首页 > 文献资料
-
脆性组氨酸三联体、甲基-CpG-结合蛋白2异常表达与宫颈癌变的关系及交互作用
目的 探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)与甲基-CpG-结合蛋白2(MeCP2)异常表达在宫颈癌变中的交互作用.方法 选择经病理学确诊的宫颈鳞状细胞癌(SCC)患者73例,宫颈上皮内瘤样变(CIN)患者113例(CIN Ⅰ 45例;CINⅡ/Ⅲ68例)和宫颈正常(NC)妇女60人作为研究对象,分别采用荧光定量PCR和Western blot检测宫颈组织中FHIT及MeCP2 mRNA和蛋白的表达量,甲基化特异性PCR(MSP)检测FHIT基因CpG岛甲基化状态.利用SPSS 20.0软件进行相关资料的Kruskal-Wallis H检验、x2检验、x2趋势检验和Spearman秩相关分析,应用广义多因子降维模型(GMDR)评价交互作用.结果 随着宫颈癌变的进展,FHIT基因CpG岛甲基化率(x2=18.64,P＜0.001,趋势检验x2=18.08,P＜0.001)逐渐升高,FHIT mRNA (H=27.32,P＜0.001;趋势检验x2=12.65,P＜0.001)与蛋白(H=47.10,P＜0.001;趋势检验x2=29.79,P＜0.001)表达量逐渐降低,且FHIT基因CpG岛甲基化率与FHIT蛋白表达量呈负相关(r=-0.226,P＜0.001).MeCP2mRNA(H=26.19,P＜0.001;趋势检验x2=11.81,P=0.001)与蛋白(H=69.02,P＜0.001;趋势检验x2=47.44,P＜0.001)表达量均逐渐升高.MeCP2蛋白表达量与FHIT mRNA Ct比值呈正相关(r=0.254,P＜0.001),与FHIT蛋白表达量呈负相关(r=-0.213,P=0.001).GMDR交互作用分析表明,在CINⅡ/Ⅲ组,MeCP2蛋白高表达、FHIT基因CpG岛甲基化及mRNA和蛋白低表达存在交互作用;在SCC组,MeCP2 mRNA和蛋白高表达、FHIT基因CpG岛甲基化及mRNA和蛋白低表达存在交互作用.结论 MeCP2 mRNA和蛋白高表达、FHIT基因CpG岛甲基化及mRNA和蛋白低表达,均可增加宫颈癌变的风险,且在宫颈癌变中具有协同作用.
关键词： 宫颈癌变 脆性组氨酸三联体 甲基-CpG-结合蛋白2 -
结、直肠癌中FHIT和p53蛋白表达及其临床病理学意义
目的 探讨脆性组氨酸三联体(FHET)和p53蛋白在结、直肠癌中的表达及临床病理学意义.方法 采用EnVision两步法检测76例结、直肠癌和癌周黏膜组织及30例腺瘤标本中的FHlT和p53蛋白表达.结果 FHlT在结、直肠腺癌中表达降低或缺失占51.3%,在癌组织学分级中高分化占10%,与中分化56%或低分化62.5%相比差异显著(P《0.05);癌组织中FHIT表达降低或缺失明显高于腺瘤组(P《0.01).结、直肠癌中p53的阳性率为51.3%,明显高于腺瘤组的10%(P《0.01).中、晚期(Dukes分期C+D)结、直肠癌组织p53的表达率61.7%,高于早期组(Dukes分期A+B)的34.5%(P《0.05).结、直肠癌组织中FHIT表达降低或缺失与p53表达之间无明显相关性.结论 部分结、直肠癌和少数腺瘤FHIT表达降低或缺失,提示可能在结、直肠癌的发生、发展过程中起重要作用.
-
FHIT和p53在子宫内膜癌中的表达及其意义
子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,约占女性生殖道肿瘤的20%～30%,近年来,EC发病率有上升趋势,但其发生、发展机制仍不明确.随着癌基因和抑癌基因的研究进展.人们已认识到EC的发生是一个多因素、多阶段、多基因变异累积的复杂过程.
-
非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体和p53的表达及意义
我们检测非小细胞肺癌的脆性组氨酸三联体(FHIT)和p53的蛋白表达水平,分析它们与临床病理特征及预后的关系,旨在了解FHIT蛋白的改变与肺癌的发生发展的关系,并为临床诊治肺癌提供理论依据.
-
FHIT蛋白在原发性肝癌的表达及意义
脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)近在国外成功分离并定位于染色体3p142.FHIT基因位于人类基因组中常见的脆性位点,其异常表达与许多肿瘤如肺癌、乳腺癌、头颈癌、食道癌等有关.本文研究FHIT蛋白在原发性肝癌的异常表达,并探讨其与临床病理指标的可能关系.
-
脆性组氨酸三联体基因蛋白表达与炎症性肠病的临床关系
目的:探讨脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine trail,FHIT)蛋白在38例溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)、25例Crohn's病、11例UC相关性腺癌和13例正常对照组中的表达情况.方法:标本常规石蜡包埋,采用免疫组化法检测FHIT在UC、Crohn's病、UC相关性腺癌和正常对照组中的表达.结果:38例UC中,25例FHIT蛋白表达阴性;25例Crohn's病中,19例表达阴性;11例UC相关性腺癌中,6例表达阴性.FHIT蛋白在UC和正常对照组(71.43% vs 7.69%,x2=18.80,P＜0.01)、Crohn's病和正常对照组(76%vs 7.69%,x2=18.88,P＜0.01)、UC相关性腺癌和正常对照组(54.55% vs 7.69%,X2=7.75,P＜0.05)间均有显著性差异;而在UC和UC相关性腺癌中无显著性差异(54.55% vs 71.43%,X2=0.05,P＞0.05).结论:FHIT蛋白在炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)和UC相关性腺癌中呈低表达或缺失,提示该基因可能与IBD和UC相关性腺癌发生有关.
-
外源性导入抑癌基因FHIT对肝癌细胞Hep3B生长的影响
目的:研究外源性人脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的高表达对人肝癌细胞Hep3B生长的影响.方法:构建一个包含FHIT基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)/FHIT,体外转染人肝癌细胞Hep3B,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白印迹(Western blot)分别检测目的基因不同水平的表达,通过细胞生长试验、流式细胞仪分析技术检测细胞转染前后的细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的变化.结果:转染pcDNA3.1(+)/FHIT后Hep3B细胞的FHIT-mRNA,FHIT蛋白表达阳性,转染后对Hep3B细胞的生长有抑制作用,早期细胞凋亡增加,与对照组比较差异有显著性(72.23±0.84 vx 54.36±0.78,53.17±0.52,P＞0.05).结论:FHIT基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞,在肿瘤基因治疗方面发挥作用.
-
反义c-myc寡核苷酸对转染FHIT基因胃癌细胞MKN28的影响
目的: 探讨脂质体介导的c-myc反义寡核苷酸对导入脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的胃癌细胞增殖及凋亡的影响.方法: 通过脂质体将重组FHIT基因PRC/CMV质粒和空载体转染到人类胃癌细胞系MKN28,并分别转染c-myc反义寡核苷酸,RT-PCR和Westen b1ot法检测FHIT基因的转染,Westem b1ot法检测细胞c-mHyc的表达,MTT法分析细胞增殖,AO/EB染色法和流式细胞分析技术检测细胞凋亡.结果: 转染FHIT基因后,MKN28细胞检测到FHIT基因片段和FHIT蛋白,而未转染的细胞及转染空载体的细胞未检测到FHIT基因片段及FHIT蛋白.转染c-myc反义寡核苷酸后.对MKN28细胞c.myc的表达有明显的抑制作用,并呈明显的时间依赖性;c-myc asODN对FHIT+MKN28细胞抑制率(F=177.480,P<0.05),凋亡率(F=41.500,P<0.05)和凋亡比例明显高于FHIT MKN28细胞.结论: 癌基因c-myc的表达抑制联合FHIT基因的表达可以发挥较强的抗肿瘤细胞作用,为多基因治疗肿瘤提供了理论基础.
关键词： 脆性组氨酸三联体 反义c-myc寡核苷酸 转染 凋亡 逆转录聚合酶链式反应 -
胃癌和胃癌前病变组织FHIT基因的杂合性丢失
目的:检测脆性组氨酸三联体基因在胃癌和胃癌前病变(肠上皮化生、不典型增生)中的杂合性丢失(LOH),分析LOH在胃癌发生中的作用.方法:用PCR的方法检测胃癌42例,不典型增生44例,肠上皮化生组织51例和自身正常对照组织中FHIT基因多态性位点D3S1234,D3S1300的LOH.结果:胃癌组、不典型增生组、肠上皮化生组在D3S1234位点的LOH发生率分别为32.4%(11/34),28.6%(10/35),10%(4/40);在D3S1300位点的LOH发生率分别为33.3%(12/36),32.4%(11/34),7.7%(3/39).胃癌组、不典型增生组在D3S1234和D3S1300位点的LOH发生率显著高于肠上皮化生组.胃癌组和不典型增生组之间在D3S1234,D3S1300位点的LOH发生率均无统计学差异.结论:FHIT基因的LOH可能是胃癌形成过程中的早期事件,在胃癌发生发展过程可能发挥了一定的作用.
-
外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导人胃癌MKN-28细胞凋亡的影响
目的:探讨外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法:通过脂质体将重组FHIT基因PRC/CMV质粒和空载体转染到人胃癌细胞MKN-28,Western blot法检测外源性FHIT蛋白的表达;使用不同浓度的长春新碱分别处理各组细胞,MTT法分析细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡:Western blot法检测细胞Bcl-2和Bax的表达.结果:转染FHIT基因后,MKN-28细胞检测到FHIT蛋白的表达;长春新碱处理48 h后,转染FHIT基因组细胞、转染空载体组细胞及未转染组细胞的凋亡率分别是30.967%±2.122%、11.033%±1.724%、10.733%±1.021%,转染FHIT基因组细胞凋亡更明显(F=142.045,P<0.05);转染FHIT基因组细胞经长春新碱处理后Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加.结论:外源性FHIT基因表达可以增强长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达有关.
-
河南食管癌高发区食管癌和癌旁正常组织中FHIT蛋白及其mRNA的表达
目的:检测食管癌高发区河南省林州市食管鳞癌及相应癌旁正常上皮组织的脆性组氨酸三联体(fragile histidinetriad,FHIT)蛋白和mRNA表达情况,从而探讨FHIT与该地区食管癌发生发展的关系.方法:采用卵白素-生物素-辣根过氧化物酶复合物(ABC)免疫组织化学染色法检测了42对食管癌高发区河南省林州市手术标本的癌组织和癌旁组织中FHIT蛋白表达水平.采用反转录PCR方法检测了16对食管癌和癌旁正常组织中FHIT基因mRNA表达状况.结果:FHIT蛋白在食管癌组织中缺失表达(24/42,57.1%)或弱表达(18/42,42.9%),与癌旁正常上皮组织中FHIT蛋白情况(40/42,95.2%)差异显著(P＜0.05).低分化癌组织中FHIT蛋白阴性表达率为(13/15,87%),分化癌组织阴性表达率为(11/27,41%),二者有显著性差异(P＜0.05).癌组织FHIT mRNA表达阳性率(4/16,25%)显著低于癌旁组织(12/16,75%)(P＜0.05).结论:FHIT基因可能在该地区食管癌的发生发展过程中起重要作用,是重要的抑癌蛋白,其表达减弱或缺失增加了食管癌的易感性.
-
FHIT基因蛋白表达与结直肠癌及癌前期病变的临床关系
目的:探讨脆性组氨酸三联体(fragile histidine trail,FHIT)蛋白在45例结直肠癌、36例结直肠腺瘤和23例正常对照组中的表达情况.方法:标本经40 g/L甲醛固定,常规石蜡包埋,采用免疫组化SP法检测FHIT在结直肠癌、结直肠腺瘤和正常对照组中的表达.结果:在45例结直肠癌中28例FHIT蛋白表达显著减少或缺失,5例表达减弱,12例表达阳性;其中结直肠癌DukesA,B和C期FHIT蛋白表达阴性比例分别为6/1l,5/12和17/22.在36例结直肠腺瘤中7例FHIT蛋白表达显著减少或缺失,4例表达减弱,25例表达阳性;其中结直肠腺瘤伴轻、中和重度不典型增生FHIT蛋白表达阴性比例分别为2/16,1/7和4/13.FHIT蛋白阴性表达在结直肠癌和正常对照组(62.2% vs 4.4%,x2=25.33,P＜0.01)、结直肠癌和结直肠腺瘤(62.2% vs 19.4%,x2=14.19,P＜0.01)、结直肠癌未伴淋巴转移的Dukes A+B期和已伴淋巴转移的C期(47.8% vs 77.3%,x2=4.28,P＜0.05)间均有显著性差异,而在结直肠腺瘤伴轻度不典型增生和中、重度不典型增生(12.5% vs 25.0%,X2=0.84,P＞0.25),结直肠腺瘤和正常对照组(19.4%ys 44%,x2=3.51,P＞0.05)中无显著性差异.结论:FHIT蛋白在结直肠癌中呈低表达或缺失,且FHIT低表达与转移状况有相关关系,提示该基因可能与结直肠癌的发生发展有关.
-
FHIT及nm23-H1基因编码蛋白表达与胃癌临床病理生物学行为
目的:观察脆性组氨酸三联体(FHIT)基因和nm23基因在胃癌中的表达,探讨其与胃癌临床病理因素的关系.方法:采用PV9000免疫组化二步法检测98例胃癌组织中FHIT和nm23蛋白的表达.结果:FHIT和nm23在胃癌中表达率分别为38.8%(38/98)和33%(28/87).FHIT蛋白的缺失在胃癌中占62.1%.胃癌中FHIT的缺失与组织学类型,Lauren分型和淋巴结转移相关(P＜0.05);临床病理分期愈晚,FHIT蛋白表达缺失率愈高,但无显著差异(P＞0.05).nm23蛋白阳性表达与临床病理分期,淋巴结转移呈负相关(P＜0.05).结论:胃癌组织中FHIT蛋白的缺失是频发事件,FHIT可能是胃癌发生中重要的侯选抑癌基因.FHIT及nm23基因编码蛋白在胃癌中的表达与胃癌淋巴结转移密切相关,且可能共同起作用,可作为临床预测转移及估计预后的重要指标.
-
非小细胞肺癌Ⅰ期脆性组氨酸三联体基因蛋白表达研究
脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad,FHIT)位于3p14.2,跨越人类染色体常见脆性位点FRA3B[1].近年研究发现,人类肺癌、胃肠道癌、乳腺癌及头颈部癌中存在FHIT基因及其转录产物的异常,多数学者认为FHIT可能是肿瘤抑制基因[2,3].FHIT是组氨酸三联体(histidine triad,HIT)基因家族成员之一,由10个外显子组成,其中第5～9外显子为编码区,其编码的蛋白产物(Fhit)可能的功能之一为具有多磷酸二腺苷水解酶活性,尤以AP3A为适底物,该活性依赖于FHIT基因外显子(exon)E8编码的保守性组氨酸三联体结构[4].FHIT基因异常转录可使其编码的蛋白质Fhit在细胞中不表达,作为AP3A水解酶,Fhit功能失活使AP3A或类似复合物在细胞中水平升高,从而引起细胞癌变.我们通过免疫组化方法对62例Ⅰ期NSCLC进行检测,以期进一步探讨Fhit蛋白缺失与NSCLC发病及病理类型的关系.
-
胆囊癌中脆性组氨酸三联体基因表达缺失的研究
抑癌基因的改变在肿瘤的病理形成过程中具有重要作用,我们采用免疫组化方法研究脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad ,FHIT)基因与胆囊癌发生发展的关系,现报告如下.
-
C-erbB-2和脆性组氨酸三联体在病理性瘢痕组织中的表达及意义
病理性瘢痕分为增生性瘢痕和瘢痕疙瘩.病理性瘢痕与肿瘤有共性;在细胞学上,它们都是以细胞增生为主的疾病;就其本质而言,可能都是癌基因或者抑癌基因异常表达的结果.
-
HPV16基因整合与FHIT蛋白缺失在宫颈癌变中的作用
目的 探讨HPV16的基因型整合状态及FHIT基因缺失在宫颈癌发生发展中的作用及相关性.方法 选取44例宫颈癌、58例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和20例宫颈正常组织的患者,免疫组化检测宫颈FHIT蛋白的表达;并用多重PCR法检测HPV16E2/E7表达.结果 122例单一HPV16阳性标本HPV16总整合率为78.69％,在正常宫颈组织、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈癌中整合率分别为60.00％、66.67％、75.00％、86.96％和88.63％,随病变加重,整合率增强,组间差异有统计学意义(P＜0.05);FHIT蛋白的总缺失率为43.44％,FHIT蛋白在正常宫颈组织、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈癌中的缺失率分别为15.00％、20.00％、25.00％、43.48％和72.73％.FHIT蛋白的缺失率,随病变加重,缺失率增高,组间差异有统计学意义(P＜0.05).FHIT蛋白缺失在不同HPV16整合时不同,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HPV16基因整合和FHIT蛋白缺失在宫颈癌的发生、发展中起重要作用,HPV16基因整合可能通过诱导FHIT基因低表达从而促使宫颈癌发生发展.
-
子宫颈癌及子宫颈上皮内瘤变组织脆性组氨酸三联体基因的表达
脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因,是近年来发现的候选抑癌基因[1].本研究通过免疫组织化学的方法,从蛋白水平检测FHIT基因在宫颈浸润性癌(宫颈癌)及宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达,探讨FHIT基因在宫颈癌发生、发展中的作用,为宫颈癌的早期诊断提供有益线索.
-
乳腺癌中脆性组氨酸三联体异常甲基化能下调其mRNA及蛋白的表达
目的 通过检测脆性组氨酸三联体( fragile histidine triad,FHIT)基因在乳腺癌组织和正常乳腺组织中的异常甲基化及其mRNA和蛋白表达情况,探讨FHIT基因在乳腺癌发生发展中的作用,为乳腺癌生物治疗及判断预后提供实验依据.方法 分别应用免疫组织化学SP法、逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和甲基化特异性PCR( methylation specific PCR,MSP)检测50例乳腺癌组织和距离肿瘤5 cm以外的正常乳腺组织中FHIT蛋白及其mRNA的表达情况.对FHIT表达与乳腺癌临床病理指标的关系采用卡方检验,对FHIT甲基化与蛋白、mRNA表达的关系进行Spearman相关性分析.结果 免疫组织化学染色显示:FHIT蛋白在乳腺组织细胞浆内呈棕黄色颗粒状分布.FHIT在乳腺癌和正常乳腺组织中的阳性表达率分别为32.0％( 16/50)和88.0％(44/50),差异有统计学意义(x2=32.667,P=0.000)；RT-PCR结果显示:在乳腺癌和正常乳腺组织中均有FHIT mRNA的表达.乳腺癌组织中FHIT条带吸光度(D)值与相应的β-actin条带的D值的比值(0.1081±0.0128)明显低于正常乳腺组织(0.2088+0.0137),差异有统计学意义(P＜0.05),表明乳腺癌组织中FHIT的表达量减少；MSP扩增结果显示:乳腺癌组织和正常乳腺组织的甲基化率分别为46.0％(23/50)、12.0％ (6/50),差异有统计学意义(x2=14.036,P=0.000).FHIT基因甲基化率与蛋白表达、有无淋巴结转移有关(P＜0.05),而与肿瘤大小、组织学分级及TNM分期无关(P＞0.05).结论 FHIT 基因在乳腺癌中的甲基化能下调其mRNA及蛋白的表达.
-
与肺癌有关的FHIT基因
脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad，FHIT)是Ohta等发现和拟定的抑癌基因，位于3p14.2上。该基因及其FRA3B易脆位点，是近年来肿瘤研究中的一个热点，在正常人体组织中大部分都存在有FHIT基因的低水平表达，故认为FHIT基因是众多组织器官的抑癌基因，加之研究发现FHIT基因异常可能与环境有一定关系，FHIT基因在肿瘤发生中所起的作用逐渐受到……
