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Foramzan显色法测定山梨醇脱氢酶活性
目的利用Foramzan(甲簪)显色法测定山梨醇脱氢酶(SDH)的活性.以此作为肝功能的特异性指标.方法对正常成人和肝病患者的血清与自研试剂作用后生成紫色化合物-Foramzan,在CL-7200型生化分析仪上测定其酶的活性,并对Foramzan试剂进行一系列的可行性分析.结果Foramzan试剂大吸收峰波长为572.6nm,其酶促反应适pH为8.8,线性敏感度为60 μ mol/L,并且有一定的抗干扰能力和一定的稳定性.325例正常人血清中SDH活性为2.43±1.04U/L,82例肝病患者血清SDH活性为6.74±3.10U/L.结论肝病组SDH明显高于正常组,可作为临床观察肝脏疾病一项高特异性指标.Foramzan显色法用可见光570nm波长比色有较好的线性关系和稳定性,还可通用于需NAD(P)H辅酶的一系列酶活性的测定.
关键词： 山梨醇脱氢酶 化学增溶剂 可溶性Foramzan -
不同治法对糖尿病大鼠肾组织醛糖还原酶和山梨醇脱氢酶活性的影响
为探讨糖尿病及其慢性并发症的病机规律,我们观察了活血化瘀药、益气养阴药以及化痰利湿药对糖尿病大鼠肾组织中醛糖还原酶(aldose reductase,AR)和山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase,SDH)活性的影响,现报道如下.
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毒死蜱对大鼠生精功能和睾丸组织酶活力的影响
目的 探讨毒死蜱对雄性大鼠生精功能和睾丸组织酶活力的影响.方法 将40只21日龄SPF级雄性Wister 大鼠随机分为4组,分别为对照组(1 mg/L吐温80溶液)和低剂量(2.7 mr/kg)、中剂量(5.4 mr/kg)、高剂量(12.8 mr/kg)毒死蜱染毒组,每组10只.采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量10ml/kg,每天1次,每周6天,连续暴露90d.染毒结束后,测定睾丸组织酶[山梨醇脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACP)和乳酸脱氢酶(LDH)及其同工酶(LDH-x)]活力,并观察睾丸组织病理学改变.结果 与对照组比较,高、中剂量毒死蜱染毒组雄性大鼠精子计数和精子活动度均较低,而精子畸形率较高,差异均有统计学意义(P＜0.05).且随着毒死蜱染毒剂量的升高,雄性大鼠精子计数和精子活动度呈下降趋势,精子畸形率呈上升趋势.仅高、中剂量毒死蜱染毒组雄性大鼠睾丸组织中LDH和LDH-x活力高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).各剂量毒死蜱染毒组雄性大鼠睾丸组织中ACP、SDH活力与对照组比较,差异均无统计学意义.随着毒死蜱染毒剂量的升高,部分生精小管出现萎缩,生精上皮细胞层次紊乱,管腔中有脱落的精子和细胞,成熟精子数量明显减少.结论 毒死蜱可影响雄性大鼠的睾丸发育和生精功能.
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血清山梨醇脱氢酶活力测定的方法学研究
目的 建立一种简易、快速的山梨醇脱氢酶(SDH)活性测定法。方法 用双试剂法进行测定，波长340 nm，温度37 ℃，血清：试剂=1∶15，第一次孵育时间2 min，加入第二试剂后，用延迟时间30 s，读数间隔时间15 s，读数次数6次。结果 适pH为8.8，SDH对山梨醇的Km为1.24 mmol/L，山梨醇：NAD+=6∶1。批内CV(n=20)为2.7%～4.2%；批间CV为3.1%～8.3%。在90 U/L以下线性良好，参考值上限为12.5 U/L。结论 该方法简易、快速、灵敏，线性范围宽，干扰因素少，所需样品量少。
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bFGF对在大鼠系膜细胞和抗Thy-1肾炎SDH表达的影响
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对山梨醇脱氢酶(SDH)在大鼠系膜细胞(MsC)及大鼠抗Thy-1肾炎模型(ATG)中表达的影响.方法 采用无菌培养法分离培养大鼠肾小球系膜细胞(MsC),采用Western blot检测bFGF刺激后体外培养MsC SDH的表达以及bFGF和SDH在ATG中的表达.结果 MsC为成纤维细胞样细胞,在外源性bFGF作用后,大鼠MsC中SDH表达升高,并显示出一定的时间与剂量依赖性.在ATG中,随着病程的延长,bFGF、SDH表达升高.结论 bFGF可以上调SDH的表达,后者可能参与了肾小球肾炎发生发展的过程.
关键词： 肾小球肾炎 碱性成纤维细胞生长因子 山梨醇脱氢酶 -
bFGF对SDH在原代大鼠系膜细胞及大鼠Thy-1肾炎中表达的影响
目的研究碱性成纤维细胞生长因子( bFGF)对山梨醇脱氢酶( SDH)在大鼠系膜细胞( GMCS)及大鼠抗Thy-1肾小球肾炎模型( ATG)中表达的影响。方法采用RT-qPCR和Western blot分别检测bFGF刺激后体外培养GMCS SDH的表达以及bFGF和SDH在ATG中的表达；应用免疫组化检测ATG中bFGF、 SDH的表达，并对染色强度进行图像分析。结果原代培养的GMCs为成纤维细胞样细胞，在施加外源性bFGF后， SDH在大鼠GMCs中表达升高，并呈现一定的时间、剂量依赖性。 ATG模型中，随着病程的延长，应用western blot方法和免疫组织化学的方法均说明bFGF、 SDH表达升高。结论 bFGF可以诱导SDH的表达升高，而升高的SDH则参与了肾小球肾炎发生发展的过程。
关键词： 肾小球肾炎 碱性成纤维细胞生长因子 山梨醇脱氢酶 -
一种特异性肝功能检测指标的研究
目的利用水溶性甲簪显色法测定山梨醇脱氢酶的活性.以此作为肝功能的特异性指标.方法对325例正常成人和82例肝病患者的血清与自研试剂作用后生成紫色化合物--甲簪,在CL-7200型生化分析仪上测定其酶的活性,并对甲簪试剂进行一系列可行性分析.结果甲簪试剂大吸收峰波长为572.6 nm,其酶促反应适pH为8.8,线性敏感度为60 μmol/L,并且有一定的抗干扰能力和一定的稳定性.正常人血清中山梨醇脱氢酶活性为2.43±1.04 U/L,肝病患者血清山梨醇脱氢酶活性为6.74±3.10 U/L.结论肝病组山梨醇脱氢酶活性明显高于正常组,可作为临床观察肝脏功能的一项特异性指标.甲簪显色法用可见光波长在570 nm比色有较好的线性关系和稳定性,该自研试剂还可通用于需还原型尼克酰胺为辅酶的一系列酶活性的测定.
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氧化葡萄糖酸杆菌实时定量PCR检测方法的建立与应用
选取氧化葡萄糖酸杆菌16S rRNA作为看家基因,利用Primer Premier 5.0软件设计特异性引物,以总基因组为模板,建立氧化葡萄糖酸杆菌实时定量PCR方法.选取山梨醇脱氢酶大亚基sldA和小亚基sldB为研究对象,以看家基因16S rRNA的表达作为内参,测得山梨醇脱氢酶大小亚基的转录水平一致,均为看家基因的68%.
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邻苯二甲酸二丁酯对大鼠睾丸生化酶及脂质过氧化的影响
目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对睾丸生化酶及脂质过氧化的影响,为接触人群早期诊断及生物学监测提供参考评价指标.方法:选择6周龄雄性SD大鼠随机分成4组,每组16只.灌胃给予DBP,剂量为0(对照组)、250、500、1 000 mg/(kg·d).于染毒2周和4周末分别处死8只大鼠,收集睾丸及其他脏器和血清,以1:3的比例制备睾丸匀浆.测定血清和睾丸匀浆中生化酶及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性和谷胱甘肽(GSH)的含量.结果:随DBP染毒剂量的增加,肝脏器系数明显上升,而睾丸脏器系数显著下降(P＜0.01).染毒2周后,血清中GSHPx活性和睾丸匀浆中GSH水平下降趋势明显,而匀浆中GSHPx活性呈上升趋势,1 000mg/(kg·d)组与对照组相比,差异有显著性(P＜0.05).染毒4周后,血清中碱性磷酸酶活性呈上升趋势,血清和睾丸匀浆中山梨醇脱氢酶(SDH)活性受到明显抑制,1 000 mg/(kg·d)组与对照组相比差异均有显著性(P＜0.01).血清GSH水平呈上升趋势,1 000 mg/(kg·d)组与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:DBP可对机体产生明显的毒性作用,主要靶器官为肝脏和睾丸.脂质过氧化可能是DBP毒性作用的机制之一,SDH是DBP对睾丸毒性作用较为敏感的指标之一.
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血清山梨醇脱氢酶测定的临床意义
本文报道了以D-果糖为底物两点法测定血清SDH活力的方法.观察了各类肝病患者血清SDH活性的测定结果;急性肝炎患者血清SDH与ALT均显著升高,二者的变化呈正相关.研究结果表明:血清SDH测定是一项反映肝细胞损伤的良好指标.
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肝细胞损伤相关酶类的检测及临床应用价值
反映肝细胞损伤的酶类很多,升高的主要有丙氨酸氨基换酶(ALT)、门冬氨酸氨基移换酶(AST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、谷胱甘肽S转移酶(GST)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)、醇脱氢酶(ADH)、山梨醇脱氢酶(SDH)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、鸟嘌呤脱氢酶(GDA)、精氨酸代琥珀酸裂合酶(ASAC)、碱性磷酸酶(ALP)和L-r-谷氨酰基移换酶(r-GT).肝损伤时各种酶在血清中出现的先后及酶活力升同幅度不同,在此就其中的ALT、AST、r-GT、GDH、GST各酶的特异性、灵敏性作一简单介绍.
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茵陈煎剂对大鼠急性化学性肝损伤的保护作用
目的:观察茵陈煎剂对四氯化碳(CCl4)致大鼠急性肝损伤的保护作用.方法:给大鼠皮下注射CCl4造成急性肝损伤模型,实验设茵陈煎剂小、中、大3个剂量组和正常对照组及模型对照组.测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、山梨醇脱氢酶(SDH)活性及肝糖原、肝脏系数和观察肝组织病理变化,以评价肝脏损伤程度和药物的保护作用.结果:茵陈煎剂各剂量组大鼠血清ALT,SDH活性及肝脏系数均降低,肝糖原合成增加,肝脏组织病理损伤得到明显改善.结论:茵陈煎剂对CCl4致动物急性肝损伤具有良好的保护作用.
关键词： 肝损伤 茵陈 血清丙氨酸氨基转移酶 山梨醇脱氢酶 肝脏系数 -
大鼠实验性肝损伤时山梨醇脱氢酶、SOD活性及MDA含量变化
目的：探讨山梨醇脱氢酶(SDH)活性与SOD活性及MDA含量在急性肝损伤中的相互关系。方法：采用急性CCl4肝损伤模型，观察大白鼠肝匀浆及血浆中MDA含量，SDH、SOD活性变化。结果：肝损伤组与对照组比较，前者血及肝匀浆中SDH活性增高，SOD活性明显降低，MDA含量增加，且SDH活性与MDA含量呈正相关，与SOD活性呈负相关。结论：此三项指标能有效地反映肝损伤后体内过氧化系统的异常程度，可用做肝病的诊断及愈后观察的一种辅助性指标。
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多元醇通路导致糖尿病视网膜病变的研究
本文综述了多元醇通路在糖尿病视网膜病变发生发展中的作用及其研究进展。
