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氨基酸溶液的临床合理选择与应用
初期的PN氮源为水解蛋白,可称为第1代氨基酸产品.自70年代起逐被结晶氨基酸溶液所取代,水解蛋白相对于结晶氨基酸有许多缺点,这也是它被淘汰的主要原因.如①水解蛋白溶液含有大量氨离子,增加了敏感个体发生高氨血症的潜在危险和肝脏损害.②酶水解而产生的水解蛋白是氨基酸和肽的混合溶液,其中肽在肠外途径给予时易引起过敏反应(发热等).③水解过程中要释出不溶解于水的胱氨酸和酪氨酸而形成沉淀,这一丧失对早产儿来说是一缺点,因为这两种氨基酸对早产儿是必须的.第2代氨基酸又称为不平衡氨基酸溶液,所谓不平衡是指溶液中必需氨基酸和非必需氨基酸比例不平衡,早期过分强调了必需氨基酸的重要性.我国80年代初有类似产品问世和临床应用,如11氨基酸-912(上海),氨复命11s(天津),日本的Sohamine等.其缺点是酸碱紊乱,主要是酸中毒,引起酸中毒的原因是氨基酸溶液中的碱性氨基酸(精氨酸,赖氨酸)采用盐酸盐形式,氯离子特别高,如.Sohamine中氯离子为162mmol/L,因此这类氨基酸易致高氯性酸中毒.第3代氨基酸,即平衡氨基酸溶液,主要适用于普通成人的营养支持,配方的特点是①必需氨基酸与非必需氨基酸比例约为1:1;②溶液中去掉了氯离子,碱性氨基酸由盐酸盐改为醋酸盐形式,避免高氯性酸中毒的发生.国内极大多数医院应用这类氨基酸.主要品种有15-氨基酸823(上海),氨复命14s(天津),凡命Vamin(无锡华瑞),乐凡命Novamin(无锡华瑞),18氨基酸500(上海,广州等).它们应用于成人和大年龄儿童营养支持效果肯定,但应用于早产儿、新生儿和婴幼儿PN有以下不足:①配方中甘氨酸含量过高.由于胆汁酸主要与甘氨酸和牛磺酸结合形成甘氨胆汁酸和牛磺胆汁酸,两者有竞争与胆汁酸结合作用,正常情况下它们有一定比例.甘氨胆汁酸对肝脏有毒性作用,而牛磺酸有护肝作用,如血中甘氨酸过多对肝脏不利.②胱氨酸、酪氨酸含量低,由于它们难溶解,配方中不能达到合适量,而它们对早产儿,新生儿又是必需的.因此它们应用于早产儿、新生儿PN不够合理.第4代氨基酸又称专科或专病用氨基酸,主要包括:①肝病用氨基酸溶液(15-氨基酸800,安肝平等);②肾病用氨基酸溶液(肾必安等);③创伤用氨基酸溶液(15-氨基酸HBC);④小儿专用氨基酸溶液,主要产品有小儿氨基酸注射液(上海),爱咪特(天津),Trophamine(美国),Neopham(美国),Vaminlac(瑞典)等.
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高迁移率族蛋白B-1的肿瘤生物学效应研究进展
高迁移率族蛋白B-1(high-mobility group box-1,HMGBl)是一种几乎存在于所有真核细胞内的染色质非组蛋白核蛋白,富含酸性和碱性氨基酸,早由Ellerman等[1]在小牛胸腺中分离和鉴定.1999年,学者们发现HMGB1可以作为一种炎性介质被分泌到细胞外[2].此后,HMGB1的功能多样性逐渐被人们熟知.在细胞核内,HMGB1可以调节基因转录;在细胞外,HMGB1参与炎症反应、细胞分化、增殖、迁移以及肿瘤免疫反应[3-4].近年来,HMGB1在肿瘤中的作用日渐受到关注,本文就HMGB1在肿瘤发生、发展、免疫及治疗中的研究作一综述.
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快速鉴别真假人血白蛋白方法的改进
目的:对快速鉴别真假人血白蛋白方法进行改进,排除氨基酸对该方法的干扰.方法:在原有人血白蛋白快速鉴别方法的基础上,通过比较沉淀形态差异,增加鉴别反应等手段,对人血自蛋白、复方氨基酸注射液以及20种氨基酸溶液的鉴别进行研究.结果:发现3种碱性氨基酸干扰鉴别试验.提出的钨酸钠-双缩脲快速检测法能够有效避免氨基酸的干扰.结论:该方法保持了原有快速检测方法简便快速的特点,专属性更强,适用于人血白蛋白的快速检测.
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碱性氨基酸对丙交酯/乙交酯共聚物体外降解时集酸程度的调节
背景:丙交酯,乙交酯共聚物在降解中会产生酸性单体乳酸和乙醇酸而使局部集酸,从而 引起机体局部产生炎症反应.目的:采用赖氨酸、组氨酸、精氨酸分别与丙变酯/乙交酯共聚物进行复合,考察它们对丙交酯/乙交酯共聚物降解时集酸程度的调节功效.设计:重复测量实验.时间及地点:实验于2006-07/2007-08在重庆大学生物工程学院完成.材料:丙交酯/乙交酯共聚物(80:20)为美国Sigma公司产品,赖氨酸、组氨酸、精氨酸(纯度>99%)为美国Sigma公川产品:壳聚糖(脱乙酰度85%)为成都科龙化工试剂厂产品;海藻酸钠(黏度1.05-1.15)为天津大茂化学试剂厂产品.方法:将赖氨酸、组氨酸、精氨酸分别各按5%和10%的比例与丙交酯/乙交酯共聚物制成复合物,于体外在37℃下在三蒸水中进行降解2个月.用pH计检测降解液pH的变化;在榆测点将试件从人工降解液中取山滤干后再真空干燥12 h后进行称重以计算失重率.取相同种类的3份试样的平均pH值作为该监测点下此试样的pH值;取相问种类的3份试样的平均初始质量的平均值作为该此试样的初始质量,取该试样的终质量的平均值作为此试样的终质量.以上述实验结果为依据,将碱性氨基酸的调节效果与海藻酸钠、壳聚糖、碳酸氢钠的调节效果进行比较.主要观察指标:降解液pH的变化;复合物的失重率.结果:各种碱性添加剂都有一定的缓解酸度的能力,NaHCO3的缓解能力强,海藻酸钠和壳聚糖的缓解能力较低,而碱性氮基酸的缓解能力适中;赖氨酸的添加量为5%时能够得到较佳的综合调节效果.结论:碱性氨基酸能有效地缓解丙变酯/乙交酯共聚物降解后的集睃程度.其中,赖氨酸的添加量为5%时能够得到较佳的综合调节效果.
关键词： 丙交酯/乙交酯共聚物 降解 碱性氨基酸 pH 壳聚糖 -
血红素加氧酶-1中第39位赖氨酸对电子传递功能的影响
目的验证血红素加氧酶-1(HO-1)中的第39位赖氨酸(K39)对电子传递的影响.方法通过定点诱变将K39置换为酸性氨基酸谷氨酸(E),并将得到的变异型酶基因克隆到高度表达的载体上表达,提纯变异型HO,测定其活性,比较变异型酶与野生型酶的活性区别,以了解高保守的碱性氨基酸K39对电子传递的影响.结果 HO催化血红素的体外反应,由抗坏血酸提供电子时,变异型酶K39E与野生型酶比较活性没有显著性差异;而HO催化血红素的模拟体内反应,由NADPH- 细胞色素P450还原酶提供电子时,变异型酶K39E与野生型酶相比活性有显著性差异.结论 HO的碱性氨基酸K39在接受并传递NADPH-细胞色素P450所提供的电子时具有重要作用.
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美国微生物学会会讯摘要
1.有关为何1918年流感病毒引起大流行,美国加州大学洛杉矶分校的Nayak提出了新的切入点.除对HA、NA研究外(已发现无特殊致病特点),认为应对病毒出芽释放进行研究.已知禽流感病毒H7、H5亚型及适应于小鼠的WSN株均不仅侵袭呼吸道,还可向全身播散且嗜多种器官.已知流感病毒局限于肺部的原因是,有一个酶(tryptase clara),可将HA裂解为HA1与HA2,这一酶仅限于肺组织,而这一酶是病毒复制所必需的酶.在泛嗜性流感毒株如H5、H7的HA有碱性氨基酸或在WSN毒株中的NA有纤溶酶酶原,从而可使HA在肺及其他组织中均可被裂解,病毒的致病性由此增强.此外,呼吸道上皮细胞为极性细胞,有顶部及基底部细胞表面.流感病毒只从顶部出芽释放至肺,故感染限制于呼吸道.如向基底面释放则可发生病毒血症或泛嗜性.
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生物镇痛新药--克洛曲片
克洛曲片是由上海丽珠制药有限公司与中国科学院昆明动物所毒素蛇资源开发中心共同研制的非吗啡类中重度镇痛新药.它是由纯化的眼镜蛇神经毒素、曲马多、布洛芬按1:150:300组成,三者通过不同的作用机理协同发挥镇痛作用.纯化的眼镜蛇神经毒素是由61个氨基酸残基组成的蛋白质,富含赖氨酸和精氨酸等碱性氨基酸,有4个二硫键,分子量为6940道尔顿.
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将大肠杆菌OmpA信号肽改造成为抗菌肽的研究
目的 探讨将大肠杆菌OmpA信号肽改造成抗菌肽的方法以及衍生肽的杀菌活性.方法 以由21个氨基酸残基组成的大肠杆菌OmpA信号肽(P-AQA)为模板,通过改变其C末端的氨基酸组成,分别合成衍生多肽:(MKKTAIAIAVALAGFARVRQK,P-RQK)、(MKKTAIAIAVALAGFARRKKK,P-KKK)、(MKKTAIAIAVALAGFAD VDQD,P-DQD) .采用琼脂铺板计数法测定以上3条衍生多肽及肠杆菌OmpA信号肽对革兰阳性菌(G+)(金黄色葡萄球菌)和革兰阴性菌(G-)(大肠杆菌)的杀菌活性.结果 天然信号肽P-AQA不溶解水,无杀菌活性;在信号肽C末端加入酸性氨基酸的衍生肽P-DQD 对G+菌和G-菌均无杀菌作用;其余两条在末端加入碱性氨基酸的多肽对G+菌和G-菌均有较强的杀菌作用,其中末端带有5个碱性氨基酸的多肽(P-KKK)其杀菌活性强于有3个碱性氨基酸的多肽(P-RQK)5倍.结论 将大肠杆菌OmpA信号肽C末端中的中性氨基酸替换为碱性氨基酸后,具有明显的杀菌活性,其杀菌活性可能与碱性氨基酸的数量有关.
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人抗菌肽FALL-39突变体FALL-39-Lys24'32的构建及其抗菌作用研究
目的:用PCR定点突变法构建人抗菌肽FALL-39基因突变体pGEX-1βT-FALL-39-lys24'32,并比较研究FALL-39及其突变肽的功能.方法:采用一步法和两步法PCR定点突变技术,用赖氨酸替代第24位的谷氨酰胺和第32位的天门冬氨酸,构建FALL-39突变体大肠杆菌表达载体;该载体表达的融合蛋白经亲合层析、凝血酶酶切和高效液相后获得高度纯化的FALL-39以及突变肽;用低有效浓度(MEC)、低抑菌浓度(MIC)、低杀菌浓度(MBC)指标比较纯化产物抗菌作用.结果:PCR定点突变得到突变体质粒pGEX-1βT-FALL-39-lys24'32;重组原核表达质粒pGEX-1βT-FALL-39及其突变体融合蛋白有高效表达,经提取纯化可得到高纯度的活性蛋白FALL-39,和FALL-39-Lys24'32(约4Kd).突变蛋白对大肠杆菌ATCC 25922、耐氨苄青霉素菌ML-35p和绿脓杆菌的抗菌活性明显增强.结论:用PCR定点突变技术成功得到FALL-39基因突变体,大肠杆菌表达载体可得到高效表达的蛋白;突变蛋白的抗菌活性明显增强,提示在FALL-39分子中增加碱性氨基酸可以增强其抗菌活性.
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L-精氨酸与缺血再灌注损伤的研究进展
精氨酸又名α-氨基-δ-胍基戊酸,是碱性氨基酸,又是一种半必需氨基酸,它分为左旋(L-Arg)和右旋(D-Arg)两种旋光异构体,在生物体内有生理作用的是L-Arg,D-Arg基本无效.精氨酸在体内可通过氧化途径,经过一氧化氮合成酶催化生成具有生物活性的一氧化氮.体内存在着广泛的L-精氨酸(L-Arg)通路.已知多种细胞(内皮细胞、巨噬细胞)、神经细胞、中性粒细胞、肝细胞等)均可以L-Arg为底物合成NO.
