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益肺活血复方对人肺动脉内皮细胞分泌功能的影响
目的 研究益肺活血复方对人肺动脉内皮细胞分泌功能的影响.方法 建立人肺动脉内皮细胞低氧高二氧化碳模型；制备益肺活血复方不同给药剂量(生药10、20、40 g ·kg-1)的含药血清及生理氯化钠溶液血清；在细胞培养液中共同孵育12 h后,利用免疫组织化学法测定细胞内低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,放射免疫分析法测定各组细胞上清液中内皮素-1(ET-1)的浓度,逆转录多聚酶链反应法测定ET-1 mRNA的表达水平.结果 低氧高二氧化碳条件下,人肺动脉内皮细胞ET-1的分泌、HIF-1α蛋白和ET-1 mRNA的表达明显增强(P＜0.05)；而中、高浓度益肺活血复方能够抑制人肺动脉内皮细胞合成分泌HIF-1α、ET-1 mRNA及ET-1(P＜0.05).结论 低氧高二氧化碳导致人肺动脉内皮细胞功能障碍,而中、高浓度的益肺活血复方可减少人肺动脉内皮细胞ET-1的分泌和ET-1 mRNA、HIF-1 α蛋白的表达,从而减轻人肺动脉内皮细胞功能紊乱的程度,益肺活血复方可能成为治疗低氧高二氧化碳性肺动脉高压的有效药物.
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烫伤对大鼠下丘脑视上核内皮素-1基因转录和蛋白含量的影响
用原位杂交和免疫组织化学方法观察了烫伤后下丘脑视上核(SON)内皮素-1(ET-1)基因转录和蛋白含量的变化, 并用通用图像颗粒分析法估计ET-1 mRNA阳性杂交信号的强度和ET-1样免疫反应物(ET-1-ir)的免疫反应强度.与对照组相比, 烫伤后15 min, SON神经元胞浆内ET-1 mRNA阳性杂交信号未见明显变化;而在烫伤后60和180 min, ET-1 mRNA阳性杂交信号强度分别较比照组增加35.1% (P<0.05)和62.4% (P<0.01).在烫伤后15 min, SON神经元胞浆内ET-1-ir明显减少, 仅为对照组的8.5%, 显著低于对照组(P<0.01). 烫伤后60和180 min免疫反应物强度较烫伤后15 min有所回升, 分别为对照组的31.5%和52.4%, 但仍显著低于对照组(P<0.01).用Northern法检测烫伤后下丘脑ET-1 mRNA含量和长度变化. 结果显示, 在烫伤后15 min, ET-1 mRNA含量变化不显著, 在烫伤后60 min显著增多(P<0.05), 在烫伤后180 min继续增至对照组2.5倍, 但ET-1 mRNA长度在烫伤前后并无改变.以上结果表明, 烫伤后大鼠下丘脑SON ET-1 mRNA含量增加, 而ET-1-ir含量在烫伤后180 min内维持在低水平.鉴于SON具有神经内分泌作用, 烫伤后SON内ET-1 mRNA和ET-1-ir的变化提示, ET-1在烫伤后的病理生理变化中可能有重要的神经内分泌作用.
