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藻胆蛋白与荧光免疫分析
藻胆蛋白是一种新型的荧光标记物,在荧光免疫分析方面有着广阔的应用前景.其应用领域主要包括荧光激活细胞分类、流式细胞荧光测定、荧光免疫检测以及单分子检测等.在可溶性抗原、抗体检测方面的研究则开展较少.
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藻蓝蛋白抗肿瘤及其作用机制研究进展
藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)从藻类中提取,是来自真核藻类的一种捕光色素蛋白,捕光效能高,属于藻胆蛋白的一种,在螺旋藻中含量较高,主要由α和β两种亚基组成,天然状态下多以杂聚体形式存在.研究表明,藻蓝蛋白在抗肿瘤、抗氧化、提高机体免疫力等方面有着很高的活性,有极大开发成为药物的潜力[1,2].近年来在海洋生物中寻找高效、低毒、不良反应小的抗肿瘤药物已引起了国内外研究者的重视.现对藻蓝蛋白的抗肿瘤作用及其相关机制做一综述,为天然药物新领域研发和新药开发提供相关依据.
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螺旋藻多糖和藻胆蛋白的肿瘤防治作用及机制
螺旋藻多糖和藻胆蛋白具有显著的肿瘤防治作用,综合起来主要是对体外肿瘤细胞的抑制、动物肿瘤的防治及在临床上的应用3个方面,其肿瘤防治作用的机制可能是作用于肿瘤发生的不同阶段及增强机体的免疫功能两个方面.
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藻类中抗肿瘤活性成分的研究进展
藻类中含有多种生物活性成分,从中筛选抗肿瘤活性成分已成为当前研究热点.近年来,国内外研究者已从藻类中筛选出多种具有抗肿瘤作用的活性成分,如藻类多糖、萜类、溴苯酚及藻胆蛋白等.本文就其研究现状做一综述.
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钝顶螺旋藻两个不同生态种藻胆蛋白抗癌作用的比较研究
目的:探讨鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻S1藻胆蛋白的抗癌作用,并与Chad湖钝顶螺旋S2的进行比较.方法:用MTT法分别测定螺旋藻藻胆蛋白对人肝癌细胞(HepG-2)及人胃癌细胞(MGC-823)的生长抑制作用.结果:S1、S2的藻胆蛋白对HepG-2的生长抑制率分别为67.6％、8.1％.S1与空白对照组间呈极显著性差异(P＜0.01),S2与空白对照组差异显著(P＜0.05)；S1与S2差异极显著(P＜0.01).S1和S2的藻胆蛋白对MGC-823的生长抑制率分别为68.8％、62.5％.S1、S2与空白对照组间均差异显著(P＜0.01)；S1与S2间无显著性差异(P＞0.05).结论:S1的藻胆蛋白对HepG-2的生长抑制作用大于S2；S1和S2对MGC-823的生长均有抑制作用且效果相同.
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兴奋剂促红细胞生成素免疫检测方法的研究
目的探索兴奋剂促红细胞生成素(EPO)的检测方法.方法制备了抗重组EPO(rHuEPO)的两株单克隆抗体:McAbF8和McAbF11,同时纯化了天然螺旋藻中的藻胆蛋白.以McAbF8作包被抗体,建立了检测血清中EPO浓度的竞争ELISA法;并将藻胆蛋白作为荧光探针标记McAbF8,建立了检测血清中EPO浓度的荧光免疫检测法,其检测线性范围为10-10～10-12mol/L.结果用于同样样本的血清检测,与竞争酶联免疫吸附法所测结果无显著性差异(P>0.05).结论荧光免疫检测法在灵敏度和特异性等方面,并不亚于传统的酶联免疫吸附法(ELISA),而在有些方面还要优于ELISA,它在检测中将获得更大的应用.
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节旋藻藻胆蛋白对果蝇总抗氧化能力和丙二醛的影响
目的 研究节旋藻藻胆蛋白对果蝇体内总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量的影响.方法 采用鄂尔多斯钝顶节旋藻藻胆蛋白(P1)和Chad湖钝顶节旋藻藻胆蛋白(P2)分别配制0.25％、0.50％和1.00％浓度的含蛋白培养基,以普通培养基为对照组、喂饲果蝇并测定各剂量组果蝇体内T-AOC和MDA含量.结果 P1、P2不同剂量组的雄果蝇T-AOC较对照组均显著提高(P＜0.05),雌果蝇T-AOC虽提高,但为达到显著性水平.与对照组相比,P1组雌雄果蝇MDA含量明显降低(P＜0.05),P2组雄果蝇MDA含量明显降低(P＜0.05).结论 节旋藻藻胆蛋白具有增强雄果蝇T-AOC和降低果蝇体内MDA含量的作用.不同产地钝顶节旋藻的藻胆蛋白对果蝇T-AOC和MDA含量的影响不存在差异.
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盐生隐杆藻藻胆蛋白的分离纯化和特性研究
盐生隐杆藻的水溶性色素提取物经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow、羟基磷灰石和Sephacryl S-200柱层析,纯化出两种藻胆蛋白:藻蓝蛋白(C-PC)和别藻蓝蛋白(APC),纯度(A620/A2so)分别为5.5和5.O.紫外-可见分光光度计测得C-PC和APC的大可见吸收峰分别为617 nm和651 nm,其室温荧光发射峰分别为645 nm和664 nm.SDS-PAGE显示,C-PC和APC均有α和β亚基.C-PC的α和β亚基分子质量分别为15 667 u和18 197 u;APC的α和β亚基分子质量分别为14 894 u和17 378 u.根据SDS-PAGE推算,C-PC和APC单体的分子质量分别为33 864 u和32 272 u,质谱测得C-PC和APC单体的分子质量分别为38 014 u和36 432 u.经等电聚焦测定C-PC和APC的等电点分别约为4.6和4.8.氨基酸分析结果表明,c-PC和APC分别含有17种氨基酸.
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条斑紫菜藻胆蛋白对小鼠免疫功能及抗氧化活性的影响
目的 本实验研究了条斑紫菜藻胆蛋白对小鼠免疫功能及抗氧化活性的影响.方法 通过小鼠衰老模型探讨不同浓度藻胆蛋白提取液(CPP)灌胃30d后,对小鼠免疫器官重量、血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及肝组织丙二醛(MDA)生成的影响.同时,研究了纯化的R-藻红蛋白(R-PE)和c-藻蓝蛋白(C-PC)对二笨代苦味酸自由基(DPPH)的清除作用及对H2O2诱导的小鼠红细胞溶血和小鼠肝匀浆脂质过氧化生成的抑制作用.结果 藻胆蛋白提取液可以提高免疫器官脏器指数,并且显著提高小鼠血清SOD和GSH-Px活性,显著降低了肝组织MDA生成.R-PE和C-PC浓度在1.4mg·mL-1时.对DPPH的清除率达到大,分别为89.01%和60.52%;在浓度为0.12mg·mL-1时,对小鼠红细胞溶血的抑制率达到大,分别为73.85%和63.42%;在浓度为0.2mg·mL-1和0.3mg·mL-1时,对肝匀浆脂质过氧化的抑制率分别达到66,63%和66.67%.以上活性均高于同浓度下的维生素C.结论 条斑紫菜藻胆蛋白能提高小鼠的免疫功能,是一种具有良好应用前景的抗氧化剂.
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坛紫菜中藻胆蛋白的提取及其抗氧化活性研究
目的 提取紫菜中的藻胆蛋白,找出从紫菜中提取藻胆蛋白的佳提取条件,并对其抗氧化能力进行研究.方法 紫菜用40倍体积的水溶涨6d后,经组织捣碎2min,45%的硫酸铵盐析沉淀透析后即得藻胆蛋白粗提物(CPP).采用邻二氮菲-Fe2+氧化法和邻苯三酚自氧化法分别测定CPP清除·OH和O-2·能力,并小鼠连续灌胃25d后,分别测定小鼠全血过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽氧化物酶(GSH-Px)活性,以及红细胞丙二醛(MDA)含量和血清总SOD活性.结果 CPP具有体外清除·OH和O-2·作用,并能显著地提高小鼠全血CAT,GSG-Px,血清总SOD活力,降低红细胞MDA含量.结论 CPP能以多种途径发挥抗氧化作用.
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紫球藻生物活性物质及其应用
紫球藻(Porihuyibridium)是一种海水单细胞红藻,其在培养繁殖过程中,能够合成藻胆蛋白、高不饱和脂肪酸、硫酸酯多糖等生物活性物质,具有广阔的应用前景.本文综述了分类、形态、及其活性物质的生物应用研究.
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螺旋藻多糖和藻胆蛋白对人白血病Jurkat细胞生长的影响
目的研究螺旋藻不同成份对人白血病Jurkat细胞生长的影响.方法从直线型钝顶螺旋藻(SP-Dz)中提取藻多糖和藻胆蛋白,将不同浓度的螺旋藻粗提取液、藻多糖和藻胆蛋白分别添加到细胞培养液中进行体外细胞培养,每天在显微镜下计数活细胞数.结果100mg/L的藻粗提取液抑制率接近90%,螺旋藻多糖浓度为25mg/L或者藻胆蛋白浓度为200mg/L时,对癌细胞生长的抑制率可以达到5%左右,随着浓度的增加,抑制效果增强.结论螺旋藻粗提取液、藻多糖和藻胆蛋白对Jurkart细胞生长均有明显抑制作用,螺旋藻多糖发挥抑制作用的浓度低.
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龙须菜多糖与藻胆蛋白的研究进展
龙须菜富含海藻多糖、维生索、蛋白质以及磷、钙、碘、铁、锌、镁等多种矿物质以及多种人体必需的微量元素和活性物质,具有较高的保健和营养价值,作为中药具有清热、化痰软坚、利水等功效.笔者对龙须菜作为中药方面及其主要成分多糖和藻胆蛋白的研究进展进行了综述,以期促进对龙须菜的开发和综合利用.
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藻胆蛋白与血卟啉衍生物光敏剂的光毒性比较
目的:比较藻胆蛋白和血卟啉衍生物光敏剂的光动力杀伤和光毒性作用,并从理论上分析吸收光谱特性和光敏作用之间的关系.方法:采用吸收光谱面积的计算方法和MTT法检测光照后培养细胞存活率.结果:3种藻胆蛋白的光敏毒性从大到小依次为藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白,均较血卟啉光敏剂有较弱的日光光敏毒性,光谱分析的理论计算数值和实验结果基本相符.结论:藻胆蛋白,尤其是别藻蓝蛋白和血卟啉光敏剂相比,有较弱的光敏毒性,适合开发成新型的光敏药物.
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藻胆蛋白荧光免疫检测中包被条件的探讨
目的初步确定藻胆蛋白荧光免疫检测适用的包被缓冲液.方法结合普及型藻胆蛋白荧光标记诊断试剂盒的研制,比较不同pH值和不同离子强度的包被缓冲液对抗体包被效果的影响.结果 0.01M,pH8.0磷酸盐缓冲液作为包被液是较为适宜的包被条件.结论该包被条件有利于在包被环节保持抗体活性,提高抗体的固相包被容量.
