自噬在不同年龄大鼠终板软骨中的变化

目的 观察不同月龄SD大鼠终板软骨中自噬的变化及其意义.方法 取3、6、12月龄SD大鼠的原代终板软骨细胞,分为自然培养组和雷帕霉素组.茜素红染色观察细胞形态,实时聚合酶链反应和免疫印迹检测软骨标志基因Ⅱ型胶原、SOX-9、蛋白多糖转录因子和基质分解酶相关基因MMP-13以及自噬相关基因Beclin-1和LC3基因的表达,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察细胞的自噬率,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率.结果 茜素红染色显示细胞呈梭形改变,蛋白多糖转录因子、Sox-9和Ⅱ型胶原基因表达呈年龄依赖性降低趋势(P<0.05),提示随年龄增长,终板软骨细胞出现退变;自噬相关基因Beclin-1和LC3在各组终板软骨细胞中均有表达,且呈年龄依赖性降低趋势[(1.0±0.1)比(0.6±0.1),(1.0±0.1)比(0.3±0.2);(1.0±0.2)比(0.4±0.1),(1.0±0.2)比(0.1±0.1)](P<0.05),自噬发生率也呈现明显降低(P<0.05).自然培养组中,细胞存活率呈逐渐降低趋势(P<0.05);与自然培养组相比,雷帕霉素组中各组细胞存活率明显增加(P<0.05).结论 自然增龄大鼠中,终板软骨细胞逐渐出现退变,且存活率降低;上调其自噬水平,可提高细胞存活率,提示呈年龄依赖性降低的自噬活性,可能与椎间盘的自然退变有关.

体外高频热疗治疗癌性疼痛的中西医结合护理体会

目的：恶性肿瘤近年其发病率逐年增高，多数肿瘤患者发现时往往处于中晚期，已失去佳治疗时机，疼痛是其常常伴随症状，对患者身心造成极大危害，体外高频热疗通过针对肿瘤部位的治疗，能够使肿瘤细胞凋亡，是继手术、化疗、放疗及免疫治疗之后又一种治疗肿瘤的新手段，对改善肿瘤患者的疼痛有良好的疗效。方法：对67例不同种类的肿瘤患者，采用体外高频热疗加中药外敷的治疗方法，并进行疗效评定。结果：治疗后疼痛处理效果评价C R14人，完全停止使用止痛药。PR32人，NRS评分下降>50%，止痛药物用量减少>50%或换用低阶梯药物治疗。MR15人，止痛药物稍有减量。有5例患者疼痛无明显改善，其中1例热疗中出现疼痛加重现象。结论：体外高频热疗具有抑制肿瘤的生长和减少复发。增强细胞吞噬作用，调节免疫功能等作用。是一种非侵入性治疗实体肿瘤的新技术。体外高频热疗为中晚期肿瘤患者减轻痛苦、控制疼痛、提高生存质量提供了一种新的治疗手段。体外高频热疗配合中药外敷具有缓解疼痛的作用。

1,25(OH)_2D_3对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌过程的影响

目的 研究维生素D(VD)对巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的吞噬活性及吞菌后巨噬细胞自身凋亡过程的影响.方法 巨噬细胞株RAW264.7分为对照组(C),细菌组(B),活性VD+细菌组(VD+B),VD+B组加入终浓度为10~(-8)mol/L活性VD培养24h后,与细菌组一起感染金黄色葡萄球菌1h,用流式细胞仪测定各组巨噬细胞吞噬率、线粒体膜电位、细胞内游离钙离子浓度、活性氧的差异.结果 VD+B组巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的能力显著高于B组;VD+B组巨噬细胞吞菌后线粒体膜电位显著低于B组;同时,VD+B组的细胞内游离钙离子浓度显著低于B组的;两组间活性氧的生成没有显著性差异.结论 维生素D能促进巨噬细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬能力,对于吞噬细菌后巨噬细胞自身的凋亡有一定抑制作用.

铁棍山药促进巨噬细胞吞噬细菌的高内涵分析方法研究

目的 建立巨噬细胞系RAW 264.7对绿色荧光蛋白标记的大肠杆菌(GFP-E.coli)吞噬活性的高内涵分析方法,评价铁棍山药在体外对巨噬细胞增殖和吞噬活性的促进作用.方法 采用CCK-8法测定铁棍山药作用于RAW 264.7巨噬细胞的增殖活性.采用高内涵技术,建立铁棍山药调节巨噬细胞RAW 264.7吞噬细菌活性的评价方法.结果 通过考察给药时间、细菌加入量、细菌刺激时间等因素,确定所建立方法的佳方案为给药12h、细菌加入量为50倍、细菌刺激时间1.5 h;方法重复性考察RSD值为2.31％.与不加药组相比,在铁棍山药质量浓度为0.156～1.25 mg/mL都能促进巨噬细胞的增殖,以及单个细胞的平均吞噬率;在1.25 mg/mL时铁棍山药促进巨噬细胞的增殖及吞噬活性的能力强.结论 首次建立铁棍山药促进巨噬细胞吞噬活性的高内涵分析方法,该方法具有准确、直观、高通量等优势;铁棍山药在体外既能促进巨噬细胞增殖,又能提高单个细胞的吞噬能力,为进一步分析山药等补益类中药的免疫活性及增强免疫机制的研究提供新思路和新方法.

生物材料粒子的类型和尺寸对吞噬作用及组织分布的重要意义

外用干扰素喷雾剂治疗带状疱疹疗效观察

带状疱疹是皮肤科常见多发病,由水痘带状疱疹病毒感染引起,好发于免疫功能低下人群.干扰素具有广谱抗病毒和免疫调节作用, 可抑制病毒感染和细胞中病毒的复制,用于各种病毒感染性疾病,均取得较好疗效.同时干扰素还具有调节免疫作用,可以增强巨噬细胞的吞噬作用、增强淋巴细胞对靶细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的功能.国内外已应用干扰素注射剂治疗带状疱疹[1],有一定的疗效.近SDA批准了天津华立达公司的重组人干扰素α-2b喷雾剂(商品名:捷抚),用于预防和治疗皮肤粘膜局部病毒感染导致的疾病.本试验采用注射干扰素加外用干扰素喷雾剂,探寻一种新的带状疱疹治疗方案.

卵巢癌微环境及长链非编码RNA调节巨噬细胞极化的研究进展

肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)是肿瘤微环境中常见的免疫细胞,其在肿瘤组织、远处转移前微环境和转移阳性的淋巴结中均有分布,与肿瘤的进展和预后有关.卵巢癌组织和卵巢癌患者腹水中存在大量的TAMs,然而TAMs浸润、极化和促进肿瘤进展的机制尚不完全清楚.近年长链非编码RNA(lncRNA)在细胞功能调控中的作用逐渐受到重视,其可通过竞争性结合微小RNA(miRNA)、直接与染色质或蛋白质结合而对编码基因进行调控,从而影响细胞的功能.lncRNA与巨噬细胞的极化也有关系,M1型和M2型巨噬细胞的多个lncRNA表达水平具有显著差异.此外,lncRNA也与巨噬细胞的抗原呈递和吞噬功能的调节有关.抑制TAMs的靶向治疗有利于控制卵巢癌的生长和减少腹水量,而以lncRNA为靶点的肿瘤治疗的实验研究也已取得一定的进展.

抗CD47靶向治疗研究现状及应用前景

在肿瘤发生发展过程中,肿瘤细胞逃逸了免疫系统的监视;免疫逃逸机制对于研发新的抗肿瘤治疗方案具有重要的意义.免疫治疗旨在激活患者自身的免疫系统,是肿瘤治疗相关研究的前沿,具有广阔的应用前景.CD47是一种广泛表达的细胞表面分子,肿瘤细胞可能借此"别吃我"信号,逃避了肿瘤免疫;肿瘤干细胞中CD47的表达水平甚至比肿瘤细胞更高.通过使用抗CD47抗体阻断CD47-SIRPα通路,从而介导细胞吞噬作用,能够靶向性杀伤肿瘤细胞.现在多项关于CD47靶向治疗的临床试验正在进行中,包括两种单克隆抗体和一种融合蛋白.然而由于使用动物模型不一,可能高估了这些药物的临床疗效预测.现将CD47抗肿瘤治疗相关研究的背景及潜在问题加以综述,并对该治疗的未来应用前景予以展望.

药物引起的嗜酸性粒细胞增多

当成人外周血嗜酸性粒细胞分类计数超过7%,绝对值超过0.45×109/L时称嗜酸性粒细胞增多或嗜酸性粒细胞增多症.嗜酸性粒细胞增多症的发病机理目前尚无定论,多数人认为是一种特异性变态反应,系多种不同因素所致的抗原-抗体复合物与嗜酸粒细胞接触后,通过吸附和吞噬作用,而刺激嗜酸性粒细胞的增殖.国内所见的嗜酸性粒细胞增多,常见于寄生虫感染,特别是当其侵犯肠道外组织时,嗜酸性粒细胞增多更显著.其次为变态反应性疾病,可发生轻至中度的嗜酸性粒细胞增多.本文只讨论报道过的引起嗜酸性粒细胞增多过敏反应有关的药物.

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能实验的改进

[目的]将大吞噬实验中的吞噬颗粒鸡红细胞换成酵母菌,硫代乙醇酸钠作为巨噬细胞刺激剂,观察小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬作用的现象和功能,探索和改进实验方法.[方法]小鼠经腹腔注射3％硫代乙醇酸钠溶液刺激活化腹腔巨噬细胞,96 h后经腹腔注射分别注射鸡红细胞悬液和酵母菌菌液,10、30、60 min后观察巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞和酵母菌的现象,并分别测定其吞噬百分率和吞噬指数.[结果]30 min就可观察到小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞和酵母菌的现象,吞噬鸡红细胞和酵母菌的平均吞噬百分率分别为15.3％和18.9％,吞噬指数分别为19.3和45.9,结果显示酵母菌作为吞噬颗粒,吞噬细胞对其吞噬百分数和吞噬指数均升高.[结论]小鼠腹腔巨噬细胞体内吞噬酵母菌现象更明显,吞噬能力较大,而且省去制备鸡红细胞的时间,操作更方便,可作为一种稳定而简单体内巨噬细胞吞噬实验的方法.

左旋咪唑对脑的损害作用

左旋咪唑是四咪唑的左旋异构体,初用于驱除肠道线虫如蛔虫、钩虫等,是一种广谱驱虫药,但从1971年Renoux发现其在动物体内有调整机体免疫功能的作用以来,已经明确它能恢复和增强吞噬作用,能恢复和增强T细胞功能,增强排斥反应并增加外周血中T细胞数量,对免疫功能低下的机体产生免疫增强作用,而对免疫功能亢进者则发挥抑制作用,故称之为免疫调节剂[1].临床上利用这一功能治疗与免疫有关的疾病,其不良反应也因大量地应用而被人们所观察和认识到,可累及到许多器官和组织如神经、消化、呼吸、皮肤、心血管、肾、血液及造血系统等,其中以脑损害常见,可达74.2%(135/182)[2].笔者就其发病机理、临床表现、辅助检查、诊断、治疗、预防等作一综述,以引起重视.

携氧载药脂质微泡体外巨噬细胞化初步研究

目的 探索携氧载紫杉醇脂质微泡体外巨噬细胞化的可行性及相关影响因素.方法 采用机械振动法合成携氧载紫杉醇脂质微泡,与体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞共孵育,普通光镜观察不同孵育时间下巨噬细胞对不同粒径、不同浓度的脂质微泡的吞噬率.结果 携氧载紫杉醇脂质微泡体可成功被巨噬细胞吞噬,其吞噬效率与微泡粒径、浓度及二者共孵育时间密切相关.随着微泡粒径增大,巨噬细胞对微泡的吞噬率下降;巨噬细胞与微泡的比例1∶10,共孵育30 min吞噬率高,达到(18.9±0.69)％.结论 携氧载紫杉醇脂质微泡可成功体外巨噬细胞化,微泡粒径、浓度及二者共孵育时间均是影响微泡巨噬细胞化效率的重要因素.

低温对全麻大鼠中性粒细胞吞噬功能和活性氧产量的影响

目的 通过评价低温对全麻大鼠中性粒细胞(PMNL)吞噬功能和活性氧(ROS)产量的影响,探讨低温抑制PMNL免疫功能的机制.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重200～240 g,随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)、常温麻醉组(N组)和低温麻醉组(H组).C组在非麻醉状态下维持中心温度(直肠温度)38℃;N组和H组在全麻状态下分别维持中心温度38℃和34℃,3 h后开腹,取腹主动脉血2 ml,肝素抗凝,以流式细胞仪测定PMNL吞噬率和ROS水平.结果 与C组比较,N组PMNL吞噬率和ROS水平降低(P＜0.01);与N组比较,H组上述指标明显降低(P＜0.01).结论 低温可通过降低全麻大鼠PMNL的吞噬功能和ROS产量抑制PMNL免疫功能.

羟乙基淀粉与明胶对人体中性粒细胞和单核细胞吞噬作用的影响

目的观察明胶和6%羟乙基淀粉200/0.5溶液对中性粒细胞和单核细胞吞噬作用的影响.方法33例ASA Ⅰ～Ⅱ级的泌尿外科病人随机分为3组,组Ⅰ:明胶组(n=11);组Ⅱ:羟乙基淀粉组(n=11);组Ⅲ:乳酸林格氏液(Bss)组(n=11).每组病人均输注胶体或Bss10 ml·kg-1,输注前及输注后1 h抽取静脉血,使用流式细胞仪测定中性粒细胞和单核细胞对异硫氢酸荧光素(FITC)标记的经调理的大肠杆菌的摄取数.结果组Ⅰ输液后产生吞噬作用的中性粒细胞百分数显著性下降(P＜0.05);单核细胞百分数显著性下降(P＜0.01).组Ⅱ、组Ⅲ输液前后无明显变化.结论羟乙基淀粉对中性粒细胞和单核细胞的吞噬作用无明显影响,而明胶则使之减弱.

重组β-防御素-2预处理对急性肺损伤大鼠肺组织ICAM-1表达的影响

急性肺损伤(ALI)系创伤、感染等诱因触发的全身炎性反应综合征或代偿性抗炎反应综合征在肺组织的表现,脓毒症是其主要的诱发因素[1].β-防御素-2不仅对多种病原微生物有高效杀伤作用,而且对树突状细胞具有趋化和调理吞噬作用[2-4].而β-防御素-2在内毒素性ALI防治中的作用尚无定论.本研究拟观察重组β-防御素-2对内毒素性ALI大鼠肺组织胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,探讨其对ALI的防治作用.

安福隆治疗流行性腮腺炎42例疗效体会

安福隆系利用携带有人白细胞干扰素基因质粒的重组假单孢菌生产,具有广谱抗病毒、抑制细胞增殖以及提高免疫功能等作用.提高免疫功能包括增强巨噬细胞的吞噬作用,增强淋巴细胞对靶细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的功能.

凝固酶阴性葡萄球菌致医院内感染的危险因素分析

凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)院内感染日益增多.该类菌为条件致病菌,它可产生溶血素、杀白细胞素、肠毒素,并且有吞噬作用.近年来,其耐药性逐渐增加.北京军区总后医院CNS检出率从1999年的34%上升到2000年的52%,且出现多重耐药现象.

穿琥宁注射液不良反应及原因分析

穿琥宁是从爵床科植物穿心莲叶中提取制成的中药制剂,其有效成分是脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯单钾盐,其药理作用主要包括[1]:①抗病原微生物的作用,无直接杀菌作用,但可增强吞噬细胞对病原微生物的吞噬作用;②抗心肌缺血和抗心律失常作用,可升高下移的ST段,减少病理性Q波的出现,降低心律失常发生率;③抗血小板凝聚,抑制血栓形成;④解热抗炎;⑤保肝利胆;⑥兴奋垂体-肾上腺皮质系统.

冬虫夏草水提物对巨噬细胞吞噬功能的实验研究

对服用冬虫夏草水提物 3 周的小鼠进行巨噬细胞功能的测定.结果表明:同种浓度不同剂量的 3 个实验组:高 150(ml/kg),中(33 ml/kg),低(17 ml/kg)剂量组,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组,(P＜0.05).且 3 个实验组间比较也存在明显差异,(P＜0.05).提示:冬虫夏草可增强巨噬细胞吞噬功能,提高机体免疫功能.

急性坏死性胰腺炎时枯否细胞吞噬功能的实验研究

目的 研究急性坏死性胰腺炎时枯否细胞的吞噬功能.方法 将健康雌性Wistar大鼠随机分为三组:假手术组(SO组)、急性坏死性胰腺炎组(SAP组)及三氯化钆组(GdCl3组).各组动物均于术后24h处死.HE染色,光镜下观察胰腺病理改变;检测血中内毒素(endotoxin)及淀粉酶(AMS)水平.另外一批模型处死动物前各组经鼠尾静脉注射用生理盐水1∶3稀释的印度墨汁(0.25 ml/100 g).计算吞噬指数k的校正值a;HE染色,镜下观察枯否细胞(KC)并计数.结果 SAP组大鼠胰腺符合急性出血坏死性胰腺炎表现;GdCl3组与SAP组病变相似.SAP组与SO组相比,血中endotoxin及AMS水平显著升高(P＜0.01);GdCl3组与SAP组相比,血中endotoxin水平显著升高(P＜0.01),AMS水平无显著差异(P＞0.05).SAP组与SO组相比,KC的数目和吞噬指数k的校正值a无明显差异(P＞0.05);GdCl3组与SAP组相比,KC的数目和吞噬指数k的校正值a均显著降低(P＜0.01).结论 SAP时血中endotoxin水平显著升高,KC的吞噬功能无明显降低.