中山大学学报（医学科学版）杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보（의학과학판）
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Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒对SW480结肠癌细胞株生长与侵袭的影响
[目的]探讨Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒对结肠癌细胞株SW480生长、迁移与侵袭的抑制作用.[方法]应用我们已构建的Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒转染SW480细胞,检测CXCR4 RNA干扰对CXCR4 RNA和蛋白的抑制作用,MTS法检测能否抑制细胞增殖,Transwell小室评价对细胞迁移和侵袭的影响.[结果]重组Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒转染SW480细胞可见绿色荧光.SW480、阴性对照组及Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒组CXCR4 RNA表达水平分别为0.54±0.06、1.00±0.03和0.11±0.04(P=0.001);CXCR4蛋白相对表达量分别为0.60±0.03、0.72±0.03和0.18±0.02(P＜0.001);MTS OD值分别为1.38±0.04(P=0.005)、1.28±0.05(P=0.026)和0.92±0.06;迁移实验细胞数分别为32.0±6.8、32.6±1.7和0.75±0.71 (P＜0.001);侵袭实验细胞数分别为29.1±10.3、30.4±6.1和0.63±0.74(P＜0.001).[结论]重组Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒可高效抑制SW480细胞CXCR4 RNA和蛋白表达水平,遏制细胞增殖,降低肿瘤细胞迁移和侵袭能力.
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多西紫杉醇联合二烯丙三硫协同诱导前列腺癌细胞凋亡的研究
[目的]探讨多西紫杉醇联合二烯丙三硫(DATS)对前列腺癌PC-3细胞的协同杀伤效应及其机制.[方法]PC-3细胞接种96孔板,分别给予多西紫杉醇(5～60 nmol/L)和DATS(5～60μmol/L)单药处理24、48、72 h;联合用药采用15μmol/L DATS联合不同浓度多西紫杉醇(5～ 60 nmol/L)处理48 h.MTT法检测多西紫杉醇和(或)DATS对PC-3细胞生长的影响.DAPI染色、流式细胞仪检测多西紫杉醇、DATS及二者联合对PC-3细胞凋亡和细胞周期的影响;Western-blot测定Bcl-2、Bax、Bcl-xL/xS及细胞色素C、caspase-9、caspase-3的表达及活性变化.[结果]多西紫杉醇、DATS均能抑制PC-3细胞的生长,DATS可明显提高多西紫杉醇的杀伤效应,DATS(15 μmol/L)联合多西紫杉醇(10 nmol/L)作用48 h的细胞生存率为(50.1±1.0)％,低于多西紫杉醇(67.4±1.0)％和DATS(69.2±1.8)％,二者具有协同抑瘤作用;联合组使细胞凋亡率及G2/M期细胞比率明显增高,并更能显著抑制Bcl-2、Bcl-xL的表达,而且联合组使细胞色素C的释放及caspase-9、caspase-3的裂解活化时间提前了8h.[结论]多西紫杉醇及DATS共同诱导细胞凋亡是二者发挥协同效应抑制前列腺癌细胞生长的重要机制,其可能与细胞周期阻滞、Bcl-2、Bcl-xL的表达降低、细胞色素C的释放及caspase-9、caspase-3的活性变化有关.
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矢车菊素-3-葡萄糖苷通过降低STAT3活化抑制TNF-α诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖
[目的]探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)对TNF-α诱导的血管平滑肌增殖的影响及可能的机制.[方法]C57BL/6J小鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)购于ATCC,体外培养后以C3G对细胞进行预处理后观察TNF-α的促细胞增殖作用;Dihydroethidium (DHE)荧光染色检测VSMC在TNF-α作用下的活性氧(ROS)生成情况;实时定量PCR检测细胞内NADPH氧化酶活化蛋白1(NoxA1)的mRNA水平;蛋白质印迹法检测细胞内NoxA1、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3及β-actin的表达水平.统计学方法采用单因素方差分析.[结果]C3G预处理能够抑制TNF-α诱导的VSMC增殖,该作用呈现剂量、时间依赖性.联合应用50 μmol/L C3G及100μmol/L apocynin显著减少TNF-α诱导ROS的生成.C3G联合apocynin较C3G或apocynin单独孵育更能显著抑制TNF-α处理下VSMC内NoxA1基因的表达及STAT3蛋白的磷酸化.应用ROS清除剂触媒(catalase 2 000 U/mL)能显著抑制TNF-α诱导的VSMC增殖及STAT3蛋白活化.[结论]C3G对抗TNF-α诱导VSMC增殖的机制很可能是通过削弱NoxA1导致的ROS生成,从而抑制STAT3蛋白的激活.
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埃兹蛋白与直肠癌发生和局部复发的关系及意义
[目的]探讨埃兹蛋白(ezrin)的表达在直肠癌发生和局部复发中的关系及意义.[方法]收集中山大学附属第六医院和中山大学附属第一医院2002年8月至2009年2月间术后复发的直肠癌石蜡标本148例、癌旁正常组织30例和随访5年内未见肿瘤复发的直肠癌组织30例,应用免疫组化的方法检测埃兹蛋白的在癌组织及癌旁组织中的表达差异,分析埃兹蛋白与直肠癌发生和局部复发的关系.[结果]埃兹蛋白在肿瘤中的高表达率为72.3％(107/148),而在癌旁组织中的高表达率仅为20％(6/30),两者的差异有统计学意义(P＜0.001);埃兹蛋白在非局部复发组的直肠癌原发灶组织中的高表达率为53.3％(16/30),而其在局部复发组直肠癌原发灶组织中的高表达率为72.3％ (107/148),两者的差异有统计学意义(P=0.04);在局部复发组中,埃兹蛋白的表达与年龄、性别、肿瘤的大小、分化程度、距肛缘的距离、TNM分期等临床病理特征均无关(P＞0.05);在局部复发直肠癌中,埃兹蛋白低表达组的中位复发时间为2.0年,而埃兹蛋白高表达组的中位复发时间为1.2年,两者的差异有统计学意义(P＜0.001).[结论]埃兹蛋白与直肠癌的发生和局部复发有关,可能是个促进直肠癌发生和局部复发的因素之一.
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不同时期高蛋白营养干预对宫内生长受限大鼠体成分和骨骼肌mTOR活性的影响
[目的]探讨不同时期高蛋白营养干预对宫内生长受限(IUGR)大鼠体成分和骨骼肌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活性的影响.[方法]64只IUGR新生雄鼠出生时随机分为2组:IUGR对照组(CR)组40只、IUGR早期高蛋白干预组(EPR)组24只,另正常新生雄鼠24只为正常对照组(CN组).4周龄时各组处理8只大鼠后CR组随机取16只大鼠组成IUGR延迟高蛋白干预组(DPR组).3周哺乳期间CN组和CR组母鼠予基础饲料自由饮食,而EPR组母鼠予高蛋白饲料自由饮食;CN组和CR组断乳后予基础饲料自由饮食至12周龄,EPR组断乳后予高蛋白饲料自由饮食至4周龄、以后予基础饲料自由进食至12周龄;DPR组4～8周龄予高蛋白饲料、8～12周龄予基础饲料自由饮食.8、12周龄各组再处理8只大鼠.4、8、12周龄分别检测各组大鼠体成分、血清脂联素、血糖和胰岛素水平、骨骼肌纤维横截面积、骨骼肌mTOR活性.计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).[结果]与CN组相比,CR组4、8、12周龄和DPR组12周龄体脂肪百分比增加(P＜0.05或P＜0.01),而瘦体质量百分比、骨骼肌纤维横截面积、骨骼肌mTOR活性,血清脂联素水平减低(P＜0.05或P＜0.01).CR组8、12周龄和DPR组12周龄HOMA-IR高于CN组(P＜0.05或P＜0.01).与CR组相比,EPR组4、8、12周龄以及DPR组8周龄体脂肪百分比减低(P＜0.05或P＜0.01),而瘦体质量百分比、骨骼肌纤维横截面积、骨骼肌mTOR活性、血清脂联素水平增加(P＜0.05或P＜0.01).EPR组8、12周龄和DPR组8周龄HOMA-IR低于CR组(P值均＜0.01).[结论]出生到4周龄是高蛋白营养干预IUGR大鼠较合适的关键时期,近期和远期均可改善其体成分和胰岛素敏感性,与高蛋白干预上调骨骼肌mTOR活性、促进瘦体质量增长而减少体脂成分有关.
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再灌注前干预肥大细胞功能对肠缺血再灌注氧化损伤的影响
[目的]探讨再灌注前干预肥大细胞功能对肠缺血再灌注氧化损伤的影响.[方法]48只SD大鼠随机分为6组:S组(假手术组)、M组(缺血再灌注模型组)、C组(缺血再灌注+色甘酸钠)、CP组(缺血再灌注+Compound 48/80)、P组(缺血再灌注+鱼精蛋白)、K组(缺血再灌注+酮替芬).复制大鼠肠缺血再灌注损伤模型,CS、CP、P、K组在再灌注前5min分别经尾静脉给予色甘酸钠25 mg/kg、Compound 48/80 0.75 mg/kg、鱼精蛋白2.5 mg/kg、酮替芬1 mg/kg,S、M组分别给予等量的生理盐水.再灌注4h后处死大鼠取小肠组织.观察各组肠黏膜病理变化及Chiu's评分;免疫组化计算IMMC数量;测定小肠MDA含量、SOD活性和NO含量.[结果]与S组相比,M组和CP组的Chiu's评分和IMMC计数均明显增高(P＜0.05);与M组相比,C、P、K组的Chiu's评分和IMMC计数明显降低(P＜0.05),而CP组的Chiu's评分明显增高(P＜0.05).[结论]再灌注前通过抑制肥大细胞功能明显减轻氧化应激,对肠缺血再灌注损伤具有良好的保护作用.
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HGF与CTLA-4Ig双基因修饰增强脐带间充质干细胞的免疫抑制和促增殖作用
[目的]探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSC)经肝细胞生长因子(HGF)和细胞毒性T细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA4-Ig)双基因修饰后免疫调节能力的变化及其促进肝细胞增殖作用的影响.[方法]酶联合消化法提取并鉴定人脐带间充质干细胞;对照组的hUCMSC转染携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的Ad5-EGFP,实验组的hUCMSC转染携带HGF和CTLA-Ig双基因的腺病毒Ad5-HGF/CTLA-4Ig.流式细胞仪检测对照组hUCMSC转染Ad5-EGFP后72 h表达EGFP细胞比率;实验组Ad5-HGF/CTLA-4Ig转染hUCMSC 72 h后,CCK8检测细胞存活率,同时再次检测hUCMSC免疫表型和向成骨细胞分化的能力,ELISA检测细胞上清中HGF含量,Westem blot检测细胞中CTLA4-Ig蛋白的表达水平,通过CCK8法检测双基因修饰后hUCMSC对淋巴细胞增殖的影响及其上清对L02细胞增殖的影响.[结果]携带外源基因的腺病毒可有效转染hUCMSC,不影响其干细胞特性和多向分化能力,经HGF/CTLA-4Ig基因修饰hUCMSC可分泌高浓度HGF并高表达CTLA-4Ig,同时能有效地抑制淋巴细胞增殖,其上清能明显促进肝细胞增殖.[结论]hUCMSC经HGF/CTLA-4Ig基因修饰后生物学特性无明显改变,并能高表达HGF和CTLA-4Ig,其免疫调节及促进肝细胞增殖的能力进一步加强,为肝移植术后存在的肝细胞损伤的保护治疗提供了新思路.
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大鼠自体原位肝移植24h后肝内硫氧还蛋白-2的表达和抗氧化能力的变化
[目的]探讨线粒体硫氧还蛋白(Trx2)和抗氧化能力在原位自体原位肝移植(AOLT)大鼠后24 h内肝脏组织动态变化.[方法]将40只雄性SD大鼠随机均分为假手术组(Group S,n=8)、肝移植后4h组(LTR 4h group,n=8),肝移植后8h组(LTR 8h group,n=8),肝移植后16h组(LTR 16h group,n=8)和肝移植后24 h组(LTR 24h group,n=8).S组只进行开腹和血管的分离,各肝移植组接受自体原位肝移植(AOLT),光镜下观察各组大鼠肝脏病理学改变,Suzuki病理学评分改变,实验室检测活性氧水平、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽(GSH)活性、总抗氧化能力(TOC)变化、及Western Blot法检测Trx-2的蛋白表达的变化.[结果]自体肝移植引起了大鼠明显的肝脏损伤,组织病理评分在移植后4h明显升高并达峰值,持续到移植后24 h(P＜0.05,vs.group S),但24 h较4h有明显改善(P＜0.05 vs.group LTR4h);O2·、·OH和MDA的生成在4h到16h增加明显(1.6 ～ 2.0倍),MDA水平发生与之一致的时间变化(P＜0.05 vs.group S);抗氧化酶活性在肝移植后4h和8h下降明显,SOD 、CAT和GSH活性下降达30％(P＜0.05 vs.group S),TOC活性下降达70％(P＜0.01 vs.group S).而相对氧化/抗氧化指标来讲,移植后肝脏组织内Trx-2蛋白表达增高的速度较慢,4h开始表达增加(P＜0.05 vs.group S),而直到24h才达到蛋白表达峰值(～2.0倍).[结论]移植后肝脏发生损伤,并逐渐加重而后逐渐恢复,损伤程度与活性氧水平和抗氧化酶活性变化趋势相一致;Trx-2的表达上调有利于抗氧化酶合成和提高抗氧化能力.
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缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注肾损伤的影响
[目的]探讨缺血预处理对大鼠肝缺血再灌注肾损伤的影响及可能机制.[方法]30只SD大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组)、肝缺血再灌注组(IR组)和缺血预处理组(IPC组),每组10例.Sham组仅分离肝门区;IR组用无损伤血管夹夹闭门静脉和肝动脉的分支,阻断肝左、中叶血流,缺血40 min,再灌注6 h;IPC组先缺血5 min,再灌注5 min,然后操作同IR组.肝缺血再灌注6h,断头处死大鼠,于下腔静脉抽取血样并取左肾和左肝.血样离心测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的含量.左肾一半制成匀浆,测定肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,另一半和左肝观察组织病理改变.[结果]与Sham组比较,IR组和IPC组ALT、AST、BUN、Cr、MDA 、TNF-α和IL-6含量升高,SOD含量降低(P＜0.05),肾组织病理损伤明显;与IR组比较,IPC组ALT、AST、BUN、Cr、MDA、TNF-α和IL-6含量降低,SOD含量升高(P＜0.05),肾组织病理损伤减轻.[结论]缺血预处理对肝缺血再灌注导致的肾损伤有保护作用,其保护机制可能与减少氧自由基的释放和抑制炎症反应有关.
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双链RNA依赖的蛋白激酶在非小细胞肺癌预后预测及靶向治疗中的作用
[目的]探索双链RNA依赖的蛋白激酶(PKR)联合其他肿瘤代谢相关蛋白能否作为非小细胞肺癌(NSCLC)的更有效的预测因子;同时拟研究部分肿瘤代谢相关化合物,如胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂等与PKR表达的关系,拟求达到更好的靶向治疗及个体化治疗的目的.[方法]免疫组化检测212例NSCLC中PKR、IGF-1R表达情况,并用于Kaplan-Meier生存分析.Western Blotting检测13种肺癌细胞株PKR、p-PKR表达;磺基罗丹明B法(SRB)检测PPP、Rapamycin等药物作用后对高表达及低表达p-PKR细胞的抑制率.[结果]全组NSCLC患者中,PKWlow/IGF-1Rhigh患者的5年总生存率(21.6％)明显低于PKRhigh/IGF-1Rlow患者(74.6％)及其他患者(58.2％)(P＜0.0001),单、多因素分析提示PKR/IGF-1R联合标记物为NSCLC患者总生存率的独立预后因素.SRB结果提示,第1～3天,IGF-1R抑制剂PPP3 μmol/L在6个肺癌细胞株中均能显著抑制细胞生长,在0.3μmol/L剂量低表达PKR和/或p-PKR的H1792和H292细胞株中,较其他细胞株更能抑制细胞生长.而mTOR抑制剂Rapamycin采用1、0.1及0.01 μmol/L 3个剂量级在各细胞株均未见明显抑制细胞生长的区别.[结论]PKR联合IGF-1R可预测NSCLC的预后,PKR低表达的H1792、H292细胞株中,IGF-1R抑制剂PPP具有显著抑制作用,但对于mTOR抑制剂Rapamycin,未见明显作用,提示可通过检测PKR的表达来选择适合IGF-1R抑制剂PPP的病人.
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Th17/Treg细胞及相关细胞因子在变应性鼻炎患者外周血中的表达
[目的]探讨变应性鼻炎(AR)患者外周血Th17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其相关细胞因子的表达.[方法]2012年3月至5月,收集AR患者24例(AR组)和16例健康志愿者(对照组)外周血,采用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th17细胞和Treg细胞比例;ELISA检测血清中IL-17、TGF-β1的水平.[结果]AR组和对照组Th17细胞百分率分别为(1.76±0.60)％、(0.59±0.17)％,AR组较对照组明显升高,两组比较的差异有统计学意义(P＜0.001);AR组和对照组Treg细胞百分率分别为(1.65±0.79)％、(5.03±1.92)％,AR组明显低于对照组,两组比较的差异有统计学意义(P＜0.001).AR组血清中IL-17的表达水平(669±63)pg/mL高于对照组(587±28) pg/mL,两组之间的差异有统计学意义(P＜0.01); AR组血清中TGF-β1的表达水平(0.37±0.05) pg/mL低于对照组(0.50±0.07) pg/mL,两组之间的差异有统计学意义(P＜0.001).AR患者外周血中Th17细胞百分率和Treg细胞百分率存在负相关(r=-0.794,P＜0.001),Th17细胞百分率和TGF-β1存在负相关(r=-0.579,P＜0.01),Treg细胞百分率和TGF-β1存在正相关(r=0.771,P＜0.001),IL-17和Th17细胞百分率、Treg细胞百分率、TGF-β1无相关性(r分别为0.225、-0.183、-0.131,P＞0.05).[结论]AR患者外周血中Th17/Treg细胞存在功能失衡,其可能在AR的发病中发挥重要作用.
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非小细胞肺癌中uPA和PAI-2的表达及其临床意义
[目的]探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)及其抑制因子PAI-2蛋白的表达,分析两指标与临床病理学指标的关系.[方法]应用免疫组织化学方法检测108例NSCLC组织中uPA和PAI-2蛋白的表达,分析它们与性别、年龄、肿瘤的大小、癌的组织学类型、组织分化程度、淋巴结转移、手术后总生存期的关系.[结果]108例NSCLC组织uPA和PAI-2的阳性率分别为38.9％和43.5％;uPA的表达在男性组和淋巴结转移组的阳性率分别明显高于女性组和无淋巴结转移组,且随着NSCLC临床分期的升高,uPA的阳性率也明显升高(P＜0.05);鳞癌组织中PAI-2的表达明显较腺癌组织中高(P＜0.05);uPA和PAI-2的表达均与术后生存期的长短有密切关系.[结论]NSCLC组织中uPA和PAI-2的表达与肿瘤的生物学行为有着密切关系,影响着患者的预后,对uPA和PAI-2蛋白表达的干预,可能可以改变NSCLC的预后.
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沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响
[目的]探讨沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞(CNE-2)放射敏感性的影响,寻求放射治疗鼻咽癌的新方法.[方法]首先利用siRNA预测软件得到3条siRNA序列,并制备合成siRNA片段,利用RT-PCR和免疫印迹法检测其沉默Pokemon基因的效果,筛选出沉默效果佳的siRNA片段,转染CNE-2细胞后观察其对CNE-2细胞p53基因表达的影响、MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的凋亡、克隆形成法检测转染siRNA联合放射处理后细胞的放射增敏比.[结果]成功筛选出了沉默效应佳的siRNA片段,转染CNE-2细胞后能显著降低其Pokemon基因的表达、提高p53基因的表达、降低细胞的增殖活性、加速细胞的凋亡,同时增加了CNE-2细胞的放射敏感性.[结论]沉默Pokemon基因能增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性,这为临床鼻咽癌的放射增敏治疗提供了新思路.
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白细胞介素6参与介导大鼠运动神经损伤所致的病理性疼痛
[目的]检测选择性切断腰5脊神经前根(L5-VRT)术后脊髓背角内IL-6的异常表达并评价其对运动神经损伤所致机械性痛觉过敏的影响.[方法]在不损伤感觉传入的情况下,L5-VRT制备大鼠机械性痛过敏模型,采用Western blot和免疫荧光组织化学方法检测IL-6在脊髓背角的表达水平并进行细胞定位,通过痛行为学测试观察蛛网膜下腔内注射IL-6中和抗体对L5-VRT大鼠机械性痛过敏的影响.分组:sham组、L5-VRT组,n=5;vehicle+ L5-VRT 、IL-6 neutralization +L5-VRT组,n=6,[结果]L5-VRT术后7 d较假手术组同侧DRG IL-6蛋白表达显著上调(P＜0.001),IL-6蛋白表达的细胞类型为神经元细胞,L5-VRT术前应用IL-6中和抗体可抑制大鼠L5-VRT术后所致双侧机械性痛过敏的形成(P＜0.05).[结论]IL-6参与介导L5-VRT所致的大鼠后肢机械性痛过敏.
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原发性胃恶性淋巴瘤临床与病理研究
[目的]分析原发性胃恶性淋巴瘤(PGML)的临床与病理学特点,为临床诊断及治疗提供参考.[方法]对2006年1月至2012年6月我院收治的35例经病理确诊的PGML患者的临床资料与病理学特点进行分析.[结果]PGML发病以50岁以上人群为主,占65.7％,男女比例为1.69:1.其临床表现缺乏特异性,胃镜和CT表现与胃癌等其他胃部疾病较难鉴别,内镜下多部位深活检可提高诊断阳性率,手术联合化疗治疗可获较满意疗效.[结论]原发性胃恶性淋巴瘤多属B细胞来源,胃镜检查及活检是术前有诊断价值的方法,临床治疗方案的选择应根据临床分期、病理类型及病人情况进行规范化处理.
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LASIK手术对不同戴镜情况的近视患者隐斜度的影响
[目的]研究准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)对不同戴镜情况的近视患者隐斜度的影响.[方法]入选对象为2008年3-8月间来我院行LASIK手术矫正双眼近视及近视散光的患者84例(168只眼),男性40例(80只眼),女性44例(88只眼),年龄(26±6)岁.按等效球镜度分为低、中、高度近视组.选取年龄性别均与实验组匹配的屈光正常者30例作为正常对照组.根据术前戴镜状况分为持续、间断和未戴镜组.随诊3个月者有67例(134只眼),低度近视组16例(32只眼)、中度近视组17例(34只眼)和高度近视组14例(28只眼).比较不同戴镜组各屈光度组别的术前裸眼、术前戴镜、术后10d和术后3个月的远、近隐斜度.[结果]持续戴镜组:术前裸眼近隐斜度-8.2±4.6(低度近视)、-11.7±5.5(中度近视)、-11.5±3.8(高度近视)均高于正常对照组-2.1±2.1(P=0.00);术前戴镜及术后3个月与正常对照组无明显差异(P＞0.05);术前裸眼、术前戴镜及术后3个月的远隐斜度均与正常对照组(2.0±0.9)无明显差异(P＞0.05).间断戴镜组:低、中度近视组术前裸眼近隐斜度(-8.3±2.9,-10.0±2.1)、远隐斜度(3.2±0.7,3.0±1.1)均高于正常对照组(P=0.00);术前戴镜及术后3个月与正常对照组无明显差异(P＞0.05).未戴镜组:低度近视组术前裸眼近隐斜度-7.8±2.6、中度近视组近隐斜度-12.3±2.3、远隐斜度3.4±1.5均高于正常对照组(P=0.00);术前戴镜及术后3个月与正常对照组无明显差异(P＞0.05).高度近视组的间断戴镜组和未戴镜组,术前戴镜及术后3个月近外隐斜度虽明显缩小,但仍未恢复正常;远隐斜度与正常对照组差异不明显.[结论]近视患者不坚持配戴合适的眼镜会出现调节聚散关系失衡和眼位的改变.LASIK术后调节聚散功能渐趋正常,特别是对于间断戴镜组、未戴镜组的近视患者,有利于调节聚散关系的协调、眼位的平衡.
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混合静脉血氧饱和度评估心脏外科围术期的风险
[目的]分析混合静脉血氧饱和度(SvO2)对心脏外科围术期风险评估的价值及其预警值.[方法]170例心脏手术后病人到达ICU时通过经胸壁肺动脉导管采取标本测量SvO2.分析SvO2与围术期危险因素以及预后的关系,运用统计学计算SvO2对术后并发症的预警值,并将预警值作为分组界值将病人分组进行比较,验证SvO2与心脏外科围术期并发症及预后的关系.[结果]SvO2的预警值为53.5％.A组(SvO2≤53.5％)22例;B组(SvO2＞53.5％)148例.A组EuroSCORE (The European System for Cardiac Operative Risk Evaluation)评分(4.6±3.4)明显高于B组(2.8±2.3;P=0.015).A组与B组相比,术后由于心包填塞或出血剖胸探查率18.18％vs 2.03％(P=0.006),术后脑梗死率13.6％vs1.5％(P=0.016),术后第1天胶体液用量(1587±732)mL vs (1091±785)mL(P=0.002),住院死亡率18.18％vs 1.35％ (P=0.003)等显著高于B组4例(2.4％)发生频发室性早搏,拔除经胸壁肺动脉导管后心律失常消失.拔除经胸壁肺动脉导管后无一例发生导管相关出血.[结论]经胸壁肺动脉导管取血测量SvO2安全经济.SvO2对心脏外科围术期风险可做出可靠的评估.
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妇科手术对女性排尿情况的影响分析
[目的]通过测定妇科手术患者尿流率参数了解妇科手术对患者排尿功能的影响.[方法]随机选择2010年3月至2011年3月在我院行妇科手术,无其他合并症及并发症的100例女性患者作为研究对象,除外合并泌尿系感染及器质性疾病者.包括开腹子宫切除术组(27例),阴式子宫切除术组(28例),广泛性子宫切除加盆腔淋巴结清扫组(24例),腹腔镜附件手术组(21例)测定大尿流率(Qmax)、平均尿流率(AFR)、排尿量(VV)、尿流时间(FT)等.应用B超测量膀胱三条径线:a、b、c,以a×b×c×0.7mL估算残余尿量(PVR).[结果]腹腔镜附件手术组和开腹子宫切除术组手术前后的Qmax、AFR、FT、VV、PVR,差异均无统计学意义(P＞0.05),手术前后大尿流率均在正常范围.阴式子宫切除和广泛性子宫切除加盆腔淋巴结清扫术组的Qmax、AFR、VV、PVR手术前后差异有统计学意义(P＜0.05),术后Qmax、AFR、VV明显低于术前,术后PVR明显高于术前.[结论]阴式子宫切除术和广泛性子宫切除加盆腔淋巴结清扫等手术使患者的膀胱产生了明显的功能障碍,特别是广泛性子宫切除加盆腔淋巴结清扫手术对患者膀胱的影响是严重的和深远的,这种影响的产生可能与手术中的神经损伤、膀胱创伤等有关,今后在两类手术中如何大限度减小手术对排尿功能的影响是未来手术改进的方向之一.
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宫腔镜治疗不同形态子宫中隔对生育能力的影响分析
[目的]了解不同形态子宫中隔术后的妊娠率及其妊娠结局,探讨宫腔镜手术治疗各种形态子宫中隔对生育能力的影响.[方法]95例患者均行宫腔镜下子宫中隔切除术.根据患者症状分为不孕组及反复流产组,分别进行术后随访,了解术后是否妊娠以及妊娠距离手术时间、妊娠结局.并按三维B超诊断的宫腔形态分为“Y型宫腔”、“V型宫腔”、“X型宫腔”三组,比较组间差别.所有患者术后均放置宫内节育器3个月+激素序贯人工周期处理预防宫腔粘连.[结果]不孕组主要为V型宫腔(46.2％),流产组主要为Y型宫腔(80.4％),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).不孕组V型宫腔较其他组受孕率明显升高(P＜0.05).流产组术前术后妊娠结局比较差异有统计学意义(P＜0.05),不同宫腔形态组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).两组产后无1例发生胎盘粘连、植入、产后大出血等产科并发症.术后出现1例宫腔粘连行二次宫腔镜手术.[结论]子宫中隔长度未达宫腔深度1/2者主要症状为反复流产,中隔长度超过宫腔深度1/2的者主要症状为不孕;完全中隔症状有不孕及反复流产.宫腔镜下子宫中隔切除术是治疗子宫中隔畸形的理想方法,可明显改善妊娠结局.
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循环microRNA-499与肌钙蛋白T早期诊断急性心肌梗死
[目的]比较分析心肌特异性microRNA-499(miR-499)与心肌肌钙蛋白T(cTnT)在早期诊断急性心肌梗死(AMI)中的价值.[方法]收集67名AMI病人和32名健康人的血浆标本,通过定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血浆中miR-499的含量,同时通过电化学发光法检测血浆cTnT的变化.[结果]AMI病人血浆中miR-499的含量较健康人显著升高(P＜0.01),而当这些AMI病人康复后出院时miR-499的含量已下降到基线水平.MiR-499含量的变化与研究病例的自身特征无相关性(P＞0.05).另外,受试者T作特征曲线(ROC)分析表明,miR-499在诊断AMI方面具有明确的心肌特异性和敏感性,但并不优于cTnT.[结论]循环miR-499可作为AMI诊断的生物标志物,但在AMI早期诊断价值上不优于cTnT.
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冠心病患者牙周炎严重程度对血清超敏C反应蛋白和TNF-α及冠脉狭窄程度的影响
[目的]研究不同严重程度的牙周炎对冠心病患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)及冠脉狭窄程度的影响,探讨牙周炎与冠心病之间潜在的相关性.[方法]冠脉造影确诊为冠心病的142例患者,根据临床附着丧失的程度分为三组:冠心病牙周健康组32例(C组),冠心病伴轻度牙周炎组32例(C+P1组),冠心病伴中重度牙周炎组78例(C+P2组).依据冠状动脉造影结果,对其冠脉狭窄程度进行评分.选择经冠脉造影排除冠心病的单纯中重度牙周炎患者31例为对照组(P组).检测血清hs-CRP和TNF-α的含量.用SPSS13.0软件进行统计学分析.[结果]冠心病伴中重度牙周炎组血清hs-CRP含量高于单纯中重度牙周炎组,差异有统计学意义;随着牙周炎严重程度的增加,冠心病患者的血清hs-CRP、TNF-α和冠脉狭窄程度有显著升高,冠心病伴中重度牙周炎组的血清hs-CRP、TNF-α含量和冠脉狭窄程度高于冠心病伴轻度牙周炎组,差异有统计学意义.[结论]中重度牙周炎的冠心病患者血清炎症水平较高,冠脉狭窄程度较严重,提示牙周感染可能通过以上炎症介质及级联反应,引发或加重冠心病.
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子宫内膜癌患者代谢综合征及其组分发病情况
[目的]探讨子宫内膜癌患者代谢综合征(MS)及其组分的发病情况,并与健康体检人群进行比较.[方法]选取2005年9月至2009年12月在中山大学孙逸仙纪念医院妇科肿瘤专科进行初始治疗的子宫内膜癌患者265例为研究组,用年龄及绝经与否进行匹配的同期在我院体检中心进行体检的女性265例为对照组,对其临床资料进行回顾性分析.代谢综合征的诊断采用2005年国际糖尿病联盟制定的标准.[结果]研究组MS发病率为41.89％,对照组MS的发病率为9.28％:研究组的腰围、BMI、收缩压、舒张压、TG、FPG水平均高于对照组,HDL-C水平低于对照组;研究组代谢异常的发生率从高到低是低HDL-C(55.09％)、高SDP(44.53％)、高TG(35.09％)、高BMI(34.72％)、高DBP(27.92％)和高FPG(26.04％);研究组合并代谢综合征0～5个组分的比例分别为:13.96％、24.53％、16.23％、20.75％ 、18.11％和6.42％;研究组中两个年龄段亚组MS发病率无差异,4个BMI亚组MS发病率分别为0、21.18％、79.55％和100％;多因素分析显示,腰围、DBP、TG是子宫内膜癌合并MS的独立危险因素;研究组是否合并MS患者的病理类型、分期差异无统计学意义,但病理分化程度中高分化组与中分化组所占比例差异有统计学意义.[结论]子宫内膜癌与代谢综合征及其组分关系密切,这可能为子宫内膜癌的防治提供一条新思路.
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鼻咽癌容积旋转调强放疗与常规静态调强放疗的剂量学对比研究
[目的]探讨容积旋转调强(VMAT)相比常规静态调强(s-IMRT)在鼻咽癌治疗中的剂量学特点及治疗效率.[方法]选取52名病理确诊且接受容积旋转调强放疗的初治鼻咽癌患者纳入本研究.所有患者均统一采用同步加量技术给予肿瘤靶区处方剂量70 Gy/33次,亚临床病灶区60 Gy/33次,预防照射区56 Gy/33次.每例患者采用相同剂量学限制条件分别进行容积旋转调强及常规调强计划设计(Monaco计划系统).通过其剂量学对比分析评估:①靶区覆盖,均匀性及适形性;②危及器官剂量分布;③治疗时间及治疗跳数.[结果]两组计划均有较好靶区剂量覆盖,但PTV70常规调强组相比容积旋转的均匀性(VMAT vs.s-IMRT,1.09±0.02 vs.1.07±0.02; P＜0.001)和适形性(VMAT vs.s-IMRT,0.48±0.15 vs.0.54±0.13; P＜0.001)更优;同时VMAT组在正常组织上也未显示剂量学优势,VMAT组脑干剂量较s-IMRT组剂量略低(VMAT vs.s-IMRT,57.99±6.43 vs.58.22±5.78; P＜0.001),但脊髓,腮腺及喉的剂量较s-IMRT组高(P＜0.05).VMAT单次治疗时间(7.0 min)较IMRT(13 min)显著缩短,但平均治疗跳数(VMAT vs.s-IMRT,644±172 vs.654±180;P＞ 0.05)无明显统计学差异.[结论]在鼻咽癌调强放疗中,容积旋转调强放射治疗可达到常规静态调强较相似的剂量分布,但治疗时间显著缩短.
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息肉样脉络膜血管病变的频域光相干断层扫描图像特征分析
[目的]研究息肉样脉络膜血管病变(PCV)的频域光相干断层扫描图像(SD-OCT)特征并分析其临床意义.[方法]对经眼底检查、眼底彩照、荧光素血管造影和吲哚青绿造影确诊的连续PCV患者的SD-OCT图像进行分析,分析PCV在SD-OCT上的主要表现形式.[结果]共95例患者(106眼)纳入该研究,其中18眼(16.98％)出现广泛性出血性色素上皮层脱离(mhPED)伴或不伴视网膜下大出血(MSH),总范围大于12个视盘面积;在无mhPED/MSH的98眼中,78眼(79.59％)可见双线征,71眼(72.45％)见局限性视网膜色素上皮脱离,42眼(42.86％)见拇指样隆起息肉病变,65眼(66.33％)见视网膜下积液,20眼(20.41％)见视网膜层间积液,29(29.59％)眼见局限性视网膜下出血.[结论]双线征、色素上皮脱离、视网膜下积液、拇指样息肉病灶以及视网膜下出血是PCV在SD-OCT上常见的5种表现形式,其中以双眼线征和色素上皮脱离为常见.
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无动物源性成分人胚胎干细胞培养体系与其它人胚胎干细胞培养体系的比较
[目的]通过比较hESC在各培养体系中未分化表面标记物及以多能性因子的表达,进一步筛选出更优化、安全有效的hESC培养体系.[方法]四种培养体系分别为:新建立的无动物源性的人包皮饲养层(XF-HFF)联合成分确定培养基(CDM)的无动物源性培养体系(XF-HFF/CDM),对照组为XF-HFF联合添加了200 mL/L人血清(HS)的培养基的培养体系(XF-HFF/HS),HS包被的培养皿联合CDM的无饲养层培养体系(HS-Matrix/CDM),以及传统的人包皮饲养层(XC-HFF)联合添加了200 mL/L血清替代物(KSR)的培养基的培养体系.通过观察克隆形态、细胞计数、免疫荧光、流式细胞术、荧光定量PCR,来比较4种hESC培养体系中的细胞增殖率、未分化表面标记物和多能性因子的表达情况,以及hESC在XF-HFF/CDM培养体系中长期培养后,对其未分化状态、多能性和染色体完整性的检测.[结果]在几种培养体系中,同一代次的hESC表达SSEA-4、TR A-1-60、Oct3/4和hTERT的情况在XF-HFF/CDM组和XC-HFF/KSR组中相似(P＞0.O1),且均高于其它两组培养体系(P＜0.01).hESC在XF-HFF/CDM培养体系中长期培养超过40代次,仍能表达hESC未分化表面标记物SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81及多能性因子hTERT、Oct3/4,在SCID小鼠体内能分化成含3个胚层的畸胎瘤,以及保持完整的二倍体核型.[结论]新构建的完全无动物源性的hESC培养体系的培养效率与传统添加KSR的培养体系相似,且优于相同CDM下的无饲养层培养体系以及相同饲养层下的含人血清的干细胞培养条件.
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HIV-1辅助受体CCR5与其天然配体结合效果的综合评价
[目的]探讨CCR5蛋白与天然配体的结合姿态位置,寻找CCR5的优化对接靶点及与天然配体结合的优姿态,为HIV-1新型药物研发提供依据.[方法]运用SWISS-MODEL构建天然配体的三维结构,运用Discovery studio软件ZDOCK模块模拟3种天然配体RANTES,MIP-1α和MIP-1β与CCR5对接,分析对接姿态,计算ZDOCK综合得分,评估结合效果优劣.[结果]RANTES、MIP-1 α和MIP-1β这3种天然配体主要是在N末端或第二个胞外环与CCR5蛋白结合.并且RANTES较MIP-1α和MIP-1β有更强的抑制作用.[结论]第二个胞外环可能是多肽抑制剂与CCR5结合的主要位点.对于RANTES的分子修饰是未来研发多肽类CCR5抑制剂的首选方向.
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广东地区感染性角膜溃疡病原学及相关因素分析
[目的]了解感染性角膜溃疡发病特点及病原学分布特征,为临床合理诊治提供依据.[方法]收集中山眼科中心2004-2011年924例诊断为感染性角膜溃疡患者的临床资料,对其细菌和真菌的分布特征、发病高峰、人群特征、发病诱因等进行回顾性分析.[结果]病原特征显示:924例患者中,389例病原菌培养阳性,其中细菌162例,真菌209例,真菌和细菌混合感染18例;细菌以表皮葡萄球菌多,共76株(占42.22％),其次为铜绿假单胞菌,39株(占21.67％);真菌以镰刀菌属多,共86株(占36.12％),其次为曲霉菌属和蠕孢菌属,分别为46株(占20.26％)和43株(占18.94％).细菌中G杆菌呈上升趋势,真菌中蠕孢菌属及毛霉菌近年呈上升趋势,而镰刀菌属近3年下降明显.流行病学特征显示:924例患者以男性居多,共611例(占66.12％),发病年龄以40～60岁为主,共431例(占46.65％),职业主要是农民,有512例(占55.41％),10～12月为高发季节,外伤是主要诱因.[结论]广东地区感染性角膜溃疡患者以中老年男性农民为主,其发病与农业活动密切相关,主要致病细菌为表皮葡萄球菌,真菌为镰刀菌属.
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依据共有等位基因数判别叔侄关系
[目的]建立基于共有等位基因数(A)的典型判别函数,并探讨其在叔侄鉴定中的应用.[方法]根据119对叔侄、119对无关个体的15个STR基因座的分型结果,计算每对个体的共有等位基因数(A)和叔侄指数(AI),进行统计学处理.[结果]共有等位基因数(A)在叔侄对和无关个体对中均符合正态分布.采用共有等位基因数(A)建立的典型判别函数(f)=0.437A-5.268,判别叔侄和无关个体的平均准确率为80.7％;采用Ig AI建立的典型判别函数(f)=1.021 lg AI +0.051,平均准确率为82.8％,两者判别结果无统计学差异(P＞0.05).[结论]依据共有等位基因数建立的典型判别函数的判别效能与ITO法相近,且计算简便、易于掌握,可以应用于叔侄关系鉴定.
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肿瘤干细胞理论的演变
肿瘤干细胞(CSC)是存存于肿瘤组织或肿瘤细胞群中具有干细胞特性的亚群.CSC具有自我更新和分化能力,可以分化为特性各异的细胞.CSC因其强大的起始肿瘤能力和抵抗治疗的特性而成为关注的焦点.肿瘤干细胞理论从起初的单向等级分化模式,发展到现在的随机和等级分化交互模式,较好地解释了肿瘤在形态和功能方面的多样性,是研究肿瘤的发生和发展的理想模型.本文通过对近年来在肿瘤干细胞研究领域的部分卓越成就的解析,阐述了肿瘤干细胞在分化模式、微环境调控和动态变化等方面的特性.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
