首页 > 文献资料
-
现代生物技术在人参属药用植物研究中的应用
该文对DNA条形码等分子鉴定技术、一代和二代测序技术、基因克降等现代牛物技术在人参属药用植物的物种鉴定、转录组分析、次生代谢产物合成途径及关键酶功能鉴定研究中的应用进行综述.现代牛物技术为人参属药用植物在分子水平的研究提供保证,揭示了人参属药用植物转录组及功能基因等遗传信息,加速了人参属药用植物基因组图谱绘制,为阐明人参属植物中重要次生代谢产物——人参皂苷合成的分子机制、实现体外合成重要天然产物以及对未来新药物的研发奠定基础.
-
人参皂苷生物合成研究进展
人参为五加科多年生草本植物,驰名中外的名贵药材,人参的主要活性成分为人参皂苷,大体上可以分为3种:齐墩果烷型、原人参二醇(PPD)和原人参三醇(PPT).人参皂苷具有抗血栓、抗疲劳、抗衰老、控制肿瘤、增强免疫力等诸多作用.关于人参皂苷的研究已深入到药理、药效和生物合成等各个方面,并有很大的提升,该研究对近年来发表的关于人参皂苷生物合成的相关文章进行总结与综述,为人参皂苷的研究提供一定的指导和参考.
-
人参皂苷的体外模拟代谢及转化研究进展
人参系传统名贵中药,近年来对其代谢的研究成为热点.通过查阅国内外相关文献,作者主要从人工胃液、肠道菌代谢、酶和微生物体外转化4个方面对人参皂苷体外模拟代谢及转化进行阐述,分析人参皂苷体外代谢的主要途径,为人参皂苷代谢的系统性研究提供参考.
-
人参皂苷对吗啡作用影响的研究进展
对人参皂苷拮抗吗啡成瘾有关的药理作用进行了综述,主要介绍了人参皂苷对吗啡引起的与成瘾有关的动物行为、神经系统功能和信号转导改变的拮抗作用.
-
炮制、体内转化过程与人参皂苷潜在构效关系相关性的探讨
人参是少数在世界范围内使用的药食同源的中药之一,其主要活性成分被认为是人参皂苷.在过去几十年中,对于其化学结构和药理活性的研究,已经取得了显著的进展.但是迄今为止,尚未有关于人参炮制、体内转化过程的具体描述,对于上述过程中产生的稀有皂苷为何增强抗癌活性的探讨也并未明确.因此,该文首先描述了人参中人参皂苷的多样性,包括天然产生人参皂苷以及炮制或生物转化过程所产生的特有皂苷.接着对炮制或体内转化过程进行了归纳总结,并探讨了稀有皂苷与抗癌活性存在的潜在构效关系.了解这些化学变化以及药理活性之间的相关性,可以为提高人参皂苷的抗癌活性提供新的思路,并有利于发展新的抗癌药物.
-
人参15个组织器官中皂苷量与6种人参皂苷生物合成基因表达的相关性研究
以四年生红果期吉林人参的15个组织器官为材料,利用HPLC和香草醛-硫酸比色法分别测定15个组织器官中6种单体皂苷(人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rc,Rb2,Rd)和总皂苷含量;同时,利用实时荧光定量PCR测定15个组织器官中法尼基焦磷酸合成酶(farnesyl pyrophosphate synthase,FPS)、鲨烯合成酶(squalene synthase,SQS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SQE)、氧化鲨烯环化酶(oxidized squalene cyclase,Osc)、β-香树脂合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)和细胞色素P450超家族(cytochrome P450 family,P450)基因的相对表达量.研究试图通过相关性分析,获得吉林人参15个组织器官中人参皂苷含量与生物合成途径相关酶基因表达量之间相关关系.结果表明,6种单体皂苷含量之间具有线性正相关的协同增减趋势,而单体皂苷含量与总皂苷含量之间具有相关性极显著(P＜0.01)的正相关关系;总皂苷含量与人参中SQS,OSC,β-AS,SQE,P450,FPS基因之间的相关性极显著(P＜0.01),单体皂苷含量与6种酶基因之间相关性各不相同.说明这6种参与人参皂苷生物合成酶基因调控人参总皂苷与单体皂苷的生物合成,它们在人参不同组织器官中的表达呈现协同增减趋势,并以集群协调表达的方式来调控人参皂苷生物合成.
-
外源人参三萜皂苷对新林土中土壤微生物群落的影响
人参皂苷不仅是人参主要的药用活性物质,而且人参皂苷是人参化感作用的主要化感物质,其在人参植株生长及生态适应性方面发挥重要作用.为了研究人参皂苷对土壤微生物群落的影响,采用外源添加的方式研究人参总皂苷对新林土中微生物群落动态的影响,分析新林土中微生物群落代谢活性的变化趋势,探讨人参皂苷对土壤微生物群落的生态学效应.与对照相比,加入人参总皂苷10 d和40 d后新林土中土壤微生物群落的代谢活性均显著高于对照组,处理10 d后土壤微生物群落多样性指数除了均匀度指数(E)外,其他多样性指数随皂苷浓度升高呈现出先升高后降低的趋势,其中,低浓度处理碳源利用丰富度指数(S)与对照相比差异显著.后期除了均匀度指数(E)外,其他多样性指数高于对照.人参总皂苷可改变新林土中土壤微生物群落的组成和代谢活性,人参皂苷在土壤中的积累可以改变土壤微生态环境从而影响人参生长.
-
不同基质条件下西洋参皂苷提取物的自毒作用
人参皂苷是西洋参Panax quinquefolium中所含的主要次生代谢产物,西洋参生长过程中,植株内的人参皂苷可以通过根系分泌及腐解进入到土壤环境中.研究利用高效液相色谱法(HPLC)测定了土壤中人参皂苷含量,根据西洋参田间的实测数据设计皂苷提取物的系列浓度(0.2 ～125 mg· L-1溶液或0.2 ～ 125 mg·kg-1土壤),通过在溶液及土壤基质中的添加实验,观察环境中的皂苷提取物对西洋参种胚和成株苗生长的作用.结果表明,在北京市怀柔区三至四年生西洋参根际土中,检测到人参皂苷Rb1,Rb2,Rd,总量为0.80 ～ 3.19 mg·kg-,按照田间持水量为20％计算,总皂苷在土壤溶液中的质量浓度为4～ 16 mg·L-1.在溶液基质中,0.2～125 mg·L-1西洋参皂苷提取物对西洋参种胚胚根的抑制作用在6％ ～23％,在125mg·L-1时达到显著水平(P＜0.05);对西洋参胚芽无显著抑制作用.营养液中添加25 mg·L-1皂苷提取物,培养20 d时,三年生西洋参成株苗株高下降28％,地上部的生物量下降50％(P＜0.05);对新生须根生长的抑制作用不显著.在土壤基质中,添加同样浓度的皂苷提取物在灭菌和未灭菌土中对西洋参胚根、胚芽生长均无显著影响.由此推论,西洋参的皂苷成分对自身胚根和成株苗生长有自毒作用,但在田间土壤条件下,这种作用有所下降.
-
不同贮藏处理对西洋参鲜根品质及成分的影响
目的:研究2种贮藏方法对西洋参鲜根品质及成分的影响.方法:选择无病健康的四年生西洋参鲜根,分别采用砂藏(处理A)和"清洗+保鲜剂+保鲜袋"(处理B)2种方式进行保鲜贮藏至180 d,每隔45 d随机取样1次,调查参根发病率和病情指数,测定人参皂苷、粗多糖以及游离氨基酸的含量.结果:贮藏45 d内,B处理的参根没有发病,优于A处理;贮藏至180d时,则以A处理的效果更好,发病率和病情指数均低于B处理.2种贮藏方式下,人参皂苷、粗多糖和游离氨基酸含量均存在明显差异.在整个贮藏过程中,A处理的西洋参中人参皂苷含量一直保持较高,粗多糖和游离氨基酸含量在135 d贮藏期内变化平缓,至180 d时有较明显的上升;而B处理的西洋参中粗多糖含量在贮藏90 d后明显下降,至135 d后基本保持稳定,游离氨基酸含量呈类似变化趋势,但下降不明显.结论:总体看来,在180 d贮藏期间,A处理更有利于保持西洋参鲜根的品质.
-
人参Ri质粒转化及代谢产物对HepG2细胞的作用
目的:发状根生产的次生代谢产物含量比植物自身合成的含量高几倍甚至几十倍,利用人参发状根可以生产大量人参皂苷,并有效的抑制癌细胞的增值.方法:通过正交试验设计筛选人参发状根诱导的条件,通过发状根生物积累量和皂苷含量的测定确定培养条件,然后利用MTT法测定了人参皂苷对HepG2细胞的影响.结果:本实验优化了人参发状根的佳诱导条件,吸光度A 0.6,侵染时间为10 min,预培养时间为3d,筛选出发状根的佳培养条件,MS培养基,pH6.1,24℃培养时,发状根的生物积累量和皂苷含均较高,采用人参总皂苷对肝癌细胞HepG2的抑制效果进行研究,证实人参总皂苷对HepG2的抑制率与给药浓度呈正相关.结论:筛选出适的人参发状根诱导及培养条件,不同部位的总皂苷对肝癌细胞HepG2的增殖均具有抑制作用.
-
离体培养条件对人参不定根生长及其活性成分合成的影响
目的:对人参不定根的摇瓶培养条件进行系统的优化.方法:利用组织培养技术结合高效液相色谱法和紫外分光光度法,考察了接种量、蔗糖浓度以及无机盐浓度对人参不定根的生长、人参皂苷以及人参多糖合成的影响.结果:每1 L培养基接种的不定根鲜重为20 g时人参不定根的干重增殖倍数达到大值;随着蔗糖浓度的升高,人参不定根干重增殖倍数呈先升高后降低的趋势,人参多糖含量增长趋势不明显,不同蔗糖浓度时各单体皂苷含量有显著区别,人参总皂苷含量随蔗糖浓度的升高而降低,单位体积培养基中的多糖和皂苷产量均在40g·L~(-1)蔗糖质量浓度下达到大值;培养基中的无机盐浓度对不定根的生长以及多糖和皂苷的合成与积累都有较大影响,3/4MS有利于不定根的生长以及皂苷的合成,而不定根中的多精含量则随着盐浓度的升高而降低.结论:接种量、蔗糖浓度、无机盐浓度都会显著影响人参不定根的生长以及其活性成分的合成和积累.
-
不同移栽制红参品质的初步比较研究
目的:比较不同移栽制红参的品质,为人参栽培和加工利用提供依据.方法:测定不同移栽制红参中10种人参皂苷、总灰分、酸不溶性灰分、挥发油、挥发性醚浸出物和总蛋白含量.结果与结论:不同移栽制红参总灰分＜5.0％,酸不溶性灰分＜0.3％；且不同移栽制红参中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量均符合《中国药典》(2010年版)规定.
-
西洋参破壁饮片、粗粉与传统饮片中人参皂苷的体外溶出度比较
比较西洋参破壁饮片、粗粉与传统饮片中人参皂苷在水中和模拟胃液中溶出度,研究粉体粒径对西洋参溶出度的影响.采用高效液相色谱法测定西洋参破壁饮片、粗粉和传统饮片中5种人参皂苷成分在不同时间点的溶出量,绘制溶出曲线,比较不同形态西洋参皂苷成分的溶出特征.结果表明,在以水为溶出介质的实验中,西洋参破壁饮片中人参皂苷较粗粉、传统饮片具有更快的溶出速度,5 min时溶出度就达到了总质量分数的90％,溶出量比饮片高出14％,比粗粉高出8％;在以模拟胃液为溶出介质的实验中,西洋参破壁饮片中人参皂苷比提取物中人参皂苷溶出速度上稍慢,但大溶出量比传统饮片提取物高出5％,比粗粉高出14％.该文首次通过体外溶出度研究证明,西洋参破壁饮片化后能够改善其有效成分的溶出效率.
-
人参皂苷Rh2脂质纳米粒的制备表征及冰片对其抗肿瘤活性的协同作用研究
制备人参皂苷Rh2脂质纳米粒,并考察其协同冰片的体外抗肿瘤活性.借助正交设计优化工艺,采用超声辅助溶剂挥发法制备人参皂苷Rh2脂质纳米粒,并对其包封率、载药率、粒径分布、Zeta电位、形态、体外药物释放行为等进行表征,MTT法初步考察其协同冰片的抗肿瘤活性.运用优化工艺制备的纳米乳颗粒圆整均匀,形态良好,3批平均包封率为(77.3±2.5)％,载药率为(7.2±0.2)％.,体外具有明显的缓释特征,96h累计释放52.42％;人参皂苷Rh2纳米粒作用24,48 h对脑胶质瘤C6细胞体外增殖作用的IC50分别为22.33,11.46 μmol·L-,纳米粒配伍冰片后IC50为16.36,8.04 μmol·L-1,并呈现浓度依赖性.
-
UPLC同时测定蒸制三七中的10种人参皂苷类活性成分的含量
该文建立了蒸制三七中人参皂苷Rg6,F4,Rk3,Rh4,20 (S)-Rg3,20(R)-Rg3,Rk1,Rg5,20 (S)-Rh2,20(R)-Rh2 10种皂苷类活性成分同时含量测定的超高效液相色谱方法,并对其不同头数、不同药用部位、不同蒸制时间的样品进行含量测定和质量控制研究.所采用的色谱条件为ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×100mm,1.7 μm),流动相乙腈-水,梯度洗脱,流速0.3 mL· min-1,检测波长203 nm,柱温35℃.结果显示,人参皂苷Rg6,F4,Rk3,Rh4,20(S)-Rg3,20(R)-Rg3,Rk1,Rg5,20(S)-Rh2,20(R)-Rh2分别在0.46 ～ 115,2.06 ～ 515,1.632～408,3.216～804,1.392～348,1.4～350,0.496 ～ 248,3.012～1 506,0.82～ 205,0.832～208 mg·L-1具有良好的线性关系(R2≥0.999 8),平均回收率分别为97.00％,97.96％,98.86％,95.27％,98.67％,98.02％,95.53％,96.63％,99.57％,103.6％.该方法快速、准确、重复性好、分离度高,可有效控制蒸制三七的质量,为制定其规范化炮制工艺和质量标准,确保其临床疗效的可靠性与一致性奠定了基础.
-
HPLC-DAD测定人参首乌胶囊中8种人参皂苷类成分
目的:建立同时测定人参首乌胶囊中8种人参皂苷类成分含量的HPLC-DAD方法.方法:采用Ultimate C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长203 nm.结果:人参皂苷Rg1,Re,Rb1,Rc,Rb2,Rb3,Rd,20(S)-Rg3分别在0.242 ～ 12.1,0.222～11.1,0.251～25.1,0.245～24.5,0.232～23.2,0.232 ～23.2,0.264～ 26.4,0.244～ 24.4μg成良好的线性关系,平均回收率分别为102.7％,103.2％,101.6％,101.2％,102.0％,100.7％,101.9％,102.0％.结论:该方法简便,准确,分离效果好,无干扰,可用于人参首乌胶囊中上述8种成分的含量测定.
-
人参皂苷compound K转化菌株的筛选
目的:筛选具有人参皂苷转化能力的真菌菌株,用于生产稀有人参皂苷compound K.方法:通过液态发酵,以三七茎叶总皂苷为底物,采用TLC和HPLC-ELSD检测转化产物,从12株植物病原真菌中筛选能够转化产生人参皂苷compoundK的佳菌株.结果:获得一株高效人参皂苷转化真菌,可以转化产生人参皂苷compound K,该菌株为镰刀属真菌串珠镰孢Fusarium moniliforme.结论:串珠镰孢对三七茎叶总皂苷具有较高的转化效率,有望用于生产制备compound K等低含量高活性的稀有人参皂苷.
关键词： 人参皂苷 compound K 生物转化 筛选 -
超高压处理对鲜人参微生物及人参皂苷含量的影响
目的:通过比较鲜人参超高压处理前后细菌和霉菌的菌落总数和人参皂苷含量的变化,探讨超高压处理技术作为鲜人参防腐防霉方法的可行性.方法:采用微生物学检验法测定细菌总数和霉菌总数；HPLC测定12种主要人参皂苷的含量.结果:在所选择的3组条件下,超高压处理后鲜人参菌落总数显著下降,霉菌未被检出；人参甲醇提取物和水提取物中12种人参皂苷的含量明显提高.结论:超高压处理鲜人参不但可以防腐防霉,而且提高人参皂苷的浸出率,是一种值得进一步深入研究的潜在的高效、安全和环保的人参防腐防霉技术.
-
近红外光谱法测定注射用益气复脉(冻干)中的10种人参皂苷
目的:利用近红外光谱法快速测定注射用益气复脉(冻干)中10种人参皂苷的总量.方法:用HPLC分别测定60批样品中10种人参皂苷的总量,运用偏小二乘法(PLS)建立50批测定值与NIR光谱之间的校正模型,并对10批样品的含量进行预测.结果:运用一阶导数+多元散射校正的预处理方法,选择波段为4246.8～4602.2,5 446.8～6 102.6 cm-1,佳维数为9时,建立的定量模型准确性好,R2(决定系数)和RMSECV(内部交叉验证均方差)分别为94.2,0.186;对10批样品的预测值与HPLC测定值之间的RMSEP为0.234.结论:近红外光谱法能快速对注射用益气复脉中的10种人参皂苷的含量进行预测,方法简便、精密.
关键词： 近红外光谱法 注射用益气复脉(冻干) 人参皂苷 -
不同炮制方法对加拿大产西洋参中10种人参皂苷的影响
探讨不同炮制方法对加拿大产西洋参中10种人参皂苷的影响.采用课题组前期已建立的测定西洋参人参皂苷的HPLC-PDA-ESI-MS方法,测定自制西洋白参(新鲜全参切片+-80 ℃冷冻干燥)、自制西洋红参(新鲜全参+隔水蒸煮+切片+-80℃冷冻干燥)和购于加拿大西安大略省大山行农场的商品西洋参(新鲜全参+电热鼓风烘干)中10种人参皂苷在炮制前后的变化情况.人参总皂苷含量为:商品西洋参＞自制西洋白参＞自制西洋红参;与自制西洋白参相比,自制西洋红参人参皂苷Re,Rc,Rb2,Rb3的含量降低,人参皂苷Rg1,Rb1的含量升高;人参皂苷Rg2,Rg3在六年生自制西洋白参、商品西洋参中采用PDA检测器均未检测到,采用ESI-MS能检测到较低响应值的Rg2,Rg3,但是在六年生自制西洋红参中其质量分数分别达到了0.027％,0.040 1％;通过二级质谱分析发现新鲜加拿大西洋参炮制成西洋红参后,人参皂苷RA0的量增加;人参皂苷Rf在所有西洋参样品中均未检测到.炮制后加拿大产西洋红参中人参皂苷的含量发生了较大变化,部分原本含量很低的人参皂苷含量增加,部分人参皂苷含量降低;与文献报道一致,西洋参样品中不含人参皂苷Rf.
关键词： 加拿大 西洋参 炮制 HPLC-PDA-ESI-MS 人参皂苷
