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妊娠期糖尿病的诊断进展
妊娠期糖尿病是指在妊娠阶段首次发生或发现的任何程度的糖耐量异常,但不包括原有糖尿病患者怀孕[1],1979年WHO将其作为糖尿病分型中的一个独立类型。根据国际上新诊断标准,妊娠期糖尿病全球发病率占妊娠妇女的17.8%[2]。妊娠期糖尿病主要危害是围产期母婴临床结局不良风险增加,包括母亲自然流产、妊娠高血压、先兆子痫、产后发展为2型糖尿病[3],胎儿宫内发育异常、胎儿宫内发育窘迫、新生儿畸形、巨大儿(增加母婴在分娩时发生并发症与创伤的危险)以及新生儿低血糖和高胰岛素血症发生风险增加等[4]。也有学者在研究妊娠期糖尿病对后代远期影响时发现[5-6]:妊娠期糖尿病患者的后代容易发生肥胖;妊娠期血糖控制水平越差,对后代智力及神经发育的不良影响越明显。但妊娠期孕妇血糖升高的程度及其对胎儿有何影响,一直存在争议,因而妊娠期糖尿病的诊断标准也一直存在争议,临床常用的诊断标准主要有美国糖尿病协会( ADA)、世界卫生组织( WHO )、美国国家糖尿病资料组( ND-DG)等标准。2010年国际糖尿病与妊娠研究组织( IADPSG)基于妊娠期高血糖与围产结局研究[7]( HAPO)结果制定的妊娠期糖尿病诊断标准2011年被ADA采纳并推荐,此标准的提出,成为妊娠期糖尿病诊断史上新的里程碑,使得全球妊娠期糖尿病的筛查和诊断标准逐渐达成共识[8]。为与国际医学接轨,结合我国实际的医疗背景,卫生部2011年底公布了新的妊娠期糖尿病诊断标准,此标准在诊断血糖切点值引用了ADA新标准,但在诊断方法上同时推荐一步法和两步法。妊娠期糖尿病的及时诊断、正确处理、控制血糖对于患者及胎儿结局及预后有重要影响,是临床医师面临的重要课题。
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血清丙型肝炎病毒核糖核酸二种提取方法的比较
目前,国内大多数聚合酶链反应(PC R )实验室开始丙肝病毒核糖核酸(HCVRNA )的检测不多,一是核糖核酸(RN A )在裂解提取时操作较繁琐,容易降解,二是HCV的感染患者相对乙型肝炎较少,三是 HCV 含量低,需要高敏感度和准确率。本文应用2种HCVRNA裂解提取的方法:柱提取法和二氧化硅吸附法,对抗-HCV 阳性的血清处理,并应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR )的一步法和两步法分别检测HCV-RNA ,以比较2种方法的临床应用价值。
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乙型肝炎表面抗原检测中假阴性问题探讨
目前国内临床检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)多采用ELISA双抗体夹心一步法,该方法检测HBsAg时,当标本中的HBsAg浓度过高,可造成假阴性。针对此现象,笔者从常规844例乙肝五项指标检测血清中,收集其中10例HBeAg、HBcAb两项阳性,而HBsAg阴性的血清标本,对其稀释后分别进行ELISA一步法和两步法检测,解决因HBsAg浓度过高而产生的假阴性问题。
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改良木瓜酶-抗痛素法对Rh血型4份弱抗体特异性的检测分析
传统的木瓜蛋白酶技术有两种方法,即一步法和两步法.一步法操作简便,但灵敏性差;两步法灵敏性高,但操作繁琐、费时.鉴此,我们对两步法进行了改进,并应用改良木瓜酶-抗痛素抑制剂技术检测Rh血型系统4份弱抗体,获得明确结果,现报告如下.
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人抗菌肽FALL-39突变体FALL-39-Lys24'32的构建及其抗菌作用研究
目的:用PCR定点突变法构建人抗菌肽FALL-39基因突变体pGEX-1βT-FALL-39-lys24'32,并比较研究FALL-39及其突变肽的功能.方法:采用一步法和两步法PCR定点突变技术,用赖氨酸替代第24位的谷氨酰胺和第32位的天门冬氨酸,构建FALL-39突变体大肠杆菌表达载体;该载体表达的融合蛋白经亲合层析、凝血酶酶切和高效液相后获得高度纯化的FALL-39以及突变肽;用低有效浓度(MEC)、低抑菌浓度(MIC)、低杀菌浓度(MBC)指标比较纯化产物抗菌作用.结果:PCR定点突变得到突变体质粒pGEX-1βT-FALL-39-lys24'32;重组原核表达质粒pGEX-1βT-FALL-39及其突变体融合蛋白有高效表达,经提取纯化可得到高纯度的活性蛋白FALL-39,和FALL-39-Lys24'32(约4Kd).突变蛋白对大肠杆菌ATCC 25922、耐氨苄青霉素菌ML-35p和绿脓杆菌的抗菌活性明显增强.结论:用PCR定点突变技术成功得到FALL-39基因突变体,大肠杆菌表达载体可得到高效表达的蛋白;突变蛋白的抗菌活性明显增强,提示在FALL-39分子中增加碱性氨基酸可以增强其抗菌活性.