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子宫移植动物模型的手术研究进展
随着微创缝合技术的进步和免疫学研究的进展,子宫移植技术已取得显著的临床进展.目前,国内外已成功开展近40余例人体子宫移植手术并获得12名活产分娩的健康新生儿,这表明子宫移植技术已成为重建子宫性不孕女性个体生殖能力的重要手段.国际妇产科联盟(FIGO)指南规定,各医疗单位在开展人类子宫移植术前必须具有动物方面的基础实验研究经验,但如何选择合适的子宫移植动物模型值得探讨.本文对不同动物的子宫移植模型建立方法及移植结局进行综述.
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移植物处理减轻同种异体移植后排斥反应的研究进展
同种异体移植是当今医学界应用多的移植类型,其术后的排斥反应是影响移植物功能和长期存活的主要因素.近年来,许多研究表明,多种因素影响移植术后的排斥反应,其中,对移植物进行适当的保存和处理可能会降低移植后排斥反应的强度.本文就异体移植后排斥反应的免疫机制、移植物的处理方法进行综述.
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复合环孢菌素同种异体骨的免疫学与组织学评价
目的 对比评价复合环孢菌素同种异体骨(CAB)的免疫学特性及成骨特性.方法 54只新西兰兔随机分为三组(每组18只):实验组(植入CAB修复兔桡骨中段骨缺损)、对照组(植入深冻/冻干辐照同种异体骨修复兔桡骨中段骨缺损)、材料提供组.于不同时间点抽血行淋巴细胞亚群分析并取材,标本经处理后分别行CD25分子免疫组化染色和改良马松三色法染色并图像分析,对淋巴细胞亚群及新骨面积行统计学分析.结果 术后16周对照组CD25分子密度明显高于实验组,且对照组各个时间点间的CD4+T淋巴细胞百分数及CD8+T淋巴细胞百分数波动明显,差异有统计学意义(P＜0.05);实验组各骨缺损修复部位新骨生成面积均大于对照组,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 免疫学及组织学结果初步显示,与深冻/冻干辐照同种异体骨相比,CAB可以更稳定持久地抑制免疫排斥反应并更好地促进新骨生成.
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冷冻保存同种异体骨-前交叉韧带(ACL)-骨移植实验研究
目的探讨自体骨-ACL-骨和二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植的组织学、形态学及生物力学的变化特点.方法将60只日本大耳兔和60只新西兰兔随机分成自体骨-ACL-骨移植组和二步冷冻保存骨-ACL-骨同种异体移植组.术中及术后不用免疫抑制剂.术后4、8、12周切取移植膝关节及健侧膝关节,行ACL生物力学测试.术后4、12周切取ACL分别作组织学检查和电镜检查.结果自体移植组和二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植组的ACL所测大拉伸强度和拉伸刚度与同期正常对照ACL相比显著下降(P＜0.01)两组之间同期相比其大拉伸强度和拉伸刚度差异无显著(P＞0.05).结论自体骨-ACL-骨移植和二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后具有相同的生物力学性能和组织学愈合过程.
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半月板重建的临床研究进展
半月板是膝关节的重要组成部分,它能吸收震荡、增加关节面的接触面积和润滑关节,在传递载荷、稳定关节和防止关节退变等方面起着重要作用.因此,对于半月板损伤或切除后患者,如何重建半月板的功能,是膝关节外科医生面临的问题.本文就目前半月板重建的适应证、禁忌证、注意事项、临床疗效及前景等进行了综述.
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利用组织工程化骨进行撕脱指骨的置换
数十年以来,人们利用许多方法来替代由于创伤和疾病所造成的骨缺失.1908年Lexer报道利用新鲜的截肢或尸体骨与关节来重建关节.近年来自体移植和同种异体移植已被广泛应用于骨组织的再生和重建.一些天然或合成的骨替代物也得到了应用,它们或者单独使用,或者和脱钙骨、异体骨结合使用.同时还有大量使用肽、脱钙骨粉末加速间充质组织向骨组织分化的报道.
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低剂量FK506预处理诱导移植物对缺血再灌注损伤耐受的影响
目的观察并初步探讨低剂量FK506预处理诱导带血供同种异体膝关节移植时移植物对缺血再灌注损伤的耐受及其可能的机制.方法用24只日本大耳白兔,建立带血供同种异体膝关节移植异位动物模型,并将其分为IR组(缺血再灌注组)、FK506组(低剂量FK506预处理组)及ST组(对照组),缺血1 h后再灌注,然后取缺血再灌注前及缺血再灌注后12 h的相同组织(以肌肉组织为例)进行苏木精-伊红染色、透射电镜、流式细胞仪、RT-PCR、Western Blot、DNA梯度电泳及SOD、NO与MDA的分光光度计检测.结果结果发现,HE染色显示,IR组组织结构紊乱,细胞疏松;而FK506组中组织结构清晰、细胞完整.TEM显示IR组线粒体肿胀,空泡化;FK506组线粒体完整,无明显空泡化.SOD、NO及MDA检测显示:IR组中NO及MDA含量明显增加,SOD活性下降,而FK506组中NO、MDA含量增加不明显,SOD活性较强.DNA梯度电泳显示,FK506预处理后DNA梯度较IR组减弱.流式细胞仪检测显示:低剂量FK506预处理后,细胞的凋亡率可从20%降至10%左右,而Fas及FasL的表达则明显降低.RT-PCR检测显示,经FK506预处理后,TNF及IL-1 mRNA水平的表达减弱,而与此同时,HSP 70在mRNA水平的表达则明显增强,Western Blot检测仪显示HSP 70在相应时间蛋白水平亦是明显增强的.结论低剂量的FK506(0.3 mg/kg)预处理在带血供同种异体膝关节移植时可以诱导移植物对缺血再灌注损伤的耐受,HSP 70蛋白的高表达可能是这一现象的关键机制.
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应用牙周膜干细胞—牙囊干细胞复合细胞膜片同种异体移植修复比格犬牙周组织缺损的研究
目的 拟构建比格犬牙周缺损模型,观察牙周膜干细胞—牙囊干细胞复合细胞膜片修复牙周组织缺损的效果.方法 分离培养比格犬牙囊干细胞、牙周膜干细胞,制备牙囊干细胞细胞膜片、牙周膜干细胞细胞膜片以及以上2种细胞的复合细胞膜片,将膜片混合支架材料同种异体植入成年雄性健康比格犬牙周缺损模型,对照组只植入支架材料.分别于移植后1周、2周、4周、6周、8周、12周检测探诊深度、牙龈退缩、附着丧失情况.12周后观察分析牙周再生的组织形态学变化.结果 牙周临床检查及组织学形态学分析显示,3个膜片移植组牙周再生效果较对照组效果明显,其中复合细胞膜片移植组明显高于其余两个单一膜片移植组(P<0.05).结论 牙周膜干细胞—牙囊干细胞复合膜片同种异体移植更有利于修复比格犬牙周缺损.
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同种异体脂肪源干细胞移植对耐力训练大鼠血清生化指标及运动能力的影响
目的 从筋膜学角度观察同种异体移植脂肪源干细胞(ADSCs)对耐力训练大鼠体内某些血清生化指标活性及运动能力的影响.方法 40只Wistar雄性大鼠随机分成安静对照组(空白对照组)、游泳训练照组(模型组)、安静移植细胞组(实验对照组)和游泳移植细胞组(实验组).模型组和实验组进行力竭游泳训练.力竭游泳训练1周后,实验组与实验对照纽经尾静脉输入ADSCs.游泳训练结束后,记录各组大鼠游泳力竭的时间以及检测血清尿素(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、血乳酸(BLa)和血红蛋白(Hb)含量.结果 模犁组与空白对照组比较,Hb水平显著降低,血清BUN、LDH、BLa水平均显著升高(P<0.01),力竭时间显著延长(P<0.01);与模型组比较,实验组Hb显著提高(P<0.01),而BUN、LDH、BLa水平均明显降低(P<0.01),力竭时间有较大提高(P<0.01).结论 移植ADSCs可有效延缓了大鼠运动性疲劳的产生,提高了大鼠的运动能力.
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飞秒激光辅助猴眼角膜基质透镜移植观察
[目的]评估飞秒激光辅助猴眼角膜基质透镜移植术后透镜生物相容性,观察猴眼表参数及泪液因子表达的变化.[方法]3只健康青年恒河猴,麻醉后行双眼全飞秒激光角膜基质透镜取出术,左右眼分别为一组,右眼植入同种异体角膜基质透镜,左眼植入自体右眼取出的角膜基质透镜.术后1周、1月、3月、5月、6月观察眼表炎症反应、中央角膜厚度、屈光状态及角膜地形图变化,同时对术前、术后1周、1月、3月多个时间点猴眼泪液进行采集并进行多因子检测.[结果]术后两组透镜均透明,未见排斥反应,中央角膜厚度及屈光状态在术后6月趋于稳定,各时间点差异无统计学意义,角膜地形图陡K和平K值比较差异无统计学意义(P＞0.05),泪液因子检测两组间多个时间点比较均无统计学意义(P＞0.05).[结论]同种异体角膜基质透镜植入角膜基质袋内安全有效,可预测性好,同种异体及自体角膜基质透镜植入猴眼角膜基质袋无明显差别.
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T细胞亚群及其免疫分子介导的妊娠免疫耐受研究进展
生殖免疫学认为,人类胚胎形成过程类似同种异体移植,胚胎对于母体来说属于半同种异体抗原,能够正常分娩而不被母体排斥是母-胎界面母体和胚胎之间复杂对话的结果,其细胞及细胞因子之间构成相互作用的复杂网络,形成了特有的免疫耐受状态,即成功的妊娠实际是成功的妊娠免疫耐受.
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眼表上皮重建的研究进展
眼表面的概念由Thoft和Friend于1979年提出,眼表疾病的概念由Nelson于1980年提出.在解剖学上,眼表是由上下睑缘皮肤为界的整个黏膜上皮衬里组成.在组织学上,这个上皮表面覆盖着两个主要领域,即角膜和结膜.近20年来,有关眼表上皮以及眼表重建的研究已取得进展,眼表上皮的重建早是由Thoft[1]提出的结膜移植,经过多种方法:结膜自体移植,结膜异体移植;结膜角膜缘自体移植,尸眼结膜-角膜缘同种异体移植,亲属结膜-角膜缘同种异体移植;角膜-角膜缘异体移植.近年来提出的羊膜移植,角膜缘移植和培养的角膜缘干细胞移植等.本文就眼表上皮重建的临床研究进展作一综述.
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神经节苷脂GM1促进兔异体移植神经再生的作用观察
目的:研究神经节苷脂GM1(GM1)对冷冻处理后的兔同种异体移植神经再生作用的影响.方法:选择成年大白兔36只,4只作为供体,切取其双侧坐骨神经,制成10 mm神经段,深低温冷冻储存2周;其余32只随机分为实验组和对照组,每组又分为4个亚组.将兔左侧坐骨神经造成10 mm长缺损,用复温后的同种异体神经进行移植桥接.然后,实验组局部应用GM11 mg/d,连续14 d,对照组不做任何处理,任其自然生长.4个亚组分别于术后2、4、8、12周进行组织学、电生理、超微结构、形态学定量分析、肌湿重等观察.结果:两组均无急性排斥反应发生.术后12周,实验组和对照组在运动神经传导速度及形态学定量分析方面比较,差异有统计学意义(P＜0.05),实验组优于对照组.结论:外源性GM1可促进冷冻处理后的异体移植周围神经再生.
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FK506对同种异体神经移植后神经再生的影响
目的研究免疫抑制剂FK506对冷冻处理后的同种异体神经移植后神经再生的作用.方法选择成年的新西兰大白兔36只.4只作为供体,切取双侧坐骨神经,制成10 mm神经段,深低温冷冻储存2周.其余32只随机分为实验组和对照组.将兔左侧坐骨神经造成10 mm长缺损,用复温后的同种异体神经进行移植桥接.然后作以下处理:实验组移植部位应用FK506(10 μg/d×14 d),对照组不做任何处理,任其自然生长.于术后12周进行组织学、电生理、超微结构、形态学定量分析、肌湿重以及免疫学等观察.结果在观察的时限内,实验组及对照组32只大白兔在进行同种异体神经移植后均未发生急性移植排斥反应.但实验组大白兔的移植部位运动神经传导速度(30.58±2.16)s明显快于对照组(21.78±2.43)s(P＜0.05).光镜及电镜检查发现实验组大白兔的有髓神经纤维数量、神经束膜间毛细血管及雪旺氏细胞细胞器等明显多于对照组(P＜0.05).结论免疫抑制剂FK506可促进冷冻处理后的同种异体神经移植后周围神经再生.
关键词： 免疫抑制剂FK506 同种异体移植 神经再生 -
供体骨髓来源的未成熟树突状细胞抑制小鼠同种异体牙移植后排斥反应的效果研究
目的:研究供体小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(Immature dendritic cell, imDC)对小鼠同种异体牙移植后排斥反应的抑制效果.方法:运用50 U/ml粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)诱导出小鼠骨髓来源imDC,流式细胞术鉴定细胞表型,并于同种异体牙移植前1周以2×106个/只回输入受者体内,组织病理切片观察imDC对小鼠同种异体牙移植后排斥反应的抑制效果.结果:imDC回输组与未回输imDC的同种异体牙移植组相比,淋巴细胞浸润减少、炎症反应减轻.结论:imDC可以减轻同种异体牙移植后的排斥反应.
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大鼠同种异体耳廓异位移植模型的可行性探讨
目的建立稳定的大鼠同种异体耳廓移植模型.方法将动物分为A、B两组.每组均以10只SD大鼠为供体,10只Wistar大鼠为受体进行原位及异位移植.原位移植的静脉选择颈外静脉,动脉选择颈外动脉,动脉吻合平面选择甲状腺上动脉分支处;异位移植选择股动静脉.然后观察大鼠及其耳廓的生存情况与组织学变化.结果两组的耳廓生存时间为5～11 d,异位移植大鼠的生存率高,耳廓的生存及病理改变与原位移植无差异.结论大鼠同种异体耳廓异位移植模型对于研究带血管的体表同种异体复合组织移植排斥反应简便易行,稳定可靠.
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同种异体移植大鼠耳廓组织中RANTES表达的实验研究
目的探讨趋化因子RANTES在同种异体移植的大鼠耳廓组织中的表达与相关免疫细胞的浸润.方法使用Lewis大鼠8只作为供体,BN大鼠8只作为受体,进行异体耳廓移植(Lewis→BN);使用BN大鼠16只进行自体移植(BN→BN).观察移植耳廓的生存时间及病理改变,并采用免疫组织化学技术检测RANTES的表达与T淋巴细胞、单核细胞的浸润情况.结果同种异体移植耳廓平均生存(7.3±0.25)d,移植耳廓组织中RANTES的表达于术后3d达到高峰,并与组织中T淋巴细胞的浸润有明显的关系,同时可见大量单核细胞的浸润.结论同种异体大鼠耳廓移植后1周左右发生排斥反应,并与趋化因子RANTES的表达及进一步T淋巴细胞与单核细胞的浸润有关.
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CTLA4Ig-重组腺病毒载体延长大鼠异基因原位移植气管存活期
目的研究腺病毒介导的CTLA4Ig基因在大鼠异基因原位气管移植中的作用.方法建立异基因大鼠原位气管移植模型.分别采用腹腔注射生理盐水(Saline组,2ml/只)、腹腔注射CTLA4Ig重组腺病毒载体(Ad-CTLA4Ig组,2×109PFU/只)和肌肉注射环胞素A(CsA组,5mg/kg),观察术后大鼠的存活时间和移植气管的病理改变.结果 Ad-CTLA4Ig组大鼠存活时间为(27.3±5.88)d,较Saline组(7.3±1.63)d和CsA组(18.3±1.70)d明显延长(P<0.05).同时,术后10d Ad-CTLA4Ig组大鼠气管组织学改变与CsA组大鼠比较无明显差异.结论 Ad-CTLA4Ig可延长大鼠异基因原位移植气管的存活时间.
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骨髓间质干细胞降低大鼠移植物抗宿主反应的实验研究
目的 探讨MSCs对GVHD的作用及其机制.方法 建立大鼠同种异体骨髓移植模型,同时输入供者的T淋巴细胞诱导出移植物抗宿主反应,联合或不联合移植供体来源的MSCs,观察受鼠的生存时间,同时利用RT-PCR法研究Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,用ELISA法检测移植后体内IL-4细胞因子的浓度.结果 GVHD组的平均生存时间为(17.30±2.33)天,实验组的平均生存时间为(24.10±2.36)天 , 与单独移植HSCs相比,MSCs与HSCs共移植明显延长的受鼠的生存时间.同时,GVHD组Th1/Th 2 细胞比值为1.29±0.06,IL-4因子的浓度平均为(14.84±2.59) pg/mL,实验组Th1/Th 2细胞比值为(0.77±0.14),IL-4因子的浓度平均为(40.09±13.99) pg/mL.MSCs与 HSCs 共移植降低了体内Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,提高了体内IL-4细胞因子的浓度.结论 MSCs与HSCs共移植能有效抑制HSCs移植后致死性GVHD的发生,延长生存时间,同时MSCs 可能通过作用于体内Th1/Th2淋巴细胞亚群的比例,促进体内IL-4细胞因子的分泌从而间接发挥了抑制GVHD的作用.
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CD4+CD25+调节性T细胞在同种异体移植免疫耐受中的研究进展
同种异体器官移植已经成为终末器官衰竭患者修复病损的组织和器官,并重建其功能必要的治疗方法.受者往往都需要长期接受免疫抑制剂来维持移植物在其体内的存活.由于免疫抑制剂的非特异性及毒副作用,长期应用该类药物会导致受者免疫力低下而出现易感染、癌症等副作用.因此,解决该问题的关键是诱导受者对供者移植抗原产生特异性地”移植免疫耐受”.大量研究结果显示,CD4+CD25+调节性T细胞能特异性地抑制免疫排斥反应,在调控免疫应答与维持外周免疫耐受中发挥着重要作用.本文对近年来CD4+CD25+调节性T细胞的作用机制及其在同种异体移植免疫耐受方面的研究进行了综述.
