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2型糖尿病患者胃旁路术后胃泌酸调节素增高
胃旁路术(BGP)可导致患者体重下降及2型糖尿病缓解,但其机制尚未完全明确.既往研究表明,这一现象可能与胃饥饿素减少及餐后胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、YY肽增加有关.胃泌酸调节素(OXM)是GLP-1受体和胰高血糖素受体的双重兴奋剂,能减少食物摄入,减轻体重,改善血糖稳态.本研究旨在阐明OXM是否在胃旁路术后体重减轻及糖代谢改善中发挥作用.
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26例妊娠晚期胎儿心律不齐诊治的探讨
探讨妊娠晚期的胎儿心律不齐的诊断与处理.一、资料、方法与结果1990～1997年7840例孕35+1～40+4周住院的孕妇中胎心节律不齐(早搏)26例,占3.3%.孕妇年龄22～36岁.22例为正常孕妇,余为:妊娠期糖尿病(GDM)、重度妊娠高血压综合征(妊高征)、孕中期疑诊上呼吸道感染各1例;1例早孕时出现口唇单纯疱疹,巨细胞病毒免疫球蛋白IgG(+),1个月后复查(-).有8例孕妇发现胎心早搏前2～7天有不同程度饮用咖啡等兴奋剂或饮料的历史.
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莫达芬尼对48 h睡眠剥夺时视听运动反应和疲劳感的影响
目的观察48 h睡眠剥夺(sleep deprivation, SD)条件下正常人服用新型促醒剂莫达芬尼改善视听反应能力和疲劳感的效果.方法 6名健康男性青年志愿者,在2次SD实验(间隔2周)中交叉服用莫达芬尼和安慰剂,SD时间从第1天7∶00至第3天7∶00,于第2天0∶00、16∶00和第3天0∶00分别服用莫达芬尼200 mg或安慰剂,采用随机双盲给药,并在第1天21∶00及每次服药后1 h、3 h、5 h、7 h各完成1次测试,内容包括:1)声、光刺激运动反应时;2)注意分配;3)临界闪光融合频率(critical flicker fusion frequency, CFF);4).斯坦福嗜睡量表(stanford sleepiness scale,SSS);5)自认疲劳分级表(rating of perceived exertion, RPE).结果与安慰剂组比较,第2、3次服用莫达芬尼后CFF值较安慰剂组明显升高,斯坦福量嗜睡表、RPE表分值较安慰剂组明显下降;声、光刺激运动反应时与注意分配无明显变化.结论莫达芬尼能明显降低SD条件下的疲劳感和困倦程度.
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雄烯二酮兴奋剂体内代谢及检测方法研究概述
雄烯二酮(Androstenedione或Androst-4-ene-3,17-dione)为内源性类固醇激素,可由人体性腺及肾上腺分泌,是体内雄性激素合成途径中睾酮的直接前体,也是雌性激素合成途径中雌激素的前体.其化学结构.
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兴奋剂中β2-激动剂的检测方法研究进展
在国际奥委会禁用药物表中,兴奋剂主要包括刺激剂、利尿剂、麻醉剂、蛋白同化制剂、肽类激素、β-阻断剂和β2-激动剂等.β2-激动剂中除沙丁胺醇(salbutamol)、福莫特罗(formoterol)、沙美特罗(salmeterol)和特布它林(terbutaline)可以限量使用(只允许吸入)外,其他所有β2-激动剂如克仑特罗(clenbuterol)、奥西那林(orciprenaline)、利托君(ritodrine)、西马特罗(cimaterol)、马布特罗(mabuterol)等均为禁用药物.β2-激动剂能选择性兴奋支气管、子宫和骨骼肌血管平滑肌β2-受体,并能有效地解除支气管痉挛,发挥支气管舒张作用,在临床上已成为治疗哮喘的主要支气管舒张药物[1].此外,该类药物还能增加气道内粘液运输速度,因而有助于分泌物的清除.但若大剂量使用可以增加肌肉/脂肪比并提高肌肉力量,还对呼吸系统和神经系统有兴奋作用,故被运动员用作蛋白同化制剂和刺激剂[2].
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《兴奋剂使用态度量表(PEAS)》的中文版修订
目的:研究适合我国运动员兴奋剂使用态度的有效测量工具.方法:选择《兴奋剂使用态度量表(PEAS)》中文版量表对我国运动员群体进行试用,以考查PEAS量表的测量学特性;依据PEAS中文版量表的适应性检验结果和运动员访谈,对PEAS中文版量表进行修订,并验证PEAS中文修订版量表的信度、结构效度和效标效度.结果:(1)PEAS中文版量表在试用于我国运动员群体时,测量学特性并不理想,主要体现在量表的结构效度较差;(2)PEAS中文修订版量表的结构仍为单维,包含10个条目,具有良好的信度和结构效度;(3)PEAS中文修订版量表的得分与效标量表运动道德推脱的得分显著正相关,与兴奋剂使用意向的得分显著正相关.结论:PEAS中文修订版量表具有良好的测量学特性,可以作为深入研究我国运动员兴奋剂使用态度的有效测量工具.
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液相色谱串接质谱联用法分析人体志愿者尿样中克仑特罗
目的:建立液相色谱串接质谱联用法检测人体志愿者尿样中克仑特罗检测方法.方法:尿样经过液液萃取提取,以10 mmol/L pH3.5甲酸铵和乙腈为流动相,采用Agilent Eclipse PLUS C18 150 mm×4.6mm×3.5 μm色谱柱分离,电喷雾离子源,正离子多反应监测模式扫描分析检测,Dg-克仑特罗为内标.采用该方法分析了4名人体志愿者尿样中的克仑特罗.结果:该方法的检测限为0.02 μg/L,定量限为0.04μg/L,在添加的高、中、低三种浓度的相对回收率分布在85％～100％之间.结论:分析了克仑特罗在人体尿液中代谢规律.方法满足常规检测要求,样品前处理简单、快速、可靠.
关键词： 克仑特罗 兴奋剂 尿样 液相色谱串接质谱联用法(HPLC-MS/MS) -
液相色谱串联质谱法分析马尿中司坦唑醇代谢产物
目的:分析司坦唑醇在马尿中的主要代谢产物,并描述其主要代谢产物的浓度随时间变化曲线,为马尿中检测司坦唑醇提供参考.方法:收集服药前和单次口服司坦唑醇片剂后的马尿样本,经酶解和液液萃取后进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测,分析司坦唑醇在马尿中的代谢产物.结果:对服用司坦唑醇后的马尿进行分析,检出了药物原型和5种代谢产物;建立了司坦唑醇的4种代谢产物的浓度随时间变化曲线.结论:本实验对服用司坦唑醇马尿的代谢产物进行分析,但由于药物浓度低和杂质问题的影响,使得代谢产物的分析不够完善;4种代谢产物浓度随时间变化曲线对于马尿中检测司坦唑醇的代谢物的选择、检测窗口期具有一定的参考价值.
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气相色谱-质谱法初筛和确证运动营养品中甲基己胺
目的:建立气相色谱-质谱法初筛和确证运动营养品中甲基己胺快速检测方法.方法:样品采用甲醇超声提取,弱阳离子交换固相萃取柱(MCX)纯化,洗脱液再经过液液萃取提取,30C下氮气吹干,N-甲基-N-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺衍生化后,采用HP-1MS柱(17 m×0.2 mm i.d.×0.11 mm)色谱分离,程序升温,质谱检测.结果:甲基己胺的差向异构体在确证分析中实现基线分离,3个定性特征离子的峰度比计算结果满足世界反兴奋剂机构(WADA)要求.该方法的检测限为100 μg/kg,在添加的高、中、低3种浓度的相对回收率分布在75％～120％,满足常规检测要求,样品前处理简单、快速、可靠.
关键词： 甲基己胺 兴奋剂 运动营养品 气相色谱-质谱法(GC/MS) -
食品及补剂中降糖药物的初筛及确证方法研究
为探索更有效的食品及补剂中降糖药物的检测方法,本研究采用液相色谱/质谱联用的技术研究检测了食品补剂中的7种降糖药物,分别采用乙酸乙酯提取法和甲醇直接提取法,建立了快速、有效的检测食品补剂中降糖药物的初筛及确证方法.检测限在20～500pg之间.
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同位素比质谱方法检测兴奋剂福美司坦
目的:建立对福美司坦药物来源的检测方法,并进行人体代谢的检测研究.方法:采用酶解、提取、高效液相色谱纯化等方法对尿样进行预处理,应用同位素比质谱仪测定相关组分的同位素比(13C/12C,δ值),建立检测方法.本实验中招募2名男性健康受试者,每位受试者口服福美司坦后收集尿样,应用所建立的检测方法对尿样进行分析,探讨福美司坦在人体内代谢过程中的检测规律.结果:建立的分析方法精密度及重现性RSD均小于1％.受试者尿样中福美斯坦的δ值在服药后迅速降低,并在27小时内保持在约为-31‰.内源性雄性激素代谢物雄酮androsterone和本胆烷醇酮etiocholanolone的δ值无显著性变化.结论:在兴奋剂检测中确定以福美司坦药物原形为目标化合物进行来源分析,建立了检测福美斯坦兴奋剂的同位素比质谱分析方法.
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口服依西美坦后尿中内源性甾体排放规律
依西美坦(exemestane)作为芳香酶抑制剂,因其能够抑制人体内的雄激素向雌激素转变,提高雄激素水平,而被世界反兴奋剂机构(WADA)禁用.本研究通过对一名健康男性志愿者口服单次治疗剂量依西美坦1片(25 mg/片)后,留取15天尿样,采用气相色谱/质谱联用技术,分析其中的内源性甾体激素并逐一定量,分析口服依西美坦后尿中内源性甾体激素的排放规律.结果显示,尿中睾酮等内源性雄性甾体激素浓度有一定增加,几种相关内源性雄性甾体激素比值无明显变化,而睾酮与雌酮浓度比值发生明显变化.采用气相色谱/同位素比质谱技术测定尿中雄酮和本胆烷醇酮的13C/12C比值,耒显示外源性来源.结果提示口服单次治疗剂量依西美坦对尿中内源性甾体激素的排放有一定影响.
关键词： 依西美坦 气相色谱/质谱 气相色谱/同位素比质谱 甾体激素排放规律 兴奋剂 -
液相色谱串接质谱联用快速分析肉食品中克仑特罗对映异构体
目的:建立液相色谱串接质谱联用法快速分析肉食品中克仑特罗对映异构体的方法,分析现有肉食品中克仑特罗对映异构体的比值情况.方法:样品经匀浆处理后,酸化提取,MCX 6cc固相萃取柱纯化,以流动相为10 mmol/L甲酸铵的甲醇为流动相,采用Astec CHIROBIOTICTM T 150 mm×2.1 mm×5 μm色谱柱分离,电喷雾离子源,正离子多反应监测模式扫描分析检测,Dg-克仑特罗为内标.采用该方法分析了85例含有克仑特罗肉食品中的R-(-)-克仑特罗与S-(+)-克仑特罗比值和分布情况.结果:R-(-)-克仑特罗和S-(+)-克仑特罗实现基线分离,方法的检测限为0.1 μg/kg,在添加的高、中、低三种浓度的相对回收率分布在81％～111％之间.结论:该方法样品前处理简单、快速、可靠.
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液相色谱串接质谱联用法确证肉食品中低浓度克仑特罗
目的:采用液相色谱串接质谱联用法对肉食品中残留的低浓度克仑特罗进行确证分析.方法:样品匀浆处理后,酸化去除蛋白,经液液萃取和MCX 3cc固相萃取柱两步纯化,以流动相为10 mmol/L的pH 3.5甲酸铵和乙腈为流动相,梯度洗脱,采用Eclipse C18(1.8 μm,4.6×100 mm)色谱柱分离,电喷雾离子源,正离子多反应监测模式扫描分析检测.结果:D9-克仑特罗为内标,克仑特罗的线性范围为0.01～0.2 μg/kg,相关系数(R2)大于0.99,检出限为0.005 μg/kg,3个不同水平的加标回收率为78.8％～114.8％,相对标准偏差不大于10％.结论:该方法具有操作简单、灵敏度高、重现性好等特点,可以完成肉食品样品中痕量克仑特罗的确证分析.
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液相色谱串联质谱法检测马尿中32种蛋白同化激素
目的:建立马尿中32种蛋白同化激素的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法.方法:利用Agilent 6410A LC-MS/MS仪器;色谱柱采用Agilent Zorbax XDB-C 18柱(2.1×100 mm,3.5 μm);流动相采用0.1％甲酸水溶液(A)和乙腈(B)进行梯度洗脱;离子检测方式为多反应离子检测(MRM);正离子检测.结果:建立了马尿中32种蛋白同化激素的检测方法,药物浓度线性方程的相关系数均大于0.992,日内和日间精密度基本小于20％,提取回收率在84％以上且基质效应多在80％～120％之间,LOD和LOQ满足相关马术检测机构的要求.结论:本方法操作简单,经方法学验证符合相关标准,能满足马术项目的兴奋剂检查要求,可以应用于常规的兴奋剂检测.
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阿卡地新(AICAR)的LC-MS/MS检测方法的建立及应用
目的:建立阿卡地新(AICAR)的LC-MS/MS检测方法,在日常检测中使用.方法:取2ml尿样,加入50μl β-葡萄糖醛酸苷酶进行酶解,C18-SPE固相萃取,洗脱液氮气下吹干,后溶解上样.用此方法检测290名运动员内源性AICAR浓度,建立中国运动员AICAR内源性水平数据库.结果:方法验证中得出线性相关系数、低检测限和定量限,满足日常定性定量要求;药物日间精密度＜20％,日内精密度＜15％,回收率在85％以上;基质效应在80％～110％之间,符合一般验证要求;得到290名运动员内源性AICAR浓度平均值为1.5μg/ml,标准偏差为1.1μg/mnl.结论:本方法灵敏度高、选择性强、重现性好,可以在日常检测中使用.
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人体毛发中类固醇类兴奋剂的液相色谱串联质谱检测方法研究
目的:利用具有高分离效能和结构确证功能的液相色谱串联质谱来探索、建立毛发中兴奋剂(酯类、母体、代谢物)的检测和评价方法,并应用于运动员头发检测,为毛发的兴奋剂检测打下基础.方法:非脂类药物:称取50 mg头发,加入d3-睾酮作内标,使用蛋白酶K水解2小时,加入正戊烷/乙醚提取.三氯甲烷/异丙醇再次提取后两次有机相混合吹干,后用甲醇/水和正己烷除去油脂,复溶后进样分析.酯类药物:50 mg头发,加内标以及水解方法同上,加入正戊烷提取,复溶后进样分析.结果与结论:方法验证中得出线性相关系数、低检测限和低定量限满足日常定量要求和头发中检测兴奋剂灵敏度的要求;药物日间精密度＜20％,日内精密度＜20％,回收率在50％以上;基质效应在80％～120％之间,符合一般验证要求.将建立的检测方法进行方法验证和评估后,应用于运动员头发中类固醇药物的检测.
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液相色谱-串联质谱法定性检测人尿中八种违禁药物
目的:本实验基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术和简单的样品前处理过程,建立迅速、准确定性检测人尿中多种违禁药物的方法,包括以下8种药物:雄1,4,6-三烯-3,17-二酮(androst-1,4,6-trien-3,17-dione)、勃拉睾酮(bolasterone)、氧雄龙(oxandrolone)、4-羟基睾酮(4-hydroxytestosterone)、表甲雄二醇(epimetnandiol)、2-(4-((2-(4-(三氟甲基)苯基)-5-甲基噻唑4-基)甲基硫基)-2-甲基苯氧基)乙酸(GW501516)、甲基司腾勃龙(methylstenbolone)、S-3-(4-乙酰氨基)-2-羟基-2-甲基-N-(4-硝基-3-三氟甲基苯基)丙酰胺(o-dephenylostarine).方法:采用液相色谱串接质谱、Zorbax XDB-C18色谱柱;尿样经液液萃取后上样分析.结果:筛查药物低检测限在0.5～2 ng/ml之间,回收率均高于50％,日内精密度、日间精密度均低于20％.稳健度均低于15％.结论:本工作对样品前处理方法、质谱条件等方面进行了优化,建立同时检测这8种化合物的液相色谱-串联质谱方法.采用该方法检测这8种药物,能达到世界反兴奋剂机构技术文件对低检测下限及日内、日间精密度的要求,保证本实验室能够通过世界反兴奋剂机构(WADA)每季度水平考试,从而保证本实验室具有检测国际比赛样品的资格.
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赛马比赛中违禁药物及其检测技术研究进展
本文概括和评述赛马比赛中滥用的违禁药物的种类、性质,赛马用药的相关规定、标准及其检测技术的研究进展,为研究者开发更加高效便接的检测方法提供参考.
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促红细胞生成素检测的判别分析研究
目的:建立新的检测促红细胞生成素的判别函数,提高EPO血液检测方法的灵敏度和特异性.法:人体实验采用随机双盲对照设计,将24名受试者分为实验组和对照组,分别注射重组EPO和安慰剂.实验阶段分为注射前(1周)、注射期(4周)和停药期(4周)3个阶段.每名受试者在整个人体实验的3个阶段中共采集血样18次.用Advia120血液分析仪检测24名受试者的红细胞压积(HCT %)、网织红细胞压积(RetHCT)、巨红细胞百分数(Macro%);血清EPO浓度的测定采用免疫化学发光法;可溶性转铁蛋白受体(sTfR)的测定采用酶联免疫吸附分析法.采用Fisher判别分析法,应用人体实验数据中注射期的数据构造判别函数,判别能力用Wilks'Lambda法进行检验;对所建立的判别函数进行回代检验,并对短期使用EPO的效果进行判别,将其结果与第一代判别函数(On_Model)进行比较.结果:两个新的判别函数为:Z_on(男性)=0.988Ln(EPO)+0.253Ln(sTfR)-0.032Ln(Macro%+0.1)+0.547HCT+0.319RetHCT,界值为3.2;Z_on(女性)=0.862Ln(EPO)-0.067Ln(sTfR)+0.103Ln(Macro%+0.1)+0.311HCT+0.439RetHct,界值为2.5.判别力经Wilks' Lambda统计检验有统计学意义(P<0.001).采用Z_on判定男性和女性各有1例假阴性,而采用On_Model则男性有3例假阴性,女性有8例假阴性.在使用1次和Z次EPO后用Z_on能全部进行正确判别,但使用On_Model均有假阴性发生.结论:新的判别函数Z_on对使用EPO的误判率低于第一代判别函数On_Model,并对短期注射EPO的判别效果高于On_Model.
