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  • 大刺猴头(88)多糖的免疫调节功能

    作者:成静;祝寿芬

    大刺猴头(88)多糖(hericium erinaceus polysacchrides HEPS)是由山西产大刺猴头(88)中提取分离的一种多糖,此多糖具有多种重要的生物活性:降血糖,抗衰老[1,2],抑制小鼠S180肉瘤的生长,增加荷瘤鼠的胸腺指数、脾指数,抗突变作用[3,4]等.我们观察了HEPS对小鼠巨噬细胞功能T细胞功能和NK细胞功能的影响,以探讨HEPS免疫抑瘤作用的机制.

  • 麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠Th 1/Th 2型细胞因子的影响

    作者:黄文娟;万茜;徐天舒

    目的:探讨麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠血清Th 1型细胞因子白介素2(IL-2)/血清Th 2型细胞因子IL-10的影响,为麦粒灸在今后肿瘤治疗方案中的运用提供实验依据.方法:30只雄性C 57 BL/6 J小鼠随机分为麦粒灸组、荷瘤组、空白组,每组10只.采用Lewis肿瘤细胞悬液皮下接种复制Lewis荷瘤小鼠模型.麦粒灸组予麦粒灸治疗“后三里”,治疗10次后,观察各组小鼠一般状况,采用MTT法检测刀豆蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖能力,以双抗体夹心ELISA法测定血清IL-2、IL-10的表达水平.结果:麦粒灸组荷瘤小鼠与荷瘤组小鼠瘤体体积与体质量差异无统计学意义(P>0.05);与空白组比较,荷瘤组血清Th 1型细胞因子IL-2表达降低(P<0.05),血清Th 2型细胞因子IL-10增加(P<0.05);与荷瘤组比较,麦粒灸组荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖能力增加(P<0.05),血清Th 1型细胞因子IL-2表达增加(P<0.05),血清Th 2型细胞因子IL-10表达降低(P<0.05).结论:麦粒灸可有效调节荷瘤小鼠的免疫功能,促进荷瘤小鼠Th 1型细胞因子的产生,有效纠正荷瘤导致Th 1/Th 2的失衡,增强机体的抗肿瘤免疫功能.

  • 龟鹿益髓胶囊对实验性脑脊髓炎和脊髓血管内皮中黏附因子、脾脏T淋巴细胞增殖及血清细胞因子的影响

    作者:张志慧;陈金亮;王殿华

    目的:观察中药龟鹿益髓胶囊对实验性脑脊髓炎血管内皮黏附因子VCAM-1、脾T淋巴细胞增殖、血中IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的影响.方法:采用豚鼠脊髓匀浆和完全福氏佐剂制成的抗原-佐剂乳化液诱导大鼠EAE动物模型,应用龟鹿益髓胶囊作为治疗药物,以强的松作为对照药物,观察脑脊髓炎血管内皮黏附因子VCAM-1、T淋巴细胞增殖及血清中IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的水平.结果:龟鹿益髓胶囊能明显抑制EAE发病,减轻脑和脊髓血管内黏附因子的表达,同时对MBP诱导的脾T淋巴细胞增殖、血清IL-2、IL-6、TNF-α活性有明显抑制作用,对ConA诱导T淋巴增殖、IL-4具有增强作用,对脑和脊髓血管中黏附因子VCAM-1阳性表达具有减轻作用.结论:龟鹿益髓胶囊对ConA诱导的T淋巴细胞增殖具有增强作用;大剂量龟鹿益髓胶囊能抑制IL-2、IL-6,增强IL-4的活性,调节免疫功能,从而抑制EAE发病,提示中药龟鹿益髓胶囊通过截断T淋巴细胞活化的途径及调节体内紊乱的免疫功能对多发性硬化起到治疗作用.

  • 小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎性别差异研究

    作者:邢广羽;张金涛;宋春杰;尹岭

    目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)性别差异的原因.方法应用髓鞘脂质蛋白139-151(PLP139-151)免疫诱导建立EAE模型,观察雌雄小鼠病情的差异,采用MTT、ELISA法,检测外周淋巴细胞对自身抗原反应的性别差异.结果雌性小鼠的平均发病时间(15±2.1)d,早于雄性的(22±4.3)d,病程有复发-缓解的特点,而雄性则多呈一过性发病;EAE雌雄小鼠的特异性淋巴细胞增殖反应和γ-干扰素分泌无显著性差异(P>0.05),雄性小鼠白细胞介素-4(IL-4)分泌明显高于雌性小鼠(P<0.01).结论PLP139-151诱发小鼠EAE性别差异可能与雄性小鼠外周淋巴细胞分泌IL-4水平较高,具有保护作用有关.

  • 清开灵有效治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎

    作者:宋春杰;尹岭;朱克

    目的研究清开灵治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的可能性及有效性. 方法应用蛋白脂质蛋白139-151(PLP139-151)免疫SJL/J小鼠诱发慢性复发-缓解性EAE模型,研究清开灵对PLP139-151诱导的小鼠淋巴结细胞增殖反应及γ-干扰素(IFN-γ)分泌的作用,并通过神经功能评分观察清开灵治疗EAE的有效性. 结果清开灵可抑制PLP139-151诱导的淋巴结细胞增殖反应及IFN-γ的分泌(P<0.001),有效改善EAE小鼠神经功能评分(P<0.01),使发病时间延迟(P<0.01).EAE小鼠发病数和死亡数较对照组减少,但其差异并无显著性(P>0.05). 结论清开灵可有效治疗EAE,为清开灵用于临床治疗多发性硬化提供了实验依据.

  • 一种新的基质金属蛋白酶抑制剂ONO-4817对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用

    作者:吕佩源;宋春风;高昌星;井上敦

    目的探讨一种新合成的含氧肟酸的基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂ONO-4817对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果. 方法给EAE大鼠口服ONO-4817,观察临床症状、T淋巴细胞增殖以及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平. 结果 ONO-4817能显著改善EAE临床症状(P<0.01),同时明显抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),显著降低大鼠血清TNF-α水平(P<0.05). 结论研究表明,ONO-4817通过抑制MMPs活性、T淋巴细胞增殖和减少TNF-α生成,进而能显著减轻血脑屏障(BBB)的破坏,又可抑制炎细胞浸润和髓鞘破坏,从而有效缓解EAE.

  • 黄芩甙治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的实验研究

    作者:宋春杰;尹岭;丁新生;朱克

    目的 研究黄芩甙治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的可能性及有效性.方法 应用髓鞘脂质蛋白(PLP)139-151免疫SJL/J小鼠诱发慢性复发-缓解型EAE模型,研究黄芩甙对PLP139-151诱导的小鼠淋巴结细胞增殖反应及干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)分泌的作用,使用流式细胞技术检测黄芩甙对EAE小鼠淋巴结细胞CCR5表达的影响;通过神经功能评分观察黄芩甙治疗EAE的有效性.结果 黄芩甙可抑制PLP139-151诱导的淋巴结细胞增殖反应及IFN-γ的分泌,提高IL-4的分泌(P <0.001),有效降低EAE小鼠淋巴结细胞CCR5的表达;显著改善EAE小鼠神经功能评分(P<0.01),使发病时间延迟(P<0.01).EAE小鼠发病数和死亡数较对照组减少,但差异并无统计学意义(P>0.05).结论 黄芩甙可有效治疗EAE,为黄芩甙用于临床多发性硬化的治疗提供了实验依据.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子- α变化的意义

    作者:吕佩源;宋春风;高昌星;井上敦

    目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子(TNF)-α变化的意义.方法观察Le wis大鼠主动免疫性EAE临床症状、T淋巴细胞增殖以及血清 TNF -α水平. 结果 EAE临床发病过程中,T淋巴细胞增殖活跃,血清 TNF-α水平异常升高,并与临床症状呈正相关. 结论研究表明:EAE时, T淋巴细胞增殖旺盛和 TNF-α生成增多,进而导致血脑屏障的破坏,炎细胞浸润,从而诱发EAE.

  • ONO-4817对实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗作用

    作者:吕佩源;宋春风;高昌星;井上敦

    目的探讨一种新合成的含氧肟酸的基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂--ONO-4817对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果.方法给EAE大鼠口服ONO-4817,观察临床症状、T淋巴细胞增殖以及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平.结果ONO-4817能显著改善EAE临床症状(P<0.01),同时明显抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),显著降低大鼠血清TNF-α水平(P<0.05).结论研究表明,ONO-4817通过抑制MMPs活性、T淋巴细胞增殖和减少TNF-α生成,进而能显著减轻血脑屏障(BBB)的破坏,又可以抑制炎细胞浸润和髓鞘破坏,从而有效缓解EAE.

  • 常用中药静脉注射剂对银屑病T淋巴细胞增殖影响的比较

    作者:白彦萍;陈志华;李红艳;杨顶权

    目的 探讨4种常用中药注射剂清开灵注射液、鱼腥草注射液、香丹注射液、双黄连粉针剂治疗银屑病的作用机制并进行比较分析.方法 分离培养人外周血单核细胞,设定药物浓度,给药,MTT比色法定量测定细胞数,以增殖百分率与对数浓度作图显示量效关系.结果 4种常用中药注射剂对T淋巴细胞增殖均显示了抑制作用.实验还证明清开灵注射液的作用明显优于鱼腥草注射液(P<0.01).且其效果与浓度之间成正相关性.结论 4种常用中药注射剂可能通过抑制T淋巴细胞增殖达到治疗银屑病的效果.

  • 绿茶儿茶素对诱发乳腺癌大鼠免疫功能的影响

    作者:赵洁;田庆伟;王永明

    目的:研究癌前病变过程中绿茶儿茶素对免疫功能的调节作用.方法:采用二甲基苯蒽诱发的大鼠乳腺癌癌前病变模型.将大鼠随机分成4组,即对照组、二甲基苯蒽(DMBA)组、绿茶儿茶素(GTC)组及DMBA+GTC组,测定大鼠胸腺重量、巨噬细胞吞噬功能及T淋巴细胞增殖能力.结果:绿茶儿茶素可延缓大鼠胸腺器官的衰退,DMBA+GTC组巨噬细胞功能和T淋巴细胞增殖能力均高于其它组(P<0.05),在4组中对照组T淋巴细胞增殖能力低(P<0.05).结论:绿茶儿茶素可通过免疫调节机制在预防肿瘤发生上起一定作用.

  • 实验性变态反应性脑脊髓炎T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子-α变化的意义

    作者:吕佩源;宋春风;高昌星;井上 敦

    目的探讨实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)T淋巴细胞增殖和肿瘤坏死因子(TNF)-α变化的意义.方法从豚鼠(GP)脊髓中分离髓鞘碱性蛋白(MBP),主动免疫Lewis大鼠诱导EAE成功后,观察EAE组临床症状,并进行临床评分;应用淋巴细胞增殖试验测定EAE大鼠淋巴结T淋巴细胞增殖程度;应用ELISA技术测定血清TNF-α水平.结果 EAE临床发病过程中,T淋巴细胞增殖活跃,血清TNF-α水平异常升高,并与临床症状呈正相关.结论 EAE时T淋巴细胞增殖旺盛和TNF-α生成增多,进而导致血脑屏障(BBB)的破坏,炎细胞浸润,从而诱发EAE.

  • TJU103体外诱导造血干细胞移植的免疫耐受

    作者:周健;涂三芳;郭坤元;孙明;胡亮杉;吴远彬;卢晓珣;王杨

    目的:前期研究表明,吲哚亚甲基异烟腙(简称TJU103)可以明显降低异基因造血干细胞移植小鼠移植物抗宿主病的发生率和程度,明显延长小鼠移植后的生存期.实验拟观察TJU103诱导造血干细胞移植免疫耐受和对移植物抗白血病的影响,探索一条既能降低移植物抗宿主病又能保留移植物抗白血病的移植途径.方法:实验于2007-07/10在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.①实验材料:人急性髓系白血病细胞株KG1a由中国医学科学院血液学研究所宋增璇教授惠赠.10份自愿捐献的健康人外周血白细胞由广州市中心血站提供,等分为供者与受者.②实验方法:采用梯度密度沉淀法常规分离人外周血单个核细胞.以供者外周血单个核细胞作为反应细胞,受者正常外周血单个核细胞作为刺激细胞,体外建立异基因造血干细胞移植中供、受者间的单向混合淋巴细胞反应体系,应用TJU103阻断CD4+T细胞激活的抗原信号通路,设单独刺激细胞和反应细胞对照以及1640完全培养基空白对照.③实验评估:于培养第1、3、5天应用MTT检测TJU103对供者淋巴细胞的增殖活性的影响,于第5天用乳酸脱氢酶释放法分别检测10∶1, 20∶1,40∶1效靶比时供者淋巴细胞对受者单个核细胞和急性髓系白血病细胞KG1a的细胞毒活性影响,同时采用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞的百分比.结果:第3天和第5天实验组A值低于对照组 (P < 0.05).单向混合淋巴细胞5 d后实验组各效靶比供者T细胞杀伤受者外周血单个核细胞的活性明显低于对照孔 (P < 0.05);二者对KG1a细胞的杀伤活性差异不显著 (P > 0.05).TJU103对供者CD4+CD25+T细胞无影响.结论:TJU103降低T淋巴细胞增殖反应的同时并不影响其抗白血病效应,有望用于临床异基因造血干细胞移植中移植物抗宿主病和移植物抗白血病的免疫调节.

  • 运动对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响研究

    作者:聂健;王冀邯

    目的:探讨运动对大鼠脾脏T淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响。方法:将24只健康雄性SD大鼠随机分为三组:对照组、30 min运动组、60 min运动组;MTT、流式细胞术分别检测各组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力及T细胞亚群变化。结果:与对照组相比,30 min运动组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力增强(P<0.05),CD4+T细胞百分数及CD4+/CD8+比例升高(P<0.05),CD8+T细胞百分数无显著改变(P>0.05);60 min运动组大鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力、CD4+T细胞百分数、CD8+T细胞百分数及CD4+/CD8+比例显著改变( P>0.05)。结论:中小强度运动有助于增强机体细胞免疫功能,可能与适当运动能够加快脾脏T淋巴细胞增殖及改善CD4+/CD8+T细胞亚群相关。

  • TPA和IFN-γ活化角朊细胞对T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的作用

    作者:陶箭;周洪;唐军;周芸;周光炎

    角朊细胞激活对T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的作用.TPA和IFN0联合作用,激活角朊细胞表达表面分子,FACS检测MHC Ⅰ、Ⅱ类分子和CD80、CD86分子水平,BT-PCR检测B7-H1共刺激分子表达.由激活角朊细胞提供T淋巴细胞激活的第二信号;绵羊红细胞花环沉淀分离纯化T细胞,抗CD3单抗提供第一信号,建立体外混合培养系统,3H-TdR渗入法检测T细胞增殖,ELISA检测培养上清细胞因子浓度.结果显示,TPA和IFN-γ联合作用可诱导角朊细胞表达B7-H1共刺激分子,并上调其MHCⅡ类分子.以B7-H1为第二信号,可以协同抗CD3单抗对T细胞的增殖作用,并呈现独特的细胞因子分泌格局.因此角朊细胞激活后表达B7-H1共刺激分子,此第二信号可刺激T淋巴细胞增殖,对其功能分化具有调节作用.

  • PTD-HBcAg体外诱导小鼠髓源性树突状细胞成熟及在T淋巴细胞增殖中的作用

    作者:陈小华;潘庆春;余永胜;韩进超;臧国庆

    目的 观察融合蛋白PTD-HBcAg诱导体外培养的小鼠髓源性树突状细胞(DC)成熟及对T淋巴细胞增殖的作用.方法 体外分离培养近交系BALB/C小鼠髓源性DC加入重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rgM-CSF)、重组IL-4培养5 d,再加人TNF-a、HBcAg和PTD-HBcAg诱导DC成熟.激光共聚焦显微镜观察免疫荧光在细胞中的分布及定位,流式细胞计数仪测定DC表面分子表达,ELISA法测定DC培养上清液中IL-12 p70的水平,CCK-8试剂盒检测T淋巴细胞增殖反应.组间数据比较采用t检验.结果 成功体外诱导培养小鼠髓源性DC,HBcAg主要定位于DC膜表面,而PTD-HBcAg能够穿透DC膜进入细胞质.PTD-HBcAg能明显上调DC表面分子CD80、CD86和主要组织相容性复合体(MHC)II类分子表达;50 mg/L和100 mg/L PTD-HBcAg诱导DC分泌IL-12 p70水半分别为(142.50±18.31)ng/L和(124.30±15.12)ng/L,明显高于HBcAg诱导组的(42.31±4.21)ng/L(t=9.234和9.045,均P<0.05);PTD-HBcAg诱导DC刺激T淋巴细胞增殖能力明显高于HBcAg组及阳性对照TNF-a组.结论 PTD-HBcAg具有穿透DC膜能力,并能促进DC分化、成熟,明显上调表面共刺激分子表达,增强DC刺激T淋巴细胞增殖能力及分泌IL-12 p70的水平.

  • 右美托咪定对免疫低下幼鼠细胞免疫的影响

    作者:李霞霞;李玉兰;张东航;韩芳芳;张海军;王秀梅

    目的 评价右美托咪定对脾切除幼鼠外周血T淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响.方法 健康雄性SD大鼠24只,6周龄,体重130~150 g,随机分为四组:生理盐水组(S组)、右美托咪定组(D组)、生理盐水组+脾切除(SN组)和右美托咪定组+脾切除(SD组),每组6只.S、D组不做外科处理,SN、SD组制备脾切除模型.喂养1周后S组和SN组腹腔注射生理盐水 10 ml/kg,D组和SD组腹腔注射右美托咪定50 μg/kg.给药后2 h,取血样,采用MTT法检测外周血T淋巴细胞增殖能力,采用流式细胞术检测T细胞亚群即CD4+、CD8+细胞含量,计算CD4+/CD8+值.结果 与S组比较,SN组T淋巴细胞增殖能力降低,CD4+、CD8+含量及CD4+/CD8+值降低,D组T淋巴细胞增殖能力明显降低(P<0.05);与D组比较,SD组T淋巴细胞增殖能力明显降低,CD4+、CD8+含量及CD4+/CD8+值明显降低(P<0.05);与SN组比较,SD组T淋巴细胞增殖能力明显降低(P<0.05).结论 右美托咪定对正常幼鼠和免疫低下幼鼠细胞免疫均有一定抑制作用,且对免疫低下幼鼠的抑制作用更强.

  • 小鼠BTLA基因重组慢病毒载体的构建及鉴定

    作者:王子杰;邓忠磊;杨雪健;韩志坚;陶俊;鲁佩;殷长军;谭若芸;顾民

    目的:构建小鼠B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)基因重组慢病毒载体,探讨BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞增殖及活化的影响.方法:以小鼠脾脏组织总RNA为模板,逆转录为cDNA,通过PCR技术扩增BTLA基因,构建pWPTS-mBTLA慢病毒载体,磷酸钙法感染人胚肾上皮细胞株293T细胞.RT-PCR及Western blot法检测BTLA mRNA和BTLA蛋白表达,50%组织培养感梁剂量(TCID50)法检测重组慢病毒滴度.通过感染pWPTS-mBTLA及pWPTS-GFP慢病毒载体的293T细胞与小鼠脾脏T淋巴细胞混合培养,初步研究BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞活化与增殖的影响.结果:成功构建小鼠pWPTS-mBTLA慢病毒载体,并制备高滴度病毒颗粒(1.3×108 pfu/ml).通过对比实验组与对照组小鼠脾T淋巴细胞的增殖结果,发现4d及8dT细胞的增殖效应均明显受抑制,差异具有统计学意义(P<0.05),且这种抑制作用在0~8 d内具有时间依赖性.结论:过表达BTLA基因的293T细胞与小鼠脾T淋巴细胞混合培养后对其增殖及活化有抑制作用,提示成功构建具有生物学效应的小鼠BTLA基因重组慢病毒载体.

  • 阿伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎治疗作用的初步研究

    作者:沈霞;张作慧;崔桂云;雒东江;王慧

    目的观察阿伐他汀对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗效果,初步探讨其治疗机制.方法采用Lewis大鼠建立EAE模型,口服给药,观察临床症状,MTT法检测T淋巴细胞增殖,ELISA法测淋巴细胞培养上清液中γ干扰素(IFN-γ)的水平.结果阿伐他汀能显著改善EAE临床症状(P<0.05),同时明显抑制T淋巴细胞增殖(P<0.0.),显著降低大鼠血清IFN-γ水平(P<0.05).结论阿伐汀通过抑制T淋巴细胞的增殖和减少炎性细胞因子的分泌,从而抑制髓鞘破坏,有效缓解EAE.

  • 罗红霉素对小鼠接触性皮炎及T细胞功能的影响

    作者:刘康;徐强

    目的:研究罗红霉素对接触性皮炎及T细胞功能的影响.方法:使用2,4,6-三硝基氯苯诱导小鼠接触性皮炎,以双向混合淋巴细胞反应及刀豆蛋白诱导脾T细胞增殖,MTT法检测活细胞数量.采用RT-PCR方法检测细胞因子mRNA表达.结果:20 mg·kg-1罗红霉素效应相灌胃给药明显抑制2,4,6-三硝基氯苯诱导的小鼠接触性皮炎(P<0.01).25 μg·ml-1罗红霉素显著降低双向混合淋巴细胞反应(P<0.05),5、25 μg·ml-1罗红霉素明显抑制刀豆蛋白诱导的脾细胞存活、增殖(P<0.05, P<0.01)及T-bet、IL-2及IFN-γ的mRNA表达.结论:罗红霉素能抑制2,4,6-三硝基氯苯诱导的接触性皮炎,可能与其抑制T淋巴细胞存活、活化及增殖有关.

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