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体外SELEX法筛选淋病奈瑟菌适体方法的建立
淋病奈瑟菌的实验室检测包括直接涂片、培养、免疫抗原检测,基因诊断等方法.本研究旨在以SELEX筛选技术为基础,筛选对淋病奈瑟菌敏感、特异性高、结合力强而且不易受外界环境影响的的寡核苷酸分子,为建立相关的荧光标记适体(aptamer)技术奠定基础.
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萋一纳氏染色法与抗酸染色改良法的比较
痰标本直接涂片找抗酸杆菌是诊断肺结核病人的重要依据,抗酸染色方法较多,我们取其中 两种方法进行比较,现报告如下。材料与方法 所选病例均为我院1999年11月~2000年5月的住院及门诊痰菌阳性肺结核病人50例。取病人 清晨起床前后深咳痰约3~5ml,分别加入25ml的离心管内,加100g/L氢氧化钠4滴, 再加蒸馏水至管的2/3处,用纸包扎管口。高压灭菌1.05kg/cm220min,以3 000r/cm2离心300min,弃上清液。每份标本沉淀物平均涂厚涂片2张,常规火焰 固定,分别用萋一纳氏染色法(经典法)和改良法[1]进行染色,油镜观察找抗酸杆 菌,对抗酸杆菌阴性片以300个视野未找到抗酸杆菌为准。
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LPT在检测胸腹水中恶性肿瘤细胞的应用价值
胸腹水细胞学检查是一项重要的肿瘤诊断方法,传统上系采用直接涂片检查技术,但因细胞堆积、分布不均和含红细胞多等原因,恶性细胞检出率低.作为液基薄层细胞制片技术之一的利普制片系统(liqui-prep test,LPT),其操作方法简便,无需特殊仪器设备,尤其对细胞团块的处理优于其他液基薄层细胞制片技术,能提高胸、腹水中肿瘤细胞的检出率.本文通过LPT与传统涂片方法的比较,探讨LPT在检测胸腹水中的恶性肿瘤细胞的应用价值.
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两种幽门螺杆菌检测方法的结果比较
目前对幽门螺杆菌(HP)的感染诊断已有多种方法[1].在这些方法中,以直接涂片和快速尿素酶试验(HPVT)为简便、快速.为比较这两种方法的检测结果,我们于1998年12月~1999年12月,对门诊胃镜活检取出的胃粘膜标本同时用两种方法检测,结果如下.
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肺奴卡菌病2例诊治分析
奴卡菌病是由奴卡菌中的某些菌种引起的感染而命名,近年来随着器官移植的广泛开展,免疫抑制剂、糖皮质激素应用的增加及免疫缺陷病的增多,该病发病率有上升趋势,应引起广大医务工作者重视,由于该菌生长缓慢,培养时间较长,培养分离率低,故痰及穿刺液等临床标本直接涂片行革兰氏染色和弱抗酸染色非常必要,可做到早期快速诊断,争取早治疗,降低奴卡菌病病死率。奴卡菌病中以肺奴卡菌病为常见。现将我院诊治的2例肺奴卡菌病患者临床资料报道如下。
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提高痰涂片结核菌检验的体会
目前,WHO仍将直接涂片染色镜检作为结核病诊断与防治的一个支柱.该方法操作简便、易掌握、费用低、省时、减少"丢失"患者.现就提高涂片痰菌检出率体会讨论如下.
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涂片镜检结合胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值
目的:探讨结核分枝杆菌在BACTEC960中湿片镜检形态特征及胶体金法对结核杆菌复合群的鉴别价值。方法收集陕西省结核病防治院经BACTEC 960培养阳性920例,进行直接涂片湿片镜检、涂片抗酸染色、胶体金法菌群鉴定,并以PNB(对硝基苯甲酸)和TCH(噻吩-2-羧酸肼)鉴别培养基菌群检测为标准。结果结核分枝杆菌(MTB)在液体培养管中呈镜检呈索状排列98.3%(832/846);非结核分枝杆菌( NTM)镜检呈团状排列32.43%(24/74)、块状排列35.13%(26/74)、散在排列为24.32%(20/74)。胶体金法检测结核分枝杆菌的敏感性98.34%(832/846),特异性98.64%,阳性预测值99.87%,阴性预测值86.90%。结论湿片观察结核分枝杆菌在BACTEC 960培养管中形成索状排列,较涂片抗酸染色更简便、快速,对鉴定分枝杆菌有初筛作用。
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ZnSO4浮聚抗酸菌的实验观察
可疑结核病人标本涂片检查抗酸杆菌,仍是确诊结核病为快速、简便和可靠的检查手段,其缺点检出率较低.本文取可疑结核病人痰、胸水和支气管肺泡灌洗液(BAL)三样标本进行直接涂片、离心沉淀和ZnSO4浮聚法实验比较,结果如下:
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淋病奈瑟菌与几种革兰阴性双球菌的鉴别
淋病奈瑟菌(Neisseria gonorhoeae,NG)是性传播疾病(sexually transruitted disease, STD)重要的病-菌之一,有严格的人类寄生性,且对人体有很强的适应性和侵袭力.其所致的淋病也是国内发病率高的性病[1].在我国城乡基层医疗和疾病预防控制机构,淋病的实验室病-学诊断多依据生殖道分泌物直接涂片革兰染色,发现革兰阴性双球菌而诊断为淋病;亦有学者在论述野传统方法在临床细菌学鉴定中的作用冶中也推荐这一方法作淋病的快速诊断.依据生殖道分泌物直接涂片革兰染色,检验革兰阴性双球菌诊断淋病,虽然检验方法快速,成本低廉;但是,易发生误诊误治,女性患者淋病的误诊率更高,且不适宜于咽及直肠标本的检测[2],也不宜用于抗淋病治疗后疗效的复查.预防和控制性传播疾病的关键是提高淋病等临床诊断的准确性.
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348例女性阴道分泌物异常的病原体分析
为了了解我市女性阴道分泌物异常的病原体感染情况,我们对近期来我院妇科、皮肤性病科门诊就诊的女性进行病原体检测,结果报告如下.1 材料和方法1.1 一般资料:随机选择就诊女性病人348例,其中已婚301例,未婚47例.其中年龄20~30岁279例,31~40岁45例,40岁以上24例.1.2 材料:淋球菌选择培养基:WHO推荐用淋球菌培养基,Thayer-Martin(T-M)培养基(英国OXOIN公司生产).支原体培养基:由广东江门市众诚公司提供."立明"衣原体快速免疫法(Clearview Chlamyd,简称C-C快速法),试剂由UNIPATH公司提供.1.3 取材和方法:1.3.1 淋球菌检查:取宫颈分泌物行直接涂片,革兰氏染色,镜检和分离培养.
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痰液中心力衰竭细胞检查方法的改进
检查痰液中心力衰竭细胞原常用玻片法,将痰液直接涂片染色镜检,但在痰液粘稠度高时阳性率低.我们采用α-糜蛋白酶消化痰液后,离心,取沉淀物,染色镜检,明显提高了阳性率.现报告如下:
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86株流感嗜血杆菌分离鉴定及耐药性分析
目的 探讨适合临床实际的流感嗜血杆菌分离鉴定方法,并了解本地区社区获得性下呼吸道感染患者分离的流感嗜血杆菌耐药性.方法 常规培养并结合标本直接涂片革兰染色镜检挑选可疑菌落,卫星试验和V+X、V、X因子需求试验进行初步鉴定,法国生物梅里埃公司API NH鉴定板条进行复核鉴定;K-B法药敏,结果判断依据CLSI2010版标准;Nitrocefin法测定β内酰胺酶.结果86份流感嗜血杆菌培养阳性标本直接涂片镜检均为合格标本,并可见大量WBC吞噬和/或伴行革兰阴性小杆菌(形似流感嗜血杆菌).86株流感嗜血杆菌中产β内酰胺酶17株,产酶率19.8%;对测试的8种药物中,复方新诺明敏感性低(38.4%),其次为氨苄西林(73.3%)、阿奇霉素(83.7%)和头孢呋辛(84.9%),对亚胺培南、阿莫西林/克拉维酸、左旋氧氟沙星和头孢噻肟敏感性较好,均在95%以上.结论实验室人员应重视标本直接涂片镜检,并结合培养提高HIN分离率.HIN对常用抗生素的耐药率应引起临床医师重视,注意合理使用抗菌药物.
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230份痰标本涂片检查与培养结果分析
肺部病原菌的检出对肺部感染性疾病的诊断治疗具有重要意义.尽管目前痰培养还存在许多问题,但仍是常用并且具有参考价值的方法之一.在标本多,工作量大的情况下,如何获取合格的痰标本,既可以节省劳动力,又可节约成本,更可以减少病人的诊疗费用.所以应确保痰培养的准确性,避免假阳性和假阴性对临床治疗产生误导.现将我院2000年4~5月收集的230份痰标本进行直接涂片与培养结果比较分析如下:
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儿童淋病奈瑟氏菌的检测及探讨
近几年,淋病的发病率呈明显上升趋势,儿童淋病也不乏见,针对小儿患阴道疾病逐年增多的问题,我院特设了"小儿妇科"门诊,对可疑患儿的阴道分泌物进行细菌直接涂片及培养.开诊五年来,就诊人数近二万人,分离出淋病奈瑟氏菌近千例,淋球菌感染占阴道炎的培养阳性率的7.6%,为临床的诊断和治疗提供了及时可靠的依据.
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荧光PCR技术与直接涂片法对淋球菌检测的临床应用分析
目的:探讨二种检测淋球菌方法对疑似淋病男、女病例的临床应用效果。方法采用直接涂片法和荧光PCR法对116例疑似淋病病例进行检测,按不同症状和男、女组别观察实验室效果。结果直接涂片法阳性率症状较重者高于症状轻微者,具有非常显著性差异(P<0.01);荧光PCR法对症状轻微患者、女性标本的检出率高于直接法,二种方法具有非常显著性差异(P<0.01);对于症状较重患者、男性标本,二种方法则相差无几(P>0.05);直接涂片法对于症状较重患者、男性标本具有较高的阳性检出率,男性标本明显高于女性标本,具有非常显著性差异(P<0.01)。结论直接涂片法具有简便、快捷、直观的特点,但对女性的检出率较低。荧光PCR法敏感性高、特异性强,能有效提高检出率,对女性疑似病例具有较好的补充效果。
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超高倍显微镜应用于细菌性阴道病检测的评价
细菌性阴道病(bacterial vaginosis BV)发病率有逐年增高的趋势.鉴于BV对妇女及其妊娠的危害,在妇科、产科以及施行外科流产术前进行BV检查具有十分重要的意义.为了探讨适合常规使用的检测BV的方法,我们试用超高倍显微诊断系统进行直接检测,并与传统的直接涂片G染色法以及目前常用的特异性胺试验法进行比较,报告如下.
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2005年东营市河口区部分人员痰液直接涂片结核杆菌检查结果
[目的]探讨痰标本质量对结核杆菌阳性检出率的影响.[方法]将痰液直接涂片,萋-尼氏抗酸染色检查结核杆菌.[结果]768份痰液结核杆菌阳性检出率(12.24%)偏低.4种不同性状的痰液(干酪痰、血痰、黏液痰、唾液)结核杆菌阳性检出率分别为20.00%、0,13.76%、6.06%,差异有统计学意义(P<0.05);不同时间采集的痰液(晨痰、夜间痰、即时痰)阳性检出率分别为14.04%、12.38%、3.92%,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄段的人群(0~20岁、21~50岁、51~70岁、71岁以上)送检的痰液阳性检出率分别为4.08%、6.67%、2.14%、9.80%,差异有统计学意义(P<0.01);不同性别的人群(男、女)送检的痰液阳性检出率分别为12.82%、10.81%,差异无统计学意义(P>0.05);不同职业的人群(农民、工人、机关事业单位人员、学生)送检的痰液阳性检出率分别为11.97%、17.39%、13.33%、12.63%,差异无统计学意义(P>0.05).[结论]痰标本的质量直接影响结核杆菌的阳性检出率,留取合格的痰标本是提高结核杆菌阳性检出率的关键.
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盐都县初、高中毕业班学生肺结核感染状况调查
为了解肺结核在中学生中的感染现状, 2001年9月对盐都县20所中学在校的初、高中毕业班全体学生23 进行了结核菌素试验,并对强阳性反应者做进一步检查.1 对象与方法1.1 对象 2001年9月对盐都县20所中学在校的初、高中毕业班全体学生进行调查,合计12 866名.其中初中生7 654名,高中生5 212名;年龄15~20岁;1所县直中学964名,19所农村中学11 902名.1.2 方法使用上海生物制品研究所生产的结核菌素稀释液0.1 ml(5 IU),采用孟都氏法按说明书接种和判定结果.强阳性以上的学生摄胸片,并采集夜间痰、清晨痰、及时痰各1份直接涂片作抗酸杆菌检查.2 结果2.1 全部学生检查情况结核菌素试验合计检测初、高中毕业班学生12 672名,强阳性933名,强阳性率为7.36%;查出肺结核现症病人98例,患病率为0.77%,其中涂阳病人36例,涂阳患病率为0.26%.
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呼吸道分泌物真菌半定量培养和直接涂片检查同时进行的临床准确性探讨
目的 把握呼吸道分泌物真菌半定量培养和直接涂片检查同时进行的临床准确性.方法 建立呼吸道分泌物真菌半定量培养"12级法"和直接涂片检查"7级法";同时应用上述2种方法,对不同年龄段非呼吸道感染人群口咽部真菌的阳性率和数量进行调查(对照组),并对临床呼吸道分泌物(痰液/口咽拭子)标本进行常规化真菌检验;统计分析出院时确诊为真菌感染者(依据临床表现、真菌培阳或/和涂阳、住院期间的观察、鉴别和治疗验证等作出,并有明确的文字记录)的病历资料(病例组);列出四格表,计算其临床准确性指标.结果 非呼吸道感染人群322例口咽部真菌培养和直接涂片的阳性率分别为0.047(15/322)、0.003(1/322),其中≥50岁组分别为0.123(10/81)、0.012(1/81);出院时确诊真菌感染者的病原学检验阳性(培阳和/或涂阳)率1.0(505/505),其中真菌培阳率0.976(493/505),涂阳率0.4(202/505),培阴涂阳率0.024(12/505),涂阴培阳率0.6(303/505),≥50岁组培阳率0.980(445/454),涂阳率0.407(185/454),培阴涂阳率0.020(9/454),涂阴培阳率0.59(269/454);同时进行呼吸道分泌物真菌半定量培养和直接涂片检查的临床准确性指标--灵敏度(真阳性率)、特异度(真阴性率)、阳性预测值(阳性人中的患者率)、阴性预测值(阴性人中的非患者率)、准确度(真阳真阴之和所占的百分率)、尤登指数(灵敏度和特异度的综合)、阳性似然比(真阳性率与假阳性率之比)、阴性似然比(假阴性率与真阴性率之比),分别为1.000、0.953、0.971、1.000、0.982、0.953、21.28、0.000,其中≥50岁组分别为1.000、0.877、0.978、1.000、0.981、0.877、8.130、0.000.结论 呼吸道分泌物真菌培阳和/或涂阳,排除误判,宜视为临床感染或亚临床隐性感染,不宜视为正常携带;其临床准确性两法同时进行>半定量培养>直接涂片检查,宜提倡两法同时进行;鉴于真菌感染患者中≥50岁组超过4/5,相关指标以≥50岁组者更具临床实用价值.
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集菌法提高痰结核菌检查阳性率
目前痰中找结核杆菌仍是诊治肺结核病的重要方法.痰结核杆菌检查对发现传染源、确定治疗方案、考核疗效、评价防治效果等具有重要意义.我们对1032例痰标本同时进行直接涂片和沉淀集菌法查结核菌,以对两种方法的阳性率和分级情况进行比较.