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改装一次性集痰器用于支气管肺泡灌洗术
在纤维支气管镜检查中,支气管肺泡灌洗是诊断呼吸系统疾病常用的检查项目.[1,2]但传统的灌洗操作中,玻璃灌洗液回收器经常漏气致灌洗液回吸不彻底,且刷洗、消毒不彻底.[3,4,5]近年我们把一次性集痰器稍作改装,制成了一种简单、方便、安全、经济的支气管肺泡灌洗液回收器,效果满意,介绍如下.
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特发性肺纤维化患者支气管肺泡灌洗液中特异性蛋白标记物研究
目的 分析特发性肺纤维化(IPF)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白质谱变化,寻找特异性蛋白标记物,评价这些标记物对IPF的诊断价值及临床应用前景.方法 收集IPF患者及对照组BALF标本,应用表面增强激光解析/电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选差异蛋白.通过非线性支持向量机方法建立诊断模型,并留一交叉验证法评估各模型的预测效果.结果 IPF患者BALF中筛选出8个表达有显著差异的蛋白质峰,其中检测效率高的4个低表达蛋白质峰质荷比(m/z)分别为1947.634、1975.519、2488.535及4950.230.以这4个蛋白质峰组合建立诊断模型,其特异性和敏感性均为100%.结论 应用SELDI-TOF-MS技术分析获得的低分子量蛋白质峰在诊断中具有较高的灵敏度和特异性,这些小分子可能在IPF发病中起重要作用.
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急性呼吸窘迫综合征患者肺泡微环境对肺成纤维细胞生物学活性的影响
目的 探讨不同程度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺泡微环境的变化对肺成纤维细胞(LF)的影响.方法 以2014年1月至2016年12月绍兴市人民医院重症监护病房(ICU)收治的58例符合ARDS诊断标准的患者,依据患者氧合指数和柏林定义标准将患者分为轻度组(26例)、中度组(15例)、重度组(17例),另纳入10例行机械通气但无肺部疾病患者作为无肺损伤组.所有入选患者均进行支气管肺泡灌洗,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)标本,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其中白细胞介素1β(IL-1β)、角质细胞生长因子(KGF)和肝细胞生长因子(HGF)水平,并进行蛋白定量及细胞计数.同时,体外培养肺成纤维细胞系MRC-5细胞,与各组患者BALF共培养,采用Transwell法检测细胞迁移能力,采用Western-blotting法检测各组细胞CollagenⅠ和血小板源性生长因子α受体(PDGF-Rα)表达.结果 与无肺损伤组比较,ARDS轻度组、中度组及重度组患者的IL-1β[12(8,21)、776(449,943)、802(691,1 004)、886(548,1 130)ng/L]、KGF [2.0(1.0,2.2)、19.0(15.8,24.5)、41.4(36.2,57.3)、64.7(49.2,82.1)ng / L]、HGF [90(75,106)、514(373,785)、867(674,1 248)、940(660,1 344)ng/L]、蛋白含量[(0.09 ± 0.03)、(0.29 ± 0.10)、(0.45 ± 0.09)、(0.68 ± 0.16)g/L]及细胞总数[(2.4 ± 0.6)、(16.5 ± 2.1)、(17.8 ± 2.0)、(18.2 ± 2.0)× 109个/mL]均明显升高(Z=26.182、55.871、36.354,F=72.860、177.291,P均<0.05),且与重度组患者比较,轻度组及中度组患者的KGF水平及蛋白含量显著降低(P均<0.05),轻度组仅HGF水平及总细胞数明显降低(P均<0.05),而ADRS各组间IL-1β比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05).同时,与无肺损伤组比较,ARDS各组间趋化指数均明显升高(F=12.291,P=0.003),且重度ARDS组患者明显高于轻度及中度组患者(P均<0.05).四组间CollagenⅠ蛋白及PDGF-Rα蛋白比较,差异均有统计学意义(F=358.943,P=0.001;F=4.574,P=0.002).ARDS各组CollagenⅠ蛋白明显高于无肺损伤组,且中度、重度组明显高于轻度组(P均<0.05).而PDGF-Rα蛋白在无肺损伤组和轻度组几乎无表达,但在中度、重度组均有明显表达(P均<0.05).结论 随着ARDS程度的加重,BALF中KGF、HGF明显上升,BALF可通过诱导LF表达PDGF-Rα和CollagenⅠ,促进LF的迁移与分化.
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自动化浆膜腔积液和脑脊髓液以及其他体液细胞计数及分类的性能评估
目的 评估自动化体液模式对不同类型的体液标本进行细胞计数与分类的可靠性.方法 收集2009年5月至2013年3月北京协和医院门诊及住院患者的150份体液标本,包括75份浆膜腔积液、24份脑脊髓液(CSF)、44份良性支气管肺泡灌洗液(BALF)和7份引流液及穿刺液,通过XE-5000全自动血液分析仪体液模式进行细胞计数和分类,结合人工镜检法、瑞氏-吉姆萨及苏木素-伊红染色法评估仪器法的可靠性,通过组内相关系数(ICC)、Spearman相关、Passing-Bablok回归及ROC曲线进行数据分析.结果 浆膜腔积液和CSF的自动化红细胞和有核细胞计数优于BALF(ICC ＞0.9518与ICC＜0.8986),浆膜腔积液的自动化细胞分类计数(ICCMN＞0.8413,ICCPMN＞0.8950,ICCEOS ＞0.9048,ICCHF ＞0.7715)优于CSF和BALF(ICCMN＜0.7276,ICCPMN＜0.7525,ICCEOS＜0.8421,ICCHF ＜0.1615).细胞数≤490×106/L的14份标本(包括8份CSF、5份浆膜腔积液以及1份引流液),其精密度较差(CV＞20％).高荧光强度细胞用于预测体液中大细胞(巨噬细胞、间皮细胞、肿瘤细胞)和肿瘤细胞的曲线下面积分别为0.806和0.654,HF预测大细胞的敏感度和特异度分别为82％和76％.恶性标本HF水平为19.4％(0％ ～100.1％),低于良性BALF标本的31.1％(2.3％ ～260.7％),差异有统计学意义(Z=-2.836,P＜0.05);除外良性BALF标本,其他良性标本HF为1.6％(0％～85％),明显低于恶性标本的19.4％ (0％ ～ 100.1％),差异有统计学意义(Z=-2.276,P＜0.05).结论 XE-5000体液模式用于浆膜腔积液的细胞计数与分类优于CSF和BALF,HF用于大细胞的预测优于肿瘤细胞.
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儿童肺泡灌洗液中肺炎支原体RNA恒温扩增技术检测及临床应用
目的 通过采用RNA恒温扩增(SAT)技术,对肺炎患儿的肺泡灌洗液标本进行检测,并结合体外培养实验,评估该技术检测活菌的能力,为SAT技术在肺炎支原体(MP)肺炎诊疗中的应用提供理论支持.方法 收集天津市儿童医院2015年10月至2017年12月临床确诊为社区获得性肺炎的572例患儿的肺泡灌洗液,利用MP核酸定量和SAT技术检测MP感染情况,并对161份肺泡灌洗液进行分离培养,培养阳性菌液中持续加入高浓度抗生素,同时进行MP核酸定量和SAT技术检测.结果 MP核酸定量和SAT技术的MP阳性检出率分别为74.7％(427/572)和71.9％(411/572),两种检测方法具有很高的一致性(χ2=1.142,P=0.285).根据SAT技术的检测结果,572例肺炎患儿中男性患儿阳性率为72.7％(224/308),女性患儿阳性率为70.8％(187/264),不同性别患儿阳性率差异无统计学意义(χ2=0.252,P=0.616).不同年龄患儿MP检出阳性率不同,婴幼儿(≤3岁)阳性率为56.6％(94/166),学龄前期和学龄期儿童(4～14岁)阳性率为78.1％(317/406),学龄前期和学龄期儿童的阳性率明显高于婴幼儿,差异有统计学意义(χ2=26.811,P=0.000).通过SAT技术检测活菌的能力的实验发现,MP阳性培养液中连续5 d加入5 MIC阿奇霉素后,MP核酸定量检测阳性,SAT技术检测则为阴性.结论 SAT技术具有高灵敏度和高特异性,并且可以鉴别"死菌""活菌",可以快速准确检测MP感染情况,并能有效评估临床治疗效果.
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微量免疫荧光法检测mimivirus抗体的方法学建立
Mimivirus是2003年被发现的一种新的双链DNA病毒,寄生在水生单细胞动物阿米巴变形虫中.因其体积巨大,专家们初认为发现了一种细菌,因此将其命名为Mimivirus("酷似细菌的病毒")[1].在医院获得性肺炎患者的支气管肺泡灌洗液中已发现Mimivirus DNA,推测该病毒可能会导致人肺部疾病[2].国内目前尚鲜见Mimivirus检测方法的报道,为探讨Mimivirus与人体肺病的关系,亟待建立一种Mimivirus血清学检测方法.
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一种新型快速检出分枝杆菌变色液体培养基的评价
结核病的早期发现主要靠实验室诊断，涂片抗酸染色（或荧光染色）找抗酸杆菌阳性率低（10%～20%）；常用的固体培养基阳性率虽可达40%。但时间长。尽管BACTEC 460TB检测系统能快速检出分枝杆菌，但其仪器及试剂价格昂贵、且有放射性污染［1］。近年来，变色液体培养基在国外应用的越来越广泛［2］。我们将一种新型的分枝杆菌快速变色液体培养基与改良罗-琼（Lowenstein-Jensen,L-J）培养基进行了比较研究，现将结果报道如下。 一、材料 1.标准菌株：人型结核分枝杆菌、浅黄色分枝杆菌、草分枝杆菌、戈登分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、胞内分枝杆菌、马耳摩分枝杆菌、爱知分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、偶发分枝杆菌、副偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌龟亚种、龟分枝杆菌脓肿亚种、耻垢分枝杆菌、次要分枝杆菌、非洲分枝杆菌、胃分枝杆菌、不产色分枝杆菌、金色分枝杆菌、新金色分枝杆菌、鸟分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、卡介苗和蟾蜍分枝杆菌由我们研究所保藏。 2.标本：141份临床标本，其中139份痰、1份伤口脓性分泌物和1份支气管肺泡灌洗液。 3. 快速变色液体培养基：由深圳市怡百世生物技术有限公司提供。其主要成分为磷酸盐缓冲液、谷氨酸钠、多种维生素、多种微量元素、甘油、马血清、变色剂以及甲氧苄氨嘧啶、氨苄青霉素、多粘菌素B、两性霉素B和萘啶酸等多种抗生素。 4. 改良罗-琼（L-J）培养基：按照文献［1］配制。 二、方法 1.取对数生长期的标准人型结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌于含10%吐温80磨菌瓶中，磨菌混匀，用无菌磷酸盐缓冲液调其浊度为No1 MacFarland单位，再用无菌磷酸盐缓冲液作1∶10系列稀释，各分别接种100 μl于变色液体培养基和改良L-J培养基，37℃培养。当培养基变为紫红色或底层有紫色颗粒沉淀时，取少量液体涂片，进行金胺O荧光染色证实为分枝杆菌。 2. 标本处理：标本经2～4倍体积的4%NaOH消化20 min，离心10 min，沉淀经无菌磷酸盐缓冲液洗涤2次，再加入400 μl无菌磷酸盐缓冲液，混匀后，分别取200 μl接种于变色液体培养基和改良L-J培养基，37℃培养。 3．结果观察与报告：变色培养基接种后，每24 h观察1次，2周后每周观察3次，若培养基变为紫红色或底层有紫色颗粒沉淀，经荧光染色证实有分枝杆菌时，报告分枝杆菌生长阳性。改良L-J培养基接种后3 d、7d观察结果，以后每周观察1次。8周未见液体培养基变紫红色或底层有紫色颗粒沉淀，固体培养基上未见菌落，报告分枝杆菌培养阴性。
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支气管肺泡灌洗液细菌学和真菌学分析
肺部感染是临床常见疾病，病原种类多，院内感染的耐药性强。目前国内肺部感染的病原学诊断普遍采用咳痰或抽吸痰标本。而痰液易受上呼吸道正常定植微生物群污染，单纯痰培养结果没有确诊价值。支气管肺泡灌洗液（ bronchoalveolar lavage fluid，BALF）直接取材于病变部位，获得病原菌的机会多，并能大幅减少口咽部定植微生物群对标本的污染，提高病原菌的分离率，为临床诊断、治疗提供了更加可靠的依据。为了解北京大学第三医院BALF标本中病原菌和耐药情况，本研究进行回顾性分析，报道如下。
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加强结核分枝杆菌的检验
结核分枝杆菌(结核菌)，自20世纪80年代以来，引起的感染明显回升。世界上有三分之一的人口已经感染上结核菌，其中10%的人发展成活动型,每年大约有300万人死亡［1］。我国有4亿以上人口受到结核菌感染，每年至少有113万新结核病发生，死亡人数达25万［2］。结核菌对多种药物产生耐药性并呈上升趋势,根据我国25个省市对1 595例耐药性测定者中，结核菌初始耐药率为28.1%,继发耐药率为41.1%，耐3种及4种以上药物的占5.7%(全国结核流行病学抽样调资料汇编)。总之，结核菌感染率高、患病率高、耐药率高、死亡率也高，因此，加强结核菌的检测十分必要。实验室在探讨应用简便可靠的方法快速检出结核菌方面取得了很大成绩，但尚有不足，还存在着标本的收集和处理以及涂片镜检欠规范化，快速培养方法未广泛普及，快速检出的方法还不够完善。实验室应该从各个环节进一步加强对结核菌的检测，提高阳性率，为结核病的早期诊断、治疗和预防提供可靠依据。 一、标本的收集与处理 1.标本的收集： 收集标本应该使用一次性无菌容器，尽可能避免污染。收集痰标本不能使用蜡盒，因其易导致涂片结果假阳性［3］。咽拭子标本不适于涂片和培养结核菌。标本采集后应尽快送检，避免污染菌大量繁殖，除血液标本外，其他标本如不能及时送检，应放4℃冰箱保存。(1)痰标本：收集晨痰5～10 ml，连续3 d送检，一般不超过5 d。如果用于培养，好留取下呼吸道咳出的痰。(2)支气管肺泡灌洗液和支气管洗液：至少收集5 ml，置于无菌容器中，需要注意的是支气管镜不能被自来水污染，自来水中可能会有腐生菌，支气管刷洗液可放入10 ml米氏(Middlebrook)7H9肉汤中，其中含有1%～2%的牛血清白蛋白和0.5%吐温80。(3)胃灌洗液：禁食，晨起时留取标本，收集5～10 ml标本放入无菌容器中，不加防腐剂，在4 h内用碳酸钠调pH 7.0。胃灌洗液标本中易含有腐生分枝杆菌，涂片时可能有假阳性结果。(4)血液：主要是免疫功能低下，特别是艾滋病（AIDS）病人的血液标本，主要依靠BACTEC血培养瓶进行培养，一般不要把血液直接接种到固体培养基上，如果血液标本需要运送，则用肝素和聚茴香脑磺酸钠(SPS)抗凝，不能用乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA）抗凝。(5)尿液：晨起第1次尿，留取尿前应清洗外生殖器，既可导尿也可留取中段尿。24 h贮存尿和导尿袋中的尿都是不合格的标本，标本量不应少于40 ml。(6)粪便：粪便标本应收集在无菌、无蜡、1次性使用的清洁容器内，不能少于1 g。(7)体液：脑脊液、胸腹水和心包积液应采用无菌方法收集，血性标本应用SPS抗凝，脑脊液和腹膜透析液一般只有少量分枝杆菌，较多的标本量可增加阳性率，脑脊液至少需要2 ml。(8)组织标（淋巴结、皮肤、其他活组织材料）：无菌方法取1 g组织放入无菌容器内，加入适量无菌盐水，不加固定剂和防腐剂，福尔马林浸泡的标本不能应用。
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应用GeneXpert MTB/RIF技术检测肺泡灌洗液对菌阴肺结核的临床诊断价值
目的 探讨应用GeneXpert MTB/RIF方法检测支气管肺泡灌洗液对菌阴肺结核的临床诊断价值.方法 选取黑龙江省齐齐哈尔市结核病防治院2016年6-12月拟诊为初治菌阴肺结核的52例患者作为研究对象.对研究对象进行支气管镜检查,留取肺泡灌洗液,应用GeneXpert MTB/RIF方法进行检测;同时进行肺泡灌洗液涂片检测、固体培养和药物敏感性试验(简称“药敏试验”).结果 52例研究对象应用GeneXpert MTB/RIF检测有36例阳性,阳性率为69.2％(36/52),其中1例对利福平耐药;涂片检查阳性率为23.1％(12/52);固体培养阳性率为73.1％(38/52),测定1例对利福平耐药,与GeneXpert MTB/RIF检测为同一例患者.以固体培养法作为金标准,GeneXpert MTB/RIF检测的敏感度为92.1％[35/(35-+3)],特异度为91.7％[11/(11+1)],阳性预测值为97.2％[35/(35+1)],阴性预测值为78.6％[11/(11-+-3)],Kappa值为0.81,提示两者具有较好的一致性.结论 应用GeneXpert MTB/RIF检测菌阴肺结核患者支气管肺泡灌洗液的效能与固体培养法一致,具有较高的临床诊断价值.
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三种方法检测痰液和肺泡灌洗液中结核分枝杆菌阳性率的比较
目的 比较3种不同方法检测痰液和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)标本中结核分枝杆菌(MTB)的阳性率,评估检测BALF在肺结核诊断中的临床应用价值.方法 收集深圳市第三人民医院2013年7月至2015年6月行支气管镜肺泡灌洗术的肺结核患者728例,对患者的痰液和肺泡灌洗液标本的涂片抗酸杆菌(acid-fast bacilli,AFB)染色镜检(简称“AFB镜检”)、MTB实时荧光定量核酸扩增检测技术(简称“Xpert MTB”)和MTB快速液体培养(简称“MTB培养”)检测结果进行回顾性分析,比较3种不同方法检测MTB的阳性率.率的比较采用x2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 患者痰液与BALF标本的AFB涂片镜检的阳性率分别为36.0％ (262/728)、36.1％ (263/728);Xpert MTB检测的阳性率分别为47.8 ％ (348/728)、52.1％(379/728);MTB培养的阳性率分别为57.0％ (415/728)、58.4％ (425/728);组间比较差异无统计学意义(x2涂片=0.03,P=0.9 58;x2培养=0.22,P=0.641;x2pert=2.64,P=0.104).所有标本MTB培养阳性率(57.7％,840/1456)、Xpert检测阳性率(49.9％,727/1456)和AFB镜检阳性率(36.1％,525/1456)进行两两比较,差异有统计学意义(AFB镜检与Xpert比较x2=57.17,AFB镜检与MTB培养比较x2=136.80,Xpert与MTB培养比较x2 =17.64,P值均＜0.01).结论 同一种检测方法检测痰液与BALF的阳性率差异无统计学意义,而MTB培养的阳性率高于AFB镜检与Xpert MTB检测.
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艾滋病并发菌阴肺结核诊治中支气管肺泡灌洗液检测的应用进展
结核病是人类获得性免疫缺陷综合征(简称“艾滋病”)患者常见的机会性感染和主要的死亡原因之一.肺结核或肺外结核并发艾滋病后症状不典型,且患者痰菌常为阴性,给诊断和治疗时机的判断带来了很大困难,从而导致病情进一步恶化,死亡率增高.对于HIV阳性患者,进行结核病的筛查在病程初期尤为重要.近年来,随着纤维支气管镜技术的不断进步,支气管镜肺泡灌洗液检查被广泛地应用于艾滋病并发痰菌阴性肺结核的临床诊断中.笔者从细菌学方法、分子生物学方法、酶联免疫方法、生物化学检查、细胞因子检测等方面将支气管肺泡灌洗液在艾滋病并发菌阴肺结核的诊断和治疗中的作用进行综述.
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支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物检查诊断肺鳞状细胞癌价值分析
目的:探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、可溶性细胞角蛋白19片段(CYFRA 21-1)、癌胚抗原(CEA)浓度对肺鳞状细胞癌的诊断、TNM分期及预后的临床意义.方法:选择经组织病理学和(或)细胞学确诊的40例肺鳞状细胞癌患者作为观察组,40例肺部炎性病变患者作为对照组,采用日本Pentax EPS 3500型电子支气管镜,经气管镜收集BALF,应用酶联免疫吸附法测定两组患者BALF及血清中SCC浓度,应用化学发光法测定两组患者BALF及血清中CYFRA21-1及CEA的浓度.结果:①观察组BALF中SCC[(49.6±15.4)vs.(2.1±0.8)μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(245.6±95.5) vs.(2.0±0.9)μg/L,P=0.000]、CEA[(15.6±5.5)vs.(3.6±1.4)μg/L,P=0.000],血清中SCC[(13.1±6.0)vs.(1.8±0.7)μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(20.4±10.3) vs.(1.9±0.9)μg/L,P=0.000]、CEA[(5.7 ±2.2) vs.(3.2±1.2) μg/L,P=0.000]均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).②观察组BALF中SCC[(49.6±15.4)vs.(13.1±6.0) μg/L,P =0.000]、CYFRA21-1[(245.6±95.5)vs.(20.4±10.3)μg/L,P=0.000]、CEA[(15.6±5.5)vs.(5.7 ±2.2) μg/L,P=0.000]均高于血清,差异有统计学意义(P＜0.01).③观察组Ⅲ～Ⅳ期BALF中SCC[(63.8±10.4) vs.(41.9±11.9) μg/L,P=0.000]、CYFRA 21-1[(328.3±61.0)vs.(201.1±80.0) μg/L,P=0.000]、CEA[(20.5±4.0) vs.(12.9 ±4.2)μg/L,P=0.000]均高于Ⅰ～Ⅱ期,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:BALF中SCC、CYFRA 21-1及CEA的检测对肺鳞状细胞癌的早期诊断有较好的临床价值,同时对临床分期、监测病情、判断预后也有一定临床价值,值得在临床上推广应用.
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可溶性晚期糖基化终末产物受体与哮喘阻塞性通气功能障碍的相关性研究
目的 探讨纤维支气管镜肺泡灌洗液中可溶性晚期糖基化终末产物受体水平在支气管哮喘患者阻塞性通气功能障碍中的临床意义.方法 选取支气管哮喘患者共40例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测患者纤维支气管镜肺泡灌洗液中可溶性晚期糖基化终末产物受体水平,使用方差分析法对结果进行比较和分析.结果 一组患者肺泡灌洗液可溶性晚期糖基化终末产物受体水平高于二组,差异有统计学意义(F=30.48,P<0.01).直线相关分析显示,一组sRAGE水平与一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)呈负相关(r=-0.738,P<0.05).结论 支气管哮喘患者肺泡灌洗液中可溶性晚期糖基化终末产物受体水平越高提示阻塞型通气功能障的病情越严重.
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气管内抽吸物细菌培养对呼吸机相关性肺炎诊断价值的荟萃分析
目的 探讨气管内抽吸物(EA)细菌培养是否能够替代BALF定量培养用于呼吸机相关性肺炎(VAP)的微生物学诊断和指导抗菌药物的使用.方法 以“呼吸机相关性肺炎”、“诊断”和“成人”为检索词,检索中国学术期刊全文数据库(CNKI)和万方数据库,以“ventilatore associated pneumonia"、“diagnosis"和“adult”为检索词检索PubMed和EMBASE数据库,收集1990-2011年发表的有关VAP微生物学诊断方法的中英文文章；以BALF定量培养作为参考标准,计算EA培养微生物学诊断VAP的阳性、假阳性、阴性和假阴性率,应用MetaDiSc l.4软件进行荟萃分析,计算各研究中EA诊断VAP的敏感度、特异度以及总体敏感度和特异度.结果 共检索到中英文文献1665篇,其中8篇文献纳入本研究,共561例患者,每例患者均同时做了EA和BALF细菌培养.如果将BALF定量培养作为参考标准,EA诊断VAP的敏感度为72％,特异度为71％.如果将EA定量和半定量培养分别进行分析,EA定量培养诊断VAP的敏感度为90％,特异度为65％,阳性预测值为68％,阴性预测值为89％；EA半定量培养诊断VAP的敏感度为50％,特异度为80％,阳性预测值为77％,阴性预测值为58％.结论 EA定量培养诊断VAP的敏感度较高而特异度较低,EA半定量培养的敏感度和特异度均较低,因此EA不能替代BALF作为独立的微生物学指标诊断VAP,但具有一定的临床参考价值.
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半乳甘露聚糖试验对非粒细胞缺乏患者侵袭性肺曲霉病的诊断价值
目的 探讨血清及BALF半乳甘露聚糖试验(GM试验)对非粒细胞缺乏患者侵袭性肺曲霉病(IPA)的诊断价值.方法 前瞻性收集2014年9月至2015年10月,温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科因咳嗽、呼吸困难和(或)发热等住院的1356例病例的临床资料,男879例,女477例,年龄18~96岁,平均(64±15)岁.排除慢性肺曲霉病及粒细胞缺乏病例.根据中国肺真菌病诊治专家共识分为IPA组与非IPA组.IPA组39例,年龄38~94岁,平均(68±12)岁;非IPA组1317例,为不符合IPA组的其他住院患者,年龄18~96岁,平均(64±15)岁.收集入选病例的临床资料、血清和BALF的GM试验结果,用SPSS20.0软件对数据进行统计分析.本研究为前瞻性病例对照研究.结果 1356例行血清GM试验,96例同时行血清和BALF GM试验.诊断为IPA 39例,确诊7例,临床诊断32例.血清GM试验对非粒细胞缺乏患者并发IPA诊断的敏感度、特异度、阳性预测值(PPV)及阴性预测值(NPV)分别为43.6%(17/39)、94.1%(1239/1317)、17.9%(17/95)和98.3%(1239/1261),受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.79.96例同时行BALF的GM试验,其临界值为0.8μg/L时的敏感度、特异度、PPV及NPV分别为86.7%(13/15)、60.5%(49/81)、28.9%(13/45)和96.1%(49/51);临界值为1.0μg/L时为86.7%(13/15)、74.1%(60/81)、38.2%(13/34)和96.8%(60/62).BALF和血清GM试验及两者联合应用时的ROC曲线下面积分别为0.87、0.75和0.90.结论 血清GM试验对非粒细胞缺乏患者并发IPA诊断的敏感度低,但阴性预测值较高;BALF GM试验临界值为1.0μg/L时的诊断效能高;同时进行BALF和血清GM试验可提高诊断效能.
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单项和联合指标在结节病诊断中的预测价值评价
目的 评价结节病诊断中各单项和联合诊断指标的预测价值.方法 回顾性分析北京协和医院2001年1月至2007年9月间88例初步诊断为结节病的患者的临床资料,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)和Bayes方法 对BALF细胞分类中的淋巴细胞比例、淋巴细胞亚群CD4/CD8、血清血管紧张素转换酶(ACE)等3项指标及其联合指标的诊断预测价值进行评价.采用ROC曲线评价各指标的诊断价值并确定指标的界定值,采用判别分析和ROC曲线评价联合指标的诊断价值.结果 在88例初步诊断为结节病的患者中,经活检确诊结节病59例(67%),男性16例(27%),女性43例(73%),平均年龄(48±10)岁;排除结节病29例(33%),男性12例(41%),女性17例(59%),平均年龄(49±13)岁.单项指标淋巴细胞比例、CD4/CD8值和ACE的ROC曲线下面积分别为0.64、0.74和0.69,CD4/CD8值在3项指标中的诊断效率高;通过ROC曲线的切点和坐标结合确定3项指标的佳界定值是淋巴细胞比例≥30%,CD4/CD8值≥4.0,ACE≥40 U/L;其阳性预测值分别为76.7%、80.4%和76.8%,表明CD4/CD8值在3项指标中的预测价值高.CD4/CD8值和ACE联合指标的曲线下面积为0.81,CD4/CD8值、ACE、淋巴细胞比例3项联合指标的曲线下面积为0.78,均大于单项指标的曲线下面积,前者的诊断效率优于后者.CD4/CD8值和ACE并联指标的阳性预测值为83.9%,串联指标的阳性预测值为90.5%,明显高于单项指标的相同评价指标,表明将CD4/CD8值和ACE联合起来诊断结节病的效率和预测价值均高于各单项指标.结论 BALF淋巴细胞亚群中CD4/CD8值仍然是辅助诊断结节病的有效单项指标,采用CD4/CD8值和ACE联合指标诊断结节病可提高诊断效率和预测价值.
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支气管肺泡灌洗液细胞类型与特发性肺纤维化预后的关联性研究
目的 探讨临床指标、肺功能和BALF中细胞类型与特发性肺纤维化(IPF)患者预后的关系.方法 经临床诊断的43例IPF患者进行肺功能和支气管肺泡灌洗检查.采用Kaplan-Meier检验比较组间生存率,采用Cox比例风险回归方法评价各参数的死亡风险度.结果 IPF患者存在限制性通气功能障碍和弥散功能障碍,FVC占预计值%、肺总量占预计值%和DLCO占预计值%分别为(61±18)%、(54±13)%和(48±14)%.在平均随访30.7个月内,IPF患者诊断后的中位生存期为28.5个月.糖皮质激素和(或)细胞毒类药物治疗不能改变IPF患者的预后.单因素Cox比例风险回归分析结果表明,FVC占预计值%、肺总量占预计值%、DLCO占预计值%、中性粒细胞和嗜酸粒细胞比例是影响IPF患者预后的因素,多因素Cox比例风险回归分析结果表明仅DLCO占预计值%和中性粒细胞比例是影响IPF患者预后的主要因素.结论 IPF患者主要为老年男性,存在限制性通气功能障碍和弥散功能障碍.糖皮质激素和(或)细胞毒类药物不能改变IPF患者的预后.DLCO占预计值%和中性粒细胞比例是影响IPF患者预后的主要因素,其中DLCO占预计值%和IPF患者的预后呈负相关,中性粒细胞比例和IPF患者的预后呈正相关.
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结节病支气管肺泡灌洗液中性粒细胞增多的临床意义
目的 探讨结节病患者BALF中性粒细胞增多的临床意义.方法 回顾性分析2000年1月至2014年10月北京大学第三医院收治的具有BALF细胞学分析结果并经病理确诊且未经治疗的72例结节病患者临床资料,其中男18例,女54例,年龄26~75岁,平均(50±10)岁,病程0.5个月至12年,中位数3个月,根据BALF中性粒细胞数量将患者分为中性粒细胞增多组(>3%)与非增多组(≤3%).分别比较2组患者临床表现、胸部影像学、肺功能、支气管镜下黏膜病变及BALF细胞分类等方面的差异.随访67例患者,随访时间为6~240个月,中位时间36个月,记录并比较2组治疗后胸部影像学变化及疾病复发情况.结果 72例患者中性粒细胞增多16例,其中Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期分别为4/10/2例;非增多56例,其中Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期分别为9/45/2例.与非中性粒细胞增多组患者比较,增多组肺部网格状影较多见(6/16,8/56),弥散功能障碍更常见(7/13,11/46),DLCO占预计值%下降更显著[(70±19)%,(89±23)%],BALF中CD8+淋巴细胞比例较高[(19±4)%,(11±4)%](P<0.05).中性粒细胞增多组与非增多组分别有16例(Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期为4/10/2例)和51例(Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期为9/41/1例)患者完成随访.与非增多组比较,增多组患者病情在糖皮质激素治疗后更倾向于发生恶化,且疾病更易复发.结论 结节病BALF中性粒细胞增多患者肺纤维化病变相对加重,弥散功能障碍更突出;糖皮质激素疗效欠佳,且疾病复发率增加,应更加严密监测此类患者病情变化.
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涎液化糖链抗原-6在不同类型的弥漫性间质性肺疾病患者血清和支气管肺泡灌洗液中的表达及临床意义
目的 检测涎液化糖链抗原-6(KL-6)在不同类型的弥漫性间质性肺疾病(DILD)患者血清及BALF中的表达水平并分析其临床意义.方法 纳入2012年2月至2014年9月中国医科大学附属第一医院就诊的DILD患者73例,其中男44例,女29例,年龄(61 ±8)岁.分为特发性肺纤维化(IPF)组34例,结节病Ⅰ期组10例,过敏性肺泡炎(HP)组15例,结缔组织病(CTD)组14例,检测患者肺功能,观察影像学特点并采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者KL-6在血清及BALF中的水平,比较二者相关性.结果 IPF组FVC占预计值％为(70±14)％、DLCO占预计值％为(49±13)％,均低于结节病Ⅰ期组[(82±6)％,(81±6)％,均P＜0.05],IPF组与CTD-ILD组相比差异无统计学意义(P＞0.05).IPF组BALF中性粒细胞比例为(9±7)％,高于结节病Ⅰ期组[(6±4)％,P＜0.05];淋巴细胞比例和CD4/CD8比值分别为(12±7)％和(1.5±0.8),均低于结节病Ⅰ期组[(23±13)％,(4.0±5.1),P ＜0.05].IPF组血清中KL-6水平为(858 ±516) U/ml,高于结节病Ⅰ期组[(339±168) U/ml]和HP组[(553±287) U/ml,P＜0.05)],但与CTD-ILD组无明显差别[(687±350) U/ml,P＞0.05].IPF组BALF中KL-6水平为(437±252) U/ml,高于其他各组(P＜0.05).相关性分析结果显示,IPF组血清KL-6水平与FVC和DLCO呈负相关(r=-0.46,-0.58,均P＜0.01),与高分辨率CT网格影及蜂窝影评分呈正相关(r=0.62,0.41,P＜0.05).结论 IPF患者血清和BALF中KL-6水平明显增高,血清KL-6水平与FVC、DLCO和高分辨率CT中网格影及蜂窝影评分相关,可能作为一项提示IPF临床诊断的指标.
