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雷公藤多糖提取纯化工艺的研究
目的 经正交设计的雷公藤多糖提取纯化实验,选出佳雷公藤多糖提取纯化的工艺.方法 雷公藤叶和根经粉碎后用无水乙醇润湿,封口过夜,挥干药材;用石油醚60 ～90℃回流提取1h,重复实验1次,挥干药材;用95％乙醇回流提取1h,重复实验2次,挥干药材;用去离子水水煮1h,重复实验2次,浓缩水提取液到与药材重量相等.浓缩水提取液经乙醇醇沉,抽滤得到沉淀物经过氧化氢脱色后,以不同水提取液与乙醇的比例、氯仿与正丁醇体积比、脱色液与Sevage试剂(氯仿:正丁醇)体积比、脱蛋白时间、除蛋白次数进行4因素3水平正交实验.结果 雷公藤多糖提取纯化佳工艺条件为水提取液与乙醇的比例为80％,氯仿与正丁醇为4∶ 1,脱色液与Sevage试剂为3∶1,次数为2次,雷公藤多糖的脱蛋白率为78.5％,多糖损失率为33.3％.结论 经正交实验选出佳雷公藤多糖提取纯化的工艺条件科学合理、稳定可行,为纯化雷公藤多糖提供实验依据.
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白首乌中的C21甾体苷的提取及纯化工艺研究
目的 优化白首乌中C21甾体苷类成分的提取及纯化工艺.方法 以白首乌C21甾体苷为考察对象,单因素、正交实验优化提取工艺,考察纯化C21甾体苷的大孔吸附树脂的型号、除杂溶剂、洗脱溶剂及洗脱参数.结果 确定8倍量的95％乙醇回流提取2次,每次1.5h,选用HPD-100大孔吸附树脂,分别用2BV的水、1BV的20％的乙醇作为除杂溶剂、3BV 70％乙醇富集洗脱,所得固体中C21甾苷的含量达49％.结论 此法提取纯化白首乌中C21甾体苷工艺简单、产物纯度高,可为C21甾体苷的进一步研究提供依据.
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桑叶多糖的提取纯化及其含量测定
目的:纯化桑叶多糖并测定其含量.方法:采用10%三氯乙酸、大孔树脂初步纯化桑叶多糖,采用硫酸-蒽酮法对其含量进行测定.结果:用三氯乙酸除蛋白的方法是可行的;桑叶中多糖的平均含量为2.62%,平均回收率为98.81%,RSD为2.08%.结论:该法可作为桑叶中多糖的含量测定方法.
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腹部围手术期抗生素的合理使用
上个世纪20年代,英国细菌学家亚历山大·弗莱明在培养金黄色葡萄球菌时,意外发现了青霉菌能抑制金黄色葡萄球菌生长的现象,他认为是青霉菌分泌的某种化学物质抑制了细菌的生长.第二次世界大战期间,弗莱明在英国病理学家弗洛里和生物化学家钱恩的帮助下,成功提取纯化了这种化学物质,并命名为青霉素.青霉素作为抗感染药品在二战期间挽救了无数人的生命,他们三人也因为发现青霉素及其临床效用获得了1945年度诺贝尔生理学和医学奖.
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榼藤子总皂苷的提取纯化及含量测定
目的:对HP-20大孔吸附树脂提取纯化榼藤子总皂苷及其含量进行了研究.方法:采用HP-20大孔吸附树脂,乙醇-水为洗脱溶剂提取纯化榼藤子总皂苷；采用酶标仪法测定榼藤子中总皂苷的含量,测定波长为546 nm.结果:线性范围为0.028 62～0.111 3 mg·mL-；平均回收率为98.44％;RSD为1.90％.结论:本法操作简单易行,结果稳定,为榼藤子总皂苷的质量控制提供参考.
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复方祛风缓释片中青风藤的提取纯化工艺研究
目的 优选复方祛风缓释片中青风藤的提取纯化工艺.方法 以青藤碱作为指标,采用正交试验和单因素相结合的方法优选青风藤提取纯化工艺.结果 青藤碱佳提取工艺为:70％的乙醇6倍量提取2次,每次2h；纯化工艺为:加1％ HCl调pH值为2,氯仿萃取5次.结论 该提取纯化工艺科学、合理.
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从雨生红球藻中提取纯化天然左旋虾青素的研究进展
虾青素作为一种具有特殊生理活性的物质,其超强的抗氧化、抗衰老、抗癌、提高免疫力等作用在功能性食品、药品以及化妆品行业有着广泛运用.论述从雨生红球藻中提取纯化天然左旋虾青素的研究进展.
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不同采摘时期桂花中总黄酮含量的测定及纯化
目的:测定不同时期采摘桂花中总黄酮的含量并进行纯化.方法:利用紫外分光光度法测定总黄酮含量,以大孔树脂进行纯化.结果:不同采摘时期的桂花中总黄酮含量分别为40.38mg/g、35.44mg/g、18.24mg/g,纯化后的总黄酮纯度为74.00％,转移率为63.55％.结论:采摘时间对桂花中总黄酮含量有显著影响,以D-101树脂纯化总黄酮可达到较高的纯度.
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野菊花栓治疗前例腺炎35例报告
野菊花栓是中药野菊花经提取纯化获得的纯中药制剂,功能主治为清热解毒[1].临床主要用于治疗慢性盆腔炎、慢性前列腺炎,即中医辨证为热毒蕴结下焦所致的热淋,症见尿频、尿道灼热疼痛,小腹,会阴或腰骶部坠胀疼痛等症状.我们自2006年以来,用野菊花栓治疗慢性前列腺炎35例,收到良好效果,总结报告如下:
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油茶皂素的研究进展
油茶(Camellia oleifera Abel)系山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia Linn)植物.主要分布于热带及亚热带地区.产于我国的西南部和东南部,遍布17个省区[1,2].油茶子是油茶干燥成熟的种子,亦称茶子心.种子的脂肪油称茶油,为中国药典所收载[3].榨除脂肪油的渣滓称茶子饼,俗称茶麸.油茶皂素正是茶麸中所含的皂苷类成分,亦称茶麸皂素.它具有乳化、分散、湿润、去污、发泡、稳泡等表面活性,是一种性能优良的天然表面活性剂.我国是油茶子产量大的国家,约有油茶资源5 500万亩,年产油茶种子64.5万吨[2].由于油茶皂素存在于油茶子榨除脂肪油后剩余残渣茶子饼中,所以我国每年要有100万吨左右的茶子饼被扔掉(茶麸中含皂素12.8%～13.8%),也就是每年至少要扔掉13万吨油茶皂素.目前众多研究者还不十分清楚油茶皂素所具有的活性和作用,所以才大量扔弃,造成极大浪费.现将油茶皂素的提取纯化、药理学、毒理学和应用价值向大家做一综述,旨在促进对油茶皂素的进一步开发利用.
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四物合剂提取纯化过程中不同中间产物补血调经作用研究
目的:探讨四物合剂提取纯化过程中不同中间产物补血及调经止痛的功效,以期为其生产工艺研究提供科学、合理的药效学评价基础.方法:按照现行版中国药典收载四物合剂项下制备当归-川芎蒸馏液、四物水煎液、四物醇沉上清液、四物醇沉淀样品液,采用乙酰苯肼(APH)-环磷酰胺(CTX)联用构建大鼠血虚模型,观察对其外周血象、脏器指数的影响;采用雌二醇-缩宫素联用构建小鼠痛经模型,观察其对血浆前列腺素2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)及子宫组织丙二醛(MDA)、钙离子(Ca2+)的影响.结果:当归-川芎蒸馏液、四物水煎液、四物醇沉上清液、四物醇沉淀样品液均能显著升高血虚模型大鼠白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞比容(HCT)及肝脏、胸腺指数,四物醇沉上清液能提高血虚大鼠PLT水平,当归-川芎蒸馏液、四物水煎液能显著升高血虚大鼠脾脏指数.当归-川芎蒸馏液、四物水煎液、四物醇沉上清液、四物醇沉淀样品液均能显著升高痛经模型小鼠血浆PGE2,降低血浆PGF2α及子宫组织MDA含量;当归-川芎蒸馏液、四物水煎液、四物醇沉上清液均可显著降低痛经模型小鼠子宫组织Ca2含量.结论:四物合剂提取纯化工艺能较好的保留方中药效成分,发挥补血、调经止痛功效;同时发现被醇沉除去的物质仍具有一定的药效.
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抗感退热滴丸提取纯化工艺条件优选
目的:优选抗感退热滴丸提取、纯化工艺条件.方法:以HPLC法测定葛根素含量和测定药材出固率为指标,对影响提取的重要因素A加水量,B提取次数,C提取时间等进行L9(34)正交试验;对影响水饱和正丁醇萃取纯化的药液浓度和萃取次数进行了考察.结果:佳提取工艺为药材加10倍量水,提取3次,每次提取1.5小时;正丁醇萃取佳药液相对密度为1.10～1.15(60℃),萃取次数为5次.结论:所选提取纯化工艺基本可行.
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抗自身免疫血清对NOD小鼠糖尿病的治疗作用及其机制研究
目的：I型糖尿病的发病与自身免疫反应有关，本研究旨在制备一种抗自身抗体的抗血清，用以验证对I型糖尿病小鼠的治疗作用。方法和结果：我们用亲和层析方法提取纯化6～8周龄I型糖尿病（ NOD）小鼠血清中的总IgG。以此总IgG作为抗原与免疫佐剂混合，免疫BALB／c小鼠，制备出抗总IgG的抗血清，我们将它命名为NIgG抗血清。将此抗血清一次性注入发病前的6～8周龄的NOD小鼠体内，观察至32周，发现此抗血清能有效地控制NOD小鼠血糖的增高，降低发病率和死亡率，延迟糖尿病的发生以及控制胰腺中胰岛体积的萎缩。 NIgG治疗的NOD小鼠，32周龄时胰岛体积、胰岛周围炎症浸润和血糖浓度与未经治疗的6～8周龄的NOD小鼠相比，均无显著差异，说明NIgG治疗阻止了NOD小鼠的病情进展。 NIgG抗血清治疗组和对照组脾脏中分泌自身抗体的B淋巴细胞占总B淋巴细胞的百分比在治疗组中下降。结论：NIgG抗血清一次性静脉注射治疗能有效防治NOD小鼠的糖尿病。
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重组人蛋白激酶CK2α和β亚基的原核表达、纯化及鉴定
蛋白激酶CK2是一种信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,是由两个催化亚基(α或α′)和两个调节亚基(β)组成的四聚体.目前该酶有近200种蛋白底物,底物涉及到细胞功能的许多方面,但其确切功能仍不清楚.由于该酶在细胞中的含量较少,提取纯化得到研究所需的量较困难.因此克隆并表达重组蛋白激酶CK 2对于深入研究该酶具有十分重要的意义.
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肾上腺皮质激素抗风湿应用要点--风湿性疾病治疗学 (3) (续前)
1 引言肾上腺皮质激素(激素)系内源性生理物质,而激素类药物是外源性化学合成品,是目前作用强的抗炎药物.1942年化学家们从肾上腺皮质中提取纯化了28种甾体化合物,并确定了它们的化学结构,其中5种具有生物活性,包括可的松、氢化可的松等.1949年,Hench首先报道英国1例已经卧床3年的26岁女性类风湿关节炎患者,在应用激素治疗后神奇般地能起床行走,这一“极好疗效”的报道曾经引起一时轰动.从此激素被扩大应用于几乎整个自身免疫性疾病的领域.然而,在众多的抗风湿药中,激素又是具有争议性的药物.在许多以系统损害为主的自身免疫性风湿性疾病(风湿病),激素是主要的基础用药;而以关节损害为主的自身免疫性风湿病,则主张在疾病活动期过渡性地使用小剂量激素;对于非免疫性的风湿病,则不主张采用激素治疗.这是激素治疗风湿病的大体原则.
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芦丁的提取纯化及其衍生物的制备工艺研究
目的:了解芦丁的提取纯化工艺及其衍生物的制备工艺.方法:主要有热水提取法、甲醇提取法、碱性乙醇提取法、碱水热提取法、微波提取法、超声辅助碱提取酸沉法、超临界CO2萃取法、双水相萃取法、大孔树脂吸附法、酶解提取法、表面活性剂协同提取法、连续萃取法、分子形态转变法、葡聚糖凝胶法等.结果与结论:芦丁的衍生物主要有芦丁金属配合物、槲皮素、鼠李糖、曲克芦丁、芦丁硫酸酯、二氢槲皮素等.芦丁在医药、日化、食品等领域有着广泛的应用,近年来已成为研究的热点.
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人抗菌肽FALL-39突变体FALL-39-Lys24'32的构建及其抗菌作用研究
目的:用PCR定点突变法构建人抗菌肽FALL-39基因突变体pGEX-1βT-FALL-39-lys24'32,并比较研究FALL-39及其突变肽的功能.方法:采用一步法和两步法PCR定点突变技术,用赖氨酸替代第24位的谷氨酰胺和第32位的天门冬氨酸,构建FALL-39突变体大肠杆菌表达载体;该载体表达的融合蛋白经亲合层析、凝血酶酶切和高效液相后获得高度纯化的FALL-39以及突变肽;用低有效浓度(MEC)、低抑菌浓度(MIC)、低杀菌浓度(MBC)指标比较纯化产物抗菌作用.结果:PCR定点突变得到突变体质粒pGEX-1βT-FALL-39-lys24'32;重组原核表达质粒pGEX-1βT-FALL-39及其突变体融合蛋白有高效表达,经提取纯化可得到高纯度的活性蛋白FALL-39,和FALL-39-Lys24'32(约4Kd).突变蛋白对大肠杆菌ATCC 25922、耐氨苄青霉素菌ML-35p和绿脓杆菌的抗菌活性明显增强.结论:用PCR定点突变技术成功得到FALL-39基因突变体,大肠杆菌表达载体可得到高效表达的蛋白;突变蛋白的抗菌活性明显增强,提示在FALL-39分子中增加碱性氨基酸可以增强其抗菌活性.
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芥子碱的研究进展
芥子碱是油菜籽中重要的简单酚类物质,其在菜籽饼中的含量约1.2％ ～2.3％,具有重要药理作用.现参考相关文献,综述了近年来芥子碱的提取纯化工艺、鉴定方法及生物活性等方面的研究进展,可为菜籽饼中芥子碱的研究开发提供新的途径和思路.
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替考拉宁的快速提取纯化及其单组份制备
目的 从菌株Actinoplanes teichomyceticus sp.FIM-1112发酵液中快速提取纯化替考拉宁,并建立替考拉宁5个单组份A2-1、A2-2、A2-3、A2-4和A2-5的快速制备方法.方法 采用碱化、HP-20大孔树脂柱分离、沉淀、脱色、冷却沉淀等技术,快速提取纯化替考拉宁;结合制备液相色谱分离技术[制备柱Welch Column XB-C18(250mm×21.2mm i.d.,5μm),流动相A为3.2g/LNaH2PO4-乙腈(900∶100);流动相B为2.75g/L NaH2PO4-乙腈(300∶700),流速为10.0mL/min,检测波长为254nm]分离制备替考拉宁5个单组份.结果 A2组份的收率提高至76％,HPLC结果显示各组份的含量均符合欧洲药典标准,且各组份纯度分别为94.90％(A2-1),96.86％(A2-2),84.75％(A2-3),80.16％(A2-4)和78.59％(A2-5).结论 该提取纯化方法经过优化,简单、快速、易于操作,且首次采用制备色谱分离技术对其5个组份进行分离,可用于替考拉宁单组份的分离制备.
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PCR检测血液中结核分枝杆菌三种标本处理方法的比较
为了早期快速诊断结核病,已有很多文献探索通过PCR从血液中检出结核分枝杆菌[1-3].但是多种血液成分对KPCR具有强烈的抑制作用,即使是用酚-氯仿法提取纯化亦难以去除[4,5].应用十二烷基硫酸钠(SDS)处理标本能有效去除痰、胸腹水、脑脊液中PCR抑制物[5],亦能有效去除血液中的抑制物[6].
