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长期服用人参提取物对大鼠肠道菌群结构的影响
人参作为中国的传统中药,有着广泛的药用和保健价值,目前人参作为药用食品的营养价值一直是研究热点.肠道菌群在机体中发挥的重要作用得到众多研究者的肯定,该研究利用MiSeq测序平台对长期服用人参提取物的大鼠盲肠内容物样本进行宏基因测序,之后通过对肠道菌群数据结果分析,探究长期服用人参提取物对大鼠肠道菌群结构产生的影响.结果表明,经过长期服用人参提取物,大鼠肠道菌群中的益生菌属如Bifidobacterium,Lactobacillus,Allobaculum,Clostridium等发生显著上调,而致病菌属如Butyricimonas,Parabacteroides,Alistipes,Helicobacter等发生显著下调,证明长期服用人参提取物有助于促进益生菌生长而抑制致病菌生长,该研究为长期服用人参提取对大鼠肠道菌群结构的影响提供了重要依据.
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人参皂苷Rb1对高糖培养海马神经元胰岛素信号转导途径的影响
目的:探讨人参皂苷Rb1对高糖培养SD大鼠海马神经元糖原合成激酶(GSK) 3β/胰岛素降解酶(IDE)信号转导通路及β淀粉样蛋白(Aβ蛋白)分泌的影响.方法:原代培养新生24 h SD大鼠海马神经元分别接种在不同条件的培养基中,分为正常组、高糖组、氯化锂组以及Rb1组.上述培养基中培养72 h,Western blotting法检测其磷酸化GSK3β(pGSK3β)、总GSK3β (tGSK3β)和IDE蛋白的表达,RT-PCR法检测GSK3β,IDE mRNA的表达,ELISA法检测细胞上清液中Aβ蛋白的分泌.结果:与正常组相比,高糖组p/tGSK3β蛋白比值增加,IDE蛋白及mRNA减少,Aβ蛋白分泌增加(P＜0.05);与高糖组相比,氯化锂组和Rb1组p/tGSK3β蛋白比值下降,IDE蛋白及mRNA表达增加,Aβ蛋白分泌减少(P＜0.05);与氯化锂组相比,Rb1组p/tGSK3β蛋白,IDE蛋白及mRNA,Aβ蛋白分泌增加无明显差异;4组GSK3β mRNA的表达无明显差异.结论:人参皂苷Rb1可能通过减少GSK3β的磷酸化,下调pGSK3β/GSK3β的比值,上调IDE的表达,从而减少海马神经元Aβ蛋白的分泌.
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人参皂苷Rb1改善高脂喂养肥胖小鼠胰岛素抵抗和脂肪异位沉积
人参皂苷Rb1是人参的主要活性成分,前期体外实验显示人参皂苷Rb1能够抑制脂肪细胞脂肪分解和促进葡萄糖转运的作用.本研究利用高脂饮食诱导的肥胖小鼠,研究人参皂苷Rb1对胰岛素抵抗和脂肪异位沉积的影响及其作用的分子机制.将高脂喂养的肥胖雄性C57/L小鼠,随机分为高脂组(DIO组),人参皂苷Rb1组(Rb1组)和罗格列酮组(Rog组),继续给予高脂饲料喂养,另设立正常饲料喂养的C57/L小鼠为正常组(NC组);分别按20,10 mg·kg-1体重给予Rb1组和Rog组小鼠每天腹腔注射人参皂苷Rb1和罗格列酮,NC组和DIO组以等量的生理盐水腹腔注射.治疗2周后,进行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT),3d后,处死小鼠,留取血清,检测胰岛素、游离脂肪酸(FFA)及生化指标;称取肝脏质量,检测肝脏内甘油三酯含量和病理检测;称取附睾脂肪质量,蛋白印迹检测PDE3B,HSL,周脂素.结果显示人参Rb1治疗2周明显改善肥胖小鼠的葡萄糖耐量,除了0～120 min,Rb1组葡萄糖耐量曲线下面积(0～30,0～60,0～90 min)较DIO组均显著下降(P＜0.05,n=5),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)显著下降(P ＜0.05,n=5);并且Rb1显著降低了肥胖小鼠肝脏内的脂肪水平(P ＜0.05,n=5),肝脏质量/体重也明显下降(P＜0.05,n=8);Rb1治疗后,肥胖小鼠血中升高的FFA水平也明显下降(P＜0.05,n=8);附睾脂肪中周脂素表达水平得到部分恢复,但对PDE3B的表达以及HSL的表达和磷酸化激活未见明显影响.以上研究结果表明人参皂苷Rb1能够通过上调脂肪组织周脂素的表达,减少游离脂肪酸的释放和甘油三酯的异位沉积,这可能是其改善机体胰岛素抵抗和糖代谢异常的作用机制之一.
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基于高分离度和高色谱峰纯度的红参UPLC指纹图谱研究
采用UPLC建立红参指纹图谱.采用Waters Acquity BEH C18(2.1 mm ×50mm,1.7 μm)色谱柱进行分离,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,检测波长203 nm.通过对22批红参进行测定,建立了红参的UPLC指纹图谱,并定义了26个共有峰.采用对照品比对,指认了其中的11个共有峰,它们分别是人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rb1、20(S)-人参皂苷F1、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、20(S)-人参皂苷Rg3、20(R)-人参皂苷Rg3.其中的20(S)-人参皂苷Rg3和20(R)-人参皂苷Rg3这一组差向异构体是红参的特征成分,它们不仅可以用于区分红参与人参,同时也可用于红参炮制的过程控制.采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对22批红参UPLC指纹图谱进行了相似度评价,结果18批样品的相似度大于0.9.与文献报道的红参指纹图谱测定方法比较,该研究所建立的方法具有高效、专属性强、分离度高、色谱峰纯度高、方法简单易行的特点,可用于人参类药材的品种鉴定和质量控制,并为上述药材质量标准的提升提供了理论依据.
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中国红参化学成分的研究
目的:研究五加科人参属常用中药红参的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱、反相柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、半制备液相色谱等方法分离纯化,根据理化性质和波谱鉴定化合物的结构.结果:从红参中分离并鉴定了14个化合物,结构分别为:三七皂苷R2(1),20(S)-人参皂苷Rg3(2),20(R)-人参皂苷Rg3(3),20(S)-人参皂苷Rg2(4),20(R)-人参皂苷Rg2(5),20(S)-人参皂苷Rh1(6),20(R)-人参皂苷Rh1(7),人参皂苷Rh4(g),-R.(9),-Rb1(10),-Rg1(11),-Re(12),-Rf(13),麦芽酚(14).结论:化合物1,4,6为首次从红参中分到的人参皂苷类成分.化合物2与3,4与5,6与7分别为3对对映异构体,其中对映异构体6与7为首次分离得到的单体.
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基于UPLC及多成分分析的西洋参质量评价
建立超高效液相色谱法,以0.01％甲酸乙腈-0.01％甲酸水为流动相进行梯度洗脱,同时测定西洋参样品中6种皂苷-人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rc,Ro,Rd的质量分数;应用SPSS 21.0及SIMCA-P软件,对西洋参药材与饮片、不同生长年限西洋参样品数据进行方差分析、主成分分析和偏小二乘判别分析.在所建立的色谱条件下,6种人参皂苷能够达到良好分离,线性关系、稳定性、精密度、重复性、加样回收试验均符合中药质量分析要求;所测57份西洋参样品中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的总质量分数都符合2015年版《中国药典》的规定;方差分析结果显示,西洋参药材和饮片中6种人参皂苷总质量分数有显著性差异,主成分分析可以实现药材与饮片的区分;二至四年产样品中人参皂苷质量分数随生长年限的增长而增长,偏小二乘判别分析可用于区分二至四年生西洋参样品.研究结果表明,该实验建立的超高效液相色谱法快速、准确,可用于西洋参样品中人参皂苷类成分的含量测定;多元数据分析适合于西洋参的质量分析.
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中国红参化学成分研究
采用大孔吸附树脂、硅胶等柱色谱以及反相高效液相色谱等方法系统性分离、纯化中国红参的化学成分,根据MS、NMR等谱学数据鉴定其结构.从中国红参的水煎液中分离得到52个三萜皂苷类化合物,分别鉴定为20(S)-人参皂苷Rh1(1),20(R)-人参皂苷Rh1(2),人参皂苷Rg6 (3),20(22)E-人参皂苷F4(4),人参皂苷Rk3(5),20(22)E-人参皂苷Rh4(6),人参皂苷Rg1(7),20(S)-人参皂苷Rf-1a(8),20(S)-人参皂苷Rf(9),20(R)-人参皂苷Rf(10),20(S)-三七皂苷R2 (11),20(R)-三七皂苷R2(12),20(S)-人参皂苷Rg2(13),20(R)-人参皂苷Rg2(14),人参皂苷Rs2(15),人参皂苷Rs1 (16),人参皂苷Rd(17),三七皂苷R1(18),人参皂苷Re2(19),人参皂苷Re(20),20-葡萄糖基人参皂苷Rf(21),西洋参皂苷R1(22),人参皂苷Ro-甲酯(23),人参皂苷Ro(24),人参皂苷Rb1(25),人参皂苷Rc(26),人参皂苷Rb2(27),人参皂苷Ra2(28),人参皂苷Ra3(29),人参皂苷Rb3(30),20(22)Z-人参皂苷Rh4(31),竹节参苷IVa丁酯(32),20(22)Z-人参皂苷Rs4(33),人参皂苷Rs5(34),20(22)E-人参皂苷Rs4(35),姜状三七苷R1-6′-丁酯(36),竹节参苷IVa甲酯(37),20 (S)-人参皂苷Rs3(38),20(R)-人参皂苷Rs3(39),姜状三七苷R1-6′-甲酯(40),人参皂苷Rz1(41),人参皂苷Rk1(42),人参皂苷Rg5(43),23-O-甲基人参皂苷Rg11(44),12β,25-二羟基达玛-20(22)E-烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(45),20(22)Z-人参皂苷F4(46),3β,12β-二羟基达玛-20(22)E,24-二烯-6-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(47),20(S)-人参皂苷Rg3(48),20(R)-人参皂苷Rg3(49),20(22)E-人参皂苷Rg9(50),人参皂苷Ro-6′-丁酯(51),聚乙炔基人参皂苷Ro(52).化合物8,12,31～33,36,37,44,45,47,51为首次从人参中分离得到;化合物19,23,46为首次从红参中分离得到.
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HPLC同时测定人参药材中12种人参皂苷的含量
目的:建立HPLC测定人参药材中12种人参皂苷含量的方法.方法:采用lunna NH2色谱柱(4.6 mm×150mm,5 μm);流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温为室温.结果:12种人参皂苷Rh2,Rh1,Rg2,Rg3,Rg1,Rf,Re,Rd,Rc,Rb2,Rb3,Rb1在60min内达基线分离,线性关系良好(Γ≥0.999 5).加样回收率分别为98.1%,95.3%,96.1%,95.6%,97.3%,98.6%,98.0%,96.4%,96.1%,97.6%,96.8%,96.9%(RSD≤3%).结论:该方法简便,快速,可作为人参药材质量控制指标.
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中药三七“一测多评”质量控制方法的系统研究
目的:建立可用于中药三七质量控制的人参皂苷Rg1,Rb1,Rd,Re及三七皂苷R1的“一测多评”定量检测方法.方法:采用HPLC-DAD测定5种活性皂苷成分之间的相对校正因子,并分别以这5种成分中的任1种作为参照成分,建立可对另外4种成分定量检测的“一测多评”方法.分别采用5台不同的HPLC仪器,5种不同C18色谱柱及4个检测波长验证所建立方法的耐用性.进而采用建立的“一测多评”方法测定并计算43批三七药材样品中5种皂苷类成分含量,并与外标法比较,以评价“一测多评”法的准确性.结果:5种皂苷成分分别为参照成分时,43批药材中Rg1,Rb1,Rd,Re,Rt的“一测多评”法含量计算结果(Wf)均与外标法的含量测定结果(Ws)无显著性差异,2种方法的含量测定结果的比值(Ws/Wf)为(94.02±2.11)％ ～ (99.75 ±0.79)％,说明方法准确度高、重复性好.相对校正因子耐用性良好,在不同色谱柱、不同仪器及不同检测波长下RSD分别为0.42％ ～3.7％,0.52％ ～3.5％,0.79％ ～4.9％.采用相对保留值方法可以对5种成分色谱峰准确定位,其数值的RSD为0.18％ ～ 13％.结论:本研究建立了准确、快速且耐用性良好的5种活性皂苷类成分同时定位定量的三七“一测多评”方法,为“一测多评”法应用于中药质量控制提供了可靠依据.
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基于高分离度和对照图谱的红参中9种人参皂苷类成分“一测多评”质量评价研究
采用反相高效液相色谱法,Ultimate(R)C18色谱柱,对红参中9种人参皂苷类成分进行了具有高分离度和高色谱峰纯度的同步色谱分离.采用“一测多评”中药质量评价模式,经一系列方法学考察,以人参皂苷Rb1为内参物,建立了人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2,Rb3,Rd和20(S)-人参皂苷Rg3与人参皂苷Rb1间的相对校正因子与相对保留值,在红参对照图谱的辅助定位下,终实现了仅采用人参皂苷Rb1一个中药对照品对红参中上述9种人参皂苷类成分的同步质量控制.
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人参茎叶霜冻前后的质量变化
采用HPLC测定人参茎叶受冻前后单体皂苷、游离氨基酸含量,紫外分光光度法测定总酚含量及DPPH法测定自由基清除能力的变化,考察人参茎叶霜冻前后的质量变化.结果表明,受冻后人参茎中9种单体皂苷含量除Rg1,Re升高外,其余皂苷含量均有所下降,人参叶中皂苷含量均明显降低;受冻后人参茎中游离氨基总含量降低,而人参叶氨基酸总含量升高;受冻后人参茎、叶中的总酚含量降低,但对自由基的清除能力提高.霜冻对人参茎叶质量产生一定的影响.
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HPLC测定三七花叶颗粒中人参皂苷Rb3的含量
三七花叶颗粒为三七叶茎和三七花提取加工制成,可清热、凉血、平肝潜阳,用于由血热引起的疮疖;由肝热引起的心悸、烦躁、眩晕、头痛、失眠等[1].三七叶茎及花中所含有的人参皂苷Rb3较根中高[2],本研究采用高效液相色谱法测定了三七花叶颗粒中人参皂苷Rb3的含量,为控制其制剂质量提供依据.
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HPLC测定植物中丁香脂素类物质的总含量
丁香脂素是一种较为常见的四氢呋喃骈四氢呋喃类木脂素,常以葡萄糖苷的形式存在于多种植物中.丁香脂素具有抗氧化活性,对cAMP磷酸二酯酶具有抑制作用[1].丁香脂素二葡萄糖苷具有人参皂苷相似生理活性,有较强的抗应激反应[2,3].基于这些生理活性,丁香脂素及其糖苷类物质在抗衰老、抗疲劳以及抗癌等方面具有潜在的药用价值.
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HPLC测定复方调脂胶囊中人参皂苷Rg1的含量
复方调脂胶囊由三七、山楂、泽泻、大黄等中药制备而成,具有降血脂、抗白细胞下降、降血糖等功能.其中三七为方中君药,三七主要成分为人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1等.云南红药中人参皂苷Rg1的含量测定曾有报道[1,2].
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HPLC测定益心舒胶囊中人参皂苷Rg1,Re的含量
益心舒胶囊由人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂7味药材组成,功效为益气复脉,活血化瘀,养阴生津.用于气阴两虚,心悸脉结代,胸闷不舒、胸痛及冠心病心绞痛见有上述症状者.其质量标准收载于<卫生部药品标准>中药成方制剂第十三册中,没有含量测定指标.选择方中君药人参进行含量测定.人参皂苷Rg1,Rb1,Re是人参的主要有效成分,测定的方法多为高效液相色谱法,薄层扫描法等.参考<中国药典>2000年版一部及有关文献资料[1,2],对制剂中的人参皂苷Rg1,Re含量进行了测定,并对其方法学进行了研究.
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HPLC测定回力神颗粒中五味子醇甲的含量
回力神颗粒由人参、麦冬、黄芪、五味子、当归、灵芝、茯苓、山楂、丹参经适宜加工而成.为控制产品质量,对药品的主要成分进行分析研究.因人参中人参皂苷的HPLC检测波长较低,其他成分易干扰测定[1],黄芪中黄芪甲苷的测定由于其他成分的干扰无法进行定量薄层扫描[2].五味子醇甲的测定已有一定的工作基础[3,4],故选择了五味子中的五味子醇甲作为本品的含量测定指标.
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骨痛消酊剂中丁香酚的含量测定
骨痛消酊剂是新研制的外用纯中药制剂,是由三七、延胡索、细辛、花椒、丁香油、乳香、当归、血竭、重楼、骨碎补等中药经提取精制而成,具活血化瘀,祛风散寒,通络止痛,强筋壮骨.用于风寒久痹,瘀血阻络所致腰腿痛,关节肿痛,屈伸不利,痛有定处,酸麻肿胀,遇寒加重等增生性脊椎炎、肩周炎、膝关节骨性病等.我们建立了方中君药三七中所含有效成分人参皂苷Rg1的含量测定方法(另见报道),因丁香油为本产品中所含的挥发性成分,为了更好地控制本品的质量,保证产品的疗效,试验中又建立了丁香油所含有效成分丁香酚的含量测定方法.目前测定丁香酚含量的方法有薄层扫描法[1] 、气相色谱法[2～5]等.由于本制剂含药味多,成分复杂,,因此通过试验,建立了分离效果好,专属性强的高效液相色谱法测定骨痛消中丁香酚的含量,结果满意,可作为本制剂质量控制指标之一.
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人参与莱菔子配伍后人参皂苷Rg1含量变化研究
相恶是中药七情配伍之一,即两种药物合用,一种药物与另一种药物相作用而致原有功效降低,甚至丧失[1].人参恶莱菔子是相恶的典型范例,对其进行实验研究,既有益于进一步理解相恶的内涵,又有利于指导临床合理用药.现代研究表明,人参皂苷是人参补虚作用的主要活性成分.因此,研究人参是否恶莱菔子,关键是看二者配伍后人参皂苷的煎出量是否减少,若人参皂苷煎出量明显减少,则说明莱菔子有颉颃人参补虚作用之嫌.相反,若配伍后人参皂苷煎出量没有明显变化,则说明莱菔子对人参补虚作用影响不大[2].
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人参皂苷Rg1脂质体制备工艺的优化
人参具有大补元气,补脾益肺,生津,安神的功效,能调节中枢神经系统兴奋和抑制过程的平衡,并能提高学习能力.其主要成分人参皂苷基本上能代表人参的药效指标.药代动力学研究表明,人参皂苷难以通过血脑屏障(BBB)[1].为提高脑血药浓度,增强人参的疗效,增加人参皂苷对血脑屏障的通透性,使人参皂苷更有效的通过BBB具有重要的临床意义.
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HPLC-ELSD法测定心脉通软胶囊中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1,Rb1的含量
心脉通软胶囊系由三七、山楂叶和川芎组成,采用现代大孔树脂吸附和超临界流体萃取技术富集有效成分精制而成,具有活血化瘀,通脉止痛的功效,临床用于冠心病心绞痛心血瘀阻所致胸痹心痛证.
