中国医学检验杂志
Chinese Journal Medical Laboratary Technology
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人滑膜细胞的分离培养与鉴定
[目的]建立人滑膜细胞体外分离培养的方法,为进一步的实验研究奠定基础.[方法]分别用胶原酶消化法及组织块培养法分离和培养人滑膜细胞,并通过形态学和免疫组化进行鉴定.[结果]培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征;免疫组化染色显示Vimentin阳性,CD68阴性,滑膜细胞呈长梭形极向生长.[结论]两种方法均成功的培养出了人滑膜细胞,适合做为实验研究的靶细胞.
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肿瘤相关抗原p16的表达和纯化及其在癌症检测中的应用
肿瘤抑制蛋白p16是一个细胞cyclin依赖的细胞激酶抑制因子,具有调节细胞分裂周期的重要功能,p16基因的突变与肿瘤发生密切相关.以往的研究表明与细胞恶性转变有关联的一些蛋白如p53,c-myc,p62和survivin等可以诱发机体产生自身抗体,而这些自身抗体可以作为监测肿瘤发展的标志.是否血清中p16抗体也可作为一个肿瘤诊断的标志仍需要进行评价.本研究用GST融合蛋白纯化系统对体外表达的p16重组蛋白进行纯化,并进一步将其用做肿瘤抗原对癌症病人血清中存在的p16抗体进行检测.初步结果表明在多种肿瘤病人的血清中都可检测到p16抗体.由于本研究使用的样本数有限,是否p16抗体可以作为肿瘤的一个诊断标志仍需要做进一步的研究证实.
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自身抗体对原发性胆汁性肝硬化的诊断意义
[目的]分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)出现的自身抗体及其临床意义,探讨自身免疫性肝病重叠综合征的特点.[方法]用间接免疫荧光法检测52例PBC患者的ANA、AMA、SMA和LKM、LMA及LSP等抗体,用欧蒙印迹法检测ANA谱、AMA亚型抗体及SLA/LP、LKM-1和LC-1等肝脏疾病相关的自身抗体.[结果]全部PBC患者AMA和AMA-M2抗体均为阳性,52例中18例检测了AMA-M4、M9抗体,分别有9例和8例阳性.52例中ANA阳性41例(78.4%),主要表现为细胞核膜型(19例)、核点型(11例)和着丝点型(8例)的荧光模式.其他少见的荧光模式有:抗SS-A/SS-B型、核均质型、核仁型及核颗粒型.多数PBC患者ANA为两种荧光模式的混合.荧光模式为着丝点型者CENP-B均为阳性.52例中有6例患者表现为自身免疫性肝病重叠综合征,其中2例SL/LP阳性,提示AIHⅢ型与PBC的重叠;1例LKM-1阳性,提示AIHⅡ型与PBC的重叠;3例ANA阳性,肝活检证实2例存在自身免疫性肝炎(AIH)和PBC的病理改变,1例仅有界面性炎的改变,提示AIH Ⅰ型与PBC的重叠综合征.重叠综合征男:女=4:2,年龄偏低,疾病进展较快.[结论]AMA和AMA-M2对PBC具有诊断意义;多数PBC患者ANA阳性并且有其特征性荧光模式,这种特征对AMA-M2阴性的PBC有诊断意义.PBC患者出现AIH的自身抗体时应考虑重叠综合征的诊断.此类重叠综合征患者在发病年龄、性别及抗体方面有不同于PBC的特点.
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利用合成基质进行补体C1的精制研究
[目的]为进一步研究补体C1的精制方法,用合成基质法替代溶血反应法,为今后C1的基础研究建立一种新的研究手段.[方法]我们利用C1的构成成份C1s和C1r的酶特性作为合成基质进行补体C1的合成研究.[结果]在丝氨酸蛋白酶与氟磷酸或与苯甲醇氟化磺酰反应下,前者生成具有活性的C1,后者生成不具有活性的C1.[结论]利用新的合成基质精制C1的实验结果与传统的溶血方法基本一致.
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乙型肝炎病毒基因B型和C型与临床关系的研究
[目的]通过对乙肝病毒S基因直接测序分型,来探讨HBV基因型B和C型与肝功能损伤、病毒复制水平的关系.[方法]应用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA S基因区,通过直接测序方法与Genebank标准序列对比来鉴别HBV A～H基因型,对165例乙肝患者血清进行基因分型.[结果]对HBV感染者血清进行基因分型,B型12.1%,C型86.7%.慢性肝炎和肝硬化患者主要为C基因型感染,显著高于急性肝炎患者(CHB对AH:x2=4,76,P＜0.05;LC对AH:x2=10.04,P＜0.01);基因C型乙肝病毒感染的病人中HBeAg阳性率显著高于基因B型感染的病人(63.6%比35%,x2=6.00,P＜0.05);21～30岁这组基因B型HBeAg阳性率显著低于基因C型HBeAg阳性率(27.3%对78.8%,x2=7.59,P＜0.01).[结论]本地区HBV DNA基因型以B型和C型为主;二种基因型ALT水平和病毒复制水平虽然无差异,但基因B型乙肝病毒感染的病人HBeAg阳性率显著低下,具有较高和较早的血清HBeAg转换能力.C基因型感染和乙肝病情加重和肝硬化有一定关系.
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大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因分型的初步研究
[目的]超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是一种新的β-内酰胺酶(BIA),主要产生于大肠埃希菌和克雷伯菌属,能水解三代头孢菌素和单环酰酶类,并被BIA抑制剂所抑制,ESBLs的产生和播散给临床感染的治疗带来极大挑战,质粒介导的ESBLs已发现110多种,根据亚型编码基因同源性不同分为TEM、SHV和非TEM非SHV三类,其中以TEM和SHV型多见,多由经典TEM-1、TEM-2和SHV-1发生点突变而来,编码基因中数个位点,各地区流行的ESBLs亚型各不相同,我们对江西南昌地区2001.9～2002.5临床分离的34株表型为产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌分别用TEM、SHV和CTX-M型ESBLs特定引物进行PCR扩增电泳分析.[方法]细菌质粒DNA提取与PCR扩增:采用碱裂解法提取质粒DNA行PCR扩增引物,按有关文献进行,设大肠埃希菌ATCC25922标准产酶大肠埃希菌(TEM-10、TEM-12、TEM-29和SHV-1、SHV-7、CTX-M-3)为对照,DNA电泳分析:按有关文献进行,采用1%琼脂糖凝胶电泳,电泳1～2h后,在紫外投射下观察.[结果]34株产ESBLs的菌株经质粒DNA提取,行电泳分析显示菌株均存在阳性条带,再用三种特定引物分别行质粒DNA耐药基因PCR扩增,结果TEM型引物内扩增阳性为26株,CTX-M型引物扩增阳性4株,而SHV型引物则无1例出现阳性,另4株使用三种引物行PCR扩增得未到阳性结果.文献报道,大肠埃希菌产ESBLs的亚型以TEM型为主,肺炎克雷伯菌则以TEM、SHV型兼有,我们认为未发现SHV型可能与本次分离到的实验菌株以大肠埃希菌为主有关.有4株用三种引物扩增耐药基因未能获得阳性结果,可能还存在其他亚型的ESBLs耐药基因,也不排除这4株是表型确证法检测中出现的假阳性株.[结论]本研究未能对扩增耐药基因作进一步基因测序研究,因此,不能确定耐药基因亚型的具体型号和深入分析.
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原发性肝癌患者VEGF、ET-1和NO水平测定及其临床意义研究
[目的]通过检测肝癌患者血中血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素(ET-1)和一氧化氮(NO)的浓度变化,探讨它们与肝癌发生发展及转移的关系及对临床的应用价值.[方法]采用酶联免疫方法(ELISA)检测血浆VEGF水平,放射免疫分析法(RIA)测定ET-1浓度,酶还原法测定NO含量.[结果]原发性肝癌患者VEGF水平明显增高(565.38±82.21pg/ml),与对照组VEGF(205.78±77.65pg/ml)相比差异十分显著(P＜0.01);肝癌组ET-1(87.51±20.43ng/L)和NO(117.28±34.94μmol/L)均显著高于对照组(ET-1为56.97±25.19ng/L;NO为74.17±35.28μnol/L),差异有显著性(P＜0.01);同时肝炎肝癌组VEGF、ET-1高于非肝炎肝癌组,转移组VEGF、ET-1和NO高于未转移组,差异均十分显著.[结论]VEGF、ET-1和NO与肝癌发生发展及转移密切相关.三者联合检测对临床综合治疗和预后判断可能具有重要指导意义.
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半定量RT-PCR法检测TRAIL在PHC及其癌旁组织中的表达
[目的]检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)在原发性肝癌(PHC)及其癌旁组织中的表达,并探讨其意义.[方法]收集原发性肝癌(PHC)及癌旁组织各30例,采用半定量RT-PCR,对TRAIL的表达作半定量检测.[结果]30例原发性肝癌及癌旁组织中均有TRAIL的表达,但条带荧光强度存在差异,癌旁组织强于癌组织,其半定量结果显示,癌组织中TRAIL的表达量明显低于癌旁组织中的表达(P＜0.05).[结论]TRAIL在肝癌组织的低表达可能与肝癌的发生、发展有一定的相关性,本研究为进一步了解TRAIL在肝癌发生过程中的作用机制及为TRAIL用于肝癌的生物治疗及基因治疗提供了理论基础.
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米力农对心脏瓣膜置换患者围术期胃粘膜pH的影响
[目的]探讨米力农对瓣膜置换术患者围术期胃粘膜pH(pHi)的影响.[方法]20例瓣膜置换术患者,随机分为两组.米力农组:米力农50μg/kg静注,0.5μg/kg/min维持;对照组:给予等量生理盐水.监测体外循环前、体外循环开始后5min、60min、停体外循环5min、手术结束时、术后2h、6h、20h的pH值.[结果]对照组pH值在体外循环开始后明显降低(P＜0.01),至术后6h维持在较低水平,术后20h回升至体外循环前基础水平.米力农组pH值在体外循环期间至术后6h均高于对照组(P＜0.05).[结论]米力农可以明显改善体外循环围术期胃粘膜pH值.
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多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在肝、肺恶性肿瘤早期诊断中的应用观察
[目的]探讨多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(简称C-12检测系统)在肝、肺恶性肿瘤早期诊断方面的应用价值.[方法]收集52例健康体检者、18例肝良性疾病、20例治疗前肝癌、20例肺良性疾病和26治疗前肺癌患者的空腹血清,应用C-12检测系统测定十二种肿瘤标志物:AFP、CFA、CA199、NSE、CA242、FER、HCG、f-PSA、PSA、CA125、HGH、CA153.[结果]健康体检组阳性率1.9%,肝良性疾病组阳性率55.6%,肝癌组阳性率85%;肺良性疾病组阳性率40%,肺癌组阳性率84.6%.肝癌组以AFP阳性率高(70%),CA199次之(60%),CA125第三(50%).肺癌组以CEA阳性率高(80.8%),CA125次之(65.4%),CA242第三(38.5%).[结论]C12检测系统将十二种肿瘤标志物联合测定,优于单项指标的测定,提高了阳性检出率,降低了假阳性的干扰,能为肝、肺恶性肿瘤的早期诊断提供更好的帮助,有望成为临床常用而有效的检查项目.
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慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞表达的研究
[目的]探諧D4+CD25+调节性T细胞在慢性乙型肝炎发病中的作用.[方法]用流式细胞仪测定临床确诊的60例慢性乙型肝炎患者外周血中的CD4+CD25+调节性T细胞.[结果]e系阳性组CD4+CD25+调节性T细胞明显高于e系阴性组,e系阴性组明显高于正常对照组.[结论]慢性乙型肝炎患者存在免疫无能和免疫抑制特性,导致细胞免疫功能失调,提示CD4+CD25+调节性T细胞在慢性乙型肝炎的病程中起着重要作用.
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生殖道脲原体培养、分型鉴定及其药敏试验
[目的]探讨生殖道脲原体快速培养、分型鉴定与药敏试验及其临床实用性.[方法]收集100例非淋菌性尿道炎患者分泌物标本,采用法国生物梅里埃(BioMerieux,IST)、珠海丽珠(ICS)、黑马(IES)等3种支原体检测试剂盒,进行支原体培养鉴定与药敏试验,阳性者再进行PCR分型鉴定.[结果]100例临床标本脲原体培养,IST和ICS支原体检测试剂盒检出UU(溶脲脲原体)和Mh(人型支原体)阳性率分别为52.0%和12.0%,IFS试剂盒UU阳性率为38.0%,Mh未检出.PCR分型:生物群I(U.parvum,UP)36.0%,生物群Ⅱ(U.urealyticum,UU)16.0%.药敏试验结果:交沙霉素100%敏感,强力霉素和阿奇霉素分别为76.9%和78.9%.[结论]IST和ICS支原体培养和药敏检测试剂盒可作UU与Mh快速培养鉴定和药敏试验,PCR可作脲原体快速分型鉴定.
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乙型肝炎患者辅助性T细胞分泌细胞因子的水平的研究
[目的]研究各型乙型肝炎患者TH1/TH2类细胞分泌细胞因子的水平及细胞免疫应答的模式并探讨其在乙肝发病机制中的作用.[方法]应用植物血凝素(Phytohemagglutinin,PHA)和各型乙肝患者的PBMC在体外共同培养,用ELISA法检测其PBMC产生TH1类细胞因子(IL-2、IFN-γ)和TH2类细胞因子(IL-4、IL-10)的水平.[结果]和正常对照相比,各型乙肝患者TH1/TH2类细胞因子均发生了不同程度的改变.[结论]各型乙肝患者TH1/TH2类细胞免疫应答的模式发生了明显的改变.
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SARS患者和普通发热患者白细胞及分类结果对比分析
[目的]观察比较64例SARS患者、250例普通发热患者和正常人外周血白细胞计数及分类之间的区别.[方法]采集患者抗凝全血,使用血液分析仪进行白细胞计数和分类,然后分组比较其差异.[结果]SARS患者的白细胞数量及淋巴细胞数量明显低于普通发热患者和正常人(P＜0.001),而淋巴细胞百分比差别并不明显.[结论]白细胞数量正常或降低,淋巴细胞数量的降低,可作为SARS的辅助诊断指标之一.
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类风湿因子检测在类风湿性关节炎中的临床比较分析
[目的]类风湿因子定量和定性检测在类风湿性关节炎患者中的比较分析及临床应用研究.[方法]采用Array360System全自动特定蛋白分析系统速率散射比浊法和乳胶凝集法同时定量和定性检测类风湿因子,并对结果进行回顾性分析.[结果]①75例类风湿性关节炎患者中速率比浊法和乳胶凝集法分别有52例阳性和39例阳性,两法经x2检验,P＜o.01和0.01,结果有非常显著性意义;组间比较经x2检验,P＜0.05有显著性意义说明速率比浊法好于乳胶凝集法.②75例类风湿性关节炎患者速率比浊法检测结果为103.47±184.14IU/ml,同对照组比较经t检验,P＜0.01结果有非常显著性意义.③75例乳胶法阳性检测结果中1:40多为13例.[结论]RA只有早期诊断合理检测RF才能有效地减少关节破坏和功能丧失,而检测目前仍有赖于采用速率散射比浊法和乳胶凝集法定量和定性检测RF,早期诊断对病情及预后的评估大有帮助.亦对RA患者的药物监测和使用提供有力的依据.
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Trinder's反应中四种色原物质的比较
[目的]对应用于Trinder's反应中的苯酚、3,5-二氯-2羟基苯磺酸钠(色原1)、N-[2-[乙基(3-甲基苯基)氨基]乙基]乙酰胺(色原2)和N-乙基-N-乙磺酸钠间甲苯胺(色原3)进行呈色比较.[方法]配制不同浓度的H2 O2溶液分别与4种色原物质反应,进行吸收峰扫描.[结果]苯酚的大吸收峰为505nm,范围460～555nm;色原1的大吸收峰为515nm,范围480～545nm;色原2的大吸收峰为555nm,范围520～585nm;色原3的大吸收峰为555nm,范围520～585nm;吸收峰扫描发现4种色原的呈色反应均稳定至少45min以上;反应浓度为8.71μmol/L的H2 O2与苯酚、色原1、色原2和色原3的大吸光度分别为0.262、0.921、0.581和0.617OD;呈色能力强弱依次为色原1、色原3、色原2和苯酚.[结论]Trinder's反应常规用于底物氧化酶催化的生化检测项目,色原物质的选择十分必要.
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高敏C-反应蛋白检测的方法学评价和临床应用
[目的]评价血清高敏C-反应蛋白(hs-CRP)检测的可靠性和临床应用.[方法]对胶乳增强免疫透射比浊法检测h-CRP进行线性、精密度、干扰因素评价.同时,应用该法测定了82例原发性高血压患者和103例健康对照人血清hs-CRP水平.[结果]胶乳增强免疫透射比浊法回归方程为:y=0.9728x+0.2869,r=0.9997,批内变异CV=3.01%,批间变异CV=3.99%,回归线性范围符合要求,精密度良好,轻度溶血和脂血对该测定方法基本无干扰.原发性高血压患者hs-CRP水平[(1.89±1.12)/L]明显高于健康人[(1.02±0.87)/L],差异具有显著意义(t=3.15,P＜0.01).[结论]胶乳增强免疫透射比浊法所测hsCRP灵敏度高、稳定性好、干扰因素少;hs-CRP可能是预测高血压发生、发展的重要因素.
关键词： C-反应蛋白 胶乳增强免疫透射比浊法 -
小鼠腹腔巨噬细胞的提取与鉴别方法探讨
[目的]探讨从小鼠腹腔诱导和提取大量的巨噬细胞的方法.[方法]采用三种方法刺激小鼠腹腔,使其发生炎症反应从而提取巨噬细胞,并用三种方法鉴定.[结果]用淀粉肉汤培养液刺激小鼠腹腔可得到数量为(12.57±3.24)×106/ml,纯度为(45.65±5.27)%的巨噬细胞.[结论]用淀粉肉汤培养液刺激小鼠腹腔是一种比较快速,简便,可行提取大量巨噬细胞的方法.
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90Sr-90Y敷贴治疗疤痕增生疗效观察
[目的]探讨利用90Sr-90Y器治疗疤痕的临床意义.[方法]运用90Sr-90Y敷贴照射病变部位,每日一次,每次每个部位1.5-2GY,10d为一疗程.[结果]病程短,疤痕小者,有效率99%;病程长,疤痕大者,有效率83%～97%.[结论]皮肤疤痕组织,经90Sr-90Y敷贴照射后,由于细胞分裂速度减慢而受到控制,从而达到治愈或好转的目的.
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甘油醛抗血葡萄糖酵解的观察
血液葡萄糖是临床实验室常用的检验项目,对许多疾病的诊断、治疗和病情检测有很重要的临床意义,是糖尿病诊断的可靠依据.但由于全血中红细胞不停地进行糖酵解,因此在转送或处理过程中葡萄糖浓度会大幅度下降,影响测定结果的准确性,甚至给临床带来误导,以往人们采取一些措施以减少全血样本中糖的丢失、这些方法有:样品收集后马上离心,分离血浆;样品在装运过程中保持低温(但不能冰冻);床旁检测;加入抗糖酵解剂,如氟化物,碘乙酸盐、甘露糖、甘油醛等,参考有关资料[1]我们采用国产甘油醛进行了一些工作,现报道如下:
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冠心病患者血清胆红素分析
冠心病是临床上常见的一种疾病,它是由于动脉粥样硬化所引起的一种心血管病.其发病和死亡率很高[1].冠心病的形成与脂质和脂蛋白代谢异常有着密切的关系.然而有30%～40%的冠心病的形成与脂质和脂蛋白的代谢无关[2].Schwerther等通过流行病学调查发现,低浓度胆红素是冠状动脉性疾病的独立危险因素,为探讨胆红素和冠心病之间的关系,我们对203例冠心病患者的血清胆红素作检测分析.
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丙酮酸激酶法在全自动生化仪上测血钾的影响因素
全自动生化仪以微量、快速、准确、重重性好在各医院广泛应用,但由于检测项目排序不当及仪器长期使用致其冲洗能力下降可致测试结果产生偏差,应引起操作者的注意,我院血钾测定利用两种方法,常规标本采用丙酮酸激酶法,急诊检测采用离子选择电极法,近发现血葡萄糖测定由原来的己糖激酶法(HK)改用葡萄糖氧化酶一过氧化物酶法(GOD-POD)后,有高钾标本用离子选择电极复检都为正常,再在生化仪上复检也为正常,同离子选择电极法结果相一致,经试验分析发现GOD-POD对血钾有严重正干扰,现报道如下:
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肝病患者血清总胆汁酸测定的临床意义
胆汁酸是胆固醇在肝脏分解代谢的产物,它由肝脏分泌到胆汁中,并随胆汁排入肠腔,作用于脂肪的消化与吸收.由于其生成和代谢与肝脏有十分密切的关系,故测定血清总胆汁酸(TBA)可提供肝胆系统正常与否的重要的信息.血清中TBA的诊断价值已经越来越受重视;它不仅用于诊断,还能反映病情发展和评估预后.本文采用酶比色法测定血清TBA,对各种肝病患者TBA进行比较,现报告如下:
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泌尿系感染病原菌分布及耐药性分析
[目的]了解泌尿系感染病原细菌的分布及耐药性,为临床提供可靠的诊断,为临床抗感染治疗提供参考.[方法]对2002年1月至2004年1月间我院住院及门诊患者尿培养分离出的134株细菌进行鉴定和耐药性分析.[结果]泌尿系感染以大肠埃希菌为主,其次分别为凝固酶阴性的葡萄球菌、肠球菌、变形杆菌、深部真菌.肠杆科细菌对亚胺培南,头孢哌酮/舒巴坦敏感性较高,对其他抗生素耐药率呈上升趋势.葡萄球菌对万古霉素100%敏感,对苯唑耐药率达13.6%.[结论]尿系感染以肠杆科细菌为主,由于病原菌耐药率不断上升,强烈要求临床医生应加强对泌尿系感染病人的西林病原学检测及耐药性监测,合理使用抗菌药物.
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10年间志贺菌菌群及耐药性变化
[目的]了解北京地区10年间志贺菌血清型及耐药性变化,为临床经验用药提供依据.[方法]采取腹泻患者的粪便标本,接种于SS琼脂培养基,筛出致病菌后经生化及血清学进一步鉴定到种、群及血清型.致病菌对抗生素的敏感性测定采用NCCLS推荐的Kirby-Bauer法,应用WHONLET5软件进行药敏统计和分析.数据统计处理采用Stata软件.[结果]志贺菌群的感染高峰在夏秋季,有向秋季转移的倾向.菌群的构成比有变化,血清型的组成有明显变化.2002年福氏志贺菌对氨苄西林、复方新诺明的耐药率均在80%以上.宋内志贺菌对除氨苄西林外的抗生素耐药率10年间无差别.但福氏志贺菌对环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星的耐药率显著高于宋内志贺菌(P＜0.001),也高于氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟(P＜0.05).[结论]10年间志贺菌群及血清型的分布有变化,对抗生素的耐药率有差别,临床用药应根据实验室报告区别对待.应密切监测志贺菌群及抗生素耐药率的变化.
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铜绿假单胞菌的临床分布情况及耐药性分析
[目的]通过对158株铜绿假单胞菌在临床标本中分布情况及耐药性分析,指导临床加强院内感染监测和合理用药.[方法]用回顾性调查方法,对近几年常规细菌培养和自动微生物分析仪分离、鉴定及药敏试验结果,进行归纳统计.[结果]铜绿假单胞菌在临床上的烧伤创面、伤口感染、胆道引流及痰、咽拭子样本中分布率较高.对部分常见抗生素完全耐药,对大部分抗生素仍有不司程度敏感性.[结论]铜绿假单胞菌是医院内感染中主要病原菌之一,常见于外科伤口感染、呼吸道感染、五官科感染等,临床及早进行细菌培养、分离、鉴定和药敏试验对指导临床合理用药是很有帮助的.
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临床分离痰标本细菌药敏分析
[目的]监测住院患者痰标本中分离的细菌和药物敏感情况,为临床合理用药提供依据.[方法]对2002年1月1日到2003年12月31日东方医院住院患者的痰标本进行分离培养,鉴定细菌,并进行药物敏感试验.[结果]2002年从痰培养标本中检测出细菌252株,其中G+总株数为50株,占20%,粪肠球菌(D群)19株,表皮葡萄球菌14株,金黄色葡萄球菌3株.G-分离总株数为202株,占80%.其中肺炎克雷伯菌68株,铜绿假单胞菌30株,鲍曼复合醋酸钙不动杆菌21株,大肠埃希菌和阴沟肠杆菌各16株.2003从痰培养标本中检测出细菌468株,其中G+89株,占19%.其中表皮葡萄球菌41株,粪肠球菌(D群)15株,金黄色葡萄球菌11株.G-总株数为379株,占81%.其中铜绿假单胞菌90株,鲍曼复合醋酸钙不动杆菌63株,肺炎克雷伯菌61株,阴沟肠杆菌38株,大肠埃希菌34株.耐药情况逐年加重.[结论]细菌耐药日趋严重,抗生素的合理应用十分必要.
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下呼吸道感染常见的革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析
革兰阴性杆菌是下呼吸道感染的主要病原菌,由于临床上对抗生素应用不断扩大和更新,细菌对其耐药性日趋严重.多种耐药菌株的并存使得临床治疗更为困难,且预后较差.为了解我院下呼吸道革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药情况,为临床呼吸道感染的治疗提供依据,降低临床病死率,我们对我院2000年10月～2003年12月间痰标本中分离出的854株革兰阴性杆菌进行分析,现将情况报告如下:
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58例肝病患者凝血酶原时间测定结果分析
[目的]更好更及时地预防和治疗不同程度肝病患者的出血.[方法]采用CA-50血凝仪对慢性肝炎及肝硬化患者进行凝血酶原时间(PT)检测.[结果]表明慢性肝炎患者PT值在正常参考范围内,而肝炎肝硬化与正常对照有显著差异(P＜0.01或P＜0.001).[结论]肝炎肝硬化的严重程度与凝血酶原时间延长呈正相关.因此为临床医生提示患者肝损伤程度及出血倾向提供一个诊疗依据.
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乙型肝炎患者及其配偶HBV血清标志物检测结果分析
为了比较分析乙型肝炎患者HBV血清标志物之间的相关性及其配偶HBV的感染情况,我们采用ELISA法和荧光PCR法对216例乙型肝炎患者及其配偶进行HBVM与HBV DNA定量及肝功能等方面的检测.
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97株不动杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及药敏分析
[目的]了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)不动杆菌的发生率及耐药特点,指导临床用药.[方法]采用双纸片协同试验和纸片确证试验检测ESBLs,用K-B法做药敏试验.[结果]97株不动杆菌ESBLs检出率为18.6%,纸片确证试验中头孢噻肟组检出的阳性株数多于头孢他啶组.产ESBLs的不动杆菌菌株对亚胺培南100%敏感,对阿米卡星、环丙沙星的耐药率较低.[结论]治疗产ESBLs不动杆菌引起的感染首选药物为亚胺培南.
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39例多发性骨髓瘤患者实验结果分析
[目的]了解多发性骨髓瘤患者一些常用检测项目的结果.[方法]采用速率散射比浊法检测单克隆免疫球蛋白,借助免疫电泳及蛋白电泳对骨髓瘤进行诊断,并对骨髓瘤并发症所对应的一些指标进行检测如血钙,血尿酸,血β2-MG,血BUN,血红蛋白浓度,血小板含量.[结果]39例多发性骨髓瘤患者的免疫电泳,血清蛋白电泳图谱有29例表现出异常图谱,39例多发性骨髓瘤患者均表现出单克隆免疫球蛋白增高,其它指标血尿酸,血β2-MG,血BUN,血红蛋白浓度与正常对照相比有显著性差异,血小板含量,血钙与正常对照相比无差异.[结论]多发性骨髓瘤患者的诊断依赖于实验室检测结果,对一些检测项目的检测有助于并发症的预防和控制.
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老年人呼吸道感染病原菌分布及药性分析
呼吸道感染是威胁老年人身体健康的主要疾病之一,老年人全身免疫功能及各脏器功能减退,呼吸道感染发病率较高.本文通过对我院2003年1月～2004年5月186名61～87岁老年患者进行痰细菌培养,以了解呼吸道感染的病原菌特点及药敏的耐药情况,给临床治疗提供一定帮助.现报告如下:
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干化学分析法初筛街头无偿献血者转氨酶结果分析
[目的]用于干化学分析法检测丙氨酸氨基转氨酶(ALT),用于街头采血的初筛,减少因ALT不合格而造成的血液报废,规范街头采血模式.[方法]应用干化学分析法和国际临床化学联合会(IFCC)推荐的速率法进行比较.[结果]干化学法测定的偏差率为2.61%,Y=2.867+0.655X,r=0.815,P＜0.001.[结论]说明两种方法的测定结果近似,可以用于街头无偿献血的初步筛查.
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血清GGT及同工酶分析对原发性肝癌的诊断价值
[目的]探讨血清γ-谷氨酰基转移酶(GGT)活性及同工酶分析对原发性肝癌的诊断价值.[方法]用垂直板不连续梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳分析原发性肝癌、良性肝病患者及正常人血清GGT同工酶.[结果]肝胆疾病患者血清GGT活性普遍升高;原发性肝癌患者血清GGT同工酶Ⅱ的阳性率为78.7%,胆石症、肝硬化、肝炎患者的GGTⅡ阳性率分别为15.4%,9.8%和6.4%,正常人为0%.[结论]血清GGTⅡ是一种肝癌特异性的同工酶形式.
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直接低密度脂蛋白与冠心病的防治关系
[目的]探讨直接低密度脂蛋白胆固醇(D-LDL-C)水平升高与冠心病(CHD)防治原则.[方法]采用液体双试剂用清除法测定80例CHD患者及60例无CHD对照者血清中D-LDL-C水平,同时还检测了血脂其它指标,如:总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等.[结果]CHD组的TC、TG水平均明显高于对照组(P＜0.05)且D-LDL-C显著高于对照组(P＜0.01).(HDL-C低于对照组).[结论]D-LDH-C是CHD发病的高危因素.它的定期检查,已成为临床诊断和治疗CHD必不缺少的指标.
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AFPmRNA检测在鉴别诊断良恶性腹水的价值
[目的]鉴别诊断良恶性腹水.[方法]采用RT-PCR技术检测腹水中是否存在肝癌细胞,其中良性腹水24例,恶性腹水32例.[结果]良性腹水AFPmRNA阳性率为8.3%(2/24),恶性腹水阳性率为92%(29/32),用AFPmRNA鉴别诊断良恶性腹水的特异性为91.6%,敏感性为90.6%.[结论]用Nested-RT-PCR检测方法鉴别良恶性腹水具有很高的特异性和敏感性,是一种灵敏、准确的检测手段.
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脑脊液免疫球蛋白和C-反应蛋白检测的意义
[目的]探讨四种颅内疾病脑脊液免疫球蛋白和C-反应蛋白的变化.[方法]采用免疫透射比浊法,检测化脓性脑炎、结核性脑炎、病毒性脑炎和脑膜性白血病脑脊液中的IgG、IgA、IgM和C-反应蛋白水平;[结果]化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、病毒性脑炎、脑膜白血病的IgG、IgA、IgM、均高于正常对照组(P＜0.01),而化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎的lgG、IrA、IgM又明显高于病毒性脑炎、脑膜白血病(P＜0.01),病毒性脑炎与脑膜白血病间无差异(P＞0.01).C反应蛋白在化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎时明显升高于正常对照(P＜0.01),病毒性脑炎、脑膜白血病的C-反应蛋白水平与正常对照无差异(P＞0.01);[结论]检测脑脊液免疫球蛋白有助于颅内感染的临床诊断,结合C-反应蛋白的检测在鉴别细菌性与非细菌性感染,指导临床用药、治疗效果观察等方面有临床意义.
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33例间日疟患者血小板值和白细胞直方图的变化
[目的]探讨间日疟疾患者血小板值和白细胞直方图的变化.[方法]用CELL-DYN 1700血细胞分析仪检测33例间日疟患者的血小板,同时推片染色油镜检查疟原虫.[结果]疟疾患者血小板Plt值为(73±33)×109/L,对照组血小板Plt值为(196±45)×109/L,两者间有显著性差异(P＜0.05),且疟疾患者白细胞直方图出现35fL以下异常高峰曲线改变,健康人组35fL以下曲线正常.[结论]门诊发热病人作血液学分析时,发现血小板计数降低、白细胞直方图出现35fL以下异常高峰曲线,在复片时要注意检查疟原虫以排除疟疾感染.
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血清葡萄糖新色原双试剂速率法消除脂浊及胆红素的干扰
[目的]建立血清葡萄糖新色原双试剂速率自动分析法.[方法]采用双试剂速率法.[结果]方法重复性:批内CV1.11%,批间CV1.29%;回收率99.8%;方法线性可达65mmol/L;本法能有效去除标本脂浊、胆红素的干扰;测定结果与GOD-POD终点法和HK法有良好的相关性;相关系数分别为0.9995,0.9997.参考范围为3.76～6.00(3.82±0.34)mmol/L.[结论]本方法准确可靠,重复性好,试剂稳定线性较宽,值得推广应用.
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一步法检测乙型肝炎病毒前S1蛋白及其临床意义
[目的]探讨乙型肝炎病毒前S1蛋白(PreS1)检测方法及在乙型病毒性肝炎中的诊断意义.[方法]采用EHISA法对156例各型乙型病毒性肝炎患者血清标志物PreS1进行了检测,同时对每个标本进行了HBV-DNA定量及乙肝三系的双盲测定.比较各组PreS1、HBV-DNA及乙肝三系.[结果]并结合临床进行分析.[结论]血清乙型肝炎病毒前S1蛋白(PreS1)测定可以作为HBV感染、复制及预后的有意义的指标.
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乙型病毒性肝炎临床治愈的实验室指标探讨
[目的]探索乙肝患者临床治疗终点及其预测指标.[方法]对70例乙肝患者进行检测,其中对50例住院患者进行追踪,观察其预后及相关实验室指标.乙肝病毒DNA(HBVDNA)的检测采用PCR-ELISA法,乙肝病毒标志物采用ELISA法.[结果]血清ALT水平在＞200U与＜=200U时的HBV DNA水平有显著性差异(P＜0.01).HBeAg阳性组和HBeAb阳性组之间的HBVDNA的阳性率有显著性差异(P＜0.01),并且pre-S1Ag、HBeAg和HBV DNA检测结果之间有良好的相关性,另外,HBeAg阳性组和HBeAb阳性组pre-S1Ag/Ab阳性率有显著性差异(P＜0.01).在发病早期,前S1抗体与前S1抗原(pre-S1Ag)同时存在于患者血清中,并且随着病情的好转期的推移,抗pre-S1逐渐转阴,抗HBs阳性率增高,同时pre-S1Ag、HBsAg和HBeAg的阳性率逐渐下降.[结论]HBV的定量检测可对药物疗效的评价和抗病毒反应的预后方面发挥作用.前S1抗原及其抗体作为一对新指标,对乙型肝炎的疗效观察、判断预后有重要意义.
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时间分辨荧光免疫分析技术在血清HCG检测中的应用
[目的]探讨TRFIA测定血清HCG结果与临床的符合程度,优越性及前景,制定TRFIA检测HCG的实验室参考值范围.[方法]分别用TRFIA和RIA检测患者组血清HCG值进行比较,并计算符合程度.另用TRFIA测定正常人组血HCG值制定参考值范围.[结果]两种方法对患者组105人的符合程度均较高,TRFIA略优,经配对资料的x2检验,无显著性差异(P＞0.05).正常人组84人x36.85IU/L,SD 7.56IU/L,95%参考值范围(上限)49.25IU/L.[结论]TRFIA具有高灵敏度、无干扰、线性范围宽、无污染等特点,方法学优于RIA,能很好适应于妇科临床诊断及疗效观察.
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乙丙肝酶免试剂盒临床应用准确性评价
[目的]采用酶联免疫方法对准备新引进的和实验室现使用的两种乙丙肝酶免试剂盒进行临床应用准确性和精密度评价.[方法]采用卫生部临检中心己明确预期阴、阳结果的乙肝两对半和丙肝抗体质控血清,进行乙丙肝酶免试剂盒临床应用准确性评价;用HBsAg不同含量定值血清进行HBsAg低检测限分析;用定值血清进行批内和批间精密度评价.[结果]待评价的乙丙肝酶免试剂盒除HBeAg和HBcAb的符合率为92%,抗-HCV的特异性为90.91%外,其余各项的灵敏度、特异性、总符合率均低于09%;HBsAg在2ng/ml含量时的阳性检出率为76.52%,但在1ng/ml和0.5ng/ml时阳性检出率均为0%;批内精密度CV在10%以上,批间精密度CV均在20%以上,HBeAb和HBcAb达到42.86%和60%.而实验室现使用的乙丙肝酶免试剂盒各项评价指标均优于待评价的试剂盒.[结论]所评价的乙丙肝酶免试剂盒其灵敏度、特异性、总符合率均较低,而HBsAg低检测限也达不到卫生部所要求的0.5ng/ml检测水平,加上重复测定精密度较差,待评价的乙丙肝酶免试剂盒无法满足临床检测要求.
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血清蛋白凝胶电泳自动化分析的应用
[目的]自制的血清蛋白凝胶板在全自动电泳系统上与进口血清蛋白电泳商品试剂盒的应用比较.[方法]采用血清蛋白凝胶电泳自动化分析法,分别对北京金桑特SH2020自动电泳分析系统、法国Sebia自动电泳分析仪、美国Helena电泳分析系统上的测定进行比较.[结果]研制的琼脂糖凝胶板在金桑特SH2020、Sebia和Helena电泳分析仪上的电泳结果三者之间均无显著性差异(均为P＞0.05).[结论]自制的凝胶板在全自动电泳系统上的血清蛋白分离结果与进口电泳材料无差异,可以用于自动电泳分析.
关键词： 血清蛋白琼脂糖凝胶板 自动电泳分析 -
血液中病毒的灭活现状与前景
血液中病毒的灭活方法研究一直是一个倍受关注的问题,发展、安全有效的杀灭血液及血液制品中病毒并且不损害其形态和功能的方法已成为输血、生物制品领域的重大研究课题.并对输血安全具有重要的现实意义.
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化学发光免疫测定方法的研究进展
化学发光免疫测定方法(Chemiluminescence immuno-assay,CLIA)重复性好、操作简便、快速、元放射性危害,临床很有价值.特异性阴断试验证明CLIA技术检测血清中抗原或抗体特异性强.敏感性试验结果表明CLIA方法检测血清中抗原或抗体的低限度为0.05ng/ml,明显高于ELISA法和RIA法.
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链球菌属的新分类与鉴定法
链球菌属中已增加至35个菌种.由于基因分型法的进步,链球菌属的分类几经改变.在分类法上,菌种的溶血性和菌体抗原的Lancefield分类仍居重要地位.现β溶血链球菌内有14个种和亚种,非β溶血链球菌有9种.原马链球菌与牛链球菌实为1个种.绿色链球菌内有6个群,26种.原营养变异链球菌现为乏养菌和粒座菌.尚有少见的链球菌和革兰阳性链状球菌.本文综合了各菌种的临床意义和鉴定要点.
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基质金属蛋白酶(MMP)在肿瘤进程中的标记作用
系统了解间质胶原酶在肿瘤侵袭和转移中的作用,促进其深入研究及发展.综述近几年国内外对MMP在肿瘤进程中的作用机制,重要性及其相应的应用前景的研究情况.目前对间质胶原酶的研究还处于实验及探索阶段.MMPs可以作为肿瘤进程的标志.
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难辩梭菌性肠炎检验诊断的进展和问题
难辩梭菌是医院感染的重要腹泻病原菌,可致成致死性肠炎.此种感染的实验诊断以检查粪便中的毒素A,B为可靠.现已有多种快速检查毒素或难辩梭菌共同抗原GDH的检测卡.本文介绍此类诊断用品的性能及其不足.当前难辩梭菌性肠炎的实验诊断的主要困难是毒素A-B+菌株,产CDT菌株和毒素及共同抗原的交叉反应问题.
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慢性混合性细菌性结膜炎一例
1病例摘要患者,男70岁,农民.主诉右眼分泌物多,视疲劳,发痒,异物感,偶有疼痛,历时四年.经查,右眼结膜中度充血,内眦部结膜中度肿胀.
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临床实验室定量检测项目应选择自己的室内质控方法
[目的]对临床实验室定量检测项目选择自己的室内质控方法[方法]设计的质量控制方法应与每一分析系统的准确度、精密度和误差发生率相匹配.不同的质控规则将检出不同的大小和不同类型的误差.通过增加检测质控物个数来改进误差检出.根据性能的质量控制设计系统能使我们改变质控规则、质控物个数、质控的频率和其它的质控策略来匹配当前的分析性能和误差发生率.[结果]高的临界系统误差表明方法能耐受大的均值偏移和要求相对地宽松的质量控制策略.低的临界系统误差表明方法能耐受均值小的偏移,并要求相对严格的质量控制策略.[结论]质量控制设计表为质控规则、控制频率(或质控物个数)、检查质控图的频率,以及需要纠正措施提供了建议.
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SYBR GreenⅠ熔链曲线分析检测醛糖还原酶C(-106)T单核苷酸多态性
[目的]建立一种单核苷酸多态性检测方法.[方法]用序列特异性引物和荧光染料SYBR Green Ⅰ聚合酶链式反应(PCR)方法结合熔链曲线分析,对醛糖还原酶C(-106)T单核苷酸多态性进行检测和分型.[结果]3例经检测为C/C、C/T和T/T基因型通过测序得到证实.[结论]SYBR GreenⅠ PCR熔链曲线分析操作简便,结果准确,可作为单核苷酸多态性检测新方法.
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Sysmex XE-2100与Abbott Cell-Dyn 3700血液分析仪测定结果的比较
[目的]比较Sysmex XE-2100血液分析仪与Abbott Cell-Dyn3700血液分析仪两者的测定结果并作出评价.[方法]分别用Sysmex XE-2100血液分析仪与Abbott Cell-Dyn 3700血液分析仪同时测定136例住院病人静脉血标本,并将两者测定结果比较,然后将90例标本与显微镜白细胞分类结果进行相关性分析.38份经镜检确认含NRBC的标本,同时用XE-2100与CellDyn3700进行测定,观察两者的测定结果.[结果]Sysmex XE-2100与AbbottCell-Dyn 3700血液分析仪的测定结果相关性良好;在NRBC方面,Sysmex XE-2100的假阴性率比Abbott Cell-Dyn 3700为低;两者白细胞分类结果与显微镜计数结果相关性都良好,Sysmex XE-2100中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞相关系数(r)为0.9859,0.9775,0.8053,0.8695,0.5243(P＜0.01);AbbottCell-Dyn 3700的r分别为0.9798,0.9750,0.8052,0.6531,0.3568(P＜0.01).[结论]SysmgxXE-2100血液分析仪和Abbott Cell-Dyn 3700血液分析仪是较为理想的血液分析仪,可以满足不同常规实验室的不同需要.
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条码技术与检验医学
1条码技术在检验医学中的应用概况条码技术是在计算机应用实践中产生和发展起来的,并由美国的Norm Woodland和Bernard Silver于1949年提出的一种自动识别技术.随着条码技术所需设备的不断改进以及价格变得低廉,现已广泛应用在商业、银行、邮政、图书管理、仓储、血库、工业生产过程控制和交通等领域[1-3].
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计算机网络化、信息化在检验医学中的应用
医院的信息化,是当前传统行业信息化变革潮流中的重要组成部分.无论是突发事件(如非典疫情等)给医院管理和业务流程带来的挑战,还是人们对医疗服务的普遍性要求,都对医院通过信息化改造医院的传统管理和运作模式及就医服务质量的提高提出了迫切的要求.21世纪初的中国,正朝着全面建设小康社会的目标迈进,注重生活质量,关心人本,成为人心所向的主流观念.相应的,为人们提供高效健全的医疗服务网络和高品质的医疗服务,成为社会进步的重要标志.因此医院的信息化日益成为社会各界关注的焦点.
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从慢性腹泻患者分离出斯氏弓形菌
弓形菌属通常包括4个种,2个种(嗜低温弓形菌和布氏弓形菌)已经证实与人疾病有关,它们主要是从腹泻和菌血症患者分离的.Arcobacter nitrofigilis已经牵扯到盐沼地植物的根茎,Spartina altemniflora.第4种斯氏弓形菌已经从腹泻的羔羊、流产的猪、羊和牛的胎儿及雄牛的包皮中分离出来.至目前为止,这个种的细菌尚未见从人的临床标本中分离出来的报道.我们在此报道比利时一斯氏弓形菌病例,其为上了年纪的腹泻患者.
