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超滤工艺对生脉注射液中有效成分透过率的影响
目的:考察超滤工艺对生脉注射液中有效成分透过率的影响.方法:以人参皂苷Rg1,Re,Rb1,五味子醇甲透过率为指标,通过正交试验考察聚砜膜孔径、温度、压力对生脉注射液超滤工艺的影响.采用HPLC测定指标成分含量,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0 ～ 30 min,0％ ～ 10％A;30 ～40 min,10％ ～23％ A;40 ～50 min,23％A;50 ～ 85 min,23％ ～60％ A;85 ～ 95 min,60％～100％A),检测波长203 nm.结果:佳超滤工艺为聚砜膜孔径50 000,温度45℃,压力11 psi;人参皂苷Rg1,Rb1,Re,五味子醇甲的透过率分别为80.26％,85.02％,50.69％,94.99％.结论:超滤工艺对生脉注射液中有效成分的透过率存在一定影响,为生脉注射液过滤工艺的优选提供实验依据.
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密闭性中药复合敷料的提取工艺优选
目的:优选密闭性中药复合敷料的提取工艺.方法:以人参皂苷Rg1,Rb1含量和浸膏得率为评价指标,通过单因素试验优选提取次数,利用正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间对密闭性中药复合敷料提取工艺的影响.采用HPLC测定人参皂苷Rg1,Rb1含量,流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0～10 min,81％A;10～38 min,81％～ 79％ A;38 ～90min,79％ ～66％A),检测波长203 nm.结果:各因素对提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数＞提取时间＞乙醇用量.佳提取工艺条件为加8倍量70％乙醇提取2次,每次2h;平均浸膏得率25.45％,人参皂苷Rg1,Rb1平均质量浓度分别为0.46,0.37 g·L-1.结论:建立的含量测定方法准确、重复性好,优选的提取工艺稳定、合理、可行,为民间外伤验方的二次开发提供参考.
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动态优化方法在人参提取工艺优化中的应用
目的:采用动态优化方法优选人参中人参皂苷提取工艺.方法:采用HPLC测定人参中人参皂苷Rg1,人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量变化,Diamonsil RP-18e色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～7 min,16％ ～18％A;7～27 min,18％ ～ 30％ A),流速3.0 mL· min-,柱温35℃,DAD检测波长203 nm,进样量20 μL.通过比较动态优化工艺与文献提取工艺所得人参提取物中浸膏得率、指标成分含量和指纹图谱的相似度,评价动态优化方法应用于人参中人参皂苷提取工艺优化的可行性.结果:动态优化提取工艺为8倍量70％乙醇提取3次,提取时间为第1次40 min,第2次20 min,第3次40 min,总提取物的浸膏得率为41.3 mg·g-1.动态优化提取工艺与文献提取工艺的提取物中指标成分含量及浸膏得率的RSD均＜5％,指纹图谱相似度为100％,表明2种提取方法的提取物基本一致,但是动态优化提取工艺提取时间节约63％,耗电量节约60％.结论:动态优化方法可以用于人参中人参皂苷提取的工业化生产,该工艺能大幅减少提取时间,缩短生产周期,降低能耗,能够产生明显的经济价值,具有很好的应用前景.
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HPLC-Q-TOF-MS鉴定注射用益气复脉冻干粉中皂苷类成分
目的:采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-Q-TOF-MS)鉴定注射用益气复脉冻干粉中皂苷类成分,为后续该制剂皂苷类成分的定量研究及其药效物质基础研究提供参考.方法:分析人参皂苷Rg1,Re,Rb1的质谱裂解规律,结合HPLC-Q-TOF-MS鉴定注射用益气复脉冻干粉中皂苷类成分.结果:人参皂苷Rg1,Re,Rb1的质谱裂解主要有2条途径,分别为①依次丢失所有的配糖基直到形成稳定的去质子化母核;②配糖基的碎裂形成特征性碎片离子.在此质谱裂解规律的基础上,鉴定了注射用益气复脉冻干粉中21个皂苷类化合物,除了人参皂苷Rg1,Rb1,Re,Rc,Rd,Rf,Rg3及三七皂苷R1外,其他13个皂苷类化合物首次在益气复脉冻干粉中报道,同时通过文献对比初步鉴定了五味子甲素.结论:利用HPLC-Q-TOF-MS鉴定了益气复脉冻干粉中大部分含量较高的皂苷类成分,为后续该制剂的深入研究奠定了物质基础.
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HPLC法测定参苓白术颗粒中人参皂苷的含量
目的:建立HPLC法测定参苓白术颗粒中人参皂苷的含量.方法:采用色谱柱:J'sphere ODS-H80,流动相:乙腈-0.05%磷酸溶液(19.5:80.5),以人参皂苷为对照品,检测波长203nm.结果:人参皂苷Rg1在1.04～5.2μg、人参皂苷Re在0.48～2.4μg范围内线性良好.人参皂苷Rg1平均回收率98.29%,RSD为2.63%;人参皂苷Re平均回收率98.17%,RSD为1.82%.结论:该方法准确、灵敏,可用于参苓白术颗粒的质量控制.
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11批生脉注射液的质量考察
目的:对11批生脉注射液进行质量考察.方法:采用高效液相色谱法测定生脉注射液中的人参皂苷Rg1,Re的含量.结果:人参皂苷Rg1的回归方程A=1674763X+18802,r=0.9996;人参皂苷Re的回归方程A=1255032X+16807,r=0.9995.平均回收率为人参皂苷Rg1102.0%,RSD为2.9%,人参皂苷Re101.6%,RSD为3.00%.结论:人参皂苷的测定方法稳定,可行,可用于检验生脉注射液,作为评价该制剂的质量标准.
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广西三七中皂苷成分的含量测定及其变化
目的:高效液相色谱法测定不同药龄、不同月份生育期的广西三七中皂苷的含量,并考察其变化规律,为广西三七的质量评价提供依据.方法:采用HPLC法,Shim-pack CLC-ODS柱分离,流动相:乙腈与水梯度洗脱,检测波长203nm,柱温:室温,流速1mL/min.结果:不同药龄、不同月份生育期的广西三七中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和三七皂苷R1的含量有明显差异,4年药龄的广西三七10月份采收三七皂苷含量高.结论:所建立的高效液相色谱法灵敏度高,专属性强,重复性好,能准确、快速地进行含量测定;药龄及月份生育期是影响广西三七皂苷含量的重要因素.
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康心宁胶囊人参皂苷Rg1含量测定研究
康心宁胶囊是我院治疗心脏病的有效制剂,处方为人参9 g,桂枝12 g,益母草20g,丹参30g,赤药12 g,猪苓30 g,砂仁12 g,大腹皮12 g.为保证药物临床疗效的稳定性,对处方中君药人参的主要有效成分人参皂苷Rg1进行了含量测定方法的研究.
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薄层扫描法测定健脾开胃颗粒剂中人参皂苷Rg1的含量
目的:为制定健脾开胃颗粒剂的内在质量标准奠定基础.方法:以氯仿-甲醇-水(25:10:1)10℃下放置下层液为展开剂,10%硫酸乙醇为显色剂,以硅胶G为吸附剂,λs=535nm,λR=660nm双波长薄层扫描法测定健脾开胃颗粒剂中人参皂苷Rg1含量.结果:本品人参皂苷Rg的平均含量为0.0472%,其线性方程为Y=7688.9x+5173.4(r=0.9983)平均回收率为95.56%精密度良好.结论:该法简便、快速,能满足制剂的质量控制要求.
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高效液相色谱法同时测定六味消痔胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量
目的:建立六味消痔胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的高效液相色谱测定方法.方法:色谱柱为DiamonsilTM(钻石)C18柱(250 mm×4.6 mm 5 μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸(21∶79),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为203 nm,柱温为40℃.结果:人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的线性范围分别为(500.5～5 002.5)ng和(201.25～2 012.5)ng,加样回收率分别为100.15%和98.57%,平均值为99.70%.结论:方法简便、重复性好,便于操作.
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不同产地人参皂苷成分含量UPLC法测定及质量评价
目的:文章旨在用超高效液相色谱(UPLC)分析人参有效成分含量差异以及不同产地人参质量评价.方法:人参样品来源于道地产区辽宁、吉林、黑龙江共20批样品,采用UPLC方法检测20批不同产地样品的9种人参皂苷(Rg1、Re、Rb1、Rf、Rg2、Rc、Rb3、Rb2、Rd)含量.建立20批样品的UPLC指纹图谱,利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对不同产地人参样品进行质量评价.结果:吉林、辽宁样品中9种人参皂苷的平均含量明显高于黑龙江;人参总皂苷含量排序结果显示,前15位都是吉林和辽宁省份的样品;3种人参皂苷Rg1、Re、Rb1的分析结果表明,不同省份样品中的3种人参皂苷含量存在明显差异,辽宁清源、吉林抚松、吉林长白人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量较高.20批人参药材图谱的相似度值均在0.93以上.结论:人参皂苷含量以吉林产地高,其次是辽宁和黑龙江.结果表明人参质量稳定,化学成分组成比较一致.
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人参皂苷作用于星形胶质细胞对中风后神经干细胞增殖和分化的影响
目的:观察人参皂苷作用于星形胶质细胞对中风后神经干细胞增殖和分化的影响.方法:孕17d SD大鼠,分离培养NSCs和星形胶质细胞.利用Transwell装置将NSCs和星形胶质细胞共培养.设立正常组、模型组和人参皂苷给药组,于氧糖剥夺模型4h后2h、4h和6h三个时间点分别收集处理星形胶质细胞和共培养液,免疫荧光双标染色分析NSCs的增殖和分化情况,Western blot分析HIF-1 α蛋白表达情况,ELISA检测VEGF含量.结果:与正常组比较,2h、4h和6h模型组BrdU、Tuj-1和Vimentin面密度、光密度、阳性细胞数目均减少(P＜0.05,P＜0.01),人参皂苷给药组可显著增加各时间点BrdU、Tuj-1和Vimentin面密度、光密度、阳性细胞数目(P＜0.05,P＜0.01);与正常组比较,2h、4h和6h模型组HIF-1α蛋白表达均增加(P＜0.05),与模型组比较,人参皂苷给药组可显著增加各时间点HIF-1 α蛋白表达(P＜0.05);与正常组比较,2h、4h和6h模型组VEGF含量均增加(P＜0.05),与模型组比较,人参皂苷给药组可显著增加各时间点VEGF含量(P＜0.05).并且随着2h、4h和6h复氧时间的延长,模型组和给药组HIF-1α蛋白表达及VEGF蛋白含量相比前一时间点也逐渐增加.结论:在中风等脑损伤情况下,人参皂苷能够作用于神经干细胞巢内的星形胶质细胞,使星形胶质细胞HIF-1α表达上调,启动下游VEGF的分泌增加,通过旁分泌的形式作用于NSCs,促进NSCs增殖和分化,从而达到修复脑损伤的目的.
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人参皂苷对缺氧缺糖/再灌注神经干细胞增殖和分化的影响
目的:研究人参皂苷对体外氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)神经干细胞(NSCs)自我更新、增殖和分化的影响及其机制.方法:分离胎鼠海马神经干细胞,采用MTT法测定不同时间点人参皂苷对神经干细胞增殖分化的影响,并筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖分化的佳浓度和佳作用时间窗.建立神经干细胞缺氧缺糖/再灌注(OGD/R)的体外模型,并给予人参皂苷治疗,通过ELISA和Western blot方法检测培养液中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及细胞核中HIF-1 α蛋白的表达量.采用免疫荧光双标记方法检测各组神经干细胞特异性标志物巢蛋白(Nestin)、神经干细胞增殖标记物(Brdu)、神经元祖细胞特异性标记物(Tuj-1)及星形胶质细胞祖细胞标记物(Vimentin)的表达,统计各组阳性细胞的个数、面密度值和光密度值,研究验证人参皂苷对神经干细胞的增殖与分化的影响及可能的机制.结果:筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖分化的佳浓度为1μg/mL,作用的佳时间点为24h.结果发现,与正常组比较,模型组HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量增加,阳性细胞的细胞个数、光密度和面密度减少,提示缺血再灌注后,导致了神经干细胞的损害,神经干细胞细胞核中HIF-1 α基因转录翻译增强,促进了其下游靶基因VEGF的转录翻译增强,使HIF-1 α蛋白与VEGF蛋白表达均增加,从而启动了神经干细胞增殖和分化的神经修复过程;与模型组比较,人参皂苷治疗组HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量增加,且阳性细胞的细胞个数、光密度和面密度比模型组明显增加(P＜0.05).结论:人参皂苷可促进缺血再灌注后HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量进一步增加,通过促进神经干细胞的增殖与分化而促进脑损伤结构和功能的修复.
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LC-MRM-MS法同时测定香槟方10个成分的含量
目的:建立运用液相色谱-多反应监测扫描模式-质谱法(LC-MRM-MS)同时测定香槟方中10个成分(人参皂苷Rc,人参皂苷Rd,人参皂苷Rg1,槲皮素,槲皮苷,异槲皮苷,乌药醚内酯,槟榔碱,去甲异波尔定,苦杏仁苷)含量的分析方法.方法:采用Waters BEH C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),以0.5‰甲酸-水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.2mL/min,柱温为室温;采用电喷雾离子源(ESI),正负离子检测,多反应监测扫描模式(MRM)分析,毛细管电压为3.5kV,去溶剂化温度600℃,去溶剂化气流量为550L/Hr,雾化器压力为6.2Bar.结果:10个成分在质量浓度范围内线性良好,平均加样回收率为94.52％-111.15％,RSD均小于3.01％.结论:该分析方法特异、快速、灵敏,重复性好,可为香槟方的质量控制提供依据.
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不同生长时期人参中6种皂苷含量的变化
目的:研究不同生长时期人参中6种皂苷含量的变化.方法:采用高效液相色谱法对不同生长时期的18批人参样品中6种皂苷的含量进行检测.结果:人参根中皂苷Rg1的含量在展叶期出现峰值,皂苷Re、Rf、Rb1的含量均在展叶期和果后参根生长期出现峰值,皂苷Rb2的含量在结果期和果后参根生长期出现峰值,皂苷Rd的含量在果后参根生长期出现峰值;人参茎中6种皂苷的含量在人参整个生长发育时期均变化不明显;人参叶中6种皂苷的含量均随着人参的生长而不断增加.结论:人参中6种皂苷的含量随着人参的生长而有所变化.
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参精口服液的澄清工艺考察
目的:优选参精口服液的佳澄清工艺.方法:比较高速离心法、乙醇沉淀法、酶解法、KBT-ZTC絮凝澄清法、微滤法、乙醇沉淀-高速离心-微滤法、酶解-高速离心-微滤法、絮凝澄清-高速离心-微滤法8种澄清方法对参精口服液中人参皂苷含量、总多糖含量、水浸出物的量和澄明度的影响.结果:优选的佳澄清方法是絮凝澄清-高速离心-微滤法,该方法处理后的提取液有效成分保留率高,澄明度和稳定性好.各有效成分的含量分别为人参皂苷Re为1.184mg/g,人参皂苷Rg1为0.9054mg/g,人参皂苷Rb1为0.4193mg/g,总多糖为97.47mg/g,水浸出物的平均量为25.62％.结论:絮凝澄清-高速离心-微滤法可作为参精口服液的佳澄清工艺,该工艺稳定可行,澄明度较高,有效成分损失少.
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近红外光谱快速检测西洋参提取液中有效成分含量的方法研究
目的:研究西洋参提取液人参皂苷的快速检测方法.方法:通过近红外光谱技术与HPLC法结合,采用偏小二乘法建立西洋参提取液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd指标的定量校正模型.结果:人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd的定量校正模型相关系数r分别达到0.99、0.98、0.95和0.97,RMSECV分别为0.0311、0.0382、0.0425和0.0341,定量校正模型性能稳定,预测效果良好.结论:近红外光谱透射技术可以有效反映西洋参提液人参皂苷含量变化信息,可用于西洋参提取液的快速检测.
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益气活血解毒方体内外抗肿瘤作用的实验研究
中医视人体为统一整体,辨证论治是中医认识疾病和治疗疾病的基本原则,组方配伍是中医药治疗疾病的精髓.扶正培本、活血化瘀、清热解毒合用是中医治疗肿瘤及防治肿瘤转移的常用大法.本研究依据以往的研究结果,选用扶正培本代表药人参的提取物人参皂苷,活血化瘀药三七的提取物三七皂苷,清热药黄连、黄柏的提取物小檗碱,组成益气活血解毒复方研究其抗肿瘤作用,从而为扶正培本、活血化瘀、清热解毒法治疗肿瘤提供实验依据,也为开发质量稳定、有效成分明确的标准化中药复方新药奠定基础.
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血管性痴呆中医病机及人参皂苷益智机制研究进展
据统计中国现有痴呆患者700～800万,其中血管性痴呆(VaD)占10％～20％.然而VaD的具体发病机制至今并不明确,王永炎院士曾提出VD“正虚毒损络阻”的病机学说,且《神农本草经》中也有人参“益智”作用的论述.基于VaD中医病机的探讨及临床实践,我们认识到中药人参对认知改善的确切作用,而人参皂苷作为人参的有效成分,其益智机制尚不明确.故而,文章从VaD的中医病机以及人参皂苷益智机制的相关研究进展两个方面进行综述.
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人参皂苷的免疫调节作用及其应用
人参(Panax ginseng C.A.Mey.)是传统补益中药,具有补气生血、扶正祛邪等功效.人参皂苷(ginsenoside)是人参主要的有效成分之一,按其苷元的化学结构不同,可分为人参二醇型皂苷、人参三醇型皂苷、齐墩果酸型皂苷;按其在薄层色谱上RF值的大小,分别称为Ra类(Ra1～6)、Rb类(Rb1～3)、Rf类和Rg类(Rg1～3)……共计20余种单体.现代药理学研究表明,人参皂苷具有调节机体免疫功能的作用.随着近年来免疫学的迅速发展,有关人参皂苷对免疫系统影响的基础研究和临床应用均取得了一定的进展.现将近5年的研究概况综述如下.
