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心型脂肪酸结合蛋白在心脏疾病中的研究进展
近年来由于心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在血液中出现早,特异性高,已成为国内外关注的早期诊断心血管疾病的重要生化指标之一.心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)是存在于心肌细胞浆内的可溶性蛋白质,在心肌中的含量比骨骼肌中高10倍,在肾脏、肝脏和小肠中含量很低,参与细胞内脂肪酸转运,当心肌细胞受损时,从心肌细胞释收,并迅速进入血循环.
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用考马斯亮蓝测定动物药材中可溶性蛋白质含量方法初探
目的 探讨考马斯亮蓝法用于测定动物药材中可溶性蛋白质含量的稳定性研究.方法 采用紫外分光光度法,以蟾蜍干体为原料,牛血清白蛋白为对照,在595 nm处测定蛋白质与考马斯亮蓝结合复合物的吸光值.结果 实验表明,吸光度和蛋白含量间具有良好的线性关系(r=0.996),样品在10 min内测定稳定(RSD=5.0%).结论 本方法可靠、简单、快速.
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神经突触化学传递中胞吐作用的分子机制
目录一、参与胞吐作用的相关蛋白(一)突触囊泡膜蛋白(二)突触前膜有关蛋白(三)胞液可溶性蛋白质(四)其他蛋白质
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心型脂肪酸结合蛋白的临床应用与进展
脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)是几乎存在于所有组织中的一种分子量很小的可溶性蛋白质,当组织损伤时,能迅速释放入血,可为临床提供多种有用信息,近年来在临床上的应用广泛受到人们关注和重视,本文就心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid binding protein,H-FABP)在临床中的应用与进展作一综述.一、H-FABP的生化特征及生物学功能
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细胞因子在冠心病中的作用研究进展
细胞因子又称前炎症细胞因子,是一大类通过与细胞表面特异性受体结合,在细胞间传递信息的可溶性蛋白质或小分子多肽.这些因子主要由免疫细胞产生,也可由其他非免疫细胞分泌,具有调节免疫应答、诱导炎症反应、影响造血功能和组织细胞增殖以及神经-内分泌样效应等多种生物学功能.
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九香虫药材中蛋白质及氨基酸类成分分析
目的:建立九香虫药材中可溶性蛋白质含量及水解氨基酸种类、含量测定方法.方法:蛋白质含量分析,采用比色分析,以牛血清白蛋白对照,考马斯亮蓝显色,分光光度法测定;氨基酸种类及含量分析,采用2,4-二硝基氟苯柱前衍生化,18种氨基酸混合对照品对照,氨基酸自动分析仪测定.结果:两种方法的测定结果具有一致性,且方法学考察结果均符合分析要求.结论:所建立的九香虫药材中可溶性蛋白质含量及水解氨基酸种类、含量测定方法,适用于该药材的质量控制.
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免疫学与儿科临床第六讲细胞因子及其临床意义
免疫反应的启动、发展和终完成功能效应,需依靠细胞因子的调节.细胞因子是有核细胞分泌的可溶性蛋白质,其生理功能是通过相应的受体在细胞间传递信息,使各种细胞发挥其功能,形成免疫网络系统以保证机体的正常免疫应答和维持内在平衡.除免疫反应需要细胞因子调节外,神经系统、心血管系统、内分泌系统和肾脏功能的调节也需要细胞因子的参与.参与调节免疫反应的细胞因子主要由淋巴细胞和大单核细胞(包括吞噬细胞和树突状细胞)分泌,这些细胞因子除调节免疫反应外,也参与神经、内分泌系统的功能表达;同样,神经、内分泌因子也影响免疫应答,从而形成神经-内分泌-免疫轴心.本文仅就影响免疫功能的细胞因子的临床意义作一简介.
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心肌型脂肪酸结合蛋白对于急性心肌梗死的早期诊断价值
H-FABP是一种存在于心肌细胞胞浆内的小分子可溶性蛋白质,在缺血缺氧状态下,心肌细胞损伤,动员脂肪酸进行氧化供能,使心肌细胞内的H-FABP相应地迅速上升,而且由于H-FABP的相对分子量小,可快速早期释放入血[1],因而是检测心肌损伤的理想标记物.目前国外有关H-FABP在AMI早期诊断中应用的研究结果表明H-FABP与传统的生化指标相比较,在时效性、敏感性和特异性的综合优势.本研究选取AMI患者和健康体格检查者进行研究,以评价检测H-FABP对AMI的早期诊断价值.
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树舌多糖GF对小鼠HepA癌细胞可溶性蛋白质组表达的影响
1 实验材料试剂:分子标准、PMSF、EDTA、RNase、DNase、Tris、丙烯酰胺、N,N'-亚甲基双丙烯酰胺、过硫酸铵、SDS、TEMED,均为sig-ma公司产品;琼脂糖等试剂均为国产分析纯.设备:XL-100K低温离心机,DYCZ-21型垂直板电泳槽,DYY-11型电泳仪,恒温摇床,-75℃冰箱,Mettler电子天平,Millipore超纯水机.UV-1700紫外可见分光光度计等.
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感音神经性听力损失诊断和治疗要点(续)
关于神经营养因子(neurotropin factors,NTF)神经营养因子(NTF)是机体产生的调控神经细胞存活、分化和生长的一类可溶性蛋白质,对神经系统的发育和修复损伤有重要作用.
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HRP-ASSP用于Dot-ELISA检测日本血吸虫抗体的实验研究
目的 探讨辣根过氧化物酶标记猪蛔虫可溶性蛋白质(HRP-ASSP)用于Dot-ELISA检测日本血吸虫病患者血清(Sj-S)中抗日本血吸虫抗体的可行性.方法 参照改良过碘酸钠法,采用HRP标记ASSP得到HRP-ASSP,经Dot-ELISA观察HRP-ASSP与ASSP免疫兔血清反应,并测定效价;再将HRP-ASSP分别用于直接Dot-ELISA和间接Dot-ELISA检测10份Sj-S,并与检测10份健康人血清(Hp-S)、8份卫氏并殖吸虫病患者血清(P-S)、10份囊尾蚴病患者血清(C-S)和6份旋毛虫病患者血清(T-S)进行比较.结果 HRP-ASSP与ASSP免疫兔血清呈阳性反应;直接Dot-ELISA检测Sj-S阳性反应率为100%,Hp-S、P-S、C-S、T-S阳性反应率为20%~50%;间接Dot-ELISA检测Sj-S阳性反应率为100%,其他血清阳性反应率均为0.结论 ASSP与日本血吸虫特异性抗体可能具有高亲和力,HRP-ASSP用于间接Dot-ELISA检测Sj-S中抗日本血吸虫抗体具有潜在的应用价值.
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全蝎可溶性蛋白质TRICINE-SDS-PAGE电泳法分离研究
目的:探索全蝎可溶性蛋白质电泳法分离的佳体系.方法:用TRICINE-SDS-PAGE法对全蝎蛋白提取液所含混合蛋白进行分离,用Quantity One软件确定各蛋白谱带分子量.结果:用该法可获得11条较高分辨率的蛋白谱带,其对应分子量分别为42.000,33.515,27.509,25.524,21.615,17.640,15.839,13.994,11.318,10.000,8.357 kDa.结论:TRICINE-SDS-PAGE电泳法可用于全蝎可溶性蛋白的分离.
关键词: 全蝎 可溶性蛋白质 TRICINE-SDS-PAGE法 成分分析 -
野生全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析研究
目的:探索野生全蝎粉水溶性蛋白质SDS-PAGE电泳的佳分离条件,测定各蛋白质的大体分子量.方法:采用55%乙醇提取,75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉水溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉水溶性蛋白质的相对分子量.结果:全蝎粉水溶性蛋白质的含量为4.649 mg/mL;得到较好全蝎粉可溶性蛋白质的7条电泳谱带,相对分子质量分别为70.447,64.730,54.139,40.832,29.939,26.494,19.172 kDa.结论:这7条全蝎粉水溶性蛋白质的特征谱带可用于全蝎粉水溶性蛋白质的种类鉴别.
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四种产地全蝎粉可溶性蛋白质SDS-PAGE法分离研究
目的:探索四种产地野生全蝎粉中可溶性蛋白质SDS-PAGE法所获得电泳图谱条带的一致性,并确定其大致分子量.方法:采用55%乙醇提取、75%以上乙醇沉淀的方法获得全蝎粉可溶性蛋白质,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量,SDS-PAGE法和Quantity one软件测定全蝎粉可溶性蛋白质的相对分子量.结果:山东平邑、山东龙口、山东长清、山东沂源四种产地全蝎粉的水溶性蛋白饱和溶液中的蛋白含量分别为4.006,2.894,3.795,4.649mg/mL;四种产地全蝎粉可溶性蛋白质通过SDS-PAGE法均获得了7条较清晰的电泳谱带,对应的相对分子量分别为42.563,33.938,27.060,22.354,19.402,3.422,1.929 KDa.结论:这7条全蝎可溶性蛋白质的特征谱带可用于中药全蝎粉的真伪鉴别.
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絮凝剂在青霉素生产中的应用
在青霉素发酵液中,可溶性蛋白质从液相中析出的颗粒比较难以聚集成大颗粒,影响了过滤效果.通过对多种絮凝剂的絮凝试验,确定了采用接枝型聚丙烯酰胺,并对其适宜的浓度及影响絮凝的因素,进行了试验.在青霉素工业生产中应用絮凝剂对发酵液进行预处理后,使发酵液中的蛋白质去除率大大提高,进而实现了真空转鼓过滤机一次过滤工艺.这样不仅提高了经济效益,还防止了环境污染.
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14-3-3蛋白在神经疾病中的临床研究
1 14-3-3蛋白的生理特性和检测方法14-3-3蛋白是高度保守的酸性蛋白家族,其分子量在25~30 Kda,有7种亚型,分别为β、ε、γ、η、σ及τ,由不同的基因编码,各亚型之间有高度的同源性.它们几乎在所有的组织中表达,在神经系统中含量丰富,约占全部可溶性蛋白质的1%.所有神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞的胞浆与胞核中都有表达.14-3-3蛋白对众多的靶蛋白具有调节作用,主要依赖于磷酸化方式.14-3-3蛋白主要参与信号转导、细胞内蛋白质的转运、细胞增殖周期和凋亡的调节、细胞骨架构建等,尚有一些作用目前还不清楚.
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子芩与枯芩可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析
目的 比较子芩和枯芩的蛋白质表达差异,为探索黄芩生理过程中的关键蛋白质和导致枯朽发生的标志性蛋白质提供依据.方法 采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对子芩和枯芩可溶性蛋白质进行比较分析.结果 子芩和枯芩可溶性蛋白质电泳图谱共分离出24条蛋白质带,不同的电泳谱带在数目、迁移率及谱带的强度方面有较大的差异.子芩和枯芩蛋白质共同表迭量相当的条带14条,占58.33%,另有一蛋白质条带在枯芩染色较深,而在子芩染色较浅,有差异的条带10条,差异条带占41.67%.结论 子芩和枯芩的蛋白质表达有明显的差别.
关键词: 黄芩 子芩 枯芩 可溶性蛋白质 SDS-PAGE电泳分析 -
四种种子、果实类药材及其混伪品的电泳鉴别
目的:对四种种子、果实类药材及其混伪品进行电泳鉴别,并考察考马斯亮蓝G-250的染色效果.方法:可溶性蛋白质凝胶电泳.结果:四种中药及其混伪品的电泳图谱存在显著差异.结论:电泳图谱可作为四种中药及其混伪品的鉴别依据,考马斯亮蓝G-250可用于电泳鉴别.
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心型脂肪酸结合蛋白临床应用进展
心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)是一种存在于心肌组织中的可溶性蛋白质,在心肌细胞受到损害时,能够迅速释放入血.近期研究发现,H-FABP用于诊断早期心肌损伤的特异性和敏感性优于其他心肌损伤标记物,在临床上的应用广泛受到人们的关注和重视,以下作一综述.
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重组人IL-29的原核表达、纯化及活性分析
目的:在大肠杆菌中表达具有活性的重组人白细胞介素-29(IL-29). 方法:用PCR技术扩增人IL-29成熟蛋白的编码序列,克隆入原核表达载体pET-44 Ek/LIC中,构建融合表达载体pET-44 Ek/LIC-IL-29,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达IL-29融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,然后用肠激酶消化除去N端融合标签得到完全天然状态的重组人IL-29,经N-端氨基酸测序鉴定纯化的IL-29,用细胞病变抑制法测定其活性. 结果:成功构建了表达载体pET-44 Ek/LIC-IL-29,DNA序列测定结果与预期结果一致. 在30℃培养条件下,IPTG诱导表达的IL-29融合蛋白占菌体蛋白总量43%左右,并且大部分以可溶形式存在. 纯化后的融合蛋白经肠激酶切割和回收后,所得目的蛋白(IL-29)纯度大于96%,该蛋白N-端序列与理论值一致,其抗病毒活性与IFN-α2b相当. 结论:获得了具有生物学活性的重组人IL-29.