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不同炮制因素对温郁金中姜黄素和吉马酮含量的影响
目的:考察不同炮制因素对温郁金中姜黄素和吉马酮含量的影响.方法:采用HPLC法测定温郁金及不同炮制品中姜黄素和吉马酮的含量.姜黄素的色谱条件Lichrospher ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(5％冰醋酸)(45:55),流速1.0 mL· min-1,检测波长262 nm,柱温室温.吉马酮的色谱条件Lichrospher ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(75∶25),流速120 mL· min-1,检测波长210 nm,柱温为室温.结果:不同炮制因素对温郁金饮片中姜黄素和吉马酮含量影响不一,其中姜黄素含量为生拌醋品＞生品＞清炒拌醋品=醋炙品＞清炒品；吉马酮含量为生拌醋品＞生品=清炒拌醋品＞清炒品＞醋炙品.结论:加醋可促使姜黄素和吉马酮溶出,加热可使其降低.
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HPLC研究加工、贮藏过程对温郁金化学成分的影响
目的:使用高效液相色谱法对同一产地温郁金的不同加工、贮藏品中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的含量进行考察.方法:用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1 mL·min-1;检测波长214 nm,柱温25℃,进样量10 μL.结果:鲜品中莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯的质量分数分别为0.001 201％,0.039 760％,0.061 458％,1.313 8％；加工品中4种成分的质量分数分别为0.000711％,0.054 358％,0.007 630％,0.439 7％；贮藏品中4种成分的含量分别为0.001 168％,0.113253％,0.016 493％,0.512 7％.结论:鲜温郁金中的β-榄香烯、莪术二酮和吉马酮的含量明显高于加工温郁金及贮藏一年的陈品温郁金.加工、贮藏过程对温郁金中4种指标成分的含量有一定影响.
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温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人结肠腺癌细胞SW620的抑制作用
目的:探讨温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人结肠腺癌SW620细胞的抑制作用及机制.方法:将不同浓度的化合物C作用SW620细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖情况,倒置相差显微镜下观察细胞的形态学变化,流式细胞术检测细胞的周期分布和凋亡率.结果:化合物C能以时间-浓度依赖性方式抑制SW620细胞增殖,其抑制能力显著高于阳性对照药5-Fu和L-OHP(P＜0.01),而对正常HUVEC细胞仅有轻微毒性作用;作用后的细胞在镜下呈典型的凋亡改变;化合物C能阻滞细胞于G1和S期,减少G2期比例,并以时间-浓度依赖性方式显著诱导细胞凋亡(P＜0.01).结论:温郁金中二萜类化合物C能显著抑制SW620细胞的增殖,并阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡,这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一.
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温郁金生品与炮制品微量元素的检测及其健康风险评价
目的:建立温郁金微量元素的测定方法,客观评价温郁金中微量元素对长期服用患者的健康影响.方法:用浓硝酸微波消解处理样品,ICP-OES法测定温郁金生品与炮制品中As、Ca、Cd、Cu、Fe、Hg、Mn、Pb 8种微量元素的含量,并对温郁金中微量元素进行健康风险评价.结果:温郁金生品与炮制品中重金属Cu、Cd、As和Pb含量均符合标准,Ca、Fe、Mn元素含量丰富,均不含Hg,危害指数(HI)范围在0.601-1.955.温郁金生品与炮制品中Ca和Cd元素的含量在炮制前后存在显著性差异(P＜0.01,P＜0.05),其他微量元素含量变化不大.除瑞安沙洲外,其余5个产地的温郁金炮制品均不具有健康风险.而除瑞安固前外,其余5个产地的温郁金生品均具有一定的非致癌健康风险.结论:该测定方法具有良好的准确度和精密度,为温郁金的药材质量控制提供了依据.
关键词： 温郁金 微量元素 电感耦合等离子体发射光谱 健康风险评价 -
温郁金抗抑郁活性部位的筛选
目的:筛选温郁金抗抑郁活性部位.方法:选用小鼠行为绝望模型评价温郁金醇提取物及其不同极性部位的抗抑郁作用.结果:温郁金醇提取物及其4个不同极性部位均不同程度地缩短绝望模型中小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间.其中以温郁金醇提取物(P＜0.01)、石油醚部位(P＜0.001)和乙酸乙酯部位(P＜0.01)为显著.结论:温郁金具有抗抑郁作用,活性成分主要分布在石油醚和乙酸乙酯部位.
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R语言优化温郁金油的羟丙基-β-环糊精包合工艺
目的:通过R语言结合BP神经网络和遗传算法优化温郁金挥发油的羟丙基-3-环糊精(HPCD)包合工艺.方法:以挥发油包合率、包合物收得率、含油率为考察指标,运用响应面设计试验,采用溶液搅拌法-真空冷冻干燥等技术,制备温郁金油HPCD包合物.在R语言环境下建立数学模型,编程建立BP神经网络,训练并优化网络模型,再运用遗传算法,进行网络目标寻优,得到包合工艺的佳条件.结果:温郁金HPCD包合工艺佳条件为HPCD与温郁金油用量比10:1,包合温度30℃,包合时间2h,模型综合评价预测值为43.58,与实验所得平均综合评价值43.81相比,相对误差为0.53％,说明网络具有良好的预测性.结论:该数学模型简单、客观、准确,为温郁金油包合工艺优化提供了新的参考.
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温郁金正丁醇提取物逆转胃癌SGC7901/VCR细胞多药耐药性的研究
目的:研究温郁金正丁醇提取物(CWNAE)逆转SGC7901/VCR细胞多药耐药性的作用.方法:以维拉帕米(VP)为对照采用MTT法研究无毒浓度CWNAE对SGC7901/VCR细胞多药耐药性的逆转作用.采用流式细胞仪技术观察CWNAE对VCR诱导SGC7901/VCR细胞凋亡及周期改变的影响.结果:MTT显示20、40、80μg/mL的CWNAE作用24h后均可逆转SGC7901/VCR细胞对VCR、ADM的耐药,逆转指数分别为1.51、4.07、28.95; 1.59、6.29、10.34,而10μg/mL VP的逆转指数分别为21.27、95.56.流式技术显示上述浓度的CWNAE及VP可促进VCR诱导SGC7901/VCR细胞凋亡,以早期凋亡为主,并可促进VCR将细胞阻滞在G2/M期.结论:本研究证实了无毒浓度的CWNAE可以逆转SGC7901/VCR细胞的多药耐药性,促进VCR诱导SGC7901/VCR细胞凋亡及细胞周期阻滞,有剂量依赖性,80μg/mL CWNAE作用效果基本同10μg/mL VP,但毒性远比后者小.
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温郁金二萜类化合物C对不同分化胃腺癌细胞株的抑制作用
目的:研究不同浓度的温郁金二萜类化合物C对3种不同分化阶段的胃腺癌细胞株增殖和凋亡的影响,来揭示其对不同类型胃癌的作用和机制.方法:取0、10、20、40、80μg/mL浓度的温郁金二萜类化合物C体外作用于人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1),人脐静脉细胞(HUVEC),低分化胃腺癌细胞株MKN45,中分化胃腺癌细胞株SGC-7901和高分化胃腺癌细胞株MKN 28 24、48、72、96h,用MTT法检测5种细胞株的生长曲线;采用流式细胞技术和AnnexinV-FITC/PI双染法检测各细胞的凋亡率和细胞周期;采用Western blot技术检测各细胞株中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达.结果:①与温郁金二萜类化合物C对各分化程度的胃腺癌细胞均有一定的抑制作用,呈现浓度依赖性,其中对SGC-7901的抑制为明显;而对人GES-1和HUVEC的抑制作用相对不明显.②温郁金二萜类化合物C对3种胃腺癌细胞株的细胞周期均有抑制作用.③温郁金二萜类化合物C能有效地诱导各胃腺癌细胞株凋亡,其作用亦有一定的浓度依赖性;对SGC-7901作用明显.④温郁金二萜类化合物C能不同程度的抑制各胃腺癌细胞株抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax的表达;其作用具有浓度依赖性.结论:温郁金二萜类化合物C能在对GES-1和HUVEC安全的浓度范围内 通过细胞毒性作用和阻制胃癌细胞分裂周期作用来抑制胃癌细胞的增殖;通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bax的表达来诱导胃癌细胞的凋亡,从而发挥抗胃癌的作用.
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温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人胃癌细胞的抑制作用
目的:研究温郁金醚提物中二萜类化合物C体外对人胃癌细胞(SGC-7901)的抑制作用.方法:以含10%胎牛血清的RPM11640为培养基,置37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养SGC-7901细胞;将温郁金醚提物中二萜类化合物C溶于二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO),配成10mg/mL母液;以顺铂(cis-platinumcomplexes,DDP)为阳性对照药物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测两种药物在10,30,40,70μg/mL浓度时对SGC-7901细胞增殖的影响;用倒置相差显微镜观察化合物C在40,55,70μg/mL浓度、24,48h对SGC-7901细胞的作用效果;用流式细胞仪检测化合物C在40,55,70μg/mL浓度对SGC-7901细胞周期分布的影响及其凋亡率.结果:MTT法显示化合物C对SGC-7901在较低浓度时的抑制率与阳性对照组相似,在40,70μg/mL浓度时的抑制率与对照组(DDP组)相比差异有统计学意义(P<0.05).倒置相差显微镜下观察发现早期的凋亡细胞形态接近正常,核形态基本正常;晚期的凋亡细胞体积缩小或呈圆形,核同缩或碎裂,呈一定的时间和浓度依赖性.流式细胞术(flow cytometry,FCM)显示:温郁金二萜类化合物C能阻滞SGC-7901细胞子Go/G和S期,减少G2/M的比例.结论:温郁金醚提物中二萜类化合物C对胃癌SGC-7901细胞的增殖有显著的抑制作用,阻滞其细胞周期,抑制细胞增殖,是温郁金二萜类化合物C发挥抗肿瘤作用的机制之一.
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温郁金主要成分含量测定及指纹图谱研究进展
姜科姜黄属植物温郁金Curcumala wenyujin Y.H.Chen et C.Linger是一种一株三药用的中药材植物,它的干燥块根作郁金入药、干燥根茎作莪术入药、干燥根茎趁鲜纵切厚片为片姜黄,温郁金经水蒸气蒸馏提取的挥发油俗称莪术油[1].温郁金主产于浙江瑞安,为著名的"浙八味"之一,现代药理及临床研究表明,温郁金具有抗肿瘤、降血脂、抗辐射及保肝等多种药理活性.为了更好地控制温郁金的质量,笔者现围绕其主要化学成分的含量测定及指纹图谱研究作一综述.
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温郁金茎叶化学成分研究
目的:研究温郁金Curcuma wenyujin地上茎叶部分的化学成分.方法:采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱方法进行分离、纯化,通过理化性质及波谱方法鉴定其化学结构.结果:从温郁金95%乙醇提取物的石油醚部分分离得到9个倍半萜类化合物,分别为:莪术二酮(curdione,1),新莪术二酮(neocurdione,2),反,反吉马酮(trans,trans-germacrone,3),顺,反吉马酮(cis,trans-germacrone,4),郁金烯酮(curcumenone,5),郁金二酮(curcumadione,6),异原郁金醇(isoprocurcumenol,7),欧亚活血丹内酯(glechomanolide,8),和二氢莪术二酮[(1R,10R)-(-)-1,10-dihydrocurdione,9].结论:以上9个化合物均为首次从该植物地上茎叶部分分离得到.
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温郁金生长规律研究
目的:研究温郁金生长发育规律,为获得优质、高产药材提供理论依据.方法:定期观察植株形态变化,并测定叶片、根茎、块根干物质及挥发油含量.结果:温郁金发育过程大体分为5个时期,分别为发根发芽期、苗期、叶丛期、根茎膨大期、干物质积累期.在根茎膨大期以前,地上部分干物质占全株干物质的70%以上,在叶丛期,其增长率达到大值每天3.90 g/株;在干物质积累期,根茎干物质所占比例迅速增加,达到33%以上,增长率大值每天3.83 g/株,期末根茎挥发油含量大值1.20 mL·100 g-1.结论:温郁金经历了2个生长中心,当地上部分干物质增长率曲线与根茎干物质增长率曲线相交时,可作为地上部分的生长向根茎部生长转移的依据.根茎挥发油含量随其干物质增长率的迅速上升而增加,12月中旬为佳采收期.
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温郁金内生真菌E8菌株的鉴定及次生代谢产物的研究
目的:对温郁金内生真菌活性较高的E8菌株进行菌种鉴定,并对其代谢产物的化学成分进行研究.方法:采用形态学观察结合ITS序列分析法对E8菌株进行了菌种鉴定;应用多种层析手段对其代谢产物的化学成分进行分离和纯化,并依据理化性质及波谱数据鉴定其化学结构.结果:经鉴定菌株E8为青霉属的草酸青霉Penicillium oxalicum Curie & Thom;从菌株E8的代谢产物中分离纯化了4个化合物,分别鉴定为大黄酚(1)、大黄素(2)、黑麦酮酸A(3)和β-谷91醇(4).结论:内生真菌草酸青霉P.oxalicum首次从药用植物温郁金中分离;4个化合物均为首次从温郁金内生真菌中分离得到,微生物发酵也是生产这些化合物的一条新途径.
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超临界CO2萃取温郁金挥发油及其成分分析研究
温郁金是姜科姜黄属植物温郁金Curcuma wenyujin Y.H.Chen et Ling的块根,具有行气化瘀、清心解郁、利胆退黄之功能,主治经闭痛经、胸腹胀痛、热病神昏、痫颠发狂、黄疸尿赤等症[1].近年来的药理研究表明,郁金有终止妊娠、抗炎、镇痛、免疫抑制、抗心律失常以及扩张冠状动脉的作用[2,3].
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温郁金氮、磷、钾吸收与积累动态研究
氮、磷、钾为植物吸收三大营养元素,充足的吸收量是获得高产的先决条件.而怎样进行科学施肥,必须对植物氮、磷、钾吸收特性进行深入研究.众多学者在这方面做了大量报道,温郁金该方面未见报道.温郁金作为著名"浙八味"药材之一,近年来随着经济价值提升,栽培面积逐年增多,但由于栽培与管理措施粗放,产量受到影响.本研究通过研究温郁金不同生长时期各器官氮、磷、钾吸收与积累规律,探求氮、磷、钾的吸收与干物质积累的关系,为温郁金高产栽培,科学施肥提供有力依据.
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温郁金化学成分及药理活性研究进展
该文在系统的文献调研基础上,对姜科姜黄属植物温郁金Curcuma wenyujin的化学成分和药理活性研究进展进行了总结.据统计,该植物化学成分报道主要集中于2007-2010年,到目前为止共分离得到82个化合物,倍半萜类57个,单萜类6个,二萜类6个,姜黄素类3个,其他成分10个；其中从本植物中分离得到的新化合物23个.温郁金药理活性研究包括抗肿瘤、抗炎、镇痛、保肝,抗氧化、抗血栓等.该文将其化学成分及药理活性做了总结,以便对其更好的研究、开发和利用.
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“温郁金1号”新品种选育
为选育高产、优质的温郁金新品种,在道地主产区调查种质资源后,采用系统选育的方法,筛选优良株系,通过小区品比、大区对比试验和生产性试验相结合,比较品种之间的产量、经济性状及品质差异,选优去劣育成新品种.选育的温郁金新品种植株高大,生长迅速,性状稳定;莪术、姜黄、郁金平均每667 m2(亩)干产量分别达313.7,177.9,91.2 kg,较农家种增产11.6％,10.2％,14.2％;莪术和姜黄的挥发油分别在4.0％,3.0％以上,且指标成分(吉马酮)含量稳定.经生产验证和示范证明,“温郁金1号”在道地主产区具有较大的推广和生产价值.
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温郁金二萜类化合物C抗胃癌作用的实验研究
目的 通过肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激胃癌细胞株SGC7901,探讨p38丝裂原激活的蛋白激酶MAPK(p38 MA PK)调控核转录因子(NF)-κB通路在温郁金二萜类化合物C抗炎和诱导胃癌细胞凋亡中的作用.方法 将不同浓度的温郁金二萜类化合物C在不同的时间,体外作用于人脐静脉细胞(HUVECs)、胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测其对两种细胞株的增殖抑制率;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测各组胃癌细胞凋亡率;细胞免疫荧光检测p65核转位情况,采用Western blot检测各组p38MAPK/P-p38MAPK、p65/P-p65及Cas pase-3/P-Cas pase-3蛋白表达量.结果 温郁金二萜类化合物C对SGC-7901细胞增殖有明显的抑制作用,并能有效地诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡;温郁金二萜类化合物C能一定程度地减少胃癌细胞SGC-7901 p65核转位发生;Western blot结果提示,p38MAPK、p65蛋白的表达随着温郁金二萜类化合物C浓度的提高而减少,而Caspase-3蛋白的表达则增加(P＜0.05).结论 通过p38MAPK调控p65来激活凋亡执行蛋白Caspase-3是温郁金二萜类化合物C发挥抗炎和抗癌可能的作用机制之一.
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温郁金醇提物对多药耐药人胃癌裸鼠异位移植瘤的抑制及葡萄糖神经酰胺合成酶的影响
目的 探讨温郁金醇提物对多药耐药人胃癌裸鼠异位移植瘤的抑制及葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的影响.方法 将人耐长春新碱(vincristine,VCR)胃腺癌细胞SGC7901 (vincristine-resistant gastric cancer SGC7901 cells,SGC7901/VCR)接种于50只BALB/c裸鼠右侧背部皮下,建立荷瘤裸鼠模型,2～3周后选取瘤体大小相近的裸鼠36只,按随机数字表法分为6组:模型组,VCR组,温郁金醇提物低剂量(温低)组,温郁金醇提物高剂量(温高)组,温郁金醇提物低剂量联合VCR(温低+VCR)组,温郁金醇提物高剂量联合VCR(温高+VCR)组.各组动物按各自药物和剂量给药,连续14天,末次给药后处死动物,剖取瘤体组织,计算抑瘤率以及应用RT-PCR检测移植瘤中GCS-m RNA的表达,Western blot检测GCS蛋白表达水平.结果 与模型组比较,温高+VCR组瘤重明显减轻,VCR组GCS mRNA及蛋白表达量明显增高,温高组、温低+VCR组以及温高+VCR组中GCSmRNA及蛋白表达量明显降低,温低+VCR组以及温高+VCR组中GCS mRNA及蛋白表达量均明显低于温高组(P＜0.05).结论 温郁金醇提物联合VCR可抑制人胃癌SGC7901/VCR裸鼠异位移植瘤生长;抑制作用可能与温郁金逆转人胃癌SGC7901/VCR裸鼠异位移植瘤对VCR的耐药有关.逆转作用可能是通过GCS途径,提高了肿瘤细胞对VCR的敏感性.
关键词： 多药耐药 葡萄糖神经酰胺合成酶 温郁金 胃癌 -
温郁金提取物对食管癌TE-1细胞增殖的抑制作用
目的 研究温郁金提取物对食管癌TE-1细胞增殖的抑制作用.方法 采用超临界CO2萃取法提取温郁金成分.将TE-1细胞贴壁后分成4组:1组加入100 μL含0.1％ DMSO的RMPI-1640培养基,作为对照组；另外3组分别加入浓度为25、50、100 mg/L温郁金提取物完全培养液各100 μL,分别作为温郁金低、中、高剂量组.培养48h后采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定各组TE-1细胞生长抑制率.应用基因芯片技术检测各组TE-1细胞基因表达谱的变化.对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能分类.结果 与对照组比较,温郁金各剂量组生长抑制率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05).温郁金各剂量组TE-1细胞生长抑制率随着剂量升高而增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).通过基因芯片筛选出温郁金提取物作用前后88个基因表达水平发生改变且有统计学意义,包括22个基因表达下调,66个基因表达上调.基因GO分类提示差异表达基因主要涉及信号传导(6个)、细胞周期(8个)、凋亡(14个)或分化调节(10个)等.结论 温郁金提取物对人食管癌TE-1细胞生长有抑制作用,其抗肿瘤作用可能与调控多层次的基因表达改变有关.
