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香椿果抗补体活性成分
目的:研究香椿果抗补体活性成分.方法:采用溶血法进行抗补体活性筛选,然后利用溶剂萃取和多种色谱技术分离纯化,以1H-NMR,13C-NMR波谱方法,结合文献数据,鉴定化合物结构.结果:香椿果提取物具有显著抗补体活性,经溶剂萃取,其中乙酸乙酯部位为活性部位,从中分离得到14个化合物,分别鉴定为没食子酸(1),没食子酸甲酯(2),6-O-没食子酰基-葡萄糖(3),1,2,3-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(4),1,2,6-三-O-没食子酰基β-D-葡萄糖(5),1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(6),1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(7),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(8),芦丁(9),异鼠李素-3-O-β-半乳糖苷(10),槲皮素-3-O-β-半乳糖苷(11),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(12),山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(13),槲皮素(14).其中化合物3 ～ 14为首次从香椿果中分离得到,化合物5,10,11为首次从香椿中分离得到.化合物4～7有显著抗补体活性,半数抑制浓度(IC50)分别为88.3,76.2,13.9,9.6 μmol·L-1.结论:香椿果活性部位为乙酸乙酯萃取部位,活性成分为其中没食子酰基葡萄糖苷衍生物和黄酮苷,前者抗补体活性显著强于后者,并且其抗补体活性随着与葡萄糖羟基相连接的没食子酰基数目的增加而增强.
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蓝萼香茶菜的抗补体活性成分研究
目的:在前期研究基础上,深入研究蓝萼香茶菜的化学成分及其抗补体活性.方法:通过溶血试验,对蓝萼香茶菜各部位进行抗补体活性测试,以抗补体活性作为导向分离手段,运用多种色谱方法分离纯化蓝萼香茶菜中的化学成分,采用现代谱学技术进行结构鉴定,确定抗补体活性成分.结果:蓝萼香茶菜的正丁醇部位活性较强,从蓝萼香茶菜中分离得到11个化合物,分别为豆甾醇(1),豆甾醇-9(11)-烯-3-醇(2),蓝萼丁素(3),尾叶香茶菜丙素(4),山楂酸(5),科罗索酸(6),minheryins Ⅰ (7),香叶木素(8),咖啡酸乙烯酯(9),咖啡酸(10),牡荆苷(11).抗补体活性实验表明,化合物9,10以及前期分离得到的异槲皮苷、芦丁、槲皮素、槲皮素-3-甲醚、木犀革素、木犀草素-7-甲醚和芹菜素对经典途径的补体激活具有不同程度的抑制作用.结论:化合物2,4,6～9,11为首次从该植物中获得,咖啡酸的抗补体活性强,CH50为0.041 g·L-1.
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金银花中抗补体活性酚酸类成分的研究
目的:研究金银花Lonicera japonica中的抗补体活性酚酸类成分.方法:通过溶血试验方法进行抗补体活性成分的导向分离,对所得化合物进行抗补体活性测定,采用现代波谱技术ESI-MS,1 H-NMR,13 C-NMR进行结构鉴定.结果:从金银花乙酸乙酯部位分离得到了14个化合物,其中有8个酚酸类、3个环烯醚萜类和3个黄酮类成分,包括新绿原酸(1)、绿原酸(2)、隐绿原酸(3)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(4)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸(5)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸(6)、咖啡酸(7)、咖啡酸甲酯(8)、裂环马钱苷(9)、獐芽菜苷(10)、断氧化马钱子苷(11)、木犀草素(12)、槲皮素(13)、山柰酚(14).抗补体实验表明化合物1～9,11～14对经典的补体激活具有不同程度的抑制作用,以3,5-O-二咖啡酰奎宁酸活性强.结论:化合物14首次从金银花中分离得到,酚酸类化合物是金银花中的主要抗补体活性成分,3,5-O-二咖啡酰奎宁酸活性强,值得深入研究.
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广藿香的抗补体活性成分
采用硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱方法对广藿香进行抗补体活性导向分离与鉴定,从乙酸乙酯部位和正丁醇部位共分离鉴定了15个黄酮、1个三萜和2个酚酸类成分,包括5-羟基-3,7,3’,4’-四甲氧基黄酮(1)、5-羟基-7,3',4’-三甲氧基-二氢黄酮(2)、5,4'-二羟基-3,7,3'-三甲氧基黄酮(3)、5-羟基-3,7,4'-三甲氧基黄酮(4)、5,4’-二羟基-7,3’-二甲氧基黄酮(5)、木犀草素(6)、槲皮素-7,3’,4’-三甲醚(7)、岳桦素(8)、3,5,7-三羟基-3’,4’-二甲氧基黄酮(9)、槲皮素(10)、芹菜素(11)、山柰酚(12)、5-羟基-7,3',4’-三甲氧基黄酮(13)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(14)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷(15)、齐墩果酸(16)、香草酸(17)、对甲基苄醇(18),其中化合物5,7,8,12～15,18均为首次从唇形科刺蕊草属植物中分离得到.对所得单体化合物进行经典和旁路途径的体外抗补体活性测定,并利用补体缺失血清鉴定活性强化合物的抗补体作用靶点,结果表明,化合物3,7,10,12,16对经典和旁路途径的补体激活均有抑制作用(CH50 0.072～1.08 g·L-1,AP50 0.39～0.49 g·L-1),而化合物5,6仅对经典途径有抑制活性；活性强的槲皮素-7,3’,4’-三甲醚(7)作用于补体系统的C1q,C2,C5和C9组分,值得深入研究.
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静注人免疫球蛋白抗补体活性测定影响因素的探讨
静注人免疫球蛋白(pH 4)(IVIG)是我公司生产的具有多种抗体活性的血液制品,因具有广泛的应用价值而受到临床重视.其低pH值能更好地保证Fc段生物学活性,一般认为少量的IgG多聚体能暴露出Fc段补体结合位点,从而促使抗补体活性(ACA)产生[1-3].ACA是ICIG中一项重要的指标,它指IVIG中IgG多聚体在没有结合抗原的情况下,激活补体的能力.IgG多聚体通过激活补体使补体消耗,从而使机体的免疫防御能力下降.头痛、潮红、颤抖、背痛、恶心是较常见的不良反应症状[4].因此,ACA的高低对IVIG的质量起着至关重要的作用.据文献报道[5],影响AcA的因素可能与IgG多聚体含量、Na+浓度、pH值、葡萄糖的浓度有关.据此,我们进行了研究.另外,还研究发现枸橼酸含量对ACIA也有一定影响.本文就以上因素对其进行实验分析.
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习惯性流产患者血清抗补体活性的测定
习惯性流产（habitual abortion，HA）是一种常见的妊娠并发症。有研究发现，HA患者存在补体功能的紊乱［1］，补体介导的免疫病理作用可能会导致流产［2］。为此，我们对HA患者血清抗补体活性进行检测，报道如下。 一、资料与方法 1.研究对象： 60例HA患者(HA组)为1995年9月至1997年12月在太原市人民医院妇产科门诊就诊者。选择标准：与同一配偶有过≥3次的自然流产；经妇科、B超、子宫输卵管碘油造影等检查，除外有生殖系统器质性病变；基础体温呈典型双相，黄体期不少于12 d且较平稳；夫妇双方染色体正常，无自身免疫及内分泌疾病；无协同干预因素（如阿司匹林、肝素、类固醇激素或孕酮应用等），年龄23～38岁。选取同期既往妊娠正常的经产非妊娠妇女30例为对照组，年龄24～38岁。 2.标本采集和处理：HA组在末次流产3个月后，对照组在正常足月分娩3个月后，取静脉血2 ml，分离血清，-30℃冻存。使用前溶解，经过56℃ 30 min灭活补体后，1∶10稀释备用。
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药用菌多糖的药用功能与展望
目的药用菌多糖是一种天然活性物质,具有多种药用功能,对其多方面的药用价值进行概述.方法以近几年国内外相关文献为材料,对多种药用菌多糖的价值分别进行介绍.结果药用菌多糖具有抗肿瘤、抗补体活性、抗氧化、抗衰老、免疫调节、降低血糖等功能.结论药用菌多糖将是一种极具开发价值的天然保健品.
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虎杖的抗补体活性蒽醌类成分及其作用靶点
目的 研究虎杖Polygonum cuspidatum中的抗补体活性蒽醌类成分及其作用靶点.方法 采用溶血试验法进行抗补体活性成分的导向分离,对所得化合物进行抗补体活性测定,并利用补体缺失血清鉴定主要活性化合物的作用靶点.结果 从虎杖醋酸乙酯活性部位分离得到10个蒽醌类和3个其他类成分,分别鉴定为大黄素甲醚(1)、大黄酚(2)、大黄素-8-甲醚(3)、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(4)、大黄素(5)、大黄酸(6)、迷人醇(7)、6-羟基芦荟大黄素(8)、xanthorin(9)、isorhodoptilometrin(10)、2,5-二甲基-7-羟基-色原酮(11)、7-羟基-4-甲氧基-5-甲基-香豆素(12)和5,7-二羟基-异苯并呋喃酮(13).化合物9、10为首次从蓼科中分离得到,化合物9是首次从虎杖中发现的茜草素型蒽醌；化合物3～9对补体系统的经典和旁路途径有不同程度的抑制活性,以化合物7的活性显著[CH50=(6±2)μg/mL;AP50=(50±5)μg/mL].靶点研究表明,化合物4作用于补体系统的Cl q、C2及C9组分；化合物7作用于Clq、C2、C4及C9组分.结论 蒽醌类化合物是虎杖的主要抗补体活性成分,迷人醇活性强、靶点明确,值得深入研究.
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牛蒡苷的制备与纯化
牛蒡子为菊科植物牛蒡Arctium lappa L.的干燥成熟果实.牛蒡子含有木脂素类化合物,主要是牛蒡苷等[1].药理研究表明,牛蒡子对多种致病性真菌有不同程度的抑制作用[2],牛蒡子粗提物具有抗肿瘤作用[3].牛蒡苷具有抗肾病变作用[4],增强机体免疫功能[5],具有抗补体活性[6],钙拮抗及抗高血压[7]等药理作用.
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正常及习惯性流产患者血清抗补体活性的研究
目的通过检测正常育龄妇女、正常妊娠妇女及习惯性流产患者血清中抗补体活性的水平,借以分析血清抗补体活性与妊娠的相关性.方法以经典的补体溶血实验方法为基础,在原有反应系统中加入不同人群的血清,依据溶血率的变化来判断人血清抗补体活性的水平是否与妊娠有关.以补体被抑制的百分率表示抗补体活性.结果 120份血清标本中,全部表现有不同程度的抑制效应,其中正常孕妇血清抗补体百分抑制率均值为(62±8)%明显高于正常育龄妇女的[(44±10)%,P＜0.01];妊早期孕妇血清抗补体百分抑制率为(75±9)%,明显高于妊中期[(61±7)%,P＜0.05]和妊晚期[(54±5)%,P＜0.01];习惯性流产组的血清抗补体百分抑制率为(21±4)%,明显低于对照组(44±10)%.结论妊娠期妇女血清具有较强的抗补体活性可以保护胎儿免受补体被相关因子激活后引起的对胎儿细胞的损害,从而保证胎儿正常发育;习惯性流产的发生可能与患者血清中的抗补体活性降低有关.
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血清抗补体微量溶血实验的建立及影响因素探讨
补体系统作为重要的免疫组分之一,对机体的防御机能、免疫功能的调节以及免疫病理过程起着重要作用.正常机体内具有严密的调控机制,维持补体系统的自稳状态,抗补体活性便是其中的一种.血清抗补体活性的高低通常用血清对补体所介导的溶血实验的抑制程度来表示,由于通常所采用的CH100的方法测定补体活性时[1],不能精确反应补体活性的微细变化,而CH50的操作过程又过于复杂,国外学者已进行的一些研究,由于试验方法的不灵敏或不统一造成研究结果的不一致[2,3],从而掩盖了可能存在的临床意义.因而如何建立一种快速、简便、准确且有较好重复性的微量补体抑制实验,成为人们将补体抑制因子的研究引入临床所尚待解决的问题,为此我们设计了本研究.
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甘草多糖免疫功能的研究
甘草具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓解止痛等功效.有报道甘草多糖具有多种免疫增强功能,能激活网状内皮系统[1],具有抗补体活性[2],直接刺激B淋巴细胞增殖,诱导人体中IgM,IgG的产生,还能诱生和促诱生干扰素,增强机体的杀伤细胞的活性[3].本研究通过动物细胞培养实验测定新疆地产的乌拉尔甘草多糖刺激淋巴细胞增殖的反应,来探讨甘草多糖的免疫增强功能作用.
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黄芪甘草水提物抗诱变作用
黄芪是临床上常用的中药[1],主要功效有补气、固表、利尿、生肌等,能提高机体多方面的免疫功能,常作为肿瘤及免疫功能低下的辅助治疗用药.甘草具有补脾益气、清热解毒、祛谈止咳、缓解止痛等功效.甘草多糖具有多种免疫增强功能,能激活网状内皮系统[2],具有抗补体活性[3],直接刺激B淋巴细胞增殖,诱导人体中IgM,IgG的产生,还能诱生和促诱生干扰素,增强机体的杀伤细胞的活性[4].黄芪和甘草在很多方面有协同作用.本研究将两者配伍应用以探讨中药的抗诱变机制.
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人突变CD59基因在CHO细胞的表达、检测及生物活性研究
目的:分别构建两个高效表达人突变CD59的CHO细胞真核表达系统,探讨突变CD59基因表达蛋白糖基化前后抗补体活性的变化,为在基因水平阐明糖尿病血管增殖症的发病机理奠定基础.方法:将两种含不同突变基因的人CD59全长cDNA序列(HM7、HM8)的重组pALTER质粒运用阳离子脂质体导入法共转染CHO细胞,用含有400 μg/ml新霉素类似物(G418)的F12培养基筛选出阳性表达克隆,应用荧光免疫组化(FIH)检测CD59在CHO细胞表面的表达.经染料释放试验检测突变CD59糖基化前后抗补体活性.结果:运用阳离子脂质体导入法将重组pALTER质粒与pcDNA3质粒共转染CHO,成功筛选出的阳性克隆经FIH证明突变CD59可在CHO细胞表达.染料释放法证实两种突变CD59均具有抗补体活性,且在高糖环境下易糖基化,糖基化后抗补体活性明显降低.结论:建立了两个高效表达突变CD59的真核表达系统,获得阳性克隆细胞株.初步研究证实突变CD59具有抗补体活性,糖基化后抗补体活性明显降低,为单克隆抗体的制备奠定了基础.
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应用ELISA法检测静脉注射用人血免疫球蛋白抗补体活性
目的建立检测静脉注射人血免疫球蛋白的抗补体活性的ELISA方法及其相应的标准品.方法用C1q包被酶标板,以辣根过氧化物酶标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA-HRP)作为酶标记物,邻苯二胺为底物.结果应用ELISA法检测静脉注射用人免疫球蛋白抗补体活性具有准确性高(97.2%),精确性好(试验内精密度为6.7%,试验间精密度为9.1%),特异性强,灵敏性高(测定限度为0.2ACA单位,测量限度为0.3ACA单位)等特点.结论ELISA法检测抗补体活性简便、快捷、准确.
关键词： 静脉注射人血免疫球蛋白 抗补体活性 ELISA -
静脉注射人免疫球蛋白的质量控制
静脉注射用人免疫球蛋白(IVIG)在抗体置换、免疫调节等方面有着广泛的应用.由于IVIG经静脉注射,且用量较大,其质量控制尤为重要.控制IVIG质量主要包括IgG的完整性、抗补体活性(ACA)、多聚体含量、杂蛋白含量、抗体效价、病毒安全性等方面.
关键词： 静脉注射用人免疫球蛋白 质量控制 抗补体活性 -
不同产地意大利牛舌草中芦丁和山奈酚的含量测定及其抗补体活性研究
目的:测定不同产地意大利牛舌草中芦丁和山奈酚的含量和其抗补体活性研究.方法:采用UPLC法,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(100mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相为甲醇(A)-0.4％甲酸(B);洗脱程序(0 ～3 min,5％ ～31％ A;3～10 min,31％ ～37％ A;10～12 min,37％～40％A;12 ～ 30 min,40％～40％ A),柱温30℃;检测波长366 nm.通过溶血试验评价芦丁和山奈酚的抗补体活性.结果:意大利牛舌草中芦丁和山奈酚的含量分别在1.25-3.34 mg/g和2.86-6.05 mg/g范围内,且芦丁和山奈酚均具有较好的抗补体活性.结论:意大利牛舌草中2种主要活性成分的含量同地区之间差异较小,不同地区之间存在差异,且这两种成分均具有较好的抗补体活性.
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5种马鞭草科药用植物的抗补体活性
采用细胞溶血法考察了千解草(Pygmaeopremna herbacea)、白花灯笼(Clerodendrum fortunatum L)、尖尾枫[Callicarpa longissima(Hemsl.) Merr.]、赪桐[Clerodendrum japonicum(Thunb.) Sweet]及臭茉莉(Clerodendrum philippinum Schauer var.simplex Moldenke)等5种马鞭草科药用植物提取物经典途径和旁路途径的抗补体活性.结果表明:千解草水提取物、白花灯笼水提取物和醇提取物、尖尾枫水提取物和醇提取物、赪桐醇提取物及臭茉莉醇提取物有较强的经典途径抗补体活性,对经典途径的抗补体活性(CH50)分别为0.092±0.008,0.074±0.008,0.088±0.006,0.134±0.017,0.123±0.010,0.380±0.080及0.200 ±0.015 g/L;仅千解草和尖尾枫水提取物及白花灯笼醇提取物具有旁路途径抗补体活性,对旁路途径的抗补体活性(AP50)分别为0.533±0.033,0.758±0.031和0.362±0.029 g/L.因此,5种植物均具有不同程度的抗补体活性,其中白花灯笼醇提取物抗补体活性强.
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复方甘草酸苷的药理及临床应用进展
复方甘草酸苷(美能,SNMC)由甘草酸一铵(含甘草酸)、甘氨酸、L-半胱氨酸等组成,通过保护肝细菌膜、免疫调节、抑制或灭活病毒、解毒、抗变态反应、抗补体活性抗炎、调控细胞凋亡、类固醇样作用[1],在皮肤科、肝病等领域广泛应用,且不良反应轻微.笔者就其临床应用的进展介绍如下.
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云木香多糖的抗补体活性研究
目的 从云木香中分离纯化出均一多糖,并研究其抗补体活性.方法 采用水提醇沉方法得到了云木香的粗糖(APS),用DEAE-52色谱柱对云木香粗糖进一步纯化并得到了两种均一多 糖,并测定了其理化性质和单糖组成.测定了这两种云木香多糖经典途径抗补体活性,旁路途径抗补体活性,并对其抗补体靶点进行了确定.结果 从云木香中分离得到了两种均一多糖,其中一种为葡聚 糖APS-1,另一种为葡甘聚糖APS-2.抗补体活性研究表明,APS-2表现出很好的抗补体活性,而APS-1没有明显的活性.结论 云木香多糖APS-2具有很好的抗补体活性,有望成为免疫疾病治疗的药物.
