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同种异体脂肪干细胞移植促进大鼠骨骼肌功能的恢复
背景:超过骨骼肌自我再生能力的广泛损伤可导致不可逆的纤维化、瘢痕形成和功能丧失.以往研究证实,脂肪来源干细胞可用于各种肌组织的再生,其对骨骼肌急性损伤后功能恢复的影响鲜有报道.目的:观察同种异体脂肪干细胞移植对骨骼肌急性损伤大鼠骨骼肌再生与功能恢复的作用.方法:从10只SD大鼠皮下脂肪组织中分离脂肪间充质干细胞,进行流式细胞术鉴定和多向分化能力鉴定.将72只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、胶原蛋白组和脂肪间充质干细胞移植组,后3组建立腓肠肌急性钝挫伤模型,胶原蛋白组分5个注射点在腓肠肌肌腹注射共1 mL大鼠胶原蛋白Ⅰ,脂肪干细胞移植组分5个注射点在腓肠肌肌腹注射含1×106个脂肪干细胞的1 mL大鼠胶原蛋白Ⅰ.移植后7,14,28 d,苏木精-伊红染色观察腓肠肌结构并测量腓肠肌纤维横截面积;用张力传感器测量腓肠肌等长收缩肌力;称量腓肠肌湿质量并计算其与体质量比值;Western blot检测腓肠肌组织中Pax7、MyoG、MyoD的表达.结果与结论:①大鼠脂肪干细胞表达CD29和CD90,不表达CD31和CD34,具有成脂、成骨和成软骨分化能力;②在移植后28 d,脂肪干细胞移植组大鼠腓肠肌损伤部位可观察到新生的骨骼肌纤维,4组大鼠腓肠肌损伤部位均未观察到明显的纤维增生;③在移植后28 d,脂肪干细胞组腓肠肌湿质量及其与体质量比值均高于模型组和胶原蛋白组(P<0.01),脂肪干细胞移植组腓肠肌中肌纤维横截面积大于模型组和胶原蛋白组(P<0.01);④移植后7,14,28 d,模型组、胶原蛋白组、脂肪干细胞移植组腓肠肌等长收缩肌力均低于正常对照组(P<0.01),移植后28 d,脂肪干细胞移植组腓肠肌等长收缩肌力高于模型组和胶原蛋白组(P<0.01);⑤移植后14 d,脂肪干细胞移植组腓肠肌组织中Pax7和MyoD的表达高于模型组和胶原蛋白组(P<0.05),移植后28 d,脂肪干细胞移植组腓肠肌组织中MyoD和MyoG的表达高于模型组和胶原蛋白组(P<0.05);⑥结果表明,脂肪干细胞移植到急性受损骨骼肌中能促进肌纤维的再生和功能恢复.
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运动神经元病患者骨骼肌纤维再生临床及病理研究
目的 观察运动神经元病患者骨骼肌纤维再生临床及病理特点.方法 选择经骨骼肌活检确诊为运动神经元病患者的临床资料及骨骼肌标本,将骨骼肌标本行HE染色、免疫组化染色,光镜观察肌纤维再生情况,部分留取电镜标本在电镜下观察骨骼肌纤维再生超微结构特点.结果 活检骨骼肌标本在组化及免疫组化染色中未见明显再生肌纤维,电镜下观察到运动神经元病患者骨骼肌内可见静止、活化的肌卫星细胞.结论 电镜下观察到运动神经元病患者肌肉内存在肌卫星细胞的活化、分裂及早期再生肌纤维.
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纤溶系统与肌纤维再生
无论肌肉的发育还是再生,都需要生肌纤维具有移行通过细胞外基质组织屏障的能力,纤维蛋白溶解系统是非常重要的细胞外基质降解系统,已经被证实在人类肌肉卫星细胞上表达,通过细胞外基质的降解参与MSC移行、分裂和融合过程.此外纤溶系统,特别是尿激酶型纤溶酶原激活系统还可以通过信号传导、调节细胞因子活性、影响肌肉损伤后炎症过程等多个通路参与肌肉发育和再生,有可能成为病理性肌肉损伤治疗的一个新方向.
关键词： 肌纤维再生 尿激酶型纤溶酶原激活物 细胞外基质 细胞因子 炎症 -
磷脂酰肌醇-3激酶在人骨骼肌纤维的表达
目的 研究磷脂酰肌醇-3激酶在肌病患者骨骼肌纤维的表达及其意义.方法 选择Duchenne型肌营养不良(Duehenne muscular dystrophy, DMD)9例、Becker假肥大型肌营养不良(Becker muscular dystrophy, BMD)6例、先天性肌营养不良(congenital muscular dystrophy, CMD)3例、多发性肌炎(polymyositis, PM)5例,开放式骨骼肌活检,连续冰冻切片,苏木精-伊红(hematoxylin and eosin, HE)、三磷酸腺苷酶(adenosin triphosphatase, ATPase)组织化学染色;抗-磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、抗-神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule, NCAM)、抗-结蛋白(desmin)单克隆抗体免疫组织化学染色,病理分析.结果 [1]PI3K在再生早期小径肌纤维膜上表达,伴随再生肌纤维的成熟PI3K表达消失;[2]PI3K在幼儿肌纤维膜上表达显著;[3]PI3K在动静脉平滑肌上表达显著.结论 PI3K可能在人骨骼肌纤维再生早期起重要作用.
