慢率高达60%~80%.
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有钱啥感觉
碰到我认为有钱的人,我经常问一问,有钱到底是什么感觉?住一栋别墅,倒杯水都得爬三层楼,看银行存款数字麻木得跟看身边躺着的老婆一样,换一辆车跟换一块手机电池一样,你说得多大剂量的兴奋剂,才能让你一激灵啊?大部分人都很低调,大家直摇头,都说自己还差得远.光有别墅哪成?你得有一块地,在郊区荒着,长着草,夏天,里面还得趴着几只青蛙;光有存款也不成,到一个银行窗口,小妹就把你的业务搞定了,你的资产如果不像炸药包那样,可以把一群有钱人捆在一起,而且遥控器还不在你手里,那也只能是刚刚摆脱温饱.
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胞二磷胆碱神经元保护研究进展
胞二磷胆碱(Citicoline)是一种中枢神经系统兴奋剂,其化学名为胞嘧啶核苷-5-二磷酸胆碱(Cytidine-5-diphosphocholine),基本结构分为胞苷和胆碱两部分.除兴奋作用外,近年发现其有神经元保护功能,并逐渐受到临床工作者的认同,本文就胞二磷胆碱神经元保护的作用机制、胞二磷胆碱脂质体及临床应用文献复习如下.
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癌症患者的心理护理
随着现代医学的发展,病人已不是单纯的生物体,而是生物-心理-社会统一体.愉快的心情是免疫应答的良好兴奋剂,所以心理护理在预防治疗疾病中具有了重要作用.近几年来对癌症患者更注重了心理护理,收到满意效果.现将护理要点报告如下.
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实施飞行检查,提升护理质量
飞行检查早由国际田联兴奋剂中心用于世界各国运动员的兴奋剂测,以其公正、真实及行动快捷为其特点[1]。我院借鉴这一监管方法用于临床护理质量环节管理,在事先不通知被查科室,不经过被查科室同意或陪同的前提下,随机进行的一种突击检查形式。因具有保密性、即时性、灵活性,针对性和实效性的特点,有效规范了护理职业行为,增强了护理人员对风险隐患的识别与控制意识,提高了各项制度执行力和内控管理水平。现将我院应用情况报道如下。
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理智科学对待中药中含有兴奋剂问题
我国的中药制剂中有1231种含有兴奋剂,主要成分为士的宁、吗啡、普拉雄酮和麻黄碱等.造成这些问题的原因是:中药制剂多为复方,其中有些药味本身就含有兴奋荆,例如麻黄以及一些动物类药物;另外,为了增强药效,一部分中药制剂中加入了西药,而其中的某些西药本身就属于兴奋剂.中药引起的兴奋剂风波主要是许多民众和运动员误认为中药制剂无毒无害,可以任意使用,造成误服误用.为了维护公开、公平、公正的原则,利于我国体育事业和奥林匹克运动的健康发展,国家药监局要求药品生产厂家在所有含兴奋剂成分的药品包装或说明书中必须注明"运动员慎用"的字样.中药制剂必须在其使用说明书中,公开所有组成,不得隐瞒任何化学成分或添加剂,详细说明不良反应和注意事项,必须在小包装或者说明书上用中文注明"运动员慎用"字样,以防止有人滥用或误服.正确合理应用这些含有兴奋剂成分的中药,依然可以取得良效.
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一种稳定的生长激素兴奋剂的检测方法:现状和前景
虽然在运动中已经禁止服用含有生长激素(GH)的药物,但有很多证据表明这些药物仍然被广泛滥用.据报道高剂量的GH常常与代谢类胆固醇联合使用数月.一个稳定的GH检测方法的开发是一个巨大的挑战,因为服用的重组人源22 kDa GH(22K GH)与内源GH无法在检测中被区分开来,而且循环GH浓度的生理波动很大.检测GH的一种方法是在免疫分析的基础上测定不同的循环22K GH亚型和其它GH亚型.22K GH的摄入会改变其它内源垂体GH亚型的平衡.这种区分亚型的方法已经被应用,但它的有效性由于所能检测到的时间范围很短而受到限制.第二种能够延长检测时间的方法是基于检测循环GH相关蛋白的升高水平,比如类胰岛素生长因子(IGF)轴和胶原肽.年龄和性别是决定IGF-Ⅰ和胶原标记可变性的主要因素;因此基于这些标记物的检验要考虑年龄以及性别因素.目前大量的数据可以验证GH响应标记方法(第二种方法),这种方法的应用还依赖于建立一个确切可用的标准化方法.将来的检测方向还包括在国际反兴奋剂组织中更广泛地实施这两种办法,尽可能使用其它测量平台,根据生物参数包括GH响应标记物为运动员建立个人参考档案.新的方法包括基因表达和蛋白质组学.
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体育运动中的激素滥用:从反兴奋剂说起
从远古以来,一直有一些缺乏职业道德的运动员利用兴奋剂来获得不公平的竞争优势.每年世界反兴奋剂组织都公布一些在体育运动中禁止的药物和方法清单.药物和方法如果符合至少下列标准中的两项就有可能属于违禁范围:提高运动水平、危害运动员健康、违背运动精神.在制药工业的发展下违禁药品的清单也在不断更新,清单列举了在比赛内外禁用的兴奋剂药物的类型和方法.这些药物包括类固醇类和多肽类激素以及它们的调节分子、刺激物、糖皮质激素、β2-激动剂、利尿剂和掩蔽剂、镇静剂和大麻.血液回输技术、篡改、灌注和基因兴奋剂属于该清单中的违禁方法.在这个清单中,激素始终是反兴奋剂实验室发现的数量多的违禁药品.虽然目前大多数药物是可代谢类固醇,但是随着分子生物学技术的发展,重组多肽类激素也被广泛使用.这些药物逐渐改变了兴奋剂使用的发展前景.多肽类激素,例如促红细胞生成素、生长激素、胰岛素和类胰岛素生长因子Ⅰ已经被视为广泛滥用的提高竞技水平的药物.此外,由于很难用有关技术检测出来,多肽类激素越来越受到不诚实运动员的青睐.本文将综述激素作为兴奋剂在体育运动中的使用,主要集中于多肽类激素对目前反兴奋剂斗争形成的挑战.文章也讨论了制药工业正在开发的可能作为新的必奋剂的激素和激素调节物.
关键词: 世界反兴奋剂组织(WADA) 兴奋剂 激素 体育 -
生长激素在竞技体育中提高机能作用的生理学和药理学基础
生长激素(GH)是一种重要的且功能显著的代谢类激素,是脑垂体前部细胞分泌的活性物质,受一些正常和病理生理条件的影响.人GH在上世纪50年代首次被分离出来.人尸体中分离到的GH首先被用于治疗GH缺乏的病人.然而,合成重组的GH在上世纪80年代中期被广泛使用,这种重组GH的出现推进了GH被用作兴奋剂的步伐.服用GH在许多优秀运动员和体育馆训练人员中已经是一个众所周知的现象,但是由于医学利道德上的原因被禁止了.主要是因为被服用者看重的GH的代谢和分解脂肪作用.尽管GH的机能增强作用在运动员中广泛流传,但近几年来GH作为单一兴奋剂的有效性已受到质疑.没有足够的证据表明,与优化训练和合理饮食相比,超过生理剂量的GH在肌肉训练中有额外效果.然而,可能是由于一些协同作用,比如GH可以与代谢类胆固醇结合,GH被认为对胶原的合成有促进作用.不管GH是否有效,我们都需要建立一套有效的检测方法.很多因素决定了GH检测方法的复杂性,但是有一套方法已经被建立并在雅典和都灵奥运会上使用.这种方法的问题是从后服用GH起到能有效地柃测到GH成分之间的时间跨度很短(24-36小时).因此,地道的检测方法将是至关重要的.无论如何用不同的方法开发一个可替代的、可靠的检测方法的工作正在进行.
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雄激素类固醇激素与奥运会
即使在1974年被禁用后,雄激素类固醇激素(AAS)仍然一直被参加奥运会的运动员滥用.掺杂有AAS的药物于1965年到1989年之间出现在德意志民主共和国(GDR),这些药物帮助GDR在奥运会上赢得了许多奖牌,尤其在女子项目上.AAS是目前在全世界和近两届夏季奥运会上在运动员尿检中检测到的常见的违禁药物.获得科学证据证实AAS提高运动成绩的有效性是十分困难的,因为在研究工作中让男性实验者服用某些运动员和健美人士服用的大剂量的雄激素是很难获得伦理学批准的.近三十年来,检测AAS的方法逐步发展起来了.目前虽然有很多尖端的分析仪器和方法,但是近年来反兴奋剂权威人士和分析化学科学家们仍然面临着运动员服用AAS的挑战.据预测选择性雄激素受体调节器(SARMs)在未来的发展和使用可能是未来几年的一个问题.内分泌学家们应该意识到有时候睾酮替代疗法在运动中可被授权获得治疗用途豁免(TUE),但这些情况需要进行讨论.
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454例注意缺陷多动障碍儿童多向治疗探讨
儿童注意缺陷多动障碍( attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)的中枢兴奋性药物治疗疗效常与药物的选择、用药方法、药物剂量、对产生副反应的处理及治疗的坚持性等有关.我院自 1991年开始采用利他林和匹莫林 2种兴奋剂同时口服,并结合家庭和心理的多向治疗,取得了良好的效果,现总结如下.
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药物依赖和精神疾病司法鉴定
能造成药物依赖的物质很多:麻醉剂(雅片、吗啡、海洛因等),兴奋剂(苯丙胺、麻黄碱等),大麻,致幻剂,可卡因,酒精,巴比妥,以及烟草,镇静剂,止痛剂,催眠药,溶剂,K粉等.