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和肽素检测的临床应用研究进展
和肽素(copeptin)是AVP前体羧基末端的一段多肽,两者都是从同一个前体剪切下来的多肽片段.AVP又称抗利尿激素,在下丘脑视上核、室旁核神经元内合成,其初产物为前激素原,进入高尔基体内形成精氨酸加压素原,后者由164个氨基酸组成,在酶的作用下终分解为3个多肽片段释放入血液中.AVP是含9个氨基酸残基的多肽,包括第20至第28个氨基酸;另外2个多肽是和肽素与后叶激素运载蛋白Ⅱ.
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血管加压素在感染性休克及心肺复苏时的应用
1 VP的生理及病理生理血管加压素(VP)是由下丘脑视上核和室旁核的神经内分泌细胞合成并分泌,贮存在垂体后叶,此外上交叉、杏仁核、海马等处也可有少量分泌.VP是由9个氨基酸组成的,通过二硫键构成的环状结构,分为精氨酸加压素(AVP)和赖氨酸加压素(LVP)二种,人为AVP,猪为LVP.高渗透压和细胞外液量减少是促进AVP合成分泌的有效的刺激.此外,疼痛、外伤、情绪变化、吗啡、巴比妥等药物均可影响AVP的分泌.AVP的生理范围是0.3~30 pg/ml,一般在4 pg/ml以下,禁水时渗透压增高,可于48小时升高至30~40 pg/ml.手术、大出血等应激状态下可超过600 pg/ml.AVP半衰期15~20分钟.
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精氨酸加压素在神经元水平电生理作用的研究进展
精氨酸加压素(arginine vasopressin, AVP)是由9个氨基酸组成的多肽,其相对分子质量为1084kDa,在肝脏和肾脏中被代谢分解[1].AVP具有神经激素(neurohormone)和神经递质(neurotransmitter)的作用.作为神经激素主要是由下丘脑视上核和室旁核大细胞神经元合成,经轴浆运输到神经垂体并储存.垂体内的AVP浓度是整个大脑含量的1000倍,当机体需要时释放入血液,与靶器官细胞上的受体结合而发挥生理作用,其受体分为Vla(或V1)、V2、Vlb(或V3)3种亚型[1~4].
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烫伤对大鼠下丘脑视上核、室旁核、垂体和血浆内皮素-1含量的影响
内皮素(endothelin,ET)在下丘脑含量很高,大鼠下丘脑ET主要形式是ET-1,也含有E T-3。Yoshizawa及蒋应明等报道下丘脑神经元能自身合成和表达ET-1,主要集中在视上核 (Supraoptic nucleus,SON)和室旁核(paraventricular nucleus,PVN)部位,但其功能意 义尚不清楚。ET对下丘脑-垂体-肾上腺轴具有调节作用,可促进应激情况下AVP的释放。 烫伤是一种强烈的应激刺激,同时又可引起体内渗透压的升高,因此推测重度烫伤可能影响 下丘脑ET-1合成和分泌。本实验应用放射免疫测定法,观察大鼠烫伤后不同时间下丘脑SON 和PVN、神经垂体、腺垂体和血浆中ir-ET-1含量的动态变化,以了解烫伤对下丘脑和垂体 中ET-1含量影响和下丘脑ET-1的功能。1 材料和方法 雄性Sprague-Dawley大鼠96只,体重280~320 g,随机均分为烫伤后即刻、15 min、60 min、180 min四组及相应的4个对照组。经20%尿酯腹腔麻醉(5 ml/kg)后,背部剃毛,实 验组用沸水烫背部7 s,造成20%体表面积的Ⅱ度烫伤,对照组动物背部浸入37℃水中假烫7 s。各组动物分别按上述烫后不同时间断头,收集躯干血于预冷的含抑肽酶(每ml血加500 k IU)和Na2 EDTA(每ml血加10 mg)的指形管中,4℃离心(3 000 r/min,10 min),取血浆 置 于-40℃冰箱保存待测;同时迅速取全脑和垂体,置沸生理盐水中煮10 min,分离神经垂体 和腺垂体;自前连合平面至乳头体尾端取下丘脑,双侧包括下丘脑外侧部。用4%多聚甲醛 溶液固定24 h。用震动切片机行下丘脑冠状切片,片厚200μm,依据大鼠脑立体定位图谱 ,用不锈钢针管行打孔法取下丘脑SON和PVN组织,称重,将SON和PVN组织混在一起,加1 mo l/L醋酸匀浆提取,2 h后加入1 mol/L NaoH中和,低温离心取上清液行放射免疫测定。ET- 1放免测定试剂盒由北京解放军总医院放免研究所提供,小检出量为0.5pg。
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中枢性尿崩症与替代疗法
中枢性尿崩症是抗利尿激素(VAP)又称血管加压素(VAP)的合成、分泌障碍致肾脏水再吸收低下,而发生多尿的疾病.VAP由下丘脑视上核及室旁核合成,沿神经轴索运送至垂体后叶贮存,然后受血浆渗透压的刺激向血中释放.
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烫伤对大鼠下丘脑视上核内皮素-1基因转录和蛋白含量的影响
用原位杂交和免疫组织化学方法观察了烫伤后下丘脑视上核(SON)内皮素-1(ET-1)基因转录和蛋白含量的变化, 并用通用图像颗粒分析法估计ET-1 mRNA阳性杂交信号的强度和ET-1样免疫反应物(ET-1-ir)的免疫反应强度.与对照组相比, 烫伤后15 min, SON神经元胞浆内ET-1 mRNA阳性杂交信号未见明显变化;而在烫伤后60和180 min, ET-1 mRNA阳性杂交信号强度分别较比照组增加35.1% (P<0.05)和62.4% (P<0.01).在烫伤后15 min, SON神经元胞浆内ET-1-ir明显减少, 仅为对照组的8.5%, 显著低于对照组(P<0.01). 烫伤后60和180 min免疫反应物强度较烫伤后15 min有所回升, 分别为对照组的31.5%和52.4%, 但仍显著低于对照组(P<0.01).用Northern法检测烫伤后下丘脑ET-1 mRNA含量和长度变化. 结果显示, 在烫伤后15 min, ET-1 mRNA含量变化不显著, 在烫伤后60 min显著增多(P<0.05), 在烫伤后180 min继续增至对照组2.5倍, 但ET-1 mRNA长度在烫伤前后并无改变.以上结果表明, 烫伤后大鼠下丘脑SON ET-1 mRNA含量增加, 而ET-1-ir含量在烫伤后180 min内维持在低水平.鉴于SON具有神经内分泌作用, 烫伤后SON内ET-1 mRNA和ET-1-ir的变化提示, ET-1在烫伤后的病理生理变化中可能有重要的神经内分泌作用.