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大刺猴头(88)多糖的免疫调节功能
大刺猴头(88)多糖(hericium erinaceus polysacchrides HEPS)是由山西产大刺猴头(88)中提取分离的一种多糖,此多糖具有多种重要的生物活性:降血糖,抗衰老[1,2],抑制小鼠S180肉瘤的生长,增加荷瘤鼠的胸腺指数、脾指数,抗突变作用[3,4]等.我们观察了HEPS对小鼠巨噬细胞功能T细胞功能和NK细胞功能的影响,以探讨HEPS免疫抑瘤作用的机制.
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NK细胞对异基因骨髓移植中移植排斥和造血及免疫重建的影响
本研究探讨自然杀伤(NK)细胞在小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT)中对移植排斥、造血及免疫重建的影响.以C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠、BALB/c(H-2d)小鼠为受鼠,分别在致死剂量和非致死剂量(≤7.0 Gy)全身照射(TBI)的预处理条件下进行allo-BMT,移植同时输注供鼠外周T细胞和(或)NK细胞,移植后不同时间检测受鼠外周血白细胞、骨髓CD34+细胞数和外周血淋巴细胞中CD3+细胞、CD19+细胞及供鼠来源的H-2Kb+细胞表达的百分率,并对不同移植组的存活率、植入与排斥、造血及免疫重建进行比较.结果表明:在致死刑量TBI预处理的移植中,输注NK细胞与不输注NK细胞的移植组比较,存活率显著增高(60天存活率为70% vs 0.0%);白细胞数、CD19+ 细胞表达及骨髓CD34+ 细胞数恢复快;H-2Kb+细胞的表达水平高[(86.68±4.45)% vs (4.68±0.32)%].移植后28天输注NK细胞组CD3+细胞表达水平明显低于不输注NK细胞组[(33.69±3.36)% vs (50.40±5.06)%,P<0.01],移植后印天两组比较差异无显著性(P>0.05).在非致死剂量TBI预处理的移植中,移植后30天,异基因骨髓移植组H-2Kb+细胞表达率明显下降,移植后60天已下降至移植前水平;而输注高浓度和低浓度NK细胞的两组在移植后60天仍能检测到80%以上的H-2b+细胞表达.结论:在小鼠allo-BMT中,同种异基因反应性NK细胞可以抑制移植排斥,提高造血干细胞的植入水平,促进造血及免疫重建并增加移植受鼠的生存率.
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膜型/分泌型MICA对NK细胞受体NKG2D的相反调节效应及其对NK细胞受体谱的影响
目的观察膜型和分泌型MICA对NK细胞受体表达的影响,以探讨NK细胞抗肿瘤活化机制及肿瘤细胞表达MICA分子的意义. 方法用MTT法测定人NK细胞系(NK92)的细胞毒活性;用RT-PCR或FACS检测NK细胞受体(NKG2D, NKG2A/B, KIR2DL1, KIR2DS1)及NKG2D的识别配体MICA的表达. 结果肿瘤细胞表面的MICA分子可上调NKG2D的表达,下调抑制性受体NKG2A/B和KIR2DL1的表达;而分泌型MICA (sMICA)分子对NKG2D及抑制性受体的表达均有抑制作用. 结论膜型MICA分子可上调NKG2D的表达,激发NK细胞对肿瘤细胞的细胞毒效应;分泌型MICA分子则通过降低NKG2D的表达下调机体的抗肿瘤免疫效应,肿瘤细胞分泌sMICA分子为肿瘤发生免疫逃逸的机制之一.
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对恩氟烷吸入麻醉胃肠道肿瘤手术病人免疫细胞的检测
吸入麻醉药恩氟烷对肿瘤病人围手术期细胞免疫功能的影响报道结果不一,本文检测了恩氟烷吸入麻醉对胃肠道肿瘤手术病人T细胞亚群和天然杀伤细胞(NK细胞)数的影响.
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NK细胞与妊娠关系研究进展
NK细胞是20多年前美国国立肿瘤研究所的几位免疫学家在研究T细胞对靶细胞的特异杀伤时,发现对照组小鼠脾细胞可以象肿瘤免疫小鼠的脾细胞一样杀伤某些肿瘤细胞,不需预先免疫或致敏,从而将这类具备"天生"杀瘤功能的细胞称为天然杀伤细胞[1].
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γ干扰素对人NK细胞识别功能的负调节作用
目的探讨γ干扰素(IFN-γ)对人NK细胞识别功能的负调节作用.方法用MTT法测定人NK细胞系(NK92, NKL)的细胞毒活性及细胞增殖能力;用RT-PCR检测NK细胞受体(NKG2D、NKG2A/B、KIR2DL1、KIR2DS1)及NKG2D的识别配体主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关分子A(MICA)的表达.结果 NK细胞系(NK92、NKL) 对MICA表达阳性的肿瘤细胞杀伤活性明显高于对MICA表达阴性者;IFN-γ 1000 U/ml以上可明显抑制NK细胞对MICA表达阳性肿瘤细胞的细胞毒活性,并轻度抑制NK细胞的增殖,而对MICA表达阴性肿瘤细胞的杀伤活性无明显抑制作用;IFN-γ可抑制NK细胞系活化受体NKG2D的表达,增强抑制性受体NKG2A/B和KIR2DL1的表达.结论 IFN-γ可能通过下调NK细胞活化受体的表达,上调抑制性受体的表达,使NK识别的信号平衡向抑制性方向倾斜,从而对NK细胞功能发挥负调节作用,这种作用可能是NK细胞自我调节功能的表现.
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肿瘤细胞HLAⅠ类分子表达对NK抗性的影响及IFN-γ的调节作用
目的探讨肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类分子的表达与NK杀伤的关系及IFN-γ的调节作用.方法用间接免疫荧光法检测7种肿瘤细胞表面HLA-ABC分子的表达;用鼠抗人HLA-ABC单抗封闭靶细胞后,观察NK杀伤的变化;用IFN-γ处理靶细胞后,观察瘤细胞表面HLA分子表达的变化及NK杀伤的变化.结果不同肿瘤细胞株表达HLA-ABC分子的比例及荧光强度均不相同,除Karpas外,均表现为不同程度的下降.HLA-ABC表达阴性的K562细胞对NK杀伤敏感,其他细胞的敏感性均有下降.肿瘤细胞表面HLA-ABC分子的表达多有不同程度的下降,用抗HLA单抗封闭相应位点后,可使NK杀伤明显增强.用IFN-γ 500 U/ml处理48 h后,白血病细胞K562、黑色素瘤细胞M21和高转移肺癌细胞PG表面HLA Ⅰ类分子表达明显增加,对NK杀伤的敏感性降低;而人T细胞淋巴瘤Karpas、髓样白血病细胞HL60和结直肠癌细胞HT29经处理后,HLA Ⅰ类分子表达无明显变化,对NK杀伤的敏感性反而明显增强.IFN-γ促进HL60和HT29细胞的凋亡.结论 NK细胞能识别HLA-ABC分子表达下降或缺陷的肿瘤细胞并发挥杀伤作用;IFN-γ能恢复部分肿瘤细胞HLA-ABC分子的丢失,并能促进部分肿瘤细胞的凋亡,提高肿瘤对机体抗瘤机制的敏感性.
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重组人IL-15诱导的黏附性NK细胞及其免疫学特性初探
目的初步探讨重组人白细胞介素(rhIL)-15诱导的黏附NK细胞的免疫学特性.方法首先经淋巴细胞分离液、贴壁黏附及尼龙毛柱黏附对外周血NK细胞进行初步分离,然后联合使用Percoll不连续密度梯度离心法和T细胞Panning法进一步纯化NK细胞,流式细胞仪鉴定NK细胞并检测其纯度.应用rhIL-2(6 000 U/ml)和rhIL-15(6 000 U/ml)诱导纯化的NK细胞(R-NK)转变为黏附NK细胞(A-NK),再用细胞计数法、MTT法和RT-PCR方法检测两种细胞因子诱导所得A-NK细胞的增殖和杀伤活性等.结果 rhIL-15诱导的A-NK细胞在黏附率、增殖活性和细胞毒活性方面均显著高于rhIL-2诱导的A-NK.结论 IL-15是优于IL-2的A-NK细胞诱导剂.
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低剂量分次照射脾脏提高食管癌放疗患者抗辐射作用的研究
目的:探讨低剂量分次照射脾脏对食管癌放疗患者抗辐射能力及对机体正常组织的合理防护作用的影响.方法:60例食管癌放疗患者随机分为联合组及对照组.联合组放疗配合低剂量辐射照射脾脏,对照组单纯放射治疗;采用乳酸脱氢酶释放法和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标技术法检测患者治疗前后细胞免疫指标.同时观察两组急性放射性食管炎、放射性气管炎和放射性肺炎的发生率及出现时间.结果:治疗后细胞免疫指标NK细胞活性及CD4+、CD4+/CD8+比值联合组明显高于对照组(P<0.05).急性放射性食管炎、放射性气管炎和放射性肺炎的发生率联合组为40.0%、36.7%和6.7%明显低于对照组的100.0%、76.7%和27.6%(P<0.05).出现并发症时的平均放疗剂量联合组分别为49.23 Gy、42.25 Gy和64.00 Gy明显晚于对照组的28.17 Gy、22.56 Gy和42.53 Gy(P<0.05).结论:低剂量分次照射脾脏配合放疗治疗食管癌,可提高食管癌放疗患者的免疫功能和抗辐射能力.
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老年肺结核患者淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的变化及意义
目的 观察老年肺结核患者细胞免疫及体液免疫功能的变化探讨其意义.方法 对2010年4月至2012年12月福建医科大学附属泉州第一医院住院或门诊的127例肺结核患者,按年龄分为老年组及青壮年组,50例健康志愿者(健康组)作为对照组,采用流式细胞术检测肺结核患者CD4+T细胞、CD8+T细胞、天然杀伤细胞(NK细胞),采用免疫透射比浊法测定免疫球蛋白.结果 ①老年人肺结核组CD4+T细胞及CD4/CD8比值与青壮年组及健康组差异具有统计学意义,且低于青壮年组.老年人肺结核组CD8+T细胞与青壮年组及健康组差异具有统计学意义,且高于青壮年组,老年人肺结核组NK细胞与青壮年组差异无统计学意义.②老年肺结核患者血清中IgA,IgG,IgM与青壮年组之间差异无统计学意义.结论 老年肺结核患者细胞免疫功能较青壮年低下,但是体液免疫不受影响.
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外用干扰素喷雾剂治疗带状疱疹疗效观察
带状疱疹是皮肤科常见多发病,由水痘带状疱疹病毒感染引起,好发于免疫功能低下人群.干扰素具有广谱抗病毒和免疫调节作用, 可抑制病毒感染和细胞中病毒的复制,用于各种病毒感染性疾病,均取得较好疗效.同时干扰素还具有调节免疫作用,可以增强巨噬细胞的吞噬作用、增强淋巴细胞对靶细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的功能.国内外已应用干扰素注射剂治疗带状疱疹[1],有一定的疗效.近SDA批准了天津华立达公司的重组人干扰素α-2b喷雾剂(商品名:捷抚),用于预防和治疗皮肤粘膜局部病毒感染导致的疾病.本试验采用注射干扰素加外用干扰素喷雾剂,探寻一种新的带状疱疹治疗方案.
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160 截耳瓣鱼藤体外对正常人淋巴细胞增殖及对正常人和HIV-1感染者天然杀伤细胞的影响
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正常人外周血大颗粒淋巴细胞测定及结果分析
大颗粒淋巴细胞(LGL细胞)与天然杀伤细胞(NK细胞)属于同一细胞,是一种效应细胞,LGL也能够自发地、无需抗原刺激就可以杀伤恶变细胞和被感染的细胞.所以,对大颗粒淋巴细胞的数量和形态学观察分析有着很大的临床医学参考价值,可以作为评价人体天然免疫力的重要指标.有报道,以通用的细胞毒检查NK细胞实验和外周血涂片中LGL细胞计数的结果是相符的.
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安福隆治疗流行性腮腺炎42例疗效体会
安福隆系利用携带有人白细胞干扰素基因质粒的重组假单孢菌生产,具有广谱抗病毒、抑制细胞增殖以及提高免疫功能等作用.提高免疫功能包括增强巨噬细胞的吞噬作用,增强淋巴细胞对靶细胞的细胞毒性和天然杀伤细胞的功能.
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CIK过继免疫治疗恶性肿瘤病人的护理
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killers,CIK)是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞.由于该细胞同时表达CD3和CD56两种膜蛋白分子[1],故又称为天然杀伤细胞(NK细胞)样T淋巴细胞,兼具有T淋巴细胞强大的抗瘤活性和NK细胞的非主要组织相容性复合物(MHC)限制性杀瘤优点[2].我院从2001年11月-2004年11月应用CIK过继免疫治疗25例,取得了良好的疗效.现将治疗中的有关护理介绍如下.
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应该滤除白细胞后输血
输血对患者本身就可使自身抗体的能力下降,抑制巨噬细胞的趋化,降低对细菌、异物的清除能力,使血液中调理素及补体减少.游离的血红蛋白可阻滞单核巨噬细胞系统的功能,降低天然杀伤细胞的活性.外周血辅助T细胞与抑制T细胞的比例降低,使抗体水平下降,脾细胞和辅助T细胞产生的白细胞介素Ⅱ显著降低,可造成病人感染率升高,自发恶变的机率增加,所以在临床上尽量减少输血或者不输血为好.
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小鼠DC、NK细胞体外诱导、增殖及示踪方法
目的研究小鼠自然杀伤(NK)细胞、树突状细胞(DC)体外诱导增殖及其过继免疫后示踪的方法.方法建立C57BL/6小鼠皮下黑素瘤模型,体外诱导、增殖小鼠脾源性NK细胞及骨髓源性DC,进行电镜观察,并在体外以Brdu、DAPI标记,混合两种细胞回输荷瘤小鼠体内,观察肿瘤组织中两种细胞的示踪情况.结果DC、NK细胞在细胞因子诱导下体外成倍扩增,电镜下可见典型的DC、NK细胞.Brdu对细胞的标记率约65%,DAPI对细胞的标记率可达100%.在荧光显微镜下可见肿瘤组织切片中外源性DC、NK细胞的分布.结论Brdu、DAPI均可作为外源性细胞体内示踪的标记方法.
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自然杀伤细胞和树突状细胞交互调节的研究进展
自然杀伤(natural killer,NK)细胞和树突状细胞(dendritic cell,DC)是人体免疫系统中两种关键的免疫活性细胞,在抗感染、抗肿瘤过程中都起着关键性作用.近来发现,NK不仅具有杀伤肿瘤细胞和受感染细胞的能力,它还被认为是一种重要的免疫调控细胞[1].
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天然免疫与中西医结合
天然免疫(innate immunity) 是生物体在长期进化过程中所获得的有普遍性的重要防御机制.在机体中,维持体内平衡,抵抗外来的不良刺激,天然免疫是早、快发生应答的机制.虽然天然免疫不如针对特异性刺激所产生的特异性免疫强,但天然免疫稳定而保守,具有应对广泛刺激的效应[1].近来有关天然免疫机制的研究发展迅速,不仅涉及抗感染、抗肿瘤、自身免疫及保持自身稳定等领域,还发现了一系列新的天然免疫机制(如Toll样受体和CpG在增强免疫中的作用)[2].天然免疫范围很广,包括人体的屏障、细胞(如吞噬细胞、树突细胞、天然杀伤细胞等)、细胞因子(干扰素、白细胞介素等)、体液因子(补体、溶菌酶、短肽等).已有较多编码天然免疫因素的基因被克隆,表达的产品已制成成品,有的已用于临床.天然免疫是特异性免疫不可缺少的基础.
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雌激素对天然杀伤细胞的作用
为探讨雌激素对NK细胞的作用,在不同时间把不同剂量的雌激素加入培养体系中,分析雌激素对无和有外来刺激原刺激NK细胞的影响.结果显示培养开始加入生理剂量、低于生理剂量和超生理剂量的雌激素均可明显抑制NK细胞的增殖;培养48 h后加入相同剂量的雌激素,生理剂量和低于生理剂量雌激素仍可明显抑制NK细胞的增殖,超生理剂量雌激素非但不能抑制反而使NK细胞的数量增加.