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  • 骨碎补的真伪鉴别及优劣控制

    作者:徐惠莉;郑友信

    骨碎补始载于唐<草本拾遗>,属于水龙骨科植物的根茎,在本草书籍中所记载的可入药的骨碎补不仅一种,民间广泛用于补肾强骨、续伤止痛等疾病,水龙骨科有8个属,槲蕨属有20余种外,其余多为单种的属.在我国有3属,约15种,而<中国药典>2000年版仅收载水龙骨科植物槲蕨,此种药材品种复杂多样,且缺乏科学质量标准,故历来伪劣混杂现象极为严重.目前作为"骨碎补"药用主要为槲蕨,某些地方标准收载的品种可作为习用品看待,如浙江省等地的同科属植物中华槲蕨.其他混伪品还有各种近缘植物,如同科属的团叶,槲蕨、栎叶槲蕨、石莲姜槲蕨、海州骨碎补、大叶骨碎补、光叶槲蕨、川滇槲蕨及栎叶槲蕨等,同科不同属植物崖姜蕨、光亮密网蕨、圆盖阴石蕨和鳞叶小膜盖蕨等[1].现对其常见的真伪优劣情况进行分析.

  • “水试”和“火试”在中药材及混伪品快速鉴别中的应用

    作者:郑达敏

    近年中药材混伪品不断涌现,真假难辨,给中药鉴定工作带来更大挑战,光用传统的“眼看”、“口尝”、“手摸”已难快速准确地鉴别中药材的真伪优劣,笔者在查阅文献、总结前辈的经验基础上,结合日常工作实践,利用水试法和火试法能简便、快捷、有效地鉴别部分中药材的真伪优劣,在实际工作中有较好的应用价值.

  • 几种常见中药混伪品的鉴别

    作者:栾丽

    为了杜绝中药中的混伪品出现,保证中药的质量和患者的用药安全,该文将选用几种常见的中药的鉴别来进行一一阐述,希望通过此文的介绍可以为以后中药的质量检验等提供一种方法和依据。

  • 防己及其混伪品的鉴别方法

    作者:李亚玲;叶云;余德智

    针对防己的混伪品在产供销环节鱼目混珠的情况,笔者通过查阅近年来国内外的有关资料,对防己及其混伪品的来源、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别等鉴别方法进行了概述,以便在临床使用过程中能够鉴别品种,分清科属,正确用药.

    关键词: 防己 混伪品 鉴别
  • 川木通与其混伪品和近缘种的ITS2条形码分子鉴定

    作者:刘美子;李美妮;姚辉;刘萍

    目的 分析川木通及其混伪品和近缘种的ITS2条形码序列,探讨川木通及其混伪品和近缘种鉴定的新方法.方法 对样品进行DNA提取,PCR扩增ITS2片段并进行双向测序,CodonCode Aligner拼接序列,MEGA5分析川木通的种内遗传距离及与混伪品和近缘物种的种间遗传距离,预测ITS2二级结构,应用BLAST方法进行鉴定分析.结果 川木通与混伪品的种间变异较大,ITS2二级结构的差异分析能够区分川木通与其主要混伪品开,用BLAST方法可将川木通与同属混伪品和近缘物种区分开.结论 ITS2条形码序列可用于区分中药川木通及其混伪品和近缘种,为中药材及其混伪品和近缘物种的分子鉴定提供依据.

  • 大黄与易混伪品土大黄、虎杖原植物的ITS2序列鉴定

    作者:李美妮;韩蕊莲;韩建萍;姚辉;罗焜;宋经元

    目的 分析大黄与其易混伪品原植物的rDNA上的ITS2序列信息,探索鉴定大黄及其混伪品的新方法.方法 提取DNA模板后对其ITS2区进行PCR扩增、测序;拼接序列;计算种内种间K2P距离,后基于K2P距离建立NJ树.结果 大黄与其混伪品的小种间K2P距离(38.6%)大于大种内K2P距离(8.0%),NJ树中大黄三个基原的不同来源样品聚为一支.结论 因此ITS2序列可以作为鉴定大黄与易混伪品土大黄、虎杖的候选条形码序列,DNA条形码技术在中药鉴定中具有极大的前景.

  • 基于 ITS2序列的荆芥及其混伪品的 DNA条形码鉴定

    作者:周建国;邬兰;马双姣;石林春;金钺;姚辉

    目的:通过分析裂叶荆芥及其混伪品的ITS2条形码序列,探索鉴定荆芥、荆芥穗及其混伪品的新方法,以保证荆芥的质量及临床疗效。方法对裂叶荆芥样品进行DNA提取、PCR扩增ITS2片段和双向测序,所有序列用软件MEGA 6.0进行相关数据分析,对裂叶荆芥及其混伪品间的种间序列差异进行分析比较,计算其种间、种内K2 P遗传距离,并构建邻接树。结果裂叶荆芥ITS2序列长度为232 bp,G+C含量为66.8%,序列高度保守,种内无变异位点。裂叶荆芥与其混伪品种间变异位点较多,种间K2P小距离为0.0175,大于其种内距离,NJ树显示可以将裂叶荆芥与其混伪品完全分开。结论 ITS2序列可鉴别荆芥、荆芥穗及其混伪品,为荆芥的种质资源鉴定和保证临床用药安全提供了良好的技术手段。

  • 基于 DNA 条形码-产地-形态分析联用的巴西草药 DENTEDE LE?O(蒲公英)的混伪品鉴定及生药学研究

    作者:顾选;崔秀梅;余春霞;马长华;肖瑶;韩丽;刘春生;赵百孝;哈略

    目的:对巴西市场上销售的药用蒲公英的混伪品进行鉴定及生药学研究。方法通过提取样品 DNA、PCR 扩增及双向测序,获得样品的 ITS 序列。采用相似度分析法进行分子鉴定;根据植物产地分布特征和形态特征验证结果,三种方法联用获得鉴定结果;分析混伪品的性状和显微特征。结果 DNA 条形码研究表明巴西药用蒲公英的混伪品来源于菊科植物假蒲公英猫儿菊Hypochaeris radicata 的全草,产地分析和形态分析验证了 DNA 条形码鉴定结果。结论巴西药用蒲公英的混伪品来源于菊科蒲公英属植物假蒲公英猫儿菊 Hypochaeris radicata 的全草。混伪品的生药学特征能够为巴西草药 DENTE DE LE?O 的真伪鉴别提供依据。

  • 基于ITS2序列的女贞子原植物及其混伪品的分子鉴定

    作者:李美妮;韩蕊莲;韩建萍;刘美子;姚辉;宋经元

    目的:通过分析女贞子原植物及其混用品和伪品的ITS2序列,探究鉴定女贞及其混伪品的新方法.方法:采用CodonCode Aligner进行序列拼接,MEGA4.1计算女贞及其混伪品的种内、种间的K2P距离,并基于K2P模型构建NJ树,后应用Schultz等建立的ITS2数据库和网站预测二级结构.结果:女贞的小种间K2P距离(3.2%)大于种内大K2P距离(0.90%),NJ树中女贞的不同来源样品聚为一支.女贞与其混伪品的二级结构的分子形态均有差异.结论:ITS2序列可以作为鉴定女贞子原植物及其混伪品的条形码序列,并且该序列在中药材原植物的鉴定中具有很大的潜力.

  • 基于DNA条形码对凉山虫草及近缘物种和其混伪品的分子鉴定

    作者:陈抒云;曹树萍;袁航;过立农;郑健;林羽;陈丹;林瑞超

    目的:结合ITS基因和COI基因对《四川省中药材标准》收录的凉山虫草和近缘物种及当地市场上出现的混伪品进行分子鉴定,考察其方法的可行性。方法:对收集的28份样品通过DNA提取、PCR扩增,分别获得其ITS序列和COI序列。用Codon Code Aligner V3.7.1,Mega 5.0等软件进行比对分析,构建基于ITS序列和COI序列的样品的NJ树,进行聚类分析。结果:凉山虫草和近缘物种及混伪品寄生真菌的ITS序列种间小K-2P距离大于各物种种内大K-2P距离:种内变异小,种间差异较大,从而基于ITS序列的NJ树能将凉山虫草与其他近缘物种及其混伪品很好地归属;凉山虫草和近缘物种及其混伪品寄主昆虫的COI序列种间小K-2P距离大于各物种种内大K-2P距离:种内变异小,种间差异较大,通过遗传距离及NJ树的分析能将凉山虫草与其他近缘物种其及其混伪品及其他近缘物种很好地区分。结论:结合ITS序列和COI序列的DNA条形码技术可以很好地鉴定凉山虫草与其近缘物种及其混伪品,并对虫草属的系统学和分类研究提供了技术支持。

  • 基于ITS2序列的车前子原植物及其混伪品的分子鉴定

    作者:邬兰;刘义梅;熊永兴;陈科力

    目的:通过分析车前子原植物及其混伪品的ITS2条形码序列,探索鉴定车前子及其混伪品的新方法。方法:对研究材料进行DNA提取、PCR扩增和双向测序,所得序列经过CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA5进行相关数据分析,计算其种间、种内遗传距离,并利用已建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构和构建系统发育树。结果:车前种内大K2P距离为0.0099,与混伪品种间小K2P距离为0.4976;平车前种内大K2P距离为0.0052,与混伪品种间小K2P距离为0.5191。车前子基原植物与其混伪品的二级结构的分子形态均有明显差异。由所构建的系统聚类树可以看出,车前与平车前的不同来源样品聚在一支,并能很好与混伪品区分开。结论:ITS2条形码序列能够成功鉴定车前子基原植物与其混伪品,为车前子的基原鉴定提供了新的方法。

  • 中药材半夏及其混伪品的DNA条形码鉴定研究

    作者:张雅琴;宋明;孙伟;向丽;马孝熙;樊佳佳;王俊;张晓存;刘霞

    目的:采用ITS2序列对中药材半夏及其混伪品进行DNA条形码鉴定研究,为规范中药材半夏的市场流通,保障临床用药安全及疗效提供参考依据。方法:对半夏及其混伪品共59份样品,通过DNA提取及聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列,并采用Mega6.0软件进行多序列比对,计算种内及种间K2P遗传距离,采用邻接(NJ)法构建NJ系统聚类树。采用相似性搜索法、小距离法、NJ树法考察ITS2序列的鉴定能力。结果:半夏药材的ITS2序列长度为251 bp,应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定半夏药材及其混伪品;半夏种内大K2P距离小于半夏与混伪品间的小K2P距离;NJ树显示半夏药材可与其混伪品明显分开。结论:ITS2序列能准确、稳定鉴定中药材半夏药材及其混伪品。

  • 基于ITS2序列鉴定苗药金铁锁及其混伪品

    作者:宋明;张婉冰;张雅琴;孙伟;向丽;石晋丽;马孝熙;王俊;樊佳佳;张晓存;刘霞

    目的:本研究利用ITS2序列对苗药金铁锁及其混伪品进行鉴定研究,从而确保药材质量,保障临床用药安全。方法:提取金铁锁药材及其混伪品基因组DNA,PCR扩增并双向测序获得ITS2序列。所有序列经过CodonCode Aligner V3.7.1拼接后,采用MEGA5.1软件进行序列比对,计算种内和种间Kimura 2-Parameter(K2P)遗传距离,并构建系统发育树。采用相似性搜索法、近距离法、邻接(NJ)树法对ITS2序列鉴定能力进行评估。结果:金铁锁药材的ITS2序列长度为229 bp ,其ITS2序列种内大K2P遗传距离小于与混伪品的小种间K2P遗传距离;应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定金铁锁药材及其混伪品;基于ITS2序列构建NJ树,金铁锁及其混伪品均表现出良好单系性,均能明显区分。结论:ITS2序列能够稳定、准确地鉴定金铁锁药材及其混伪品,DNA条形码技术可为金铁锁药材及其混伪品的鉴定提供新的方法。

  • 王不留行种子的ITS2序列分子鉴定研究

    作者:马双姣;周建国;金钺;赵菊润;姚辉

    目的:基于ITS2序列对中药材王不留行种子及其混伪品进行鉴定研究,为王不留行种子及其混伪品的鉴定提供新方法.方法:对王不留行种子及其混伪品样品提取基因组DNA、PCR扩增、双向测序获得ITS2序列.应用MEGA 6.0软件计算种内、种间遗传距离,构建邻接树,基于自行编写的代码和开源代码PHP QR Code的编码方式,将王不留行及其混伪品ITS2序列转换为条形码图片,获得各物种二维DNA条形码图片,并在中药材DNA条形码鉴定系统(www.tcmbarcode.cn)对所获得ITS2序列进行分析鉴定.结果:王不留行药材ITS2序列长度为219-221 bp,种内大K2P遗传距离为0.009,小于其与混伪品的种间K2P遗传距离,王不留行及其混伪品ITS2序列间存在的变异位点较多.NJ树结果表明王不留行与其混伪品分别聚为一支,可明显区分.结论:ITS2序列可以准确鉴别王不留行种子,为其种质资源鉴定和中药材种子质量标准的建立提供了新方法,将获得的ITS2序列转换为二维DNA条形码可为王不留行药材流通管理提供便利,为保障王不留行临床用药安全提供了新的技术手段.

  • 应用DNA条形码ITS2序列对市售药材黄柏的鉴定研究

    作者:汤欢;向丽;赵莎;孙伟;叶萌

    目的:应用DNA条形码ITS2序列鉴定市售黄柏药材及其混伪品,保障药材质量及用药安全.方法:对90份药材及其基原植物样品进行DNA提取,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增ITS2序列并进行双向测序,运用CodonCode Aligner V3.7.1对测序峰图进行校对拼接,去除低质量区和引物区,得到ITS2序列,运用MEGA 6.1对序列进行比对分析,基于K2P遗传距离构建系统聚类树.结果:90份实验样品均能提取到DNA,其DNA经PCR扩增、测序,序列拼接剪切后均能得到高质量ITS2序列.川黄柏和关黄柏基原物种黄皮树和黄檗的种内大K2P遗传距离分别为0.018和0.004,均远小于其与混伪品的种间小K2P遗传距离(0.051和0.056);NJ树结果显示川黄柏和关黄柏聚为一支,其混伪品各自聚为一支.结论:基于ITS2序列的DNA条形码技术可准确、有效地鉴定市售黄柏药材及其混伪品,为其市场监管及用药安全提供了一种高效的技术方法.

  • 基于ITS2条形码序列鉴定中药材两头尖及其混伪品

    作者:任伟超;马伟;安超;马孝熙;邬兰;孙伟

    目的:本研究利用ITS2序列对中药材两头尖及其混伪品进行DNA条形码鉴定,以确保该药材的质量及临床疗效。方法:采用试剂盒法对36份样品提取DNA,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,所得序列经过CodonCode Aligner拼接后,用软件MEGA5.1进行数据分析,包括变异位点分析、种内种间距离计算及系统发育树构建。结果:两头尖药材的ITS2序列长度为216 bp,种内大K2P距离为0.014,种间的小K2P距离为0.021;NJ树结果显示两头尖与其混伪品可明显区分,表现出良好的单系性。结论:ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别两头尖药材,为其鉴定提供新的技术手段。

  • 维吾尔药材新疆圆柏DNA条形码鉴定研究

    作者:宋海龙;樊丛照;阿依别克;王果平;李晓瑾

    目的:本研究采用形态学与DNA条形码技术,建立维吾尔药材新疆圆柏Juniperus sabina L.及其混伪品的鉴别方法。方法:随机选择不同产地新疆圆柏及其混伪品的叶片和果实,比较外观差异;采用ITS2序列对新疆圆柏及其混伪品10份样品进行PCR扩增并测序,结合GenBank获得4条侧柏ITS2序列,比较14份样品ITS2序列种内和种间变异,采用K2P模型构建NJ系统树。结果:4种植物叶片和果实外观相态均有相似之处;DNA条形码ITS2序列鉴定结果显示,14份研究样品ITS2序列长度均为219 bp,种间大K2P距离为0.089。结论:ITS2序列及NJ树可将新疆圆柏与3种混伪品植物区分,为维吾尔药材新疆圆柏的标准化奠定基础。

  • 基于ITS2序列鉴定南北葶苈子药材及其混伪品

    作者:凃媛;赵博;温放;孙伟;宋明;贺海波;胡志刚;郭力城;张秀桥

    目的:利用ITS2序列对多基原药材葶苈子及其混伪品进行分子鉴定,以保证药材质量及临床疗效。方法:提取46份葶苈子药材及其混伪品的DNA ,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其ITS2序列并双向测序,应用CodonCode Aligner v 4.25对测序峰图进行校对拼接,并去除低质量序列及引物区,得到ITS2序列。用MEGA 6.0软件计算物种种内和种间 Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离,分析变异位点并构建邻接(NJ)系统聚类树,综合应用相似性搜索法、近距离法以及NJ系统发育树等进行鉴定分析。结果:葶苈子的基原植物播娘蒿和独行菜的种内大K2P遗传距离分别为0.021和0.010,均小于其与混伪品之间的种间小K2P遗传距离;NJ树结果显示播娘蒿和独行菜各自聚为一支,表现出良好的单系性,均可与混伪品明显区分开。结论:以上几种鉴定方法分析结果表明,ITS2序列能准确鉴别南北葶苈子药材与混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。

  • 射干与川射干及其混伪品ITS2序列鉴定研究*

    作者:陈小露;余亚东;梅全喜;孙伟;向丽

    目的:应用ITS2序列对药材射干与川射干及其混伪品进行DNA条形码鉴定研究,保障临床用药安全。方法:提取射干、川射干及其混伪品和近缘种的 DNA ,经 PCR扩增后测序,通过 CodonCode Aligner V3.7.1对测序序列进行质量分析和拼接,基于MEGA5.1中的K2P模型计算射干与川射干及其混伪品的种内、种间遗传距离及构建系统聚类树。结果:射干的ITS2序列比对后长度为272 bp,种内大K2P距离为0,平均GC含量为52.22%。川射干的ITS2序列比对后序列长度为268 bp,种内大K2P距离为0.004,平均GC含量为67.87%。射干、川射干的种内大K2P距离均小于与混伪品的种间小K2P距离。基于ITS2序列构建NJ聚类树,射干、川射干能各自聚为一支,呈现出较好的单系性,能很好地与其混伪品白及、山菅、黄花射干,以及近缘种德国鸢尾、北陵鸢尾明显区分开。结论:ITS2序列在药材射干与川射干及其混伪品和近缘种的鉴定方面具有很好的鉴定效果,对保障射干与川射干的用药安全具有重要意义。

  • 蔓荆子药材及其混伪品DNA条形码鉴定研究*

    作者:张晓存;徐迪;孙伟;宋明;刘霞

    本研究应用ITS2序列鉴别蔓荆子及其混伪品,收集药材和基原植物样本共46份,通过提取基因组DNA、PCR扩增和双向测序获得ITS2序列,经CodonCode Aligner V4.2拼接注释获得序列,应用MEGA5.0对序列进行分析比对,计算种内和种间遗传距离(Kimura 2-Parameter ,K2P),构建系统发育NJ树进行鉴定。结果表明,蔓荆子药材基于ITS2序列的种内大K2P遗传距离均小于其与混伪品的种间小K2P遗传距离,NJ树显示蔓荆子药材与其混伪品可明显分开,表现出良好的单系性。因此,应用ITS2序列能够准确地鉴定蔓荆子药材及其混伪品。

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