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围绝经期妇女血清瘦素水平的测定及其意义
本文采用放射免疫测定法(RIA)检测了138例围绝经期妇女(其中月经紊乱期81例,绝经期57例)血清FSH、LH、E2、瘦素水平,并与4名育龄妇女各项指标对照比较.在此基础上探讨它们在围绝经期妇女正常生理过程中的相互关系.结果表明:瘦素在月经紊乱期妇女(P<0.05)和绝经期妇女(P<0.01)中都有较明显变化;FsH、LH、E2亦有显著变化(P<0.01),提示瘦素参与了围绝经期妇女的正常生理变化,并通过一些途径参与了激素的调节.
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化学发光免疫法与RIA法测定人血清抗TgAb和抗TpoAb结果的比较
比较CLIA和RIA法测定抗甲状腺球蛋白抗体(抗TgAb)和抗甲状腺过氧化物酶抗体(抗TpoAb)的临床应用意义.对经临床诊断甲状腺功能检查及病理证实的37例慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者,30例甲亢患者及36例患有内分泌疾病的患者(包括甲状腺结节、甲状腺癌、糖尿病及库兴氏综合征)和35名正常人,用CLIA和RIA两种方法分别测定其血清的抗TgAb和抗TpoAb水平,并进行比较.结果表明:(1)CLIA和RIA法的批内变异分别为3.0%和10.0%,批间变异分别为3.9%和15.0%;(2)正常人抗TgAb水平分别为CLIA法是25.9±9.6U/mL;RIA为11.2±2.8%,抗TpoAb水平分别为CLIA法是31.4±6.7U/mL;RIA是8.7±3.0%;(3)慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者分别用CLIA法测定抗TaAb为292.6±334.1U/mL(17例),RIA为56.4±11.2%(21例).而用CLIA法测定抗TpoAb为5043.3±3196.1U/mL(17例),RIA为35.4±6.9%(21例),该结果显示CLIA法所测抗TgAb和抗TpoAb水平均明显高于正常人(P<0.001),特别是抗TpoAb水平比正常人高百倍以上,说明其特异性更高;(4)甲亢患者及内分泌病患者,用CLIA法测定抗TgAb为202.3±506.3U/mL和28.7±15.0U/mL;用RIA法为28.8±20.2%和10.2±13.3%.而用CLIA法测定抗TpoAb分别为452.9±645.8U/mL和58.8±45.7U/mL;用RIA法为22.6±14.2%和7.9±7.9%;(5)两种方法相关性较好,抗TgAb的相关性为r=0.695( P<0.05),抗TpoAb的相关性为r=0.489(P<0.001).因此,CLIA法除了具有操作简单,快速,无同位素污染等优点外,本文结果显示用CLIA法测定抗TpoAb对诊断慢性甲状腺炎比RIA更敏感和更特异.
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两种尿微量白蛋白测定方法的临床评价
对化学发光免疫测定法(CLIA)测定尿微量白蛋白的方法进行临床评估, 旨在为尿微量白蛋白测定选择一种简便快速, 准确和特异的方法.85例糖尿病患者及80名对照均留取8h尿样本, 用CLIA和RIA法测定, 并进行比较和分析精密度, 准确性、特异性及干扰因素.结果显示CLIA和RIA两种方法均具有很好的精密度, 批内CV小于4%, 批间CV小于6%,回收率在95.1%-105.9%,且测定不受样本中γ球蛋白的影响.CLIA的低检测浓度为2.5μmol/L.两种方法测定的尿微量白蛋白值相关较好(Y=0.9974X-0.0291),r=0.9902.结论: CLIA和RIA尿微量白蛋白测定方法均具有高精密度, 高特异性, 两种方法的结果明显相关.然而, 与RIA比较CLIA简便、快速, 没有放射性污染, 且自动化程度高, 比较适合临床常规实验室应用.
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230例甲胎蛋白阳性原发性肝癌病人血清HBV抗原抗体模式分析
原发性肝癌(PH C)与乙型肝炎病毒(HBV)感染的相关性已较明确,为探讨肝癌病人HBV感染状态,我们对230例甲胎蛋白(AFP)阳性确诊为PH C病人的HBV血清标志物进行了检测与分析。 1 材料和方法 230例PHC患者中,男200例,女30例,年龄28~77岁,平均52.84岁,为解放军302医院1995年至1998收治的病例,根据肝癌诊断标准,经临床、B超及CT证实且AFP阳性的PHC病人。AFP的检测采用放射免疫测定法,以AFP>400ng/ml判定为阳性;HBsAg、HBeAg、HBsAb的检测用双抗体夹心法。HBeAb及HBcAb的检测用竞争法。试剂盒由解放军302医院生产。
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温郁金对胃癌细胞的抑制作用及其对IGF-I、IGF-Ⅱ表达的影响
目的:探讨温郁金对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用及其作用机制.方法:采用超临界二氧化碳萃取法提取温郁金挥发油成分,以氟尿嘧淀(5-Fu)为阳性对照药物,采用MTr法,测定温郁金提取物对体外培养胃癌细胞SGC-7901增生的影响;应用放射免疫测定法分析温郁金提取物对细胞培养液中IGF-I、IGF-Ⅱ浓度水平的影响.结果:超临界二氧化碳萃取法提取温郁金获得温郁金提取物1和提取物2.温郁金提取物1、提取物2对胃癌细胞的生长有显著的抑制作用(均P<0.01),且抑制率随药物浓度的升高而增高,存在明显的量效关系.200 mg/L浓度的温郁金提取物1和提取物2对胃癌细胞生长的抑制率分别为64.44%、60.80%,在这个浓度水平,其抑制肿瘤细胞生长作用与阳性对照药物5-Fu效果相当.温郁金提取物1、提取物2能降低胃癌细胞培养液中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的浓度水平(均P<0.05).结论:温郁金提取物对人胃癌细胞SGC-7901生长有抑制作用,其抑癌作用的机制可能与抑制胃癌细胞分泌IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ有关.
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烫伤对大鼠下丘脑视上核、室旁核、垂体和血浆内皮素-1含量的影响
内皮素(endothelin,ET)在下丘脑含量很高,大鼠下丘脑ET主要形式是ET-1,也含有E T-3。Yoshizawa及蒋应明等报道下丘脑神经元能自身合成和表达ET-1,主要集中在视上核 (Supraoptic nucleus,SON)和室旁核(paraventricular nucleus,PVN)部位,但其功能意 义尚不清楚。ET对下丘脑-垂体-肾上腺轴具有调节作用,可促进应激情况下AVP的释放。 烫伤是一种强烈的应激刺激,同时又可引起体内渗透压的升高,因此推测重度烫伤可能影响 下丘脑ET-1合成和分泌。本实验应用放射免疫测定法,观察大鼠烫伤后不同时间下丘脑SON 和PVN、神经垂体、腺垂体和血浆中ir-ET-1含量的动态变化,以了解烫伤对下丘脑和垂体 中ET-1含量影响和下丘脑ET-1的功能。1 材料和方法 雄性Sprague-Dawley大鼠96只,体重280~320 g,随机均分为烫伤后即刻、15 min、60 min、180 min四组及相应的4个对照组。经20%尿酯腹腔麻醉(5 ml/kg)后,背部剃毛,实 验组用沸水烫背部7 s,造成20%体表面积的Ⅱ度烫伤,对照组动物背部浸入37℃水中假烫7 s。各组动物分别按上述烫后不同时间断头,收集躯干血于预冷的含抑肽酶(每ml血加500 k IU)和Na2 EDTA(每ml血加10 mg)的指形管中,4℃离心(3 000 r/min,10 min),取血浆 置 于-40℃冰箱保存待测;同时迅速取全脑和垂体,置沸生理盐水中煮10 min,分离神经垂体 和腺垂体;自前连合平面至乳头体尾端取下丘脑,双侧包括下丘脑外侧部。用4%多聚甲醛 溶液固定24 h。用震动切片机行下丘脑冠状切片,片厚200μm,依据大鼠脑立体定位图谱 ,用不锈钢针管行打孔法取下丘脑SON和PVN组织,称重,将SON和PVN组织混在一起,加1 mo l/L醋酸匀浆提取,2 h后加入1 mol/L NaoH中和,低温离心取上清液行放射免疫测定。ET- 1放免测定试剂盒由北京解放军总医院放免研究所提供,小检出量为0.5pg。
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生长激素和催乳素放射免疫测定法的建立与应用
目的:建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素(GH)和催乳素(PRL)含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定(RIA)法;研究急性低氧对大鼠垂体激素GH和PRL的作用.方法:用氯胺-T法进行抗原放射性碘标记;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定.结果:用该方法测定急性低氧(0.5 h)时血浆和垂体GH和PRL含量,7km低氧,垂体GH含量明显升高(P<0.05),血浆则相反:7 km低氧,明显降低垂体和血浆PRL含量(P<0.01);而5 km低氧对GH和PRL的作用与对照相比无统计学差异.结论:本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌.
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2 500例门诊患者肝功能及血清HBV感染指标检测结果分析
乙型肝炎病毒(HBV)是引起乙肝的病原体,具有明显的嗜肝特性,可致持续性病毒感染,是常见的、严重威胁人类健康的疾病之一.目前比较常用的检测方法有ELISA、放射免疫测定法、基因定性、定量分析.我们对本地区的门诊患者的血液进行肝功能、ELISA、HBV、DNA荧光定量分析,结果如下.
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慢性肺心病血浆一氧化氮、内皮素、降钙素基因相关肽水平改变及其关系的研究
慢性肺心病是复杂的病理生理状态,除缺氧外,血管活性物质对肺动脉高压的发生发展起重要作用,一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)是近年来发现的血管活性物质,是肺循环阻力血管的重要调节剂,并与肺动脉高压形成有关,它们在慢性肺心病发病过程中的病理生理作用颇受重视.本研究采用高效液相色谱分析法(HPLC)、放射免疫测定法(RIA)测定了68例慢性肺心病患者、20例健康对照者血浆NO产物(NO-2/NO- 3)、ET-1、CGRP水平,以探讨慢性肺心病不同状态NO、ET-1、CGRP的水平变化以及它们之间的相互关系.
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急性脑梗死患者血清及脑脊液中神经元特异性烯醇化酶测定
对50例急性脑梗死(ACL)患者,采用放射免疫测定法,监测其血清、脑脊液中神经元特异性烯醇化酶(NSE),观察其含量变化及与临床症状康复的关系.1 对象与方法1.1 对象随机选择符合1991年脑梗死(修订稿)诊断标准,并经CT证实的ACL患者50例,其中男29例,女21例,年龄46~62岁,平均(54±8)岁;入院时发病均在24小时内,其中左基底节梗死24例,右基底节25例,1例左侧大面积脑梗死(颞、顶、额均有梗死灶).对照组27例,为同期住院非神经系统疾病患者,年龄、性别与病例组相近,其中男15例、女12例,年龄44~64岁,平均为(54±10)岁.
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动态测定血β-hCG在诊断异位妊娠中的应用
我们从2003年10月至2004年11月应用放射免疫测定法(RIA)测定52例异位妊娠和50例正常早孕妇女血中的β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)含量,并进行动态观察.
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人绒毛膜促性腺激素在妇产科的应用
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是由合体滋养细胞分泌的糖蛋白激素,由α、β亚基组成,HCGα亚基抗体与卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、TSHα亚基均能发生交叉反应,而HCGβ亚基片段为其所特有而不受LH干扰,因此临床利用HCGβ亚基的特异抗血清,测定母体血清中HCGβ亚基,现已采用β-HCG放射免疫测定法正确地反应了受试者的HCG水平,检测HCG的酶联免疫方法具有特异性强、灵敏度高、试剂廉价、操作简单特点,应用比较广泛.
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芹菜素对雌性大鼠下丘脑-腺垂体-卵巢轴调控作用
目的 研究芹菜素(apigenin,Api)对雌性大鼠腺垂体、卵巢颗粒细胞分泌促卵泡激素(follicle stimulatinghormone,FSH)、黄体生成素(luteinzing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)及孕酮(progesterone,P)的影响.方法 应用细胞培养技术,放射免疫测定法及下丘脑-腺垂体-卵巢三级培养细胞顺序灌注法.采用下列顺序灌注法,Api浓度分别为10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L,(1)H-AP-O;(2)H-AP(Api)-O;(3)H-AP-O(Api),分别测定腺垂体和卵巢颗粒细胞培养液中FSH、LH、H2及P的含量.结果 实验组(3、5、7组)分别与对照组(1组)比较差异有统计学意义(P<0.01),Api(10-4mol/L~10-6mol/L)以浓度依赖方式使培养的雌性动情前期大鼠卵巢颗粒细胞E2及P的含量也呈减少,且随着浓度的增加,E2及P的含量也呈减少趋势;Api组(10-4mol/L~10-6mol/L)动情前期雌性大鼠腺垂体细胞LH、FSH的分泌量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 Api在卵巢水平上发挥作用,抑制雌性动情前期大鼠卵巢颗粒细胞E2及P的分泌.对雌性动情前期大鼠腺垂体分泌FSH和LH无作用.
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肝硬化及肝癌患者血清肝胆酸测定分析
近期国内外学者提出肝胆酸(CG)应用于临床检测肝功能,并认为是一项灵敏的肝功能试验.本文于2002-01~2004-12采用放射免疫测定法(RIA)检测了82例肝炎后肝硬化(LC)、45例原发性肝癌(PHC)和54例非肝胆疾病患者空腹血清CG,并于常规肝功能进行了比较,报告如下.
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P物质对培养的大鼠睾丸细胞睾酮分泌的影响
目的研究P物质(SP)对睾丸细胞分泌睾酮(T)的影响.方法应用细胞培养技术和放谢免疫测定法研究不同浓度的P物质对睾丸细胞分泌睾酮是否有直接作用.结果实验组(加入SP)的培养液T的含量比对照组(未加SP)明显减少.实验组分别与对照组进行两两比较(t-test)并采用单因素方差分析,P均<0.01差异有高度的显著性.结论P物质对培养的大鼠睾丸细胞分泌T有直接抑制作用,且随着浓度增加,抑制作用增强.
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P物质对下丘脑-腺垂体-睾丸轴调控作用的研究
目的研究P物质(Substance power,SP)对下丘脑、腺垂体、睾丸细胞分泌促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)、黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、睾酮(Testosterone,T)的影响.方法应用细胞培养技术,放射免疫测定法及下丘脑-腺垂体-睾丸三级培养细胞顺序灌注法.采用下列顺序灌注,SP浓度为1000ng/10μl,(1)H-AP;(2)H(SP)-AP;(3)H-AP(SP);(4)AP-T;(5)AP-T(SP).结果 (1)第2组腺垂体细胞培养液LH含量比第1组明显增加,二者比较(t-test),P<0.01,差异有高度的显著性.(2)第3组腺垂体细胞培养液LH含量与第1组相比,P>0.05,二者之间无显著性差异.(3)第5组睾丸细胞培养液T的含量比第4组明显减少,二者比较(t-test),P<0.01,差异有高度显著性.结论 (1)提示:SP在下丘脑水平可能促进GnRH的分泌,从而促进腺垂体LH的分泌.(2)SP在腺垂体水平对LH的分泌无影响.(3)提示:SP可能在睾丸水平发挥直接抑制作用.
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P物质对培养的大鼠腺垂体细胞分泌黄体生成素影响的研究
目的观察P物质(SP)对培养的大鼠腺垂体细胞分泌黄体生成素(LH)的影响.方法应用细胞培养法和放射免疫测定法.结果在腺垂体细胞培养中,实验组(加入SP)与对照组(未加SP)培养液LH的含量差别不大,并采用单因素方差分析及(t-test),实验组分别与对照组进行两两比较,P均>0.05,差异无显著性.结论P物质(SP)对培养的腺垂体细胞分泌LH无直接作用.
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量子点标记技术在免疫学检测中的应用
1959年,Yalow等[1]将放射性同位素示踪与免疫反应相结合建立了放射免疫测定法,实现了痕量分析化学方面的重大突破,从而开创了标记免疫分析这一崭新领域.此后,一系列标记免疫分析方法纷纷涌现并不断发展,如酶联免疫吸附法、荧光免疫测定法、免疫层析测定法、免疫传感器测定法等等.免疫分析已经发展成为一门跨学科新型分析技术.随着人们对免疫学理论认识的深入,各种免疫分析检测技术也不断地被完善.目前,免疫分析检测技术正朝着定量、多组份分析;高灵敏度、高特异性、方便快捷、经济适用的方向发展.量子点标记免疫技术由于具有上述特征,而受到广泛关注.
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血浆神经肽Y水平测定在判定慢性肝脏疾病病变程度及预后中的意义
目的:观察慢性肝脏疾病患者血浆神经肽Y(NPY)水平变化及其与病变程度和预后的关系.方法:采用放射免疫法检测17例慢性肝炎、48例肝硬化患者和21例健康人的血浆NPY水平.肝硬化不伴腹水组25例、肝硬化伴腹水而无肝肾综合征组19例、肝硬化伴肝肾综合征组4例,按Child分级Child A级20例,Child B级16例,Child C级12例.对照组共21例.结果:慢性肝炎、肝硬化不伴腹水组患者血浆NPY水平与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);肝硬化伴腹水组及肝肾综合征组患者血浆NPY水平明显高于正常对照组(P<0.05).NPY水平与肝功能无相关性,与尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平呈正相关(r=0.872,P<0.01;r=0.857,P<0.01).结论:慢性肝脏疾病患者血浆NPY水平可作为评估病情和预后的指标之一.
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脐血、母血血清骨钙素和降钙素含量测定及分析
目的探讨母亲分娩后和新生儿脐血中血清骨钙素(BGP)和降钙素(CT)含量的变化.方法对分娩后早产儿母亲(20例)、分娩后足月儿母亲(30例)、早产儿(20例)、足月儿(30例)4组对象采用放射免疫方法分别测定其血清BGP、CT的含量.结果分娩后早产儿的母亲血清骨钙素和降钙索水平与分娩后足月儿的母亲血清骨钙素和降钙素水平相比无明显差异.分娩后早产儿母亲和足月儿母亲血清骨钙素和降钙素水平低于足月儿和早产儿血清骨钙素和降钙素水平并具有明显差异.早产儿血清骨钙素明显低于足月儿,与孕龄呈线性正相关,而早产儿血清降钙素水平高于足月儿并有明显差异(P<0.01).结论揭示了新生儿期钙代谢和骨代谢的变化特点.对早期诊断和防治新生儿低钙血症有重要理论和临床价值.