第四军医大学学报杂志
Journal of the Fourth Military Medical University 제사군의대학학보
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前列腺特异性抗原和酸性磷酸酶检测在前列腺癌早期诊断中的价值
1 临床资料前列腺癌患者38例,年龄50～83(平均70.4)岁;前列腺良性疾病患者27例,年龄56～82(平均69.7)岁,均为我院1990/2001住院并经病理诊断确诊.
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彩色多普勒对上肢无脉症的诊断价值
临床资料 2006-02/2008-03我院门诊及住院无脉症患者23(男15,女8)例,平均年龄50.1(28-75)岁.采用ALOKA 公司生产的SSD-α10型超声诊断仪,探头频率:3～13 MHz.受检者取仰卧位,从无名动脉或锁骨下动脉起始部至尺、桡动脉进行连续追踪探查,观察其结构、血流充盈情况、频谱形态及血流动力学变化,疑为锁骨下动脉盗血者观察双侧椎动脉的血流方向及频谱形态.
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皮肤血管炎患者抗中性粒细胞胞浆抗体检测46例
0 引言 抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)是指针对中性粒细胞和单核细胞胞浆成份的一类自身抗体,临床上将其作为诊断系统性血管炎等疾病的血清学标志,又是研究这类疾病发病机制的重要方法.
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重庆市某院2005～2007年抗高血压药应用分析
1 临床资料资料来源于重庆市某三级甲等医院的抗高血压药购药数据,包括药品名称、规格、金额、数量等.
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赴苏丹维和人员归国5 mo后患疟疾1例
1 临床资料 患者男性,39岁,发病5 mo前曾赴苏丹执行维和任务,历时8 mo.因发热伴畏寒、咳嗽、咽痛2 d入院.患者人院前2 d无明显原因出现畏寒、发热,体温38.0℃,无寒战,伴咳嗽,咳少量白色粘痰,咽痛,同时觉全身酸痛不适,未在意,体温持续不降.第2日体温升高,高达40.0℃,随后开始出汗(未应用退热药物),大汗淋漓,而后退热,体温逐渐降至正常.分别于体温38.0℃,39.0℃,40.0℃时行血涂片检查.
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妊娠期中毒性表皮坏死松解症1例的护理
1 临床资料 患者,26岁,宫内孕19+5 wk,以"发热伴皮疹3 d,全身水疱2 d"入院.皮肤科检查:皮疹遍布全身,呈红斑、水疱、部分水疱融合成松弛性大疱,尼氏征阳性,部分水疱破溃,呈红色糜烂面,眼睑肿胀,结膜等处出现粘膜剥脱,渗出明显.
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替牙期个别恒前牙错位的早期矫治
引言个别牙齿错位,尤其是上下切牙错位是替牙期儿童较常见的疾病,可能影响口腔健康及功能,甚至危害全身及心理健康.替牙期牙列处于生长变化中,牙根尚未发育完成,如果诊断不清,可能会延误治疗时机,增加恒牙列期的矫治难度,且影响矫治效果.如果尽早矫治个别牙错位畸形,常可在较短的时间内,取得事半功倍的效果.
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女性部分性Kallmann综合征延误诊断1例
1 临床资料 女性,18岁,在校学生.出生后至今嗅觉不敏感,能从气味上区别浓乙醇和水,但不能区别一般乙醇、醋和水.一直无月经来潮.查体:身高165 cm,体质量57 kg,营养良好,皮肤黏膜无异常.五官端正,鼻外形无异常,听力正常.甲状腺无肿大,乳房发育差,心肺无异常.肝脾肋下未触及,脊柱四肢无畸形.妇科检查:外阴未产式,阴道通畅,宫颈未查.宫体后位,略小,中等硬度,活动.无压痛.附件无异常体征.
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普理灵疝装置用于腰疝修补3例
1 临床资料 患者3(男2,女1)例,均为中老年人,年龄分别为50,53,65岁.均无外伤史,亦无明显重体力劳动史.1例患有慢性支气管炎.发病初均发现腰部有一肿块,有酸胀感,症状进行性加重,站立或弯腰时明显,用手挤压后肿块消失.
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结石性胆囊炎合并肝损害的临床分析
1 临床资料 2005-01/2007-12住院经B超、CT或ERCP检查结石性胆囊炎240(男130,女110)例,年龄(48.4±4.4)岁,病程(8.4±1.4)mo.临床表现反复右上腹痛、畏寒、发热等;体检右上腹压痛或伴肌紧张,莫菲氏征阳性.排除脂肪肝、病毒性肝炎及药物性肝损害.
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肺癌小肠转移1例并文献复习
1 临床资料 患者男性,74岁,主因腹胀、恶心、呕吐2 mo,于2007-08-05入院.立位腹平片见多个阶梯状气液平面.小肠双重造影检查发现空肠中段肠管狭窄、肠壁僵硬破坏,可见1.0 cm×0.3 cm龛影.
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抗震救灾一线官兵下颌智齿冠周炎的治疗与预防54例
1 临床资料 2008-05/07某野战医院辖区内的抗震救灾部队官兵中,下颌智齿冠周炎发病患者54(男51,女3)例,平均年龄24.3岁,其中,伴有发热27例,开口受限15例,因智齿冠周炎引起间隙感染5例.
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糖尿病患者掌握胰岛素笔的影响因素分析
1 临床资料 选择2007-01/2007-12在我科住院的2型糖尿病患者,符合1999年中国糖尿病学会诊断标准,初次使用胰岛素笔的住院患者134(男84,女50)例,平均年龄(58.87±13.56)岁,文化程度初中以下91例、高中24例、大专以上19例,其中使用诺和胰岛素笔60例,东宝胰岛素笔74例.自行设计调查表.采用不同的影响因素对患者掌握胰岛素笔的情况进行比较分析.护士根据患者的影响因素针对性进行施教,终使患者在院外能熟练操作胰岛素笔且注射剂量准确,并能够解决使用中常见问题,保证治疗的及时性、准确性、安全性和延续性.
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丙型肝炎病毒core-Ant融合表达
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)core对肝细胞的转分化作用,构建可以表达HCV core-Ant融合蛋白的原核表达载体.方法:已经构建的HCV core cDNA克隆质粒为模板,用PCR技术删除终止子,通过T载体克隆法构建pGEM-T-HCVcore cDNA克隆质粒.经筛选阳性克隆、酶切鉴定并测序后,通过常规分子生物学亚克隆方法,利用已有的pGEM T-Ant载体,连接Ant和HCV core cDNA在同一ORF,插入到pTE28表达载体.建立了表达HCV core和果蝇穿膜肽Ant的融合蛋白表达克隆.使用IFFG诱导方法,从表达菌中提取包涵体蛋白,复性后使用ELISA方法检测表达蛋白的抗原性.使用HRP标记的抗HCV核心抗体免疫组织化学一步法检测HCVcore和HCV core-Ant融合蛋白对NIH 3T3细胞的转导能力.结果:pGEM-T-HCV core·Ant cDNA克隆的酶切物理图谱及测序证实结果证实建立了果蝇穿膜肽Ant cDNA克隆和删除了终止子的HCV core cDNA克隆.亚克隆后建立的重组质粒pTF28HCV coreAnt经限制性内切酶后,琼脂糖凝胶电泳,结果显示酶切片段大小和设计预计值一致.序列测定结果表明HCV core cDNA和穿膜肽Ant cDNA处于同一ORF.通过转化B121 DE3表达菌,IPrG诱导后,PAGE电泳成功表达了HCV core-Ant蛋白.复性后包被酶标板,间接ELISA方法检测抗HCV抗体阳性血清和正常人血清证实表达蛋白具有敏感和特异的抗原性.目标蛋白能转导进入NIH 3T3细胞显示了大量的阳性着色细胞.这些阳性着色细胞的着色颗粒主要存在细胞质中.表明构建表达HCV core-Ant融合蛋白的pET28原核表达载体成功.结论:通过分子克隆体外重组技术成功建立了表达HCV core-Ant的pTE28原核表达载体,为研究HCVcore对细胞的转分化作用和HCV的致癌机制奠定了基础.
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复方壳聚糖防治大鼠胃溃疡的实验研究
目的:研究复方壳聚糖(壳聚糖和L-谷氨酰胺)对大鼠实验性胃溃疡的防治作用及机制.方法:采用乙醇致胃黏膜损伤型和乙酸灼烧型胃溃疡模型,观察复方壳聚糖铋对溃疡面积或溃疡指数的影响.观察给药后对实验性胃溃疡的治疗作用,以及对胃液量、pH值、胃蛋白酶活性、胃黏液分泌和胃黏膜PGE2含量的影响.结果:复方壳聚糖可明显降低大鼠的溃疡面积或溃疡指数.复方制剂治疗效果明显好于复方中等剂量单个药物治疗作用[溃疡指数:复方组(62.4±25.6)vs壳聚糖(98.2 ± 26.9),L-谷氨酰胺(105.3±35.4),P<0.05,n=10].复方壳聚糖可降低胃液酸度[NaOH体积(mL):模型组(1.8±0.3)vs壳聚糖(1.3 ±0.3),L-谷氨酰胺(1.6 ±0.3),复方组(1.1 ±0.2),P<0.05,n=10],增加胃黏膜黏液分泌[模型组(0.14 ±0.06)vs壳聚糖(0.11 ±0.02),L-谷氨酰胺(0.12±0.03)及复方组(0.13±0.04),P<0.05,n=10],升高胃黏膜中前列腺素E2(PGE2)含量[模型组(220.3±17.2)vs壳聚糖(201.5±10.2),L-谷氨酰胺(198.6±9.4),复方组(216.3±11.7),P<0.05,n=10].复方及复方中各成分对胃液分泌和胃蛋白酶活性无显著影响.结论:复方壳聚糖对大鼠实验性胃溃疡有明显的防治作用,复方制剂中各成分具有明显的协同治疗作用.
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恒定磁场对大鼠心肌缺血/再灌注损伤和无复流面积的影响
目的:观察恒定磁场干预对大鼠心肌缺血/再灌注损伤和无复流面积的影响.方法:将24只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、缺血/再灌注组、50 mT恒定磁场+缺血/再灌注组及100 mT恒定磁场+缺血/再灌注组,每组6只.大鼠麻醉开胸,结扎冠状动脉前降支40 min,再灌注4 h.采用硫黄素染色评估缺血心肌再灌注后的无复流面积,Evan's蓝和氯化三苯基氮四唑(TTC)染色法测定心肌梗死范围;全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶(CK)的水平,微粒子化学发光法测定血清肌钙蛋白I(cTnI)的水平.结果:50 mT及100 mT恒定磁场干预组的心肌梗死面积和无复流面积显著小于缺血/再灌注组(P<0.05).缺血/再灌注组大鼠血清CK和cTnI的水平与假手术组比较显著升高(P<0.05);而不同强度的恒定磁场干预+缺血/再灌注组血清CK和cTnI的水平与缺血/再灌注组比较显著降低(P<0.05).结论:恒定磁场干预可减轻缺血/再灌注所致大鼠心肌的损伤和无复流面积.
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两种抗原致敏方式负载树突状细胞疫苗对LNCaP细胞株的体外杀伤作用
目的:比较验证重组腺相关病毒负载PSA基因转染方式与LNCaP细胞裂解物诱导方式对产生树突状细胞(DCs)疫苗的的影响.方法:抽取HLA表型为A2的健康志愿者外周血,分离单核细胞,体外培养.通过反复冻融LNCaP细胞、提取肿瘤细胞裂解物以及使用含PSA片段的重组腺相关病毒转染未成熟DCs,诱导特异性细胞毒性T细胞(CTL).检测体外培养的DCs和CTL活性,并使用MTT法检测两组CTL对LNCaP细胞的杀伤作用,同时使用腺相关病毒转染组诱导的CTL对LNCaP和DU145两种前列腺癌细胞进行杀伤实验检测.结果:两种方式均可培养成熟的DCs,诱导激活CTL并分泌IFN-γ,而腺相关病毒转染的DCs成熟度和CTL诱导率均高于细胞裂解物组;腺相关病毒转染组诱导的CTL对LNCaP细胞的杀伤率显著高于细胞裂解物组诱导的CTL;腺相关病毒转染组诱导的CTL对LNCaP细胞有特异性杀伤作用.结论:两种抗原递呈方式均可培养出成熟的DCs,并可诱导自体CTL增殖;而使用重组腺相关病毒转染PSA至DCs的方式明显优于肿瘤细胞裂解物的抗原负载方式,具有高效特异性.
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SP-TAT-Apoptin融合基因真核表达载体的构建和鉴定
目的:通过基因克隆构建表达SP-TAT-Apoptin融合基因的真核表达载体.方法:通过DNA重组技术,以pCD-NA3.1/Apoptin质粒为模板,进行PCR反应;将具有分泌功能的信号肽和能够携带核酸、蛋白和肽自由地通过细胞膜和核膜的蛋白转导域TAT序列连接于Apoptin基因5'端;PCR反应的产物连接于plenti6-V5-D-TOPO 真核表达载体.用限制性内切酶酶切分析和DNA序列分析鉴定重组结果;将重组的真核表达载体瞬时转染HUVEC细胞,用免疫荧光标记对转染后的细胞进行处理,观察重组蛋白的表达情况.结果:PCR产物大小符合要求,重组质粒plenti6-V5-D-TOPO /*SP-TAT-Ap-optin双酶切鉴定与预期一致,测序结果正确.且经激光共聚焦显微镜观察到重组蛋白的表达.表明重组表达载体已构建成功.结论:成功克隆出SP-TAT-Apoptin融合基因,并成功构建其真核细胞表达载体,为下一步研究SP-TAT-Apoptin融合基因对肿瘤的生长抑制作用的体内外研究奠定了基础.
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体外保存兔甲状软骨活性的实验研究
目的:研究如何在体外长期保存兔甲状软骨块的活性.方法:取兔甲状软骨15块,软骨大小约5 mill×2 mill×1mm,将所取软骨块分别置于4℃,-80℃冷冻及RPMI-1640液,于37℃培养保存,于保存24 h,7,14,21,30 d时取样品,分别用HE,AB/PAS及Masson三色染色和台盼蓝排斥试验检测软骨活性.结果:用RPMI-1640培养液保存的兔甲状软骨,在整个保存期中活性保持较好,软骨细胞活性率保持在85%左右;-80℃冷冻保存7d时软骨基本失去活性,4℃保存软骨在保存30d时软骨活性明显降低.结论:与低温保存方法相比,用组织培养法能较好地保存兔甲状软骨块活性.
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吡格列酮对肝门部胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡和侵袭力的影响
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)配体吡格列酮(pioglitazone,PGZ)对胆管癌细胞增殖、凋亡和体外侵袭力的影响.方法:体外培养人肝门胆管癌QBC939细胞;采用流式细胞技术与TUNEL酶标记法检测PGZ对QBC939细胞增殖和凋亡的影响.通过Matrigel侵袭实验和过河实验检测PGZ对QBC939细胞体外侵袭力和运动能力的影响.结果:流式细胞仪分析显示,PGZ能明显抑制Qac939细胞增殖,使其停滞于G2/M期,促使诱导细胞凋亡;TUNEL酶标记显示凋亡的QBC939细胞出现凋亡小体;Matmi-gel侵袭实验和过河实验显示,随着PGZ浓度的增加,透过Matrigel膜的细胞数减少,过河时间延长(P<0.01),呈剂量-效应关系.结论:PGZ能明显抑制QBC939细胞增殖,诱导细胞凋亡,对QBC939细胞的体外侵袭力有明显的抑制作用.PPAR-γ配体PGZ有望成为治疗胆管癌新的切人点.
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人类神经上皮肿瘤中Nestin+细胞的分离培养和表达
目的:检测巢蛋白(Nestin)在神经上皮肿瘤组织、细胞中的表达,评价Nestin+细胞体外生物学特性并探讨其意义.方法:采用免疫组化法检测神经上皮肿瘤组织中Nestin的表达情况,免疫磁珠法分选肿瘤组织中的Nestin+细胞,悬浮细胞培养法进行Nestin+细胞的增殖、分化与鉴定,RT-PCR法检测Nestin蛋白在其中的活性表达情况.结果:Nestin在肿瘤内皮细胞中均有阳性染色,而在神经上皮肿瘤细胞中阳性染色比例为9.5%～96.2%,且Nestin+细胞比例及染色强度与肿瘤的恶性程度正相关.Nestin+细胞能在无血清培养基中形成典型的脑肿瘤球,在含血清培养基中分化为成熟的神经细胞系.Nestin蛋白在Nestin+细胞中活性表达强度约为阴性细胞的18.5倍,其表达强度取决于细胞的来源.结论:Nestin表达检测有助于正确评价神经上皮肿瘤的生物学行为和恶性程度,并可作为判断肿瘤病理级别和患者预后的重要依据.
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ICAT蛋白在HL60细胞向单核系分化前后表达差异的验证及其功能研究
目的:对HL60细胞在NSC67657作用下向单核系分化前后,双向电泳分离的表达差异蛋白β-catenin相关蛋白1(Beta-catonin-interacting protein 1,ICAT)进行验证,并对ICAT在细胞分化中的功能进行研究.方法:通过RT-PCB和Western blot方法验证药物作用细胞前后ICAT基因和蛋白的表达差异;通过免疫荧光协同分析目的蛋白的表达水平,并对其进行初步定位.构建pDsRed-ICAT真核表达载体,转染HL60细胞,筛选阳性克隆.对ICAT基因重组质粒转染细胞作细胞形态学、细胞增殖改变的观察和细胞周期检测以及超微结构观察.结果:NSC67657诱导HL60细胞向单核系分化,ICAT蛋白表达上调,其主要定位于细胞核和胞质.真核表达载体构建成功,电转后G418筛选可得90%以上阳性克隆.转染重组质粒的HL60细胞增殖受抑,电镜下胞核异染色质密集,核质比减小,表面抗原CD14表达和对照组无差异,但在药物处理后24h即可表达71.3%,明显高于对照组,瑞氏染色可见明显分化细胞.结论:ICAT蛋白在NSC67657诱导HL60细胞分化中表达上调,但仅是过表达的ICAT基因并不能诱导HL60细胞向单核系分化,却能提高HL60细胞对NSC67657诱导作用的敏感性.
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超声破坏微泡联合G-CSF促进心肌梗死大鼠血管新生
目的:探讨超声破坏微泡联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激大鼠梗死心肌血管内皮生长因子(VEGF)分泌、促进血管新生的有效性.方法:心肌梗死模型Wistar大鼠40只,随机分为:超声+微泡造影剂+G-CSF(A组);超声+微泡造影剂组(B组);单纯G-CSF组(C组);单纯手术(SA)组(D组).于治疗后2 wk处死大鼠取材,采用免疫组化法检测心肌组织CD34的表达,并在显微镜下计数心肌内新生血管密度(MVD).采用酶联免疫吸附法(EUSA)检测心肌组织内VEGF蛋白表达情况.结果:免疫组化显示A组心肌组织中有大量CDM表达,新生血管多,MVD计数为(231±24)个/高倍镜视野,明显高于B组(148±19),C组(100±12),D组(86±8)个/高倍镜视野,差异具有统计学意义(P<0.05).ELISA检测结果显示A组心肌组织中VEGF蛋白表达量为(3.14±0.21)ng/S,明显高于B组(2.56±0.17),C组(1.91±0.14),D组(0.97±0.11)ng/g,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:超声破坏微泡可刺激缺血心肌内源性VEGF分泌,促进心肌血管新生,联合G-CSF能明显增强其血管新生作用.
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当归多糖对小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达和黏附功能的影响
目的:研究当归多糖(APS)对小鼠骨髓基质细胞(BMSCs)生长、粘附分子ICAM-1和VCAM-1表达及其对骨髓单个核细胞黏附功能的影响.方法:观察APS对小鼠BMSCs消化时间的影响;MTT法检测APS对小鼠BMSCs增殖及对骨髓单个核细胞黏附功能的影响;流式细胞术检测APS对BM-SCs表面ICAM-1和VCAM-1表达的影响.结果:100,200mg/LAPS使BMSCs达80%贴壁后消化时间明显缩短(P<0.05);50,100 mg/L APS组BMSCs增殖能力较对照组增强(P<0.05);200,300 mg/L APS能使BMSCs表面ICAM-1表达降低,而50,100,200,300 mg/L APS均可使VCAM-1表达降低(P<0.05);体内注射APS后BMSCs表面ICAM-1和VCAM-1表达均降低(P<0.05);100,200,300 mg/L APS使小鼠BM-SCs对单个核细胞黏附率减弱(P<0.05).结论:APS能促进小鼠BMSCs增殖,降低其表面黏附分子ICAM-1和VCAM-1的表达,进而使小鼠BMSCs达80%贴壁后消化时间明显缩短,对骨髓单个核细胞的黏附率减弱.
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βig-h3基因4段高度保守序列定位、克隆及原核表达载体的构建
目的:确定βig-h3基因4段高度保守序列的序列位置,克隆βig-h3全长及4段高度保守序列的基因,分别构建原核表达载体.方法:用RT-PCR方法获得βig-h3全长及4段高度保守序列的基因,以pRSET-A为载体,分别构建重组原核表达质粒.结果:测序结果证实获得βig-h3全长及4段高度保守序列的基因,其序列与GenBank中报道完全一致.分别正确连入pRSET-A载体中,读码框正确.结论:成功构建βig-h3基因全长及4段高度保守序列的原核表达载体,为进行结构与功能相关性研究奠定了基础.
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新西兰兔烫伤模型的建立
目的:建立一种简易的可控制面积及深度的烫伤模型.方法:以医用纱布作为热载体,确定可持续保温的佳纱布层数.将恒温热水浴中加热至99℃的纱布分别在新西兰兔背部烫3,5,7,9,11,13,15,17,19,21,23,25 S共计12个时间点.伤后24 h取标本,经HE染色评价烫伤程度,并对烫伤的时间和程度作相关性分析.结果:确定可持续保温的纱布佳层数为35层,并且烫伤程度和时间具有很好的相关性:Ⅰ度烫伤模型的致伤时间3～5 8;浅Ⅱ度烫伤模型的致伤时间7～13 8;深Ⅱ度烫伤模型的致伤时间15～19 8;Ⅲ度烫伤模型的致伤时间21～25 S.结论:该模型选用纱布作为热载体,具有烫伤面积及深度控制准确,操作简便、重复性好的优点,是研究创伤修复机制的较好模型.
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钙信号对乳腺癌细胞HIF-1α表达及侵袭转移能力的影响
目的:探讨低氧条件下钙信号对乳腺癌细胞HIF-1α表达及其侵袭转移能力的影响.方法:在培养基中加入150 μmol/L CoCl2模拟化学缺氧;将实验分成对照组、CoCl2组、CoCl2和钙通道阻滞剂维拉帕米(verapamil,VPL)组.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组中HIF-1α的mRNA水平;蛋白印迹实验和免疫细胞化学检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-31中HIF-1α蛋白的表达;Millicell小室人工重组基底膜侵袭迁移实验检测各实验组中细胞侵袭迁移能力的改变.结果:两株细胞各实验组都存在HIF-1α的mRNA转录和蛋白的表达,CoCl2组HIF-1αmRNA水平和蛋白水平较对照组显著增高(P<0.01),加VPL干预后,HIF-1αmRNA水平和蛋白水平都大大降低(P<0.01),MCF-7和MDA-MB-231间有显著差异(P<0.01);两株细胞的侵袭迁移能力VPL+CoCl2组较CoCl2组明显降低(P<0.05),MDA-MB-31更明显(P<0.01).结论:阻断钙信号转导途径可以使HIF-1α的表达下调,进而抑制乳腺癌细胞的侵袭转移能力.
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中药姜黄的两种提取物对肝癌细胞生长抑制的比较
目的:比较传统中药姜黄的两种提取物姜黄素(Curcumin)和Calebin·A对肝癌细胞(HepG2)的生长抑制作用.方法:应用MTT比色法检测姜黄素和Calebin-A对肝癌细胞体外生长的抑制作用;平板克隆检测两种提取物处理前后HepG2细胞的克隆形成能力;TUNEL法测定两种药物诱导肝癌细胞凋亡的作用.结果:姜黄素和Calebin-A对肝癌细胞的生长均有抑制作用,且随药物作用的浓度升高和时间延长,抑制效果增强.同一浓度下Calebin-A对细胞生长的抑制作用大于姜黄素,姜黄素和Cahbin-A作用肝癌细胞48 h后,半数细胞抑制作用所需浓度(IC50)分别约为25 μmol/L和10μmol/L.相同浓度时(25 μmol/L)两种提取物均可使肝癌细胞的克隆形成能力明显下降,且Calebin-A对细胞克隆形成能力影响更大.25 μmol/L姜黄素及Calebin-A作用肝癌细胞48h后,Cahbin-A诱导细胞发生凋亡的比例明显大于姜黄素.结论:姜黄素和Calebin-A对肝癌细胞的生长均有抑制作用,而且Calebin-A这种新的植物姜黄提取物对细胞的抑制作用更强.
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姜黄素对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用
目的:观察姜黄素体外抗增生性瘢痕的作用.方法:以增生性瘢痕成纤维细胞为靶细胞,分别用不同浓度的姜黄素培养液培养,MTT法测定细胞的增殖情况,透射电镜进行形态学检测,流式细胞仪技术结合PI及Annexin V双标记染色检测姜黄素的促凋亡作用,实时荧光定量聚合酶链反应检测Ⅰ,Ⅲ型前胶原及Bcl-2 mRNA的表达情况.结果:姜黄素对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖有抑制作用;透射电镜观察发现,处理组凋亡细胞增多,凋亡细胞表现出典型的超微结构特征;流式细胞仪检测发现,随着药物浓度的增加,增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡率也在逐渐升高;实时荧光定量聚合酶链反应检测结果显示,姜黄素处理后Ⅰ、Ⅲ型前胶原及Bcl-2 mRNA的表达水平均下调.结论:姜黄素具有一定的体外抗增生性瘢痕的作用.
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邻苯二甲酸二丁酯对雄性果蝇生殖能力影响及其遗传毒性
目的:研究邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)对雄性果蝇生殖能力的影响及其遗传毒性.方法:①将未交配雄性果蝇随机分为5组,分别给予含DBP为0,1,4,16,64 mg/g的培养基喂饲,10 d后取存活的实验雄蝇进行交配试验和生育试验.②将雄性果蝇随机分为4组,分别喂饲含DBP为0,50,200,800 mg/L的溶液,采用伴性隐性致死(SLPL)试验,观察DBP对雄性果蝇生殖细胞的致突变作用.结果:染毒10 d后随着DBP浓度升高各染毒组雄蝇1 h交配率和子代发生量逐渐降低,64 mg/g组分别为40%和486.4±265,明显低于对照组的85%和861±312(P<0.05);生育期1～10 d各染毒组的不育率均显著高于对照组(P<0.01),10d后只有较高浓度组的不育率高于对照组(P<0.05);50mg/L度组精母细胞Ⅲ阶段的SLRL突变率(0.990%)显著高于对照组(0.106%,P<0.01).结论:DBP对性成熟的雄性果蝇能造成一定的生育障碍和遗传损伤.
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TNF-α对人lrg基因表达的调控
目的:观察TNF-α对脂多糖应答基因(lrg)在人HEK293和U937细胞中表达的影响.方法:正常培养人胚肾细胞(HEK293)和人单核细胞(U937),用TNF-α(终浓度1 ×106U/L)刺激2 h.提取刺激前后HEK293和U937细胞的总蛋白,用纯化后的兔抗人Lrg抗血清作一抗(1:1000),对TNF-α刺激前后的HEK293和U937细胞进行Western Blot分析.提取刺激前后HEK293和U937细胞的总RNA,用RT-PCB分析TNF-α对lrg在细胞中表达的影响.以B-actin为内参.结果:Western Blot分析显示,用TNF-α刺激2 h后,lrg在人HEK293和U937细胞内的蛋白含量明显上升;RT-PCR结果显示,用TNF-α刺激2 h后,人HEK293和U937细胞内的lrgmRNA水平明显上升.结论:TNF-α的刺激增强了人HEK293和U937细胞内lrg的表达,提示lrg可能参与了TNF-α诱导的炎症反应.
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耐阿霉素人骨肉瘤细胞株的建立及其生物学特性
目的:诱导并建立耐阿霉素(Adriamycin,ADM)的人骨肉瘤细胞株,观察耐药细胞系(Saos-2/ADM1,Saos-2/ADM 4)的生物学特性.方法:以ADM为诱导剂,采用逐步增加药物剂量冲击诱导方法,诱导人成骨肉瘤原代Saos-2细胞株,建立不同药物浓度耐药系(Saos-2/ADM1,Saos-2/ADM4);MTT法检测原代与耐药细胞株对ADM、顺铂(Cispla-tin,DDP)、甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)、异环磷酰胺(Ifos-famide,IFO)、表柔比星(Epirubicine,EPI)、比柔比星(Pirambi-cin,THP)、紫杉醇(Paclitaxel,PTX)药物敏感性;光学显微镜、透射电镜观察细胞形态及超微结构变化;细胞生长曲线检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期比例.结果:经167d的诱导,建立了Saos-2/ADM1,Saos-2/ADM4细胞株,其对ADM的耐药指数(Resistant drug index,RI)分别为原代细胞株49.8和74.6倍;耐药细胞株对MTX,EPI,THP,PTX亦产生不同程度的交叉耐药,对DDP仍然敏感;光镜观察Saos-2/ADM1,Saos-2/ADM4细胞株细胞体积增大,多核现象较原代Saos-2细胞株明显增加;透射电镜显示Saos-2/ADMI,Saos-2/ADM4细胞株表面突起较原代Saos-2细胞株减少、且核仁增大增多;细胞生长曲线显示耐药细胞株增殖能力下降,S期细胞所占比例减少.结论:建立了耐ADM人骨肉细胞株Saos-2/ADM1,Saos-2/ADM4并观察了耐药细胞株的生物学特性.
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MACF1的生物信息学分析及细胞定位
目的:了解微管微丝交联因子1(MACF1)的结构与功能.方法:采用生物信息学软件对MACF1结构、功能及亚细胞定位进行分析,并利用分子模拟软件对MACF1空间结构进行了模拟,同时采用免疫荧光显微术及共聚焦激光扫描显微术(CLSM)对生物信息学分析的部分结果进行了验证.结果:MACF1由5430氨基酸组成,Mr约为620×103,主要定位于胞质及细胞骨架.MACF1结构中包含1个ABD、37个血影蛋白重复单元、1个SH3结构域、2个EF手臂钙结合位点结构域、1个生长捕获特异蛋白2结构域等基序.并包含4个序列谱及5个序列模式.MACFI的德温特入藏号为Q9UPN3,MACF1包括4个亚型即MACF 1/2/3/5,主要功能可能是将微丝、微管与其它骨架蛋白交联.同源模建结果表明.MACFI与月α-辅肌动蛋白的ABD结构域一级序列的同源性为50.2%.免疫荧光显微术及CLSM结果表明,MACF1主要分布与细胞质,且与微丝、微管骨架部分共定位.结论:MACFI是一种大分子量的骨架交联蛋白,主要定位于细胞质,且与微丝、微管骨架部分共定位,MACF1结构功能可能与α辅肌动蛋白有一定的相似性.
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丁酸钠诱导结肠癌细胞分化过程中NDRG2的表达及意义
目的:研究丁酸钠诱导结肠癌细胞分化过程中抑癌候选基因NDRG2的表达特点及意义.方法:采用丁酸钠诱导结肠癌HT29,SW480,SW620细胞分化,通过碱性磷酸酶(AKP)测定和透射电镜评价结肠癌细胞的分化程度,应用Real time BT-PCR和Western Blot法测定不同分化点(0,1,2,3,4,5,6 d)NDRG2 mRNA和蛋白的表达特点.结果:经丁酸钠作用24 h-6 d后,结肠癌细胞中NDRG2基因mRNA和蛋白水平均显著高于对照组水平.结论:丁酸钠诱导结肠癌细胞分化过程中NDRG2表达显著升高,提示NDRG2是参与结肠癌细胞分化的相关基因.
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脂肪基质干细胞跨胚层分化为神经干细胞的实验研究
目的:探讨脂肪基质干细胞向神经干细胞跨胚层分化的可行性,进而为神经系统损伤修复寻找理想的种子细胞.方法:无菌条件下取大鼠腹股沟脂肪组织,消化离心后低糖含血清培养基培养,待细胞生长至亚融合状态改用神经干细胞培养基诱导,用免疫荧光对诱导的细胞进行鉴定.结果:大鼠脂肪基质干细胞在相应培养条件下快速分裂增殖为大而圆并含粗大胞质颗粒的细胞,后者形成细胞球(或称"神经球"),该细胞球表达特殊的神经干细胞Nestin抗原;若进一步将这些细胞球分离成单细胞并重新以克隆密度培养,单个的细胞又很快形成新的神经球.神经干细胞球进一步分化,可见到有的细胞胞体增大并出芽,逐渐发育成为较成熟的长突起细胞,长突起相互连接、交织成网并建立有神经纤维样联系,表达Nse或Gfap抗原.结论:大鼠脂肪基质干细胞在一定条件下可以向神经干细胞跨胚层分化.该种来源的神经干细胞可能成为中枢神经系统损伤修复的理想种子细胞.
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人食管下括约肌毒蕈碱受体的表达
目的:研究毒蕈碱受体亚型在人食管下括约肌(LES)套索纤维和钩状纤维的表达,对LES胆碱能收缩机制作进一步分析.方法:选取高位食管中段癌,行食管大部切除术患者12例,取食管胃接合部标本分离套索纤维和钩状纤维.分别应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印记(Western Blot)检测5种M受体亚型在两种肌纤维中mRNA和蛋白的表达.结果:不同M受体亚型mRNA在两种肌纤维的表达有统计学差异(P<0.05),从数据观察5种受体亚型mRNA表达从强到弱顺序依次为M2,h13,M1,M4,M5;同一受体mRNA在两种肌纤维间表达无统计学差异;不同M受体亚型蛋白在两种肌纤维表达有统计学差异(P<0.05),5种受体亚型蛋白表达强弱同mRNA;同一受体在两种肌纤维间蛋白表达无差异.结论:5种M受体亚型mRNA和蛋白在两种肌纤维均有表达,M2受体表达量高,其它依次是M3,M1,M4和M5受体;相同受体在两种肌纤维间mRNA和蛋白的表达相同.
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西安市养老机构老年人生活质量及影响因素的研究
目的:了解特殊养老环境下老年人的生活质量现况及其影响因素.方法:采用随机整群抽样的方法,选取西安市14所养老机构,对其中符合调查条件者进行现场问卷调查,内容包括一般人口学资料、简明生活质量量表(SF-36)及生活质量影响因素调查表.结果:共收集有效问卷373份.养老机构老人的生活质量处于良、中、差水平的比例分别是38.9%.55.5%,5.6%.生活满意度自评、对子女生活满意度、人际关系自评、有无兴趣爱好、运动项目数、是否主动获取保健知识、患病数是主要影响养老机构老年人生活质量的因素.结论:西安市养老机构老人总体生活质量处于中等偏上水平.在制定老年人保健护理策略及有关事宜时,要充分考虑到机构养老这一人群的特殊性.
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注射维生素E对早产儿视网膜病大鼠模型的影响
材料和方法 新生SD大鼠60只(第四军医大学实验动物中心),体质量(3.4±1.1)g,鼠龄1 d.分为对照组、模型组和干预组,每组20只,各组均由一只母鼠喂养.
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雷电寻踪——谈难治性癫痫的外科治疗
1987年,在伦敦拍卖行,一幅油画的成交价格创造了当时油画拍卖的天价,这就是著名的向日葵,它的作者是著名的荷兰画家梵高,尽管梵高有极高艺术成就,然而,这位年轻画家却因为不堪癫痫的折磨而自杀身亡,年仅37岁,那么癫痫是一种什么样的疾病?简单地说,癫痫就像我们大脑中的雷电,它是脑部过度放电导致的一种严重的脑部疾病,患者随时都会被自己产生的雷电击倒.
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从Web of Science分析第四军医大学科研论文产出状况
引言科学引文索引(SCI)是目前世界上影响大、权威的引文索引数据库,也是我校科研人员非常熟悉的数据库.由于该数据库有一套严格的选刊程序以及客观的计量方法,因此,SCI中收录了各学科领域中具权威性和影响力的学术期刊.
| 年 | 期数 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 02 03 04 05 07 08 09 10 11 12 |
