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泛素蛋白酶体在骨骼肌高分解代谢中的意义
蛋白质在细胞内的降解是极其复杂又高度有序的过程,真核细胞中的蛋白质降解绝大多数是由泛素系统完成的.泛素蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)具有高效、高选择性依赖ATP的细胞内蛋白质降解途径.蛋白质首先是被泛素分子识别,在泛素分子的介导下,由泛素活化酶E1、泛素载体蛋白E2以及泛素连接酶E3特异性作用,随后再与26S蛋闩酶体相偶联,被26S蛋白酶体内部哑单位多次切割降解为多个肽段,且多聚泛素链被还原成单体参与下一轮蛋白质降解.
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分子印迹技术在生物医学分析研究中的进展
分子印迹技术是一种人工合成具有分子识别功能介质的一种新技术,从20世纪70年代开始,随着Wulff和Mosbach等在分子印迹技术领域的开拓性工作,此技术得到了蓬勃发展.分子印迹聚合物(MIP)以其通用性和惊人的立体识别性,愈来愈受到人们的青睐.现在,以MIP为基质,进行生物物质分析、检测、分离与纯化所涉及的范围很广,可用于氨基酸、多肽、蛋白质、糖类、维生素、药物等领域,且伴随研究的进一步深入,应用领域不断拓宽.
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七跨膜域受体和心脏功能
准确的理解心脏如何与许多不同的细胞外信号分子识别与反应,将有助于我们发现治疗心脏疾病的新靶点.本文集中论述了七跨膜域受体(或G蛋白偶联受体)的新研究进展,以期阐明受体与心脏信号传导通路和环境之间的相互作用,从而为临床治疗提供理论依据和有益提示.
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病原微生物的原子力显微镜研究进展
绝大多数微生物在演化过程中对环境和生态压力进行选择形成了具有轮廓清晰的细胞壁,是外部环境和原生质体间的界线,具有维持细胞形状、控制细胞生长和分裂、抗膨压、作为分子筛和介导分子识别细胞间的相互作用.
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分子印记聚合物技术在固相萃取中的应用及影响因素
分子印记聚合物(MIP)技术是一种具有预定选择性的新型技术,固相萃取技术(SPE)是样品分离的一种有力手段.两种技术的结合成为纯化、富集和分析样品中的待测物质的有力手段.本文讨论了MIP和SPE的原理、应用、发展及影响因素.
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用螯形主体分子的识别功能选择分离小茴香挥发油中的茴香醚
目的用主客体分子包结法选择分离小茴香挥发油中的化学成分.方法利用超分子化学的分子识别功能,采用螯形主体分子trans-1,2-二苯基-1,2-苊二醇作为主体分子,小茴香挥发油的化学成分作为客体分子,螯形主体分子可与其中有互补性的化学成分形成包结化合物,以晶体形式析出.结果选择性地识别小茴香挥发油中的茴香醚并形成包结物晶体,用Kugelrohr真空蒸馏技术将茴香醚从包结物晶体中分离出,产率11.2%.采用IR、粉末XRD分析方法确定了包结物的形成. 采用IR,1HNMR和MS等分析方法,确定了被分离的化学组分的结构为反式茴香醚.结论此法分离挥发油化学组分有选择性高、速度快、方法简单等优点.
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柯里拉京分子印迹聚合物的制备及其分子识别能力
分子印迹技术(molecularly imprinted technique,MIT)是一种对某一特定分子(模板分子)具有选择性的聚合物的合成方法,该聚合物称为分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymer,MIP).当模板分子与功能单体接触时会形成多重作用点,通过聚合过程被记忆下来.除去模板分子后聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的孔穴,对模板分子及其类似物具有选择识别特性.MIP的分子识别依靠其内部孔穴的形状、大小和化学功能基的分布,类似于酶和底物、抗体和抗原、受体和激素之间的作用,具有专一的选择性.由于MIP对目标化合物具有预定的选择性,与生物大分子相比,其制备简单,具有耐酸碱、有机溶剂、高压等能力,稳定性高和使用寿命长等优点.因此,近年来分子印迹技术飞速发展,在化学与生物传感器、药物的分离纯化[1~3]以及中药活性成分的提取与分离等方面显示出广泛的应用前景[4,5].
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以DNA为靶的小分子药物研究中的分子识别
设计了不同系列的小分子,并以DNA三维空间结构的运动性为基础研究了它们之间的识别、结合作用.借助于生物量热、波谱、色谱及电泳技术鉴别它们与DNA的结合方式,从而建立了小分子与DNA嵌插结合的实验性判别标准.同时着重研究了柔性侧链、电性取代基对DNA嵌插及选择性结合的影响,总结出一些有意义的规律,如:(1)在嵌插平面上,无论是给电子还是拉电子基团的取代都可以增加π键的离域性和分子的极性,而使嵌插结合增强.(2)在刚性平面上引入特定长度的柔性侧链作为导向连接结构,可以增强DNA选择性结合的作用,这说明在抗癌药物设计中柔性侧链的引入可能对增大抗癌活性,降低毒性是有作用的.
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青蒿素分子印迹聚合物分子识别性研究
目的 合成对青蒿素具有特异识别能力的分子印迹聚合物.方法 采用分子印迹技术合成了以青蒿素为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂的青蒿素分子印迹聚合物.运用平衡结合试验研究了聚合物的吸附特性和选择识别能力.结果 Scatchard模型分析表明,该分子印迹聚合物在识别青蒿素分子的过程中存在两类不同的结合位点.高亲和力结合位点的离解常数Kd1=1.87 mmol/L,大表观结合常数QMAX1 =27.99 μmol/g;低亲和力结合位点的离解常数Kd2 =48.5 mmol/L,大表观结合常数QMAX2=334.4 μmol/g.结论 结合底物的实验结果表明,青蒿素分子印迹聚合物对青蒿素具有良好的特征吸附和选择识别性能,为天然产物中高效分离纯化活性成分青蒿素提供了一种新型材料.
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高良姜素分子印迹聚合物分子识别性研究
目的 探讨高良姜素分子印迹聚合物(GMIP)的特异性分子识别能力.方法 以高良姜素为模板分子,分别采用四氢呋喃、乙腈、丙酮为致孔剂,以丙烯酰胺(AM)为功能单体,以乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂,采用热引发聚合的方法合成GMIP;采用扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)扫描对其进行性能表征;运用平衡结合试验研究聚合物的吸附特性和选择识别能力.结果 Scathard模型分析表明,该GMIP在识别高良姜素分子的过程中存在2类不同的结合位点;高亲和力结合位点的离解常数(Kd1)=0.961 mmol/L,大表观结合常数(Qmax1)=19.79 μmol/g;低亲和力结合位点的离解常数(Kd2)=0.101 mmol/L,大表观结合常数(Qmax2) =51.09 μmol/g.结论 GMIP对高良姜素分子具有特异的吸附和识别能力,为天然产物中高效分离纯化活性成分高良姜素提供了一种新型材料.
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卟啉及金属卟啉化合物对糖分子的作用研究
目的 研究卟啉化合物对糖分子的分子识别作用.方法 采用荧光滴定法分别对所合成的卟啉化合物及其金属配合物进行糖分子识别研究.结果 通过对其结合常数分析,卟啉化合物及其金属配合物对乳糖的识别作用普遍强于葡萄糖,嵌金属Zn,Fe的卟啉化合物其对糖的结合能力明显强于没有金属配位的卟啉化合物.结论 卟啉化合物及其金属配合物对糖分子具有选择性识别作用.
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红细胞免疫分子CR1密度相关基因组多态性与其天然免疫活性
目前认为哺乳动物在长期进化中,形成了两套抗病原体免疫系统,即非特异免疫(天然免疫)和特异免疫.天然免疫对特异性免疫起指导作用,天然免疫系统利用胚系基因编码的蛋白质分子识别可能对机体有害的物质.血液中存在多种这种物质,如血浆中的补体成份(C3,3q等)和血细胞上的补体受体(CR1)等.红细胞数量巨大,在天然免疫反应中有重要作用[1].我们对40名正常人红细胞CR1密度相关基因组多态性与红细胞和淋巴细胞CR1活性相关性做了对比研究,现将结果报道如下.
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分子印迹聚合物在手性药物和生物分子识别分离中的应用
1引言目前市场上大约有500种光学活性的药物,约有90%是以外消旋体的形式出售的.然而手性药物异构体的生物活性如药效和药代动力学有很大的差别(典型例子见图1).
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噬菌体表面呈现技术及在抗寄生虫免疫中的应用
近10年来,噬菌体表面呈现技术(Phage Dislay Techniques,PDT)发展迅速,特别是在蛋白质结构研究、抗原表位分析、分子识别、细胞间信号传导、药物设计、疫苗研制、诊断试剂等方面应用广泛.Smith[1]博士于1985年首先报道小分子多肽可以在丝状噬菌体表面表达形成有活性的多肽片段.由于噬菌体易于扩增,可从含多种外源蛋白的噬菌体库中筛选出表达特异外源蛋白的噬菌体,且外源多肽或蛋白的氨基酸序列可通过测定插入噬菌体DNA序列来推测,故该技术受到许多学者的青睐.
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TCRαβ分子识别抗原肽-MHC复合物的争议问题探讨
T细胞抗原受体(TCR)是T细胞表面的特征性标志分子,其与CD3分子组成的TCR-CD3复合体,是进行抗原识别,发挥细胞免疫重要功能的基础.一般认为,TCR必须识别抗原肽-MHC分子复合物才能活化T细胞,其中CD4+T细胞识别MHCⅡ类抗原,CD8+T细胞识别MHC Ⅰ类抗原.TCR分子是由两条不同肽链构成的跨膜蛋白,肽链的种类有α、β、γ、δ四种,根据组合的差异,可分为TCRαβ+T细胞和TCRγδ+T细胞,其中TCRαβ+T细胞在发挥特异性细胞免疫过程中发挥重要作用.有关TCRαβ分子识别抗原肽-MHC分子复合物的基本分子机制已形成了经典的免疫学理论,但其中有关MHC分子限制性、CD4及CD8分子的辅助性以及TCR分子α链与β链在识别过程中的地位及作用等问题还存在不少存有争议的地方,本文将介绍相关领域的研究进展,并结合自己的综合分析,对TCRαβ分子识别抗原肽-MHC复合物过程中的一些争议问题进行探讨.
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钙调素的分子识别研究进展
钙调素(CaM),作为细胞内Ca2+信号传导途径中的主要信号转导分子,普遍存在于真核细胞中,介导调控由Ca2+引起的一系列生理生化反应,参与并调节细胞的增生、分化、运动等基本代谢过程.对CaM的结构及分子识别机制的研究,有助于更好地理解细胞信号传导、蛋白质相互作用的分子机制,对新药开发和临床治疗具有重要的指导意义.本文作者就近几年来有关CaM结构及分子识别机制的研究现状作一概述.
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缬沙坦分子印迹聚合物色谱柱的制备及其分子识别能力研究
目的 采用高效液相色谱法考察缬沙坦分子印迹聚合物的分子识别能力.方法 制备缬沙坦分子印迹聚合物色谱柱;考察在不同的流动相中分子印迹聚合物对缬沙坦的分子识别能力及在相同流动相中聚合物对缬沙坦和其他化合物的色谱表征.结果 以甲醇为流动相,缬沙坦分子印迹聚合物对缬沙坦表现出非常强的亲和力,有很好的印迹效率;对绿原酸也有很好的印迹效果.容量因子值随流动相中极性溶剂含量的增加而减小,以甲醇-醋酸(7:3)为流动相时,聚合物对缬沙坦的印迹效应消失.结论 缬沙坦分子印迹聚合物对缬沙坦具有良好的选择性,对绿原酸也有很好的印迹作用,因此可用于筛选中药提取物中与缬沙坦大小相近、结构或功能基团相似的化合物.
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噬菌体表面呈现技术及其在原虫免疫学研究中的应用
1 概述 噬菌体表面呈现技术(Phage Display Technique,PDT)是以噬菌体为载体将外源蛋白或小分子多肽与噬菌体衣壳蛋白融合并呈现于噬菌体表面,表达的外源蛋白和多肽保持相对独立的空间结构和生物活性并且这种表达不影响噬菌体的侵染能力,因此可以被其相应的结合分子识别筛选.该技术将基因表达产物展示于噬菌体表面,在蛋白基因型和表型之间建立了联系,被广泛应用于抗原表位的分析、抗体文库的构建和筛选、多肽药物的研制、细胞间信号的转导、分子间的识别等领域,为研究疫苗和研制诊断试剂提供了崭新的模式.
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从靶标的多样性看核酸适配子在分子识别中的优势与前景
20世纪90年代初,Tuerk等[1]建立了一种新的组合化学技术--指数富集的配体系统进化技术(Systematic evolution of ligands bv exponential enrichment,SELEX),筛选到噬菌体T4 DNA聚合酶的RNA配体,即核酸适配子(aptamer).核酸适配子能与生物靶分子高特异性和高亲和力结合,功能上与抗体类似,在分子识别研究中具有重要价值,目前在生物医学各个领域的相关研究中均有应用.
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适配分子在分子识别中的作用
抗体是分子识别领域应用广的一类分子,在临床治疗和诊断方面均发挥了巨大的作用.随着配体指数增强系统进化技术(SELEX)的发展,已经可能筛选出针对任何靶分子以高特异性、高亲和力结合的适配分子.在治疗和诊断的分子识别领域,它已经成为能够和抗体竞争的一类分子.