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  • 液相色谱质谱法直接进样测定饮用水中6种常用农药残留

    作者:郑和辉;于建;查玉娥;卞战强;田向红;张娟

    目的 建立同时测定生活饮用水中毒死蜱、丁草胺、乙草胺、敌敌畏、莠去津和多菌灵6种常用农药的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法.方法 采用Waters公司Acquity UPLC BEH C18柱(2.1 mm×50 mm),以乙腈/甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱分离.经正离子电喷雾(ESI+)电离及多反应监测(MRM)模式检测.结果 毒死蜱和敌敌畏的质量浓度在2.5 ~ 100 μg/L,丁草胺和乙草胺的质量浓度在0.5 ~ 20 Jμg/L,莠去津的质量浓度在0.125~5μg/L,多菌灵的质量浓度在0.05 ~2 μg/L范围时,线性相关系数r≥0.999;毒死蜱、丁草胺、乙草胺、敌敌畏、莠去津和多菌灵的低检测质量浓度分别为7,21,10,5和1 ng/L.平均回收率为84.7% ~ 105.0%,相对标准偏差为1.5%~6.1%.用该分析方法检测了7个地下水样品,都检出了莠去津残留,浓度在0.01 ~0.03 μg/L.结论 该方法具有操作简便、灵敏度高、抗干扰能力强、样品分析时间短等特点,可用于饮用水中6种农药残留水平和残留动态的日常监测.

  • 气相色谱条件对有机磷农药分析的影响

    作者:郭丽甜;杨姣

    《生活饮用水卫生标准》5749-2006要求生活饮用水需检测敌敌畏、乐果,毒死蜱,甲基对硫磷、马拉硫磷及对硫磷6种有机磷.此6种有机磷农药使用广泛,水源水中时有检出.常用的有机磷检测方法是气相色谱火焰光度检测器检测,保留时间定性,峰高或峰面积定量.而《生活饮用水检测标准》GB/T 5750-2006中毒死蜱的色谱条件与另外5种有机磷不同,需单独检测.但当饮用水中同时存在毒死蜱和甲基对硫磷时检测容易发生峰重叠,影响定性及定量.

  • 毒死蜱引起胎鼠胆碱酯酶抑制和母鼠脑损伤

    作者:蒋淑霞;陈晓萍;李敏寅;边文杰;董静尹

    毒死蜱(Chlorpyrifos,CPF)是一种目前为常用的新型有机磷杀虫剂.由于CPF易于降解,哺乳动物毒性反应阈值相对较高,阈下剂量不会引起迟发性神经病反应,通常认为较为安全,且未对其在环境中积累引起慢性中毒现象作足够重视.近年大量研究表明,生产生活中广泛使用已使环境中低浓度CPF污染成为普遍现象,妊娠期胎儿已普遍暴露于低浓度农药污染中[1-2].近年的研究表明,CPF对胚胎发育期间的脑神经系统有众多超敏毒性作用点[3-7],可能影响胚胎脑发育,造成永久性神经功能损伤.本研究采用5mg/(kg·d)暴露剂量处理SD大鼠,此剂量下实验动物不出现明显全身急性中毒症状.实验通过对妊娠各个时期的母鼠脑组织染色观察,胚胎形态和体重检测,以及胚胎不同成分胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)活力测定等方法,研究在妊娠的不同时期,CPF对胚胎鼠和妊娠鼠神经系统的毒性影响.

  • 剂量相加模型研究毒死蜱和乐果的联合作用

    作者:李亭亭;何贤松;乙楠楠;吴惠;王霞;赵敏娴;王灿楠

    目的 探讨一定剂量范围下,毒死蜱和乐果联合毒性作用的类型和性质,为有机磷农药累积风险评估提供科学依据.方法 198只清洁级成年雌性SD大鼠,按体重随机分成22组,每组9只,即对照组(0mg/kg),毒死蜱组(2、10、18、26、34、42和50 mg/kg),乐果组(5、17、29、41、53、65和77 mg/kg)和混合组(6、15、24、33、42、51和60 mg/kg),经口一次性灌胃染毒,染毒6h后处死动物.测量大鼠大脑皮质和血清中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性.结果 毒死蜱组血清中AChE活性均低于对照组(33.596±18.011)U/ml (P<0.05);乐果组除低剂量组5和17 mg/kg,其他组血清中AChE活性均低于对照组(P<0.05);混合组血清中AChE活性均低于对照组(P<0.05).毒死蜱组皮质中AChE活性低于对照组(37.812±10.706) U/ml (P <0.05);乐果组除低剂量组5 mg/kg,其他组皮质中AChE活性均低于对照组(P<0.05);混合组除低剂量组6和15 mg/kg组,其他组皮质中AChE活性低于对照组(P<0.05).使用doseResp函数拟合毒死蜱、乐果和混合农药剂量-反应关系曲线,并用剂量相加模型预测混合农药剂量-反应关系曲线,在低剂量时2种农药呈现协同作用,在高剂量时表现为相加作用.结论 doseResp函数模拟毒死蜱及乐果的混合农药,在低剂量时呈现协同作用,高剂量呈现相加作用.

  • 毒死蜱对大鼠脑区GST同工酶和微粒体GST活力的影响

    作者:董杰;李龙;陈亮;王斌;王素青;李涛;石年

    目的探讨毒死蜱(CPF)对大鼠不同脑区中GST-α,GST-μ和GSTms活力和mRNA表达的影响,了解其作用的脑区选择性和同工酶特异性,并初步探讨氧化应激是否参与其作用.方法将大鼠分成对照组和16.3 mg/kgCPF处理组,经口染毒5 d,采用分光光度法,利用特异性的底物测定大鼠不同脑区中GST-α,GST-μ和GSTms的活力及脑突触体丙二醛(MDA)量;RT-PCR分析CPF对不同脑区中GST-α,GST-μ和GSTms的mRNA表达的影响.结果CPF抑制大脑皮层中GST-μ的活力,诱导脑干中GST-α活力和小脑细胞浆中的GST的总酶活力,与对照组比差异均有显著性(P<0.05).在这个剂量下CPF未引起脑突触体膜MDA量的显著变化.RT-PCR结果显示,CPF主要选择作用于小脑,诱导小脑的GST Ya2,GST Yb的mRNA表达,而对GSTms、mRNA则起抑制作用.结论CPF对脑组织中GST的影响表现为脑区的选择性和同工酶种类的选择性,主要作用于小脑中的GST.

  • 毒死蜱和克百威体外联合染毒的细胞毒性机制

    作者:廉楠;苟练;王巧旭;彭双清;徐培渝

    目的 研究毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)与克百威(carbofuran,CF)单独及联合染毒对体外培养细胞株的毒性,并阐明联合作用模式.方法 应用不同浓度的CPF(0、50、100、200和400 μmol/L)和CF(0、25、50、100和200 μmol/L)分别单独染毒大鼠嗜铬细胞瘤株PC12细胞12h,联合效应研究分别在低剂量(CPF 50 μmol/L, CF 25 μmol/L)和高剂量(CPF 200 μmol/L,CF 100 μmol/L)水平下混合染毒.染毒结束后,采用丁酰硫代胆碱法检测乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法测定细胞内活性氧(ROS)的生成,硫代巴比妥酸(TBA)法测定细胞中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,5,5'-二硫代双硝基苯甲酸(DTNB)显色法测定细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性.结果 毒死蜱、克百威单独染毒时,对AChE活性的抑制作用、PC12细胞内ROS的生成量、SOD及GPx的活性均显著高于对照组(P<0.01),MDA含量无明显变化.2×2析因设计分析联合效应结果表明,较低剂量水平下,CPF与CF之间无交互作用,较高剂量水平,CPF、CF之间存在交互作用(P<0.01),作用模式主要为协同作用.结论 毒死蜱、克百威单独及联合染毒都具有细胞毒性,联合作用模式主要为协同作用,氧化应激可能是其产生细胞毒性的机制之一.

  • 胶体金试纸与气相色谱法检测毒死蜱结果相符率比较

    作者:万积成;赵成森;姚家彪;邵凤云;钱敬泽;菅丽萍;唐晓宾;李建芳

    目的 通过研究胶体金法与气相色谱法在检测毒死蜱中的应用,证实胶体金试纸务在检测蔬菜中毒死蜱残留的可靠性.方法 对比胶体金试纸半定量法和气相色谱定量法检测毒死蜱的结果.结果 胶体金试纸条检测阴性样品得出的结果与气相色谱的结果符合率为100%,添加的阳性样品符合率也达到100%.添加的界限值样品的回收率达到96%.结论 与气相色谱法相比较,胶体金试纸检测毒死蜱操作简便、观察直观、快速、省时,其特异性、敏感性较高,可作为蔬菜采摘前毒死蜱农药残留自我检测的手段.并可以此为基础建立一个不同于以前的毒死蜱监管模式.

  • 广东省和海南省致倦库蚊对常用杀虫剂抗药性的调查研究

    作者:冉鑫;赵明惠;李春晓;赵彤言

    为了解我国广东省和海南省不同地区致倦库蚊对常用杀虫剂的抗药性水平,对这两省四个不同城市的致倦库蚊对常用杀虫剂毒死蜱和克百威的抗性水平进行了测定.结果发现不同地理株致倦库蚊对这两类杀虫剂均产生了一定程度的抗性,对毒死蜱抗性倍数由1.91到5.40倍不等,对克百威的抗性倍数由1.12到1.95倍不等.由此可见,广东和海南两省市致倦库蚊对毒死蜱和克百威均产生了一定的抗性.对蚊虫抗性水平的检测在杀虫剂使用方面具有重要的指导意义,为城市卫生杀虫防控提供理论依据.

  • 毒死蜱与奋斗呐复配剂对德国小蠊的毒效作用

    作者:史慧勤;杨振洲;孙宇;贾瑞忠;李海波;李峰

    目的测试毒死蜱与奋斗呐复配制剂在实验室内对德国小蠊的毒效作用.方法点滴法、直接喷雾法和滞留喷雾法.结果毒死蜱和奋斗呐复配后半数致死剂量(LD50)和半数击倒时间(KT50)均接近或小于两药单独使用.两药复配呈协同作用,其中以1∶1配比毒力高;以1∶1或1∶0.5配比的击倒效果较好;1∶1配比稀释50倍, 滞效期可达90 d;不同表面对药效影响有所差异.结论毒死蜱与奋斗呐两药复配,其效果良好,值得推广应用.

  • 毒死蜱·氟虫腈微胶囊悬浮剂的制备及其对德国小蠊的防治效果

    作者:陈列忠;李艳丽

    目的 制备毒死蜱·氟虫腈微胶囊悬浮剂,研究成囊条件对微胶囊指标的影响,并考察该产品对德国小蠊的防制效果.方法 通过原位聚合法制备微胶囊剂,并通过强制接触、模拟室内及室内现场等实验评价该产品效果.结果 明胶是较为理想的成囊助剂,用量(质量分数)为0.5%时农药有效成分的成囊包封率可达97%以上,囊形均匀、圆滑,囊径和囊壁厚度适中;毒死蜱·氟虫腈微胶囊悬浮剂对德国小蠊具有良好的杀灭效果,在用量为20 mg· ai/m2时,对德国小蠊的KT50为9.8 min,24 h死亡率为100%;产品具有突出的持效性,用药后90 d再接触试虫,14d杀灭率仍可达100%,明显高于对照乳油产品(80.5%);现场实验效果表明,用量为20 mg· ai/m2时,对德国小蠊30 d杀灭率超过99%,有效时间可达1年.结论 毒死蜱和氟虫腈经微胶囊化后对德国小蠊具有良好的击倒性和突出的持效性,可有效减少施药量和施药次数.

  • 居美20%微胶囊剂对蜚蠊杀灭及滞留效果的观察

    作者:付学锋;于传江;曾晓芃

    目的了解居美20%微胶囊剂(Empire 20)灭蠊实际应用效果,探讨毒死蜱类药剂的应用前景.方法选择蜚蠊密度较高的饭店(A1)、餐馆(A2)和糕点制售点(A3)各1个,将20%微胶囊剂分别稀释100、50倍,在施药前、后,采用粘捕法分别测定试验区及对照区(A1选择洗碗间,A2、A3均选择售卖间)的蜚蠊密度,并作持效观察.结果在A1、A2试验区施用居美20%微胶囊剂,杀灭及滞留效果均较差,施药30 d后较施药前相对密度分别仅下降12.7%和5.6%,效果不显著;在A3试验区施用,滞留期可达10 d左右,基本达到实际使用要求.结论滞留性药剂使用时,应根据实际环境状况,避免药剂被无效冲刷,使药剂在环境中能得到较好的保留,以取得更好的药效.

  • 二种杀虫剂对蜱的现场防制效果观察

    作者:孙俊;章进宝;石健峰

    目的:观察药物对山区、林区蜱的防制效果.方法:用布旗法进行预调查,在蜱密度较高的山林地区选择面积为100m2地块3处,分别用作毒死蜱处理区、高效氯氰菊酯处理区和对照区,观察处理前后及处理区与对照区蜱密度变化情况.结果:现场喷洒0.5%毒死蜱和0.045%高效氯氰菊酯可将蜱杀灭,持效在30d以上;2种杀虫剂的效果差异无显著性.结论:毒死蜱和高效氯氰菊酯对林区草丛中的蜱具有较好的杀灭效果.

  • 重症混合性有机磷农药中毒一例

    作者:万珙善;李勋光;周金叶

    患者女,70岁,因"自服甲拌磷350ml及毒死蜱100 ml十余小时"于2010年11月14日17时30分由当地卫生院转入江苏省赣榆县人民医院呼吸科.患者十余小时前因与家属生气后空腹自服甲拌磷350ml及毒死蜱100ml,被家属发现后送当地卫生院救治,予以洗胃及阿托品、复能剂使用后,患者出现呼吸费力,急转入我院.病程中有少量呕吐,有流涎,无发热,小便失禁,大便未解.

  • 毒死蜱致大鼠空间记忆损伤及ERK/CREB信号途径抑制

    作者:闫长会;焦利飞;赵君;阳海鹰;彭双清

    目的 探讨有机磷杀虫剂毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)长期染毒对大鼠空间记忆的影响及其可能机制.方法 选择不引起大鼠出现全身系统毒性的CPF剂量(1,5,10 mg/kg)对大鼠连续染毒12周,利用Morris水迷宫评价大鼠的空间记忆功能,利用Western 印迹检测CREB信号通路的蛋白表达.结果 CPF染毒大鼠到达平台的潜伏期呈剂量依赖性增加; 随着染毒剂量的增加,大鼠海马CREB及ERKⅠ/Ⅱ磷酸化蛋白逐渐减少,而CaMKⅡ磷酸化蛋白、PKA蛋白表达没有明显改变.结论 CPF长期染毒能够诱发大鼠空间记忆的损伤,ERK/CREB信号通路的抑制可能是参与该变化的重要信号途径.

  • 大鼠经胃和皮下暴露毒死蜱的毒物代谢动力学和毒效学模型构建

    作者:曹正颖;姚欣雅;赵敏娴;王灿楠

    目的:构建毒死蜱(CPF)同时ig和sc暴露的以生理学为基础的毒物代谢动力学和毒效学(PBTK/TD)模型,模拟和验证其预测CPF暴露后体内毒代特征及毒效可靠性。方法①构建CPF的PBTK/TD模型,运用所构建的模型模拟大鼠同时ig和sc暴露CPF的毒代和毒效学数据,预测暴露大鼠血液中CPF及其代谢物3,5,6-三氯-2-吡啶酚(TCP)浓度变化,血液和大脑中乙酰胆碱酯酶(AChE)活性变化曲线。②45只成年雄性大鼠一次性ig和sc联合染毒CPF(50+50)mg·kg-1,染毒后0.0,1.0,2.0,4.0,6.0,8.0,12.0,24.0和48.0 h收集生物样本,测定血浆CPF和TCP浓度,及血浆和大脑皮质AChE活性,将实测值与模型模拟值进行比较,以验证模型的准确性。结果模拟大鼠ig和sc联合暴露CPF 20+20,10+30和(30+10)mg · kg-1后,48 h内血液中CPF和TCP浓度均先上升,达到峰值后随之下降;ig暴露剂量越大,血浆AChE活性下降越快,酶活性抑制程度越重,但酶活性恢复速度很快;大脑AChE活性抑制程度受皮下暴露量的影响较大。实测大鼠联合染毒(50+50)mg·kg-1 CPF后的血浆CPF和TCP浓度,及血浆和大脑皮质AChE活性,与模型预测值基本一致,差异无统计学意义。结论本研究所构建的PBTK/TD模型可预测大鼠同时ig和sc暴露CPF后的体内毒代特征及毒效水平。

  • 低剂量毒死蜱重复染毒诱发雄性大鼠生殖毒性及其机制

    作者:焦利飞;闫长会;赵君;贾栗;何俊;彭双清

    目的 探讨毒死蜱(CPF)低剂量重复染毒对雄性大鼠生殖功能的影响及其可能作用机制.方法 健康雄性Wistar大鼠ig给予CPF 1,5和10 mg·kg-1,每日1次.连续染毒12周后取大鼠附睾和睾丸称重计算脏器系数,进行组织病理学、精子数量以及活力及畸形率等检查,测定睾丸碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化及Western印迹法检测胱天蛋白酶和Fas,FasL蛋白的表达.结果 与正常对照组相比,CPF染毒大鼠睾丸脏器系数显著升高,精子数及精子活力降低,精子畸形率显著升高(P<0.05),睾丸AKP和γ-GT活性抑制明显.组织病理检查显示,睾丸曲细精管疏松和生精细胞减少.CPF染毒组生精细胞凋亡增加(P<0.05).Fas/FasL蛋白表达量升高.结论 CPF低剂量重复染毒能够诱导雄性大鼠生殖毒性,其作用机制可能与激活Fas/FasL受体途径而引起睾丸生精细胞凋亡有关.

  • 妊娠期暴露毒死蜱对子鼠成年后脑组织氧化损伤的研究

    作者:张敏;徐肖倩;刘建东;刘现洲;陈文婕;塔娜;戴红

    目的:探讨大鼠妊娠早期暴露有机磷农药毒死蜱对子代鼠成年后大脑氧化损伤与机制。方法在母鼠妊娠后第6天至子鼠出生后第21天给予灌胃染毒,染毒剂量1/50LD50、1/100LD50、1/180LD50浓度的CPF和玉米油组。待子鼠长到第8周后处死,处死取脑做匀浆测大脑匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PXD)活力。结果随着染毒剂量的增加,SOD的活力、GSH-PX的活力下降;而MDA的含量增加,并呈现出一定的剂量反应关系。各暴露染毒剂量组的上述指标还与玉米油对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠期毒死蜱暴露对8周龄子鼠大脑组织具有神经毒性,其机制可能与毒死蜱暴露至大脑氧化损伤有关。

  • 毒死蜱致雄性生殖毒性及其机制的研究进展

    作者:徐肖倩;戴红

    毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)系有机磷农药(organophosphates,OPs),广泛应用于农业生产和居住环境.毒死蜱不仅具有急性毒性,其慢性毒性和潜在危害日益引起业界关注.有研究提示CPF为可疑的环境内分泌干扰物(EEDs),具有生殖发育毒性.CPF的雄性生殖毒性主要表现为组织病理学、精子质量、激素水平和睾丸标志酶活性等发生变化,提示可能机制以脂质过氧化损伤机制研究居多.本文就CPF的雄性生殖毒性及其可能机制进行综述.

  • 急性毒死蜱中毒诊治进展

    作者:张明浩;付国强;田小溪;王伯良

    毒死蜱是近年来广泛应用的一种新型有机磷杀虫剂,自杀是导致急性毒死蜱中毒的主要原因.毒死蜱抑制胆碱酯酶的作用明显,且胆碱酯酶活性恢复缓慢.评估毒死蜱中毒患者的严重程度必须综合参考胆碱酯酶活力、血浆乳酸水平以及中毒严重程度评分、急性生理和慢性健康评分Ⅱ等.对于毒死蜱中毒的治疗方法有很多,但均存在优缺点:洗胃和血液灌流清除毒死蜱的作用仍有较大争议;阿托品、氯解磷定的解毒效果欠佳;氯化镁可通过抑制乙酰胆碱释放,中和毒死蜱毒性;脂肪乳剂可阻止毒死蜱与受体结合,减轻肺部损伤和心脏损伤;褪黑素、咖啡酸苯乙酯、磷酸二酯酶抑制剂等可调节氧化应激和细胞凋亡,降低毒死蜱所致的肝脏损伤.

  • 维生素C对有机磷类和拟除虫菊酯类农药联合染毒致小鼠遗传毒性的拮抗作用

    作者:张力;赵春红;姜淑卿;李树飞;周庆红

    目的 探讨维生素C(VitC)对有机磷类和拟除虫菊酯类农药联合致小鼠体细胞和生殖细胞突变的拮抗作用.方法 将60只健康SPF级昆明小鼠随机分为6组,每组10只,雌雄各半,分别为农药联合(0.3 mg/kg马拉硫磷+0.01 mg/kg毒死蜱+0.02 mg/kg氯氰菊酯+0.02 mg,/kg高效氯氟氰菊酯)组和低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高剂量(400 mg/kg)VitC+农药联合组及溶剂对照(玉米油)组、阳性对照(第1、2天不做任何处理,第3、4天腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺)组;采用灌胃方式进行染毒农药,连续染毒4d;各剂量VitC+农药联合组先单独灌胃染毒VitC溶液,间隔1h后,再给予农药.于染毒结束次日,进行小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验.另将30只雄性小鼠随机分为6组,每组5只,分别为农药联合组和低、中、高剂量VitC+农药联合组及溶剂对照(玉米油)组、阳性对照(腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺)组.采用灌胃方式进行染毒农药,连续染毒5d;各剂量VitC+农药联合组先单独灌胃染毒VitC溶液,间隔1h后,再给予农药.于首次染毒后第35天,进行小鼠精子畸形试验.结果 与溶剂对照组比较,农药联合组和各剂量VitC+农药联合组小鼠的骨髓细胞微核率升高,差异均有统计学意义(P<0.05).经各剂量VitC+农药联合作用后,小鼠骨髓细胞微核率下降,均低于农药联合组,差异有统计学意义(P<0.05).各组小鼠的PCE/NCE值间比较,差异无统计学意义(P>0.05).与溶剂对照组比较,农药联合组和低、中剂量VitC+农药联合组小鼠的精子畸形率升高,差异均有统计学意义(P<0.05).中、高剂量VitC+农药联合组小鼠的精子畸形率均低于农药联合组,差异有统计学意义(P<0.05);且随着VitC染毒剂量的升高,农药联合暴露小鼠的骨髓细胞微核率和精子畸形率均呈下降趋势.结论 马拉硫磷、毒死蜱、氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯联合经口染毒对小鼠具有遗传毒性效应,适量VitC对4种农药联合致体细胞和生殖细胞突变具有一定的拮抗作用.

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