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多功能光度仪的使用与故障维修
化学发光检测是分子生物学实验中的重要环节,根据检测模式可分为单光子检测仪和微孔板光度仪.
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分子生物学实验课程教学与考核新模式的探索
培养具有较强动手能力的创新型人才是分子生物学实验课程教学的重要目标,同时也要注重合作精神、认真和实事求是的科学态度的培养.文章探讨了一种新的分子生物学实验课程教学及考核模式,包括实验设计与准备、教师演示实验、学生分组实验、提交实验报告、实验总结与讨论、开设综合性实验的教学模式,以及对平时表现、实验设计与准备、实验过程、实验报告、基础理论知识及设计性实验为一体的考核模式.实施结果表明,该模式对学生实验操作能力、创新能力、自我管理能力、严谨的科研态度及团队合作精神的培养具有重要作用,促进了学生综合能力的提高,有利于高素质创新人才的培养.
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肺部非结核分枝杆菌感染
非结核分枝杆菌(NTM)代表已被从土壤和水中分离出的一群广泛的生物体,暴露于这些细菌被认为是人类感染的源泉.过去的10年里,由于新的、更敏感的分子生物学实验技术应用于NTM菌种鉴定,不仅新的NTM物种显著的增加,而且NTM的分离频率也有所增加.目前有超过140种NTM,其中至少40种与肺内感染相关(表1)1.随着NTM分离率的增加和新物种的丰富,当1个病人呼吸道样本的中有NTM菌种生长时,临床医生越来越多的面临着确定怎样的临床治疗方案.这篇文章将会试图讨论我们几乎每天都会被我们的同事(往往是我们的病人)问及的3个重要问题:1)NTM感染在增长吗,如果是,原因是什么?2)如果我的病人真的有NTM肺病,我如何知道?3)我需要治疗我的病人吗?如果需要,怎么治疗?通过阐述上述每一个问题,我们希望用一些有用的信息武装临床医生,让他们更好理解并与治疗感染的困难斗争.
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提取大鼠胰腺组织总RNA方法探讨
检测胰腺组织mRNA的表达已经成为研究胰腺疾病的重要手段,但由于胰腺组织富含RNase,抽提胰腺总RNA是分子生物学实验的难点之一.
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七年制医学分子生物学实验课改革与实践
分子生物学是一门实践性很强的学科,广泛应用于生命科学的各个领域.在七年制分子生物学实验教学实践中,通过对教学内容、教学手段、考核方法 的改革,充分调动了学生学习的积极性,培养了学生科研思维能力和创新能力.
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从理论到实践:分子生物学实验初学过程中常见错误辨析及相关教学改革建议
分子生物学实验技术是现代生命科学研究工作中基本的操作技术与实验手段,分子生物学实验所涉及的理论基础非常广泛,而且需要操作者具有一定的动手能力。而刚进入实验室的学生、研究人员在从理论走向实践的初学过程中常常发生各种“低级”错误。笔者收集了初学研究者在分子生物学实验过程中发生的一些常见问题,分析其原因,并对分子生物学实验教学提出了针对性的调整建议,以在实践过程中对这些错误及早发现和改正。
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两种血凝块基因组DNA提取方法的比较
分子生物学实验常常涉及到血液中基因组DNA的提取,通常用于实验的DNA主要是从抗凝血中提取,但抗凝血保存的时间过长,也会形成血块,给提取带来不便,造成许多珍贵的血液标本遗弃.为此,本实验对比研究了两种不同的血凝块基因组DNA提取方法,以探索血凝块基因组DNA提取的有效方法,现报道如下.
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微课应用于医学分子生物学实验的思考
医学分子生物学实验课程是临床医学专业教学计划中重要的基础课程,是一门实践性和应用性很强的学科.因课程内容抽象晦涩,操作流程繁杂难懂,在传统平铺直叙的课堂讲授形式下,教学效果往往不佳.微课教学灵活机动,内容短小精悍,视频及动画等多元化授课方式,可呈现微观世界的动态变化.因此,通过现代教育信息技术制作分子生物学实验微课,引导学生自主化学习已成为教学模式改革的重要方向之一.
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从琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA方法的总结
在分子生物学实验的操作中,许多情况下要利用琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳观察、纯化和回收DNA片段。DNA片段回收是其中的重要步骤,根据实验的目的不同,回收的DNA可用于载体连接、基因重组、序列分析、探针制备等后续工作。 DNA回收技术操作简单而迅速,并且能分离用其他方法(如密度梯度离心等)不能满意分离的DNA片段。在实际工作中,根据实验需求,准确、简便、快速、经济的DNA片段回收方法更受操作者的青睐。现总结从凝胶中回收DNA常用的方法,不需要特殊的仪器和试剂。
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慢性粒细胞白血病的分子生物学实验诊断研究进展
慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leuke-mia,CML)简称慢粒,是造血干细胞的克隆恶性增生性疾病.各种年龄均可以发病,在我国占白血病中的20%,仅次于急粒和急淋而位居第三.慢粒起病缓慢,早期常无自觉症状,一般病程可分为三期,慢性期(稳定期),加速期(增殖期)和急变期,慢粒的确诊主要依据实验室检测诊断,一般可分为血象和骨髓象的细胞形态学诊断,细胞化学染色,急变期的免疫分型检测及细胞遗传学Ph染色体的检测等.现就慢粒的分子生物学检测诊断在慢粒的诊断,治疗评价,病程判断及预后的应用作一综述.
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医学检验专业分子生物学实验教学实践与体会
分子生物学是以核酸、蛋白质等生物大分子为研究对象的学科,现已广泛应用于医学检验中.笔者结合自己分子生物学实验教学经验,介绍了细胞与分子诊断系医学检验专业分子生物学实验教学改革现状,肯定了目前分子生物学实验教学改革的效果,同时对存在的问题进行深入分析,并提出相应的完善对策.
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实例分析PBL教学法在医学分子生物学实验教学中的应用
分子生物学实验课程对培养学生科研能力至关重要,然而,目前常规教学重动手能力,而忽略科研思维的培养.本文以证明"突变β-catenin促进结肠癌细胞增殖"为例,探讨PBL教学法在分子生物学实验教学中的实际应用.与传统孤立地讲授和实施常见分子生物学实验技术不同,该PBL(problem based learning)法通过证明"突变β-catenin促进结肠癌细胞增殖"这一科学问题将DNA提取、PCR、质粒克隆和提取、核酸电泳、胶回收、蛋白提取、Western Blot、细胞转染等实验技术有机的统一起来,强化了实验技术解决实际问题的针对性和各个方法之间的内在联系,增强了学生学习的积极性,同时也大大提高学生发现问题、综合分析问题和解决问题的科研能力.
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显微捕获分离技术在分子生物学和蛋白质研究中的应用
在科研工作中,选择各种细胞进行核酸水平和蛋白质水平的实验是为常见的工作.一般说来,细胞来源多为体外培养细胞或直接从组织中获取的细胞.培养细胞一般为单一种类的细胞,与对照组有很好的对比性,用于分子生物学实验或蛋白质研究是很好的研究材料.但长期的研究发现,细胞表型受到周围微环境,特别是周围细胞的细胞相互作用的影响,培养细胞可能因微环境改变或失去周围细胞的相互作用而使基因表型发生改变.
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介绍一种外周血单个核细胞RNA提取方法
分子生物学实验中RNA提取纯化影响因素较多,由于RNA核糖残基2/ 和3/ 位上的羟基存在,使其更易受自然界中广泛存在的RNA酶降解.目前常用的RNA提取方法有酸性酚-硫氰酸胍-氯仿提取法、oligo-纤维素层析法等[1].组织和细胞单相裂解液也有商品化供应,如Trizol、Isogen、RNA NOW等试剂[2-3].
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对基础药学理科基地专业分子生物学实验教学的思考
总结几年来从事基础药学理科基地专业分子生物学实验教学的体会,从构成分子生物学实验课程的三要素--实验课程本身、教师、学生三个角度提出一些意见和建议.
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脂质体法进行基因转染技术的改进
基因转染是分子生物学实验中常使用的技术之一,利用脂质体将带有目的基因的重组载体导入细胞,通过研究细胞性状的改变而达到研究目的基因的目的.
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超声介导白蛋白微泡破裂法促进增强型绿色荧光蛋白C3基因在中国仓鼠卵巢细胞的表达
基因治疗的研究已取得不少进展,但要成功地应用于临床仍存在许多困难,安全、有效的基因载体及良好的靶向性就是其中重要的难点之一.本研究根据超声介导白蛋白微泡破裂可以增加真核细胞膜对大分子(如DNA)通透性的原理,探讨一种新的转基因方法,以便安全有效和定向地转移目的基因.实验中选择绿色荧光蛋白C3基因为标记基因,以白蛋白微泡为载体,用超声介导微泡破裂的方法在体外进行中国仓鼠卵巢细胞的基因转化,同时以脂质体为对照,激光共聚焦显微镜和流式细胞计数仪分别定性和定量观察细胞转化效率.台盼蓝染色观察细胞的活性.体外试验发现0.8 MHz、1.0 W/cm2、10%脉冲周期、60 s超声介导10%白蛋白微泡破裂可以有效稳定转化增强的绿色荧光蛋白C3基因在中国仓鼠卵巢细胞表达, 平均转化阳性率可达56.2%,活性实验证明对细胞无毒副作用,提示超声介导白蛋白微泡破裂法有应用于临床基因治疗的广阔前景.
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医学生物分子实验教学模式改革初探
生物化学与分子生物学是一门理论和实践相结合的重要医学基础课程,但其实验教学不能让学生仅仅以验证教材的理论知识和掌握基本的生物化学和分子生物学实验操作技能为终目的,还应致力于培养学生的动手、创新能力、分析解决问题的能力以及严谨的科学态度.近年来我们认真讨论、探索,改变了过去那种呆板的教师详细讲、学生听,然后按实验指导操作的传统实验教学模式.在实验室重组,实验教学内容、教学手段以及评价方式上进行大胆的改革,并在实践中不断总结、修改,加以完善,取得了令人满意的效果.
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临床生化检验和分子生物学实验教学改革的尝试与思考
近年来,随着高科技、新实验技术向医学领域的渗透,促使医学教育急需培养高素质、创新、实用的复合型人才,因此,医学院校迫切需要对各项教学环节进行改革和创新.然而这一艰巨任务涉及面广,它包括教育观念、教育环境建设、教师与学生素质等方面的革新,每个环节互动相关,其中培养学生创新、综合能力尤为重要,但方式仍需进一步探索.
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PBL结合摄像反馈在留学生分子生物学实验教学中的应用
目的 探索PBL结合摄像反馈法在留学生分子生物学实验教学中的应用.方法 以2013~2014级5年制医学留学生为研究对象,采取PBL结合摄像法为实验组,传统实验教学法为对照组,比较2组测试成绩、英文口语表达能力、主动学习能力等的差异.结果 实验平时成绩、实验理论测试成绩、实验操作测试成绩实验组均高于对照组(P=0.001).期末理论测试成绩实验组也高于对照组(P=0.01);英文口语表达能力、主动学习能力等实验组均高于对照组(P=0.001).结论 PBL结合摄像反馈教学法在留学生分子生物学实验教学中取得了显著的教学效果.