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甲硝唑对大鼠睾丸形态学影响及时间效应关系
甲硝唑(Metronidazole),1957年以治疗滴虫问世,1978,1980年先后被WHO、FDA批准用于厌氧菌感染.此后广泛用于临床,特别近年又开发用于降血脂[1],治酒渣鼻以及牙膏和美容护肤品的添加剂.与此同时甲硝唑的睾丸毒副作用也受到人们的关注.McClain[2]首先报道甲硝唑可致大鼠睾丸萎缩,精子数目减少,并且有剂量-效应关系.我们对甲硝唑对大鼠睾丸损伤的部位和时间-效应关系进行了研究.
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镉对大鼠睾丸中某些酶活性及组织形态的影响
镉是环境中常见的有毒重金属之一,可引起多器官系统毒性,并且具有生殖系统(睾丸)毒性.我们研究了镉染毒后,大鼠睾丸组织中某些酶活性指标及组织形态的变化,探讨镉对生殖系统的毒性及其机制.
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双酚A对大鼠睾丸Leyding细胞的毒性作用
双酚A,又名4-二羟基二苯基丙烷,属低毒性,是制造聚碳酸脂、环氧树脂、聚酚酚树脂及聚氧树脂的重要原料.近年来有报道表明其具有雌激素样作用,影响生殖功能[1,2].睾丸Leyding细胞是合成和分泌睾酮的细胞,并具有高度的调节性,本实验在建立睾丸Leyding细胞离体原代培养的基础上,对双酚A的Leyding细胞毒性进行了初步的探讨.
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卫星发射中心场区内环境氡水平监测与评价/青蒿酯钠对膦氧氮丙啶的抗诱变作用/膦氧氮丙啶对昆明种仔鼠生长发育的影响/三乙胺在地面水中的高容许浓度/大鼠睾丸小分子镉结合蛋白的纯化及性质/氮丙啶类化合物TMD亚急性毒性及致突变作用
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二硫化碳对大鼠睾丸c-myc表达的影响
目的 检测二硫化碳(CS2)对大鼠睾丸c-myc表达水平的影响.方法 取健康Wistar雄性大鼠36只随机分为6组,以不同浓度CS2(0、50、250、1250mg/m3)静式吸入染毒,共10周.另设1250mg/m3(CS2)加VitE(250mg/kg)组和单纯VitE(250mg/kg)组,作为实验干预组,VitE拌入饲料.染毒结束后,处死动物取出睾丸组织制备组织匀浆.分别测定各组超氧化的歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量.蛋白定量后用Western Blot法检测c-mvc表达水平.结果 睾丸中SOD活力下降,MDA含量上升,前者在各个浓度时与对照组比较均有显著差异(P<0.01),后者在高浓度时与对照组比较有显著差异(P<0.01).c-myc的表达出现双向变化,即在低浓度时被抑制,中、高浓度时被诱导,且高浓度时与对照组比较有显著差异(P<0.05).当用VitE干预后,SOD活性回升(P<0.05),MDA含量下降(P<0.01),c-myc的表达明显降低(P<0.05).结论 脂质过氧化可能参与了CS2对大鼠睾丸c-myc表达的调节.
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男性生殖相关基因功能研究策略
男性不育是较为常见的病症,约4%的男性受到不育的困扰.男性原发性不育与男性生殖相关基因的缺陷有密切关系.近年来,国内外发表了大量文献展示了新发现的与男性生殖相关的基因.刘美玲等[1]在采用抑制性消减杂交技术(SSH)筛选大鼠精原细胞与精母细胞差异表达基因过程中,发现了大鼠睾丸特异表达基因LM23基因.沙家豪所在的重点实验室运用人胚胎和成人睾丸cDNA探针与人睾丸dDNA微阵列杂交,通过差异杂交的克隆进行序列测定和分析,筛选
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诊断超声对不同年龄大鼠睾丸组织Fas/FasL蛋白表达的研究
目的:探讨诊断超声对不同年龄组大鼠睾丸组织生精细胞Fas/FasL蛋白表达的影响.方法:36只SD雄性大鼠随机分为6组:Ⅰ组(出生后30天组)、Ⅱ组(出生后30天对照组)、Ⅲ组(出生后45天组)、Ⅳ组(出生后45天对照组)、Ⅴ组(出生后60天组,即性成熟组)、Ⅵ组(出生后60天对照组).应用HP 8500彩色多普勒超声诊断仪对大鼠睾丸组织统一进行30分钟的持续照射,24小时后处死动物取睾丸进行免疫组化分析,观察标本中Fas/FasL表达情况.结果:不同年龄组大鼠睾丸组织生精细胞同时表达Fas和FasL,其表达率随年龄增长有所增加,性成熟组两组基因的表达率明显高于其它两个年龄段(P<0.001).超声照射后各组Fas和FasL的表达率均明显增高(P<0.001);但Ⅰ组和Ⅲ组之间无差异(P>0.05),而Ⅴ组两种基因的表达率均明显高于其它实验组(P<0.001),Fas表达率达(81.56±16.24)%,FasL表达率达(87.91±17.36)%,尤其是强阳性细胞增加更为明显.结论:诊断超声照射不同年龄组大鼠睾丸组织30分钟可引起Fas和FasL高表达,从而导致细胞凋亡.
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何首乌饮对衰老大鼠胰岛素信号通路的影响
目的::探讨何首乌饮对衰老大鼠胰岛素信号通路的影响。选用30只雄性大鼠随机分为3组:青年组(12月龄);衰老组(18月龄);何首乌饮组(何首乌饮4.8g/100g,灌胃60d,18月龄),每组各10只。采用β-半乳糖苷酶染色观察何首乌饮延缓睾丸衰老的情况,基因芯片技术筛选衰老大鼠受何首乌饮调控的差异表达基因群体,并采用qRT-PCR进行验证。从中筛选出受何首乌饮调控与胰岛素信号通路相关的关键基因IR、IRS1、IRS2、IGF1、IGFBP3,进行qRT-PCR、免疫荧光和Western blot 观察其在睾丸组织中的表达变化。结果:衰老组大鼠睾丸组织衰老细胞明显高于青年组(P<0.01),何首乌饮用药后衰老细胞明显减少( P<0.01)。基因芯片筛选出受何首乌饮直接调控的基因有912个,其中与胰岛素信号通路相关的基因有10个,从中选取的关键基因,衰老组IGFBP3的表达高于青年组(P<0.01),IR、IRS1、IRS2、IGF1表达低于青年组(P<0.01),用药后IGFBP3的表达下调,IR、IRS1、IRS2、IGF1表达上调(P<0.01)。结论:何首乌饮通过调节胰岛素信号通路关键基因的表达延缓大鼠睾丸衰老。
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黄连素对糖尿病大鼠睾丸氧化损伤的保护作用
1 材料与方法1.1 药品与试剂链尿佐菌素为Sigma公司产品;125I-胰岛素放射免疫分析药盒(中国原子能科学研究院同位素研究所);葡萄糖液体试剂盒(潍坊3V生物工程有限公司).丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)试剂盒为南京建成生物工程研究所产品、黄连素购自哈尔滨三精制药厂.
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高功率微波辐照对大鼠睾丸形态和超微结构的影响
目的观察高功率微波(HPM)辐照后大鼠睾丸病理形态变化特征.方法健康成年雄性SD大鼠45只,随机分为8个实验组和1个对照组.以S波段功率密度分别为20 mW·cm-2、 40 mW·cm-2的HPM辐照实验组大鼠,辐照时间分别为1、5、10和20 min.于辐照后6 h取材,以透射电镜和光镜观察其病理形态变化.结果光镜下与对照组相比,20 mW·cm-25 min组开始出现轻度炎细胞浸润、组织充血,水肿;10 min组出现生精上皮细胞排列紊乱,畸形精子增多;20 min组和40 mW·cm-2 1 min组可见大鼠睾丸部分曲细精管管腔断裂,生精细胞明显坏死脱落.上述改变随功率密度增加,照射时间延长而加重.40 mW·cm-2 5 min组部分曲细精管内几乎无细胞, 损伤达坏死极限; 电镜下超微结构发生轻度线粒体水肿和内质网扩张是从20 mW·cm-2 5 min组开始,10 min组可见精原细胞水肿变性,20 min组毛细血管内皮细胞肿胀,基底膜分层,断裂.精原细胞凋亡增多,线粒体呈空泡化.功率增高后的各组均可见部分间质细胞发生变性、凋亡和坏死崩解.对照组无改变.结论高功率微波辐照可导致大鼠睾丸形态发生明显的病理性改变,当达到20 mW·cm-2 20 min或40 mW·cm-2 1 min后,对大鼠睾丸组织细胞有致死作用.
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海带多糖对慢性局部电离辐射致大鼠睾丸细胞损伤的干预效应研究
目的 探究海带多糖(Laminaria japonica polysaccharides,LJP)对慢性局部电离辐射致雄性大鼠睾丸细胞损伤的影响.方法 将适应饲养7 d的56只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照1组、辐射模型3组和LJP干预3组,每组8只;UP干预3个组给予LJP的生理盐水溶液,其余各组以等量生理盐水灌胃;经灌胃处理7d后,除对照组外的其它6组,以60Coy射线进行局部照射,除周末两天不照射外,每天1次,每周连续5次,共20次,总刑量每只2.3Gy;分别在停止照射后1、7和14 d处死大鼠,分离睾丸;采用免疫组化、单细胞凝胶电泳、流式细胞术的方法研究海带多糖对电离辐射致大鼠睾丸组织caspase3蛋白表达量和睾丸细胞DNA损伤及其含量的影响.结果 停止辐射1d、7d、14d后LJP各组与对应模型组相比,睾丸组织形态好于对应模型组,睾丸组织caspase3蛋白表达量降低,其彗星拖尾率、尾长减少;HC峰内细胞占睾丸细胞百分比明显低于对应模型组,且UP 14d组1C、2C、4C峰内细胞占睾丸细胞百分比均显著高于模型14d组.结论 LJP可明显降低辐射所致大鼠睾丸组织caspase 3蛋白的异常表达和各睾丸细胞的DNA损伤,促进损伤细胞的修复.
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复方虫草菌丝粉对镉致大鼠睾丸酶活性影响
镉是环境中广泛存在的有毒重金属元素之一,在环境中不能生物降解,所以因工业污染导致环境中镉的含量逐年上升,尤其是城市居民从环境中接触的食物、茶、吸烟等摄入体内的镉也呈上升趋势.睾丸是镉的敏感器官之一,小剂量镉即可导致大鼠睾丸精子数减少,附睾内少精或无精,进而影响雄性生育功能.本文通过观察复方虫草菌丝粉(简称虫草粉)对镉致大鼠雄性生殖毒性的拮抗作用及其相关机制,为镉中毒的预防和治疗提供科学依据.
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多糖联合对辐照大鼠睾丸组织损伤保护作用
目的 探讨枸杞多糖(LBP)和海带多糖(LJP)联合作用对慢性电离辐射致大鼠睾丸组织氧化损伤的影响.方法 将4周雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、LBP组、LJP组和LBP+LJP联合组;灌胃7 d后进行连续4周(周六、周日除外)60Coy照射,剂量2.3 Gy/只,照射期间每天灌胃;照射结束7d后进行组织切片观察睾丸形态改变,测定睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量.结果 对照组MDA含量为(1.30±O.27)nmol/mg,与模型组、LBP组、LJP组的(2.16±0.34),(1.86±0.29),(1.70±0.09)nmol/mg比较,差异均有统计学意义(P<0.Ol或P<0.05);LBP+LJP联合组MDA含量为(0.82±0.34)nmoL/mg,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01);对照组SOD活力为(155.11±4.49)U/mg,与模型组、LBP组、LJP组的(123.98±11.38),(137.60±7.38),(133.54±8.89)U/mg比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 LBP+LJP联合作用对电离辐射致睾丸组织损伤具有明显的保护作用,其效果优于LBP、LJP单独作用.
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睾丸支持细胞免疫豁免作用机制及研究进展
早在100多年前,免疫学家发现人体有些部位具有免疫豁免的特性,睾丸就是其中之一.在20世纪70年代,科学家们将皮肤、胰岛等组织器官移植入大鼠睾丸,发现这些组织均有不同程度的存活,由此说明睾丸具有免疫豁免功能.近30年来,科学家们做了大量工作试图弄清睾丸免疫豁免的机制:
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大鼠睾丸AQP7 mRNA与蛋白质的表达及定位研究
目的:探讨AQP7在大鼠睾丸的基因与蛋白质表达及定位.方法:取4周和12周Wistar大鼠睾丸,采用RT-PCR、Westernblot检测AQP7 mRNA和蛋白质表达,免疫组化检测进行其定位研究.结果:大鼠睾丸有AQP7 mRNA和蛋白质表达,定位于减数分裂后的精子细胞和精子膜上,管周细胞也有AQP7的阳性染色.结论:AQP7在睾丸的表达可能与精子发育及曲细精管的功能有着密切的关系.
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益精方对腹腔注射环磷酰胺大鼠睾丸及垂体超微结构的影响
环磷酰胺(Cytoxan,CTX)是目前治疗许多免疫性疾病(如难治性肾病、系统性红斑狼疮等)的有效药物,而CTX引起的对性腺的副作用,限制了该药在临床上的应用,并越来越引起人们的重视.为了研究中药益精方防治环磷酰胺所致性腺抑制的作用机理,本实验主要探讨益精方对腹腔注射CTX大鼠睾丸及垂体超微结构的影响.
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热应激对大鼠睾丸HSPs mRNA表达的影响
目的:观察和分析大鼠睾丸局部短暂热应激对HSP70、HSP90、HSP105 mRNA表达的影响.方法:Wistar雄性大鼠随机分为5组:正常对照(N)组、热应激0天(H0)组、热应激5天(H5)组、热应激10天(H10)组、热应激15天(H15)组.N组睾丸局部22℃水浴20 min,其余各组均睾丸局部43℃水浴20 min.采用HE染色观察组织形态学变化,采用Real Time PCR的方法检测HSP70、HSP90、HSP105 mRNA的表达量.结果:HE染色镜下观察结果显示:与N组相比,H5组部分曲细精管萎缩,生精细胞明显消失,H10组、H15组大部分曲细精管萎缩,生精细胞大量消失.HE染色形态计量结果显示:与N组相比,H5组、H10组、H15组睾丸实质体积比明显减小(p<0.05),睾丸间质体积比明显增加(P<0.05).RT-PCR结果显示:与N组相比,H0组HSP70 mRNA的表达H0组明显增高(p<0.05),H5组、H10组、H15组HSP90 mRNA的表达明显降低(P<0.05),H5组HSP105mRNA的表达明显降低(P<0.05).结论:HSP70、HSP90、HSP105mRNA的表达在热应激后都会发生变化,变化的具体情况不尽相同,推测它们热应激后在生殖细胞凋亡过程中发挥不同的作用有关,并且和组织的损伤有密切的联系.
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糖尿病对雄性大鼠睾丸及外周血中性激素水平的影响
目的 探讨链脲佐菌素在糖尿病造模中对雄性大鼠睾丸及外周血中性激素水平的影响.方法 称取性腺重量并进行病理组织学观察,同时用放射免疫法检测正常大鼠和DM大鼠的血清性激素水平.结果 DM组大鼠睾丸质量及附睾质量低于正常对照组,差别明显,具有统计学意义(P <0.05);DM组生精细胞数量与T水平明显低于正常对照组,具有显著性差异(P<0.05);LH水平对照组显著低于DM组,具有统计学意义(P <0.05);FSH在DM组与正常对照组间无显著性差异(P>0.05).结论 糖尿病导致雄性大鼠睾丸病理学改变,并严重影响血清中睾酮水平,从而影响生殖能力.
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解脲支原体对雄性大鼠睾丸组织的影响
目的 探讨解脲支原体(UU)体对雄性大鼠睾丸组织的影响.方法 建立UU血清型8型感染大鼠睾丸模型,观察模型鼠睾丸组织病理改变,应用免疫组化法标记Toll样受体,观察模型鼠睾丸组织感染UU后局部免疫反应.结果 (1)接种UU 40d后,大鼠睾丸组织感染率为91.2%;(2)睾丸小叶明显萎缩,生精小管变性坏死,与对照组有明显差异;(3)睾丸组织中无明显炎症细胞浸润;(4)TLR2标记阳性,TLR4标记阴性.结论 UU对睾丸组织有明显损伤作用,但局部免疫反应未被启动,损伤作用并非免疫反应引起.
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北冬虫夏草子实体对大鼠睾丸功能的影响
为研究人工栽培的冬虫夏草子实体对生殖系统的作用,将37只10周龄SD大鼠随机分为A、B、C、D、E 5组,A组为正常对照组,按常规饲养;B、C、D3组在饲料中加入腺嘌呤(300mg/kg·d-1)造成大鼠睾丸功能障碍,其中C、D两组同时给予北冬虫夏草子实体细粉、复合粉(虫草素、虫草酸含量较高)模拟治疗;E组在与A组同法饲养的基础上,加用北冬虫夏草子实体复合粉.30d后,处死全部实验动物,并以组织学及组织化学定量的方法观察动物睾丸的结构变化及与激素合成有关酶(SDH、3β-HSD)的活性.结果:与A组相比,B组大鼠睾丸生精细胞数与精子数明显减少,SDH、3β-HSD活性下降;C、D2组酶活性增强,精细胞数与精子数接近正常,其中D组优于C组;E组动物上述两项指标优于A组,但无统计学差异.提示:北冬虫夏草子实体能增强睾丸的生精与内分泌功能,对腺嘌呤引起睾丸功能障碍大鼠的作用尤为明显.