中山大学学报（医学科学版）杂志
Journal of Sun Yat-sen University(Medical Sciences) 중산대학학보（의학과학판）
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同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型的建立及其对造血干细胞植入的影响
[目的]建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型,研究该技术对造血干细胞(HSC)归巢、植入率、移植后免疫造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)等方面的影响.[方法]用C57BL/6胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)作供体,以单侧胫骨骨髓腔内注射(IBMI)和尾静脉注射(Ⅳ)两种途径移植经亚致死量60Coγ射线辐照预处理的BALB/c鼠.200只受鼠随机分为4组:骨髓腔内注射组(IBM组);尾静脉注射组(Ⅳ组);放疗对照组;正常对照组,每组50只.用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记FNPB在受体内的分布变化,并观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及GVHD情况.[结果]①荧光标记FNPB体内动力学显示直至输注后72 h,供体FNPB经IBMI后主要积聚于注射侧骨髓腔内,肺部滞留很少.而Ⅳ组及IBM组非注射侧骨髓中的FNPB细胞数显著少于IBM组注射侧,Ⅳ组非造血组织器官如肺部有明显供体细胞滞留.②同种异基因小鼠CBT模型中IBM组造血、免疫功能的恢复明显快于Ⅳ组,无GVHD,移植后90 d存活率达到90%,注射侧胫骨植入水平(29.53±6.64)%,较Ⅳ组有显著改善.③IBM输注侧骨髓中供体HSCs植入水平及造血重建速度明显优于非注射侧骨髓.[结论]成功建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型,并证实IBMI途径对促进HSCs植入,造血免疫功能重建,提高UCBT效果方面优于Ⅳ途径,多部位IBMI可能更有利于HSC归巢骨髓.
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前列腺特异性膜抗原基因片段在酿酒酵母中的诱导表达及意义
[目的]分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)基因片段在酿酒酵母中的诱导表达情况,以便进一步探讨重组人PSMA的免疫活性并完成抗前列腺癌PSMA蛋白疫苗的制备.[方法]应用基因重组技术将人PSMAcDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NT,构建重组酵母真核表达质粒pYES2/NT-PSMA,转化酿酒酵母菌株INVSc1,尿嘧啶筛选出阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的Western blot检测.[结果]成功构建了PSMA的酵母真核表达重组子pYES2/NT-PSMA,并在酿酒酵母INVSc1中得到有效表达,Western blot显示两个特异性的人重组PSMA全蛋白片段,相对分子质量分别为Mr=100×103及Mr=85×103.[结论]人PSMA基因片段能够在酿酒酵母中表达并进行翻译后糖基化修饰,为下一步进行抗前列腺癌PSMA疫苗的研制奠定了良好基础.
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Ox-LDL诱导血管内皮细胞表达LOX-1
[目的]探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)作为氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)的特异性受体在摄取ox-LDL后对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)表达LOX-1的影响以及LOX-1在ox-LDL诱导其自身表达中所起的作用.[方法]用天然低密度脂蛋白(n-LDL)、LOX-1的受体阻断剂聚肌苷酸[poly(I)]250μg/mL和爱兰苔胶(carrageenan)以及不同质量浓度的ox-LDL(0,10,20,50,100 μg/mL)与HUVECs作用于不同的时间(0,6,12,24,36 h),用Realtime RT-PCR测定LOX-1 mRNA的表达水平,用Western blot测定LOX-1蛋白表达水平,并比较加入LOX-1阻断剂前后LOX-1表达的变化.[结果]在HUVECs中加入不同质量浓度的ox-LDL(0,10,20,50,100μg/mL),各组剂量的ox-LDL都可以增加LOX-1 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),在10～50 μg/mL的剂量范围内有明显的剂量-效应关系.但n-LDL对LOX-1的表达无影响.随着ox-LDL与HUVECs作用时间的延长,LOX-1 mRNA和蛋白的表达显著升高(P＜0.01),在6～24 h内呈明显的时间-效应关系(P＜0.01).HUVECs预先与250 μg/mL的poly(I)或carrageenan作用2 h,然后再加入50 μg/mL的ox-LDL作用24 h.poly(I)和carrageenan都可以显著抑制ox-LDL诱导的LOX-1 mRNA和蛋白的表达(P＜0.01).[结论]Ox-LDL可以诱导HUVECs LOX-1的表达,该诱导作用可被LOX-1的阻断剂部分拮抗.表明LOX-1不仅特异性地结合ox-LDL,而且介导ox-LDL对LOX-1表达的上调作用.
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组织工程化人工骨应用于兔的腰椎横突间融合
[目的]探讨组织工程化人工骨应用于兔腰椎横突间融合的骨愈合生物学特点及其融合效果.[方法]45只新西兰大白兔均行单节段双侧L5/6横突间融合术,依植骨材料随机分为A(自体髂骨)、B(组织工程化人工骨)和C(单纯支架)3组,每组15只.术后2、6、12周分别处死动物3、3、9只,取出腰椎,通过大体观察、影像学、组织学和生物力学等方法分析融合状况.[结果]术后2周3组均未见骨性融合,12周大体标本观察A、B、C组融合率分别为66.67%(8/12)、83.67%(10/12)、0;生物力学测试A、B组融合者硬度和强度显著高于C组(P＜0.01),A、B两组无明显差异(P＞0.05);组织学示B组融合块中央区典型软骨细胞较少,纤细编织骨包围支架材料周围,此区新生骨以组织工程骨的直接成骨为主.[结论]组织工程化人工骨用于兔腰椎横突间融合,可达到自体髂骨的融合效果,未吸收支架材料不影响局部生物力学功能,中央区骨形成主要是直接成骨过程,边缘区包括膜内成骨、软骨成骨和直接成骨作用.
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高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠的远期影响
[目的]探讨早期和延迟高压氧(HBO)治疗对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠的远期影响.[方法]7日龄大鼠37只随机分为对照组(n=10,假手术处理)、HIBD组(n=9)、EHBO组(n=9,HIBD模型后0.5～1 h开始2个绝对大气压HBO治疗,稳压30 min/次,间隔24 h,连续2次)和LHBO组(n=9,HIBD模型后48～72h开始2个绝对大气压HBO治疗,稳压30 min/次,间隔24 h,连续5次),以大鼠远期的学习记忆功能(Morris水迷宫实验)和海马形态组织学(海马锥体细胞层结构和CA1区存活神经元数)来判断干预效果.[结果]HIBD组大鼠的学习记忆功能严重不良伴海马结构严重受损,与对照组相比,水迷宫实验中平均逃逸潜伏期延长(56.35 s与23.07 s,P＜0.05)、搜索时间和搜索路程缩短(分别为29.29 s与51.21 s,548 cm与989 cm,均P＜0.05)、海马存活神经元减少(100个/mm与183个/mm,P＜0.05);早期HBO治疗明显减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍(潜伏期:39.17 s与56.35 s;搜索时间:36.84 s与29.29s;搜索路程:686 cm与548 cm,P＜0.05),并使海马存活神经元增多(131个/mm与100 个/mm,P＜0.05),延迟HBO治疗不能减轻HIBD大鼠的学习记忆功能障碍(潜伏期:56.25 s与56.35s;搜索时间:30.11 s与29.29 s;搜索路程:572 cm与548 cm,P＞0.05),海马存活神经元无增多(95个/mm与100个/mm,P＞0.05);大鼠在水迷宫实验中的逃逸潜伏期与海马锥体细胞层存活神经元数呈直线负相关(r=--0.819,P＜0.01).[结论]早期HBO治疗可减轻HIBD程度,并可改善HIBD所引起的远期学习记忆功能缺陷,延迟HBO治疗对HIBD无效.
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环缩酚肽抑制视网膜表达VEGF及PECAM基因和血管增生
[目的]观察两种环缩酚肽衍生物(Hep-A和Hep-B)对氧诱导的小鼠视网膜表达血管内皮生长因子(VEGF)和细胞黏附分子(PECAM;ICAM-1;VCAM-1)基因的影响及血管增生的变化.[方法]建立氧诱导的血管增殖性视网膜病变模型,12 d开始给小鼠皮下注安慰剂(第1组,n=7)、Hep-A 10 mg/kg(第2组,n=6)或者Hep-B 10 mg/kg(第3组,n=6),每天两次.5 d后取出左侧眼,分离视网膜并抽提RNA,用荧光定量PCR测出上述基因含量,并分别求出每个靶基因与标准基因S16含量的比率;右眼经心脏荧光素灌注后取眼球做视网膜平铺片,用图像分析软件定量计算视网膜新生血管的面积.[结果]视网膜中VEGF/S16的mRNA比率为:第1组(0.554±0.050),第2组(0.355±0.037),第3组(0.287±0.051);PECAM/S16为:第1组(2.050±0.249),第2组(1.228±0.153),第3组(1.027±0.210).经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜中VEGF基因表达分别减少36%和48.2%(P=0.001);PECAM基因表达分别减少40.1%(P＜0.05)和49.9%(P＜0.01);而VCAM-1和ICAM-1表达无明显差异.视网膜平片检测视网膜新生血管面积:第1组为(1.06±0.03)mm2/眼,第2组为(0.17±0.01)mm2/眼,第3组为(0.11±0.01)mm2/眼;经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜新生血管的面积明显减少(P＜0.001).[结论]两种环缩酚肽衍生物均抑制氧诱导的小鼠视网膜表达VEGF和PECAM基因,并抑制其形成视网膜新生血管.
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中国海南黎族人群15个STR位点的遗传多态性
[目的]研究海南黎族族人群15个STR位点D3S1358、THO1、D21S11、D18S51、VWA、CSF1PO、D8S1179、TPOX、FGA、D5S818、D13S317、D7S820、D16S539、D19S433、D2S1338的遗传多态性.[方法]通过人类短串联重复序列(shorttandem repeat,STR)复合扩增、基因扫描、基因分型调查了110名黎族无关个体15个STR位点等位基因分布情况.[结果]15个STR位点均符合Hardy-Weinberg平衡,共检出149个STR等位基因,其频率分布在0.0045～0.5045之间,杂合度(heterozygosity,H)为0.6716～0.8754,个体识别力(diserimination power,DP)为0.8770～0.9673,非父排除率(probabilities of paternity exclusion,EPP)为0.4383～0.7396,多态信息含量(polymorphic information content,PIC)为0.6265～0.8574.[结论]选用的15个STR位点均能检出等位基因遗传多态性,并具有较丰富的信息含量,为进一步研究中华民族STR遗传结构提供了基础资料.
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猪门静脉回流阻断模型内毒素的移位
[目的]拟在猪的肠血管阻断模型中探讨门静脉回流阻断肠淤血可能造成的内毒素移位和肿瘤坏死因子释放.[方法]采用种群相近体质量22～25 kg雌性小猪8只,无感染症状.分离门静脉和肝后下腔静脉分别阻断、然后开放各60 min,观察血压、心率,阻断前和开放60 min各取回肠末端小肠全层行光镜、电镜检查,测定门、颈静脉血内毒素及肿瘤坏死因子(TNF-α)含量.[结果]门静脉和肝后下腔静脉阻断后,肠淤血、水肿,并随时间延长而加重,光镜检查表明实验后肠粘膜和腺体明显损伤,电镜检查表明细胞超微结构轻微异常.阻断前后的血内毒素、TNF-α含量无显著性差异.[结论]①肠静脉回流阻断60 min引起的肠道淤血可导致肠粘膜屏障损伤.②在60 min内肠淤血性的损伤不会引起肠腔内内毒素的大量移位及TNF-α的释放.
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巨噬细胞移动抑制因子诱导血管生成相关基因的表达
[目的]研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对人血管内皮细胞表达血管生成相关基因的诱导作用.[方法]通过亚克隆,构建原核表达质粒pET22b-MIF,并转化入工程菌BL21(DE3).用Ni-亲合柱分离纯化BL21(DE3)中经IPTG诱导表达的重组MIF.用巨噬细胞移动抑制试验鉴定复性的重组MIF的活性.分别用0、30、60、120 ng/mL的重组MIF处理人血管内皮细胞12 h,通过Real-time定量PCR检测人血管内皮细胞中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF-α、PDGF-α的mRNA表达.用体外血管生成试验检测重组MIF诱导人血管内皮细胞的成管腔作用.[结果]正确构建了重组质粒pET22b-MIF.经IPTG诱导,在大肠杆菌中以包涵体形式表达出重组MIF.复性的重组MIF对巨噬细胞移动的抑制水平达30%(P＜0.05).重组MIF能特异地诱导HVECs中VEGF165、FGFR3、MMP9、TGF-α、PDGF-α表达,并能特异地诱导人血管内皮细胞形成管腔结构.[结论]在大肠杆菌中成功表达出MIF,MIF能特异地诱导人血管内皮细胞中血管生成相关基因的表达.
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含脐血MSCs体系扩增后的脐血重建NOD/SCID小鼠造血的研究
[目的]探讨含人脐血(umbilical cord blood,UCB)来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)联合造血生长因子(hematopoietic growth factors,HGFs)体系扩增后的脐血造血细胞在NOD/SCID小鼠体内植入及重建小鼠造血的能力.[方法]①用含女性胎儿脐血MSCs(UCBMSCs)及HGFs组合的无血清扩增体系体外扩增男性新生儿UCB CD34+细胞.②收获扩增第6天的UCB细胞,经尾静脉移植给亚致死量照射后的雌性NOD/SCID小鼠.③动态观察移植后小鼠生存情况及外周血象的恢复.④移植后8周,流式细胞仪检测存活小鼠骨髓中人CD45+、CD45+CD33+、CD45+CD41+、CD45+CD3+和CD45+CD19+细胞含量;PCR法检测移植小鼠外周血中人Y染色体表达.[结果]①非扩增组小鼠存活率为60%,扩增组存活率为90%.②动态观察发现:扩增组白细胞和血红蛋白于移植后第20天恢复,PLT于移植后第40天恢复,明显短于非扩增组.③移植后8周,两组小鼠外周血中人Y染色体检测均为阳性,扩增组和非扩增组小鼠骨髓中人CD45+细胞的含量分别为18.5%±8.3%和16.5%±5.7%,差异无统计学意义(P＞0.05).④移植后8周,扩增组小鼠体内CD45+CD33+和CD45+CD41a+细胞的百分率均高于非扩增组,但CD45+CD3+、CD45+CD19+细胞百分比均低于非扩增组.[结论]①含人UCBMSCs体系扩增后的UCB细胞具有NOD/SCID小鼠体内植入并重建小鼠造血的能力,但不具有提高小鼠体内植入率的作用.②扩增后的UCB移植可显著促进移植后小鼠造血恢复,提高小鼠存活率.③扩增后的UCB移植主要促进小鼠髓系及巨核系的植入,但对淋巴系的植入有抑制作用.
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白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特对小鼠气道炎症的抑制作用
[目的]探讨白三烯受体1拮抗剂孟鲁斯特(montelukast,MK)抑制小鼠气道炎症的作用及可能的机制.[方法]致敏的BALB/c小鼠持续吸入10 g/L雾化卵白蛋白(OVA)30 min,OVA吸入前2 d开始连续3 d或5 d尾静脉给予MK或生理盐水(saline),OVA吸入后24 h及72 h取材,瑞氏染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)中炎症细胞的渗出情况;ELISA方法检测血清、BALF和肺组织中有关细胞因子水平;HE、刚果红染色观察肺组织炎症细胞的渗出;免疫组化染色观察血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)和嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的表达;原位杂交研究IL-5 mRNA的变化.[结果]给予MK 5 d减少BALF嗜酸性粒细胞渗出达90%以上,嗜酸性粒细胞减少随MK剂量(10、25、62.5 mg/kg)的增加呈量效关系.ELISA结果表明给予3 d MK使肺、血清和BALF中IL-5、IL-4水平显著降低,肺IL-13含量也明显减少(P＜0.05),但MK组肺组织eotaxan下降与saline组比较无明显差异(P＞0.05).免疫组化显示MK组肺组织VCAM-1和eotaxin表达比saline组明显减弱;原位杂交可见MK组肺组织IL-5 mRNA的表达比saline组减弱.[结论]MK减轻气道炎症,可能通过抑制VCAM-1表达和IL-5、IL-4、IL-13等细胞因子分泌起作用.急性哮喘中应用大剂量MK抗炎治疗值得进一步探讨.
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细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因型与中国南方人群Graves'病的关系
[目的]探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic Tlymphocyte associated antigen 4)基因第一外显子A/G(49)多态性与中国南方汉族人群Graves'病的关系.[方法]用PCR-RFLP确定CTLA-4基因第1外显子49位点基因型,分析广东地区汉族人Graves'病患者(GD组)120例及123名正常人(对照组)CTLA-4基因多态性.并把GD患者按性别、家族史、TRAb、突眼等分别分两亚组后分析CTLA-4基因第1外显子A49G位点基因型及等位基因的频率.[结果]CTLA-4基因第1外显子49位点G等位基因频率在GD组为0.704,对照组为0.679,A等位基因频率在GD组为0.296,对照组为0.321,基因型频率GG在GD组为0.483,对照组为0.447,AA在GD组为0.089,对照组为0.075,二组间均无统计学差异,P值均＞0.05.在GD组,按性别、家族史、TRAb及突眼进行分亚组后分析,CTLA-4基因A49G位点的基因型、等位基因频率也没有表现出差异(P值均＞0.05).[结论]CTLA-4基因第一外显子A/G(49)多态性可能不是中国南方汉族人Graves'病的主要易感因素.
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腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达
[目的]为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制,构建其重组腺病毒载体,并在PC12细胞中表达.[方法]RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列,TA克隆测序,酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV,电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183.重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞,用重组腺病毒感染PC12细胞.[结果]10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致,同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带.DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后,感染Ad-polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光,重组腺病毒Ad-polβPCR鉴定含目标条带,Ad-polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达.[结论]成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体并在PC12细胞中表达
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错配修复蛋白hMLH1在子宫内膜癌表达的临床意义
[目的]探讨错配修复蛋白hMLH1在子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)的失表达情况及其临床意义.[方法]用免疫组化S-P方法检测hMLH1蛋白在61例子宫内膜癌组织的失表达情况,并分析hMLH1蛋白失表达与子宫内膜癌临床病理的关系.[结果]子宫内膜癌组织存在hMLH1蛋白失表达,其失表达率为29.5%.hMLH1失表达子宫内膜癌细胞分化较好(P=0.047),临床预后较好(OR=5.458,P=0.025),hMLH1失表达为子宫内膜癌独立预后因素(Cox多因素分析,P=0.006).[结论]hMLH1基因功能缺失在子宫内膜癌代表较良好的预后,hMLH1失表达有可能作为子宫内膜癌的独立预后因素.
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高脂血症肾移植患者外周血MCP-1及其受体CCR2 mRNA表达及辛伐他汀治疗的影响
[目的]探讨肾移植术后高脂血症患者外周血单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体CCR2 mRNA的表达及辛伐他汀治疗影响.[方法]根据患者肾移植术后6个月的血脂水平,从167例肾移植受者中选择60例作为研究对象,其中30例为血脂正常组(A组),30例为血脂增高组(B组),健康体检者30例作为对照组,逆转录聚合酶链反应检测各组外周血MCP-1及CCR2 mRNA表达水平.血脂增高组给予辛伐他汀治疗,分别于1.5个月、3个月时复查血脂水平及MCP-1、CCR2 mRNA表达水平.[结果]肾移植受者外周血MCP-1及其CCR2mRNA表达水平显著高于对照组,B组增高更为显著.辛伐他汀治疗1.5个月时,B组患者血脂水平及外周血MCP-1、CCR2 mRNA表达水平显著降低,3个月时进一步降低.[结论]肾移植后高脂血症患者外周血MCP-1及CCR2 mRNA表达水平显著增高,可能参与了移植后心血管疾病及慢性移植肾排斥的发生.辛伐他汀治疗可显著降低肾移植受者外周血MCP-1及其CCR2 mRNA表达水平,此可能有助于减少或延缓移植后心血管疾病及慢性移植肾病的发生.
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人工胸水协助超声引导肝穹窿部肿瘤治疗
[目的]探讨人工胸水在超声引导经皮局部治疗位于超声盲区的肝穹窿部肿瘤的应用价值及其安全性.[方法]7例肿瘤位于肝穹窿部的肝癌患者,右侧胸腔注入1～2 L生理盐水,然后施行超声引导经皮微波固化或(和)无水乙醇瘤内注射治疗.[结果]人工胸水后,右肺底被推开,超声下肿瘤清晰显像,穿刺径路显现,局部治疗得以顺利进行.患者术后仅觉轻微胸闷,术后3～7 d胸水消失,所有治疗均无相关并发症发生.[结论]人工胸水使位于超声盲区无法进行超声引导经皮局部治疗的肝穹窿部肿瘤变为可治.这种方法安全性高,值得推广.
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固定扩弓联合前牵引治疗乳牙期骨性Ⅲ类错(牙合)的临床研究
[目的]探讨在乳牙期利用固定扩弓矫治器前牵引的临床效果.[方法]选取12例研究对象,采用固定扩弓矫治器进行前牵引治疗,扩弓加力直至上后牙的舌尖接近下后牙的的颊尖为止.上颌扩弓的同时进行前牵引,每侧施力约0.025～0.03 N,施力方向与牙合平面成10°,两侧施力方向要平行,要求患者每天坚持戴10～12h.摄治疗前后的头颅侧位定位片并进行X线头影测量分析,采用配对t检验进行统计学分析.[结果]用带有扩弓的固定装置进行前方牵引治疗乳牙期骨Ⅲ类错(牙合),能促进上颌骨的生长,SNA角明显增大,平均增大2.4°,下颌骨向下向后旋转并向后退缩,上下切牙舌倾.[结论]利用带有扩弓的固定矫治装置进行前牵引治疗乳牙期骨性Ⅲ类错(牙合),是确实可行且疗效显著.
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膜型基质金属蛋白酶-1在肝癌组织中的表达及意义
[目的]比较膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)在大肝癌(瘤体直径＞3 cm)及小肝癌(单肿瘤结节且瘤体直径≤3 ca)组织中的表达差异,并探讨其在肝癌肿瘤细胞浸润、转移过程中的作用.[方法]应用半定量RT-PCR方法检测MT1-MMP mRNA在22例大肝癌及12例小肝癌组织中的表达;应用免疫组化方法检测MT1-MMP蛋白在53例大肝癌及40例小肝癌组织中的表达,并分析MT1-MMP蛋白表达水平与肝癌浸润、转移之间的关系.[结果]MT1-MMP蛋白在大、小肝癌组织中的表达差异显著(P=-0.007),但其mRNA水平的差异无统计学意义(P=0.693);MT1-MMP蛋白表达水平与肝癌浸润及转移之间均呈正相关关系(P=0.021;P=-0.001).[结论]调控MT1-MMP蛋白在肝癌组织中异常表达的关键环节可能是在转录后水平进行,大肝癌肿瘤细胞的侵袭能力较小肝癌强与其高表达MT1-MMP蛋白有关.
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Ⅰ型神经纤维瘤病患者神经纤维瘤发生机制的研究
[目的]探讨1型神经纤维瘤病(NF1)患者神经纤维瘤发生、发展的分子病理机制.[方法]将17例NF1和12例非NF1患者的神经纤维瘤标本进行石蜡包埋切片,常规HE染色和NF1蛋白特异性多克隆抗体标记;Western blot检测3例NF1、2例非NF1患者神经纤维瘤和1例正常神经的细胞中NF1蛋白和hTERT蛋白的表达.[结果]NF1组与非NF1组HE染色无明显差异;NF1特异性多克隆抗体标记显示NF1蛋白的表达率NF1组明显低于非NF1组,Western blot结果显示正常神经组与非NF1组比较,NF1蛋白表达没有明显差异,NF1组NF1蛋白表达明显低于非NF1组和正常神经组;NF1组和非NF1组hTERT蛋白表达明显高于正常神经组,NF1组和非NF1组比较hTERT蛋白表达差异无显著性意义.[结论]实验结果提示NF1患者神经纤维瘤的形成除了与NF1蛋白表达缺失,肿瘤抑制作用减弱有关外还与hTERT蛋白表达增加,端粒酶活性增高有关;而非NF1患者神经纤维瘤的形成与hTERT蛋白表达增加,端粒酶活性增高有关,与NF1蛋白表达缺失无关.
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子宫肌瘤致病相关基因的筛选与克隆
[目的]研究子宫肌瘤与正常子宫肌组织中的基因表达差异,筛选及克隆子宫肌瘤的致病相关基因.[方法]应用荧光标记的mRNA差异显示技术,比较11例子宫肌瘤及其正常子宫肌组织基因表达的差异,对获得差异片段进行克隆、测序及同源性分析,并对其中5条差异片段在子宫肌瘤及正常子宫肌组织中的表达情况进行RT-PCR分析.[结果]差异片段NO.3,5,11,12在子宫肌瘤正常及异常组织中的表达均存在差异.其中NO.3差异片段在8例子宫肌瘤组织中有表达,而相应的正常组织中仅2例有表达.NO.5,11,12差异片段在子宫肌瘤中的表达水平高于正常子宫肌组织中的表达水平.[结论]在子宫肌瘤的发生和发展过程中存在多个基因的表达异常,其中ulap8基因有可能在子宫肌瘤组织中呈特异性的表达,ulap14,ulap25,ulap26基因在子宫肌瘤组织中存在表达差异,推测这些基因有可能与子宫肌瘤的发病有关.
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脾切除781例临床分析
[目的]探讨临床脾切除适应证的合理选择,围术期处理以及脾切除对机体的影响.[方法]对我院近10年781例脾切除患者的临床资料进行回顾性统计分析和部分病例的术后随访.[结果]切脾指征中以门静脉高压性病理脾为多见(321例,41.10%),其次为腹部肿瘤联合脾切除(213例,29.32%);781例患者中共行1 373例次不同类型的手术,联合手术中以分流或断流术多(23.65%);术后共有113人(14.47%)发生202例次并发症,发生率为25.86%,以感染为多见.对120例门脉高压巨脾切除后进行了1～10年的随访,未见有严重感染发生.[结论]门静脉高压性病理脾是我国脾切除主要适应证,且病理脾的切除对术后远期疗效是有益的;术后并发症的发生与切脾指征密切相关,加强围术期处理是提高近期疗效的关键.
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宫腔镜在体外受精-胚胎移植失败病例中的应用价值
[目的]探讨官腔镜在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败病例诊断中的应用价值.[方法]收集从1996到2004年在中山大学附属第一和第二医院生殖中心行体外受精-胚胎移植失败患者107例,在我院进行了宫腔镜检查,其中83例进行了内膜活检,总结分析该资料.[结果]宫腔镜发现正常官腔74例(69.16%),异常33例(30.84%),其中包括宫腔粘连6例、内膜薄6例、官腔息肉6例、内膜肥厚5例、黏膜下子宫肌瘤4例、宫颈管狭窄3例、内膜炎2例、子宫纵隔1例.83例子宫内膜病理活检则发现正常内膜54例(65.06%),其中增生期18例、分泌期36例;内膜异常29例(34.94%),其中黄体功能不全(LDP)12例、轻度增生过长7例(其中有一例同时伴有宫腔息肉),内膜炎症5例、宫腔息肉3例、子宫内膜结核2例.[结论]对体外受精-胚胎移植失败病例,进行宫腔镜检查有助于明确病因.
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两种镍钛机动预备器械根管清理效果的电镜观察
[目的]比较两种镍钛机动预备器械ProFile(PF)和Hero642 (HE)在使用冲洗液时对离体根管的清理能力.[方法]32个具有双根管的离体下颌磨牙近中或远中根随机分为两组.A组29例,自来水对照组;B组30例,0.71 mol/L次氯酸钠和0.58 mol/L乙二胺四乙酸(EDTA)冲洗组.每个标本的两个根管分别用PF和HE进行根管预备,沿根管弯曲平面纵向剖开牙根,扫描电镜观察根尖段、中段和冠方段的碎屑和玷污层,按5分制评分标准进行统计.[结果]同种冲洗液条件下,两种镍钛器械在根管冠段、中段及根尖段的根管清理效果无统计学意义(P＞0.05);同种镍钛器械,B组较A组清理效果好(P＜0.05).[结论]两种镍钛机动预备器械均不能彻底清理根管;临床上在使用镍钛机动器械预备根管的同时,应配合使用有效的根管冲洗液.
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内窥镜下激光睫状体光凝术治疗人工晶体术后继发青光眼
[目的]初步评价眼内窥镜下激光睫状体光凝术(endoscopic cyclophotocoagulation,ECP)在治疗人工晶体植入术后继发青光眼中的疗效.[方法]采用Endo Optiks,URAM E2激光内窥镜系统对21例21眼人工晶体植入术后继发青光眼进行了ECP治疗,观察术后眼压变化、视力以及并发症情况,术后分别随访了6～26个月,平均18.7个月.[结果]21只眼术前眼压平均(5.08±1.69)kPa,术后平均眼压(1.96±1.23)kPa,术前、术后眼压差异有统计学意义(P＜0.001).术前平均使用降眼压药物3.3种,术后下降到0.6种,差异有统计学意义(P＜0.001).术后元需应用药物治疗而眼压≤2.8 kPa者占71.4%,需要应用局部药物治疗控制眼压≤2.8 kPa者占14.3%.患者术后视力较术前有增高(P＜0.05).21只眼中有1只眼术后出现前房积血,有19只眼术后瞳孔区出现纤维素样渗出,1只眼术后发生渗出性脉络膜脱离.这些并发症出现在早期,并在1周内愈合.所有患者术后均未出现视网膜脱离、眼压过低、眼内炎、交感性眼炎等并发症.[结论]ECP能有效地降低人工晶体植入术后继发青光眼的眼压,无严重并发症.ECP是一种治疗人工晶体植入术后继发青光眼的安全有效的方法.
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嵌体修复下颌第一磨牙残冠的三维有限元模型的建立
[目的]建立带桩嵌体修复下颌第一磨牙残冠的三维有限元模型.[方法]制成第一磨牙残冠的制锁式带桩嵌体修复体的模型,将该模型置于水杯中,利用螺旋CT扫描,通过图像合成软件建立三维数字模型,结合大型有限元软件ANSYS进行建模.[结果]建成后三维有限元模型与实体组织具有良好的几何相似性.[结论]将牙体修复模型置于水中,经螺旋CT扫描并与有限元方法结合起来,可以建立复杂的牙模型,且能真实地模拟实际情况,使用性好.
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全冠修复体计算机辅助设计的初步研究
[目的]初步探讨全冠修复体计算机辅助设计的基本方法.[方法]使用机械扫描仪采集了全冠预备体的表面数据,利用已有的标准牙的数据,在通用的CAD软件平台上初步实现了全冠修复体的计算机辅助设计的全过程.[结果]获得了全冠修复体的CAD数据,包括内外表面的数据,数据完整精确.[结论]本研究路线实用可行,可以为修复体CAD/CAM系统的研制提供参考.
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成人气管切开机械通气并发气管狭窄的相关因素分析
[目的]探讨成人气管切开并行机械通气患者并发气管狭窄的影响因素.[方法]选择本院1994-2003年气管切开并行机械通气治疗的246例患者为研究对象,就性别、年龄、术前有否气管插管,术前插管时间、术后持续机械通气时间、既往气管切开史、更换气管套管次数、环甲膜切开及反复呼吸道感染、糖尿病、胃食管返流等11个相关临床因素,用χ2检验和Logistic回归进行单因素和多因素分析.[结果]本组病例中,并发气管狭窄28例(11.4%),相关因素的单因素分析显示:术前插管时间(P=0.025)、术后持续机械通气时间(P=0.02)、反复呼吸道感染(P＜0.001),糖尿病(P＜0.001),胃食管返流(P=0.026)与气管狭窄发生有关.而多因素分析结果表明:术后持续机械通气时间、糖尿病、反复呼吸道感染、胃食管返流与发生气管狭窄明显相关.[结论]气管切开并行机械通气患者并发气管狭窄的影响因素是多方面的.统计学研究表明,术后机械通气持续时间、反复呼吸道感染、胃食管返流和合并有糖尿病等是其危险因素.
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全头皮撕脱再植成功1例报告
[目的]报告2003年10月通过重建血循环再植成功的严重全头皮撕脱伤病例.[方法]全麻下,将撕脱头皮及颅面部创面彻底清创,于10～16倍显微镜下吻合右侧颞浅动脉和左侧颞浅静脉重建撕脱头皮血循环,手术历时7 h.[结果]再植头皮94%成活,术后两个月成活头皮毛发生长.[结论]高质量的血管吻合和正确的血管处理,一条颞浅动脉和一条颞浅静脉的吻合亦可保证再植头皮成活.
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从冠脉内皮细胞功能看心脏直视手术中的心脏保护
心脏停跳液(器官保存液)初是为了保护在心脏外科手术(心脏移植手术)中的心肌(心肌细胞)而设计的.由于心肌细胞和血管细胞(内皮细胞和平滑肌细胞)在结构和功能上的差异,此类液体对冠脉的血管细胞有不利的作用.同时,这种不利的作用往往由于许多其他的因素而变得复杂化,例如缺血再灌注、温度、灌注压或者灌注持续时间.在评估一种停跳液对冠脉内皮功能的影响时,我们需要考虑很多方面.第一,需要确定停跳液对内皮的整体影响.第二,必须区分停跳液对每种血管内皮细胞舒张因子(一氧化氮,前列环素,内皮源性超极化因子)的作用.第三,需要研究停跳液里各个主要成分的作用.后,需要研究各种新型添加剂的作用.在过去十余年中,我们的研究集中在心脏外科手术中内皮细胞的功能上并首次发现了高钾对内皮细胞超极化因子的损害作用.本综述拟在现有文献基础上讨论以上的问题,希望能够为心脏停跳液或器官保存液更进一步的发展提供信息.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 z1 z2 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 Z1 |
| 1999 | 01 02 03 04 |
