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小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎性别差异研究
目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)性别差异的原因.方法应用髓鞘脂质蛋白139-151(PLP139-151)免疫诱导建立EAE模型,观察雌雄小鼠病情的差异,采用MTT、ELISA法,检测外周淋巴细胞对自身抗原反应的性别差异.结果雌性小鼠的平均发病时间(15±2.1)d,早于雄性的(22±4.3)d,病程有复发-缓解的特点,而雄性则多呈一过性发病;EAE雌雄小鼠的特异性淋巴细胞增殖反应和γ-干扰素分泌无显著性差异(P>0.05),雄性小鼠白细胞介素-4(IL-4)分泌明显高于雌性小鼠(P<0.01).结论PLP139-151诱发小鼠EAE性别差异可能与雄性小鼠外周淋巴细胞分泌IL-4水平较高,具有保护作用有关.
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连翘提取物对实验性自身免疫性脑脊髓炎抗原特异性T细胞增殖和细胞因子分泌的影响
目的 探索连翘提取物对髓鞘蛋白脂质蛋白(PLP)139-151特异性T细胞增殖及细胞因子分泌的影响.方法 应用PLP139-151免疫SJL/J小鼠,免疫后10d取淋巴结细胞进行体外培养,按处理条件将淋巴细胞分为对照组、PLP抗原刺激组、大剂量连翘组、中剂量连翘组、小剂量连翘组.采用MTT法测定吸光度[D(λ)]值,以观察连翘提取物对淋巴细胞增殖的影响；ELISA法测定IFN-γ、IL-10的水平.结果 对照组、PLP抗原刺激组、小剂量连翘组、中剂量连翘组、大剂量连翘组D(λ)值分别为0.20±0.017、0.47±0.022、0.60±0.041、0.74±0.027、0.80±0.073,PLP抗原刺激组与对照组比较差异具有统计学意义(t=-30.710,P＜0.01)；后四组比较差异具有统计学意义(F=416.06,P＜0.001).与对照组相比,PLP抗原刺激组IFN-γ水平增高(455.7±25.4vs.2507.0±79.8),IL-10水平降低(1702.2±87.4vs.1167.4±58.7)(t=-69.602,t=16.063,均P＜0.01).与PLP抗原刺激组相比,小剂量、中剂量、大剂量连翘提取物组IFN-γ水平降低(2507.0±79.8 vs.360.6±43.1、349.0±38.2、288.3±23.2)(F=4628.61,P＜0.001)；IL- 10水平增加(1167.4±58.7 vs.1189.1±75.4、1208.2±78.1、1515.5±92.7)(F=454.230,P＞0.05).结论 连翘提取物促进抗原特异性淋巴结细胞增殖,降低PLP139-151特异性淋巴细胞增殖分泌IFN,但对IL-10的分泌无影响.
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EAE小鼠体内γδT细胞的提取和鉴定
目的 试图从蛋白脂质蛋白(Proteolipid protein,PLP)免疫后的SJL/小鼠肠上皮间(iIEL)、淋巴结(LNC)中提取γδT细胞,并探讨γδT细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelilis,EAE)发病机制中的作用.方法 用多肽PLP178-191免疫小鼠,从小鼠iIEL、LNC中提取γδT细胞,利用免疫荧光标记和流式细胞分析技术进行检测.结果 PLP免疫组和正常对照组比较,小鼠iIEL中CD3+细胞百分比在组间无统计学差异(P＞0.05),而小鼠LNC中CD3+细胞百分比在组间存在显著性差异(P＜0.01);小鼠iIEL CD3+细胞中和LNC CD3+细胞中γδT细胞的百分比,组间均存在显著性差异(P＜0.01).结论 利用PLP178-191免疫SJL/J小鼠,可以稳定地提取γδT细胞,γδT细胞的确参与了EAE发病过程.
关键词： SJL/J小鼠 γδT细胞 实验性自身免疫性脑脊髓炎 -
实验性自身免疫性脑脊髓炎中γδ T细胞的变化及血吸虫卵抗原干预对其的影响
目的:研究髓鞘蛋白脂质蛋白多肽178-191(PLP178-191)免疫后小鼠体内γδ T细胞比例的变化以及日本血吸虫虫卵抗原(SEA)干预对其的影响.方法:用流式细胞仪检测技术分别观察对照组、PLP178-191免疫组、SEA干预组小鼠肠上皮内CD3+细胞中γδ T细胞百分比的变化.结果:对照组肠上皮内淋巴细胞CD3+细胞中γδ T细胞百分比为(22.95±7.26)%,PLP178-191免疫组γδ T细胞比例明显升高(P<0.01),SEA干预组则较PLP178-191免疫组有所下降(P<0.01).结论:γδ T细胞与实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病可能有着密切关系.EAE的干预能使γδ T细胞升高幅度有一定程度的降低,这可能是SEA用于EAE治疗研究的机制之一.
