第一例人类部分脸移植术后18个月情况评价

近10年来,多种组织成分的异体移植进入了一个崭新的时代,包括膝关节、单手、双手、喉、腹壁,甚至阴茎移植均有成功的报道.2002年美国医生为老鼠"换脸"获得成功,2005年11月27日法国进行了世界上首例部分脸同种异体移植,2006年4月13日我国第四军医大学西京医院进行了我国首例、也是世界上首例男性换脸手术.究竟换脸手术远期效果如何,<新英格兰医学杂志>近期发表的文章公布了首例换脸手术患者术后18月后的情况(N Engl J Med,2007,357:2451-2460).

同种异体肢体移植临床报告

法国里昂完成首例异体手移植以来[1],目前国内外已完成19只手同种异体移植,现将哈尔滨医科大学附属第一医院完成的3例(5只手)报告如下.

过继转输胚胎抗原耐受T细胞改善小鼠自然流产模型的妊娠预后

正常生理妊娠类似于同种异体移植,母体免疫系统不排斥胚胎抗原归咎于复杂的母-胎免疫调节过程.这种免疫调节作用不仅发生在母-胎界面局部,而且也发生于母体外周.胎儿逃避母体免疫攻击的确切机理,以及因母体对胎儿免疫排斥所致妊娠失败的机制一直是生殖免疫学研究的热点课题.

胰岛同种异体移植后仅需2周免疫抑制治疗

组织工程技术系列专题(一)——组织工程技术的产业化现状

导言组织缺损和器官衰竭是威胁人类健康的严重问题之一.针对较大创伤与病损组织器官的修复重建,现有的主要手段包括移植(自体移植、同种异体移植、异种移植)和人工替代物.

同种异体肋软骨膜游离移植颞下颌关节重建的实验研究

目的本研究首次提出了同种异体游离肋软骨膜(PC)移植再生关节软骨的新方法.方法通过分阶段取材分析,动态观察、分析了同种异体PC再生软骨的情况.结果同种异体移植的PC可以再生软骨,而且再生的软骨与异体移植的软骨一样可以长期存活,而未引起明显的急性、慢性及超急排斥反应.结论游离移植的PC形成的关节软骨比其它一些方法形成的假关节有较多的生理功能,属于关节的生物性修复.

同种异体原位肝移植麻醉管理1例

肝脏是人体单一的重要器官,其功能既复杂又多样,肝脏受到严重损害后根治率极低,对顽固性肝病施行肝移植是有希望的一种疗法.但肝脏与肾、心等脏器不同,肝脏移植手术操作复杂、对全身干扰大、时间长,加之大部分病患均为终末期肝病,常伴发严重的全身脏器功能损伤及内环境紊乱,且新移植肝脏面临再灌注损伤及排异反应,决定了肝脏移植的麻醉与其他手术的麻醉有明显不同,不能用传统的麻醉观念来简单地理解肝脏移植麻醉,纯麻醉处理在肝移植的麻醉处理中已不再是肝移植手术期的主要内容,麻醉期处理措施恰当与否是肝脏移植手术能否成功的关键因素之一.

骨组织工程研究进展

组织工程学是一门应用工程学和生命科学的原理和方法,以载体结合被分离细胞,并能在宿主体内降解释放细胞,形成新的有功能组织的科学.近年来应用骨组织工程临床治疗骨缺损成为目前研究的热点,可以减少自身骨移植的供区损伤,也可避免同种异体移植供体来源有限和不可避免的免疫排斥反应.目前骨组织工程的研究主要包括:细胞种植基质材料的研究开发,种子细胞的体外培养,组织培养中各种因子的调控作用.

精原干细胞和睾丸组织的同种异体移植

背景:精原干细胞作为精子发生过程的基础和前提,其自我更新和分化途径目前仍不完全清楚.目的:观察非免疫缺陷动物新生Wistar大鼠的精原干细胞和睾丸组织移植丁去势成年Wistar大鼠后的成活及生长发育情况.设计、时间及地点:组织细胞形态学水平的随机动物对照实验,于2007-04/08在广西医科大学实验动物中心外科实验室完成.材料:选用健康新生7-9 d雄性Wistar大鼠为供体,受体为经过严格检疫合格的8-12周的成年雄性Wistar大鼠,体质量180-220 g.方法:取新生雄性大鼠睾丸,采用两步法组合酶顺序消化制备大鼠精原干细胞悬液,以Percoll不连续密度梯度离心法初步纯化精原干细胞.取10只成年雄性大鼠,切除双侧睾丸肜成去势大鼠,按随机数字表法分为2组,每组5只.精原干细胞悬液移植组将制取好的1 mL精原于细胞恳液在5 min内注射至受体背部皮下.睾丸组织块移植组将制备好的已剖开的睾丸组织植入受体背部皮下,每个受体移植2个睾丸4块睾丸组织.主要观察指标:移植物的生长发育情况,移植8周末移植物的组织学特点及C-kit免疫组化定性分析结果.结果:精原干细胞悬液移植后,移植物未见成活生长.睾丸组织块移植后移植物部分成活,移植8周末组织学检查可见特征性的精曲小管和细胞结构,可见精于细胞,部分生精小管退化;睾丸间质中可见淋巴细胞浸润;免疫组化鉴定可见睾丸组织内C-kit阳性细胞表达.结论:同种异体异位移植于非免疫缺陷鼠中,新生睾丸组织块可以成活并能形成精子细胞,而精原干细胞悬液移植后未见移植物生长.

玻璃化法保存同种异体肌腱移植材料的可行性

背景:处理同种异体肌腱主要目的是减少免疫原性和保持肌腱结构与活性.现在临床上常用的低温冷冻法操作复杂、费时,所保存的肌腱活性较低.目的:以玻璃化法保存鸡屈趾深肌腱,探索其作为肌腱移植材料的可行性.方法:将成年来亨鸡跖趾关节远侧屈趾深肌腱切断,以数字表法随机分为2组,分别移植同种异体玻璃化肌腱与自体肌腱.术后2,4,8,12,16周观察移植肌腱在形态结构、羟脯氨酸含量和力学性能等方面的变化.结果与结论:玻璃化肌腱移植组早期存在轻度的免疫排斥反应,但不影响肌腱愈合与重建.两组肌腱周围产生中度粘连,移植后肌腱中段的羟脯氨酸含量先减少,8周后逐渐增高,而吻合口部羟脯氨酸含量随时间逐渐增高,两组间羟脯氨酸含量差异无显著性意义.在8周内玻璃化肌腱移植组吻合口部的破裂强度与弹性模量低于自体肌腱移植组(P < 0.05),12周后差别无显著性意义.两组肌腱中段部生物力学性能差异无显著性意义.说明玻璃化保存的同种异体肌腱生物活性好、免疫原性低,是良好的肌腱移植材料.

化学去细胞同种异体神经移植修复大鼠骶1神经缺损

背景:自体神经移植是修复周围神经损伤中常用的方法.目的:探讨化学去细胞神经修复大鼠骶1神经缺损的效果,以期寻找修复周围神经缺损较为理想的方法和材料.方法:取SD大鼠骶1神经,采用化学去细胞法处理大鼠骶1神经的免疫原性成分,使其成为去细胞神经.将Wistar大鼠右侧骶1神经制成1 cm缺损模型,用SD大鼠去细胞同种异体神经移植修复大鼠骶1神经的缺损.结果与结论:与术前相比,术后8周逼尿肌漏尿点降低,膀胱大容积和膀胱顺应性升高(P < 0.05).神经纤维细丝蛋白染色结果显示,右侧经同种异体神经移植修复的神经吻合口断端被染成绿色,神经纤维排列整齐分布均一,再生神经轴突长入远端神经.左侧正常神经形态均一,神经纤维排列整齐分布均一未见轴突长入远端神经.结果表明,化学去细胞同种异体神经的抗原性明显降低,可修复高等哺乳类动物的周围神经损伤.

同种异体骨软骨柱移植治疗关节软骨缺损

背景:同种异体骨软骨移植修复关节软骨损伤可以解决自体骨软骨来源有限的问题,但存在免疫排斥问题.目的:观察以深低温保护剂保护的同种异体骨软骨柱移植修复兔关节软骨缺损的效果,并与自体关节软骨移植作比较.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008 05/10在武汉协和医院骨科实验室完成.材料:24只成年健康新西兰兔中8只用于异体骨软骨柱的制备,16只随机分成同种异体移植组和自体移植组,每组8只.方法:使用横穿钉套筒提取兔股骨内侧髁骨软骨柱,将骨软骨柱在4℃条件下放入盛有10%二甲基亚砜的冻存管中2 h,将冻存管移入程序冷冻仪内以1℃/min速率降至-75℃,放入-196℃液氮罐底部保存3周备用.用横穿钉钻头在兔左膝关节股骨内侧髁垂直于软骨面制造缺损,缺损深4 mm,直径4.45 mm,自体移植组取右膝关节内侧髁骨软骨柱植入到左侧膝关节相应缺损处,异体移植组将经过程序性深低温冷冻保存的同种异体骨软骨柱移植到相应缺损处.主要观察指标:术后12周观察兔关节活动度、修复组织的质地等情况.以苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理变化,以半定量改良Wakitani score法进行评估.以免疫组织化学染色观察Ⅱ型胶原分泌情况.结果:两组实验动物关节活动度正常.异体移植组移植处关节软骨面较光整,与周围正常关节软骨高度一致,结合紧密,颜色接近,与自体移植组相似.两组移植后,兔关节缺损处被透明软骨覆盖,潮线整齐,细胞排列有序,分泌大量基质,异体移植组移植处软骨深层及软骨下骨处可见微小裂隙,未见淋巴细胞和浆细胞浸润.同种自体与异体骨软骨移植组Wakitaniscore评分结果无统计学差异,总分接近,修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均强阳性.结论:冷冻同种异体骨软骨柱移植可修复全层小面积关节软骨缺损,术后近期软骨细胞存活,可分泌软骨基质,未见明显排斥反应,与自体骨软骨柱修复的兔关节软骨缺损在组织学上相近.

脱细胞血管基质材料同种异体移植10个月研究

背景:异体血管移植之所以至今未能在临床应用,关键是异体组织抗原性排斥反应的难题未能得到解决.目的:制备动脉脱细胞血管基质,探讨脱细胞血管异体移植的可行性.方法:采用不同去垢剂(1%Triton X-100、1%SDS)多步骤对犬血管进行脱细胞处理,通过组织学和力学观测,建立犬动脉血管脱细胞的方法;并进行脱细胞血管的异体移植.结果与结论:经胰蛋白酶、低渗溶液和去垢剂Triton X-100、SDS等多步骤处理,犬颈总动脉血管的细胞基本脱除,细胞外基质保持完好,血管的弹性、韧性保存较好;用该法制备的犬颈总动脉(直径约4.0 mm)进行异体移植,经10个月观察,4/5通畅.提示经去垢剂Triton X-100、SDS加低渗溶液、胰蛋白酶和蛋白酶抑制剂处理的多步法,可以脱除血管的细胞成分,细胞外基质和力学特性保持完好,是一种较好的方法;用该法制备的犬颈总动脉可以直接进行异体移植,是一可选择的血管移植材料.

异位气管移植模型中上皮细胞的增殖与凋亡

背景:异位气管移植中上皮细胞的变化过程尚不清楚,有研究表明在上皮增殖同时伴随有不可逆的细胞死亡,并且气道上皮再生与死亡发生在移植气道闭塞之前.目的:观察异位鼠气管移植过程中气道上皮细胞的增殖与凋亡情况.方法:将异体BALB/c 小鼠气管植入BALB/c 小鼠颈背部皮下,移植后不注射环孢素A.将BALB/c 小鼠气管植入C57BL/6小鼠颈背部皮下,一组不注射环孢素A,另一组全程腹腔注射环孢素A.移植后第3,7,14,21,30 天苏木精-伊红染色评价气道上皮的完整性、黏膜下炎症细胞浸润和纤维组织增生情况;测定移植气管中BrdU 标记指数及TUNEL 阳性细胞数.结果与结论:受体BALB/c 小鼠移植后第3 天气道上皮细胞轻度损伤丢失,第7～21 天,气道上皮逐渐恢复正常,第30 天,气道上皮接近正常上皮;BrdU 标记指数变化范围为3%～5%;TUNEL 阳性细胞数基本无变化.受体C57BL/6 小鼠移植后第3 天,气道上皮轻度损伤,第7～21 天,气管上皮脱落、坏死,开始出现纤维增殖并逐渐加重,第30 天时,上皮细胞完全消失,管腔被纤维组织填塞,接近闭塞;移植后第14 天,BrdU 标记指数达到高,未注射环孢素A 组高于注射环孢素A 组(P=0.000),移植后第21,30 天,标记指数明显降低;移植后第21 天,未注射环孢素A 组TUNEL 阳性细胞数达到大值,注射环孢素A 组于移植后第14 天达大值.说明异位气管移植上皮增殖同时伴随有不可逆的细胞凋亡,环孢素A 可以减轻闭塞性细支气管炎的发病程度,但并不能阻止其发生.

同种异体气管移植后长段气管的再血管化

背景:移植气管再血管化是气管移植外科需要解决的首要问题.目的:观察同种异体气管移植后长段气管再血管化过程中气管软骨支架的生长情况,以实现长段气管的在血管化.设计、时间及地点:动物实验观察,于2007-06/2008-06在山东省胸科医院胸外科完成.材料:健康新西兰兔20只,由山东大学医学院实验动物中心提供,随机抽取10只家兔做供体,剩余10只家兔作为受体.方法:将同种异体供体家兔气管去除气管黏膜及膜部平滑肌,形成仅余气管软骨及部分环状韧带的气管支架,在气管软骨环之间将环状韧带剪开或密集打孔,使气管软骨支架裂隙化或网孔化,但要保留气管软骨环两端及正中部环状韧带,以保持气管软骨支架的完整连接状态.受体游离并切取带血管蒂的空肠,其长度略长于备用供体的软骨支架的长度,将大网膜环绕贴附于备用供体的气管软骨环外面充当外膜.将构建好的模拟气管置于腹腔中.主要观察指标:气管外膜的网膜及气管软骨的生长情况.结果:2周后打开腹腔,大体及病理切片观察:重建的气管替代物管腔无塌陷,按压管壁弹性良好,夹裹气管软骨的肠黏膜与大网膜血运好,异体气管软骨无坏死及吸收.结论:实验在受体腹腔内成功完成了一期气管替代物重建,实现了同种异体气管移植长段气管的再血管化.受体带蒂肠黏膜、大网膜夹裹供体网孔化或裂隙化的气管支架使移植体不再受长度的限制,是实现长段气管再血管化的关键.

组织工程化软骨细胞和骨髓间充质干细胞用于修复同种异体关节软骨缺损

背景:关节软骨几乎没有自身修复的能力,目前临床大多采用自体或异体软骨移植修复、软骨膜或骨膜移植修复、软骨细胞移植修复.由于自体软骨来源有限,异体软骨又存在慢性免疫排斥反应,终可能导致预后不佳;软骨膜或骨膜移植修复的软骨易于退化,导致修复效果不佳.目的:总结组织工程化软骨细胞、骨髓间充质干细胞及两者共培养对同种异体软骨缺损修复作用的研究现状.方法:应用计算机检索PubMed 数据库及中国期刊网全文数据库1994-01/2012-01有关组织工程化软骨细胞和骨髓间充质干细胞用于修复同种异体关节软骨缺损方面的文章,英文检索词为"cartilage defect,allograft,chondrocyte,mesenchymal stem cells,bone marrow mesenchymal stem cells",中文检索词为"软骨缺损,同种异体移植,软骨细胞,骨髓间充质干细胞".排除重复性及非中英文语种研究,共保留35篇文献进行综述.结果与结论:随着体外细胞培养方法的不断改进,现已能够把软骨细胞从坚韧的软骨中分离出来,并获得大量高纯度的软骨细胞并繁殖出新生软骨细胞.软骨细胞培养增殖能力低,传代培养容易引起老化和去分化;而成体骨髓中骨髓间充质干细胞含量少,随传代次数的增多成软骨潜能明显降低.骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养,两种细胞相互促进增殖和分化,作为种子细胞可减少软骨细胞增殖传代次数并节省软骨细胞数量,与组织工程支架材料复合能有效修复关节软骨缺损.

同种异体脂肪干细胞移植促进大鼠骨骼肌功能的恢复

背景:超过骨骼肌自我再生能力的广泛损伤可导致不可逆的纤维化、瘢痕形成和功能丧失.以往研究证实,脂肪来源干细胞可用于各种肌组织的再生,其对骨骼肌急性损伤后功能恢复的影响鲜有报道.目的:观察同种异体脂肪干细胞移植对骨骼肌急性损伤大鼠骨骼肌再生与功能恢复的作用.方法:从10只SD大鼠皮下脂肪组织中分离脂肪间充质干细胞,进行流式细胞术鉴定和多向分化能力鉴定.将72只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、胶原蛋白组和脂肪间充质干细胞移植组,后3组建立腓肠肌急性钝挫伤模型,胶原蛋白组分5个注射点在腓肠肌肌腹注射共1 mL大鼠胶原蛋白Ⅰ,脂肪干细胞移植组分5个注射点在腓肠肌肌腹注射含1×106个脂肪干细胞的1 mL大鼠胶原蛋白Ⅰ.移植后7,14,28 d,苏木精-伊红染色观察腓肠肌结构并测量腓肠肌纤维横截面积;用张力传感器测量腓肠肌等长收缩肌力;称量腓肠肌湿质量并计算其与体质量比值;Western blot检测腓肠肌组织中Pax7、MyoG、MyoD的表达.结果与结论:①大鼠脂肪干细胞表达CD29和CD90,不表达CD31和CD34,具有成脂、成骨和成软骨分化能力;②在移植后28 d,脂肪干细胞移植组大鼠腓肠肌损伤部位可观察到新生的骨骼肌纤维,4组大鼠腓肠肌损伤部位均未观察到明显的纤维增生;③在移植后28 d,脂肪干细胞组腓肠肌湿质量及其与体质量比值均高于模型组和胶原蛋白组(P<0.01),脂肪干细胞移植组腓肠肌中肌纤维横截面积大于模型组和胶原蛋白组(P<0.01);④移植后7,14,28 d,模型组、胶原蛋白组、脂肪干细胞移植组腓肠肌等长收缩肌力均低于正常对照组(P<0.01),移植后28 d,脂肪干细胞移植组腓肠肌等长收缩肌力高于模型组和胶原蛋白组(P<0.01);⑤移植后14 d,脂肪干细胞移植组腓肠肌组织中Pax7和MyoD的表达高于模型组和胶原蛋白组(P<0.05),移植后28 d,脂肪干细胞移植组腓肠肌组织中MyoD和MyoG的表达高于模型组和胶原蛋白组(P<0.05);⑥结果表明,脂肪干细胞移植到急性受损骨骼肌中能促进肌纤维的再生和功能恢复.

同种异体骨髓间充质干细胞移植对家兔股骨头缺血性坏死的治疗作用

目的:虽然骨髓间充质干细胞的体外培养和扩增技术已经成熟,但是自体细胞移植仍处于细胞培养和临床治疗相互分离的现状,不便于临床实际应用.为建立骨髓间充质干细胞库,以及为临床应用提供实验证据,实验拟比较同种异体和自体骨髓间充质干细胞移植,对实验性家兔股骨头缺血性坏死的治疗作用.方法:实验于2004-03/2007-04在河北医科大学人体解剖学教研室,白求恩国际和平医院骨科完成.①实验材料:实验所用新西兰大白兔由白求恩国际和平医院实验动物中心提供,雌雄不拘,四五月龄,体质量2.5~3.5 kg.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.②实验方法:采用全骨髓培养法制备新西兰大白兔骨髓间充质干细胞.采用液氮冷冻法制作兔股骨头缺血性坏死模型.将造模后家兔随机分成自体细胞移植组和同种异体细胞移植组,12只/组,自体细胞移植组钻孔后,植入含有体外培养的自体骨髓间充质干细胞的明胶海绵;同种异体细胞移植组钻孔后,植入含有同种异体骨髓间充质干细胞的明胶海绵.③实验评估:分别于术后2,4,6,8周,进行股骨头标本的X射线和组织学观察.结果:24只新西兰大白兔均进入结果分析.①X射线观察显示,2周时自体细胞移植组与同种异体细胞移植组,股骨头钻孔区边缘密度增加,8周时两组的钻孔区,均出现骨小梁结构.②组织学观察表明,2周时两组的钻孔区内,都有大量的成骨细胞,边缘有较多的骨组织形成;在同种异体细胞移植组的钻孔区内,出现少量淋巴细胞和浆细胞.4周时两组的钻孔区内,充满了新生的骨小梁结构,8周时钻孔区内的骨小梁趋于成熟,两组间骨小梁面积图像分析无明显差异.结论:同种异体和自体骨髓间充质干细胞移植,对实验性家兔股骨头缺血性坏死的治疗效果相似.

同种异体肌腱移植重建治疗膝关节前交叉韧带断裂：中期随访评价

背景：以同种异体肌腱移植重建前交叉韧带是现在较流行的手术方式，但缺乏中长期临床疗效的评价。目的：分析膝关节镜下同种异体胫前肌腱移植重建前交叉韧带的方法及其中期疗效。方法：回顾分析应用同种异体肌腱移植重建前交叉韧带的25例患者的临床资料，比较移植前及移植后3年以上的中期随访 Lysholm、Tegner、IKDC关节评分。结果与结论：所有病例均获得随访。25例患者同种异体肌腱移植后Lysholm关节评分、Tegner评分和IKDC评分均显著高于移植前(均P<0.05)。所有病例移植后均未出现肺栓塞、感染、移植物断裂等并发症。关节功能明显改善。1例前抽屉试验弱阳性。Lachman试验征均为阴性，轴移试验均阴性。结果表明，关节镜下应用同种异体肌腱移植重建前交叉韧带具有创伤小，并发症少的优势，中期随访疗效优良。

化学去细胞尿道在大鼠皮下的埋置

背景：有研究提出了移植排斥反应的实质是受者免疫系统对供者移植物抗原的免疫应答反应。
　　目的：验证化学萃取去细胞处理对同种异体尿道移植抗原性的影响。
　　方法：取SD大鼠尿道共20根，每段长1 cm。其中10根采用化学去细胞法处理大鼠尿道的免疫原性成分，使其成为去细胞尿道；另外10根不做去细胞处理为新鲜尿道。在10只Wistar大鼠背部皮下植入去细胞尿道，另取10只大鼠背部皮下植入新鲜同种异体尿道。6周后取材行大体和组织学检查。
　　结果与结论：20只Wistar大鼠在皮下埋植尿道后均无自嗜肢体现象，切口愈合良好，饮食正常，无溃疡发生。6周后取材大体观察可见去细胞尿道周围有组织膜形成，而新鲜尿道未见组织膜形成。苏木精-伊红染色可见去细胞尿道逐渐被吸收，被平滑肌组织取代，并可见大小不等血管长入去细胞尿道内，部分有形成血窦的倾向；对照组尿道未见吸收，未见血管长入。提示化学去细胞尿道在大鼠体内逐渐形成类似正常尿道的组织材料，说明化学去细胞同种异体尿道移植的抗原性明显降低，可替代正常尿道海绵体组织。