首页 > 文献资料
-
JAK2/STAT3通路对糖尿病心肌病的调节作用
目的：选取不同时期的2型糖尿病心肌病大鼠和同时期普通大鼠作对比，观察JAK2/STAT3通路在2型糖尿病心肌病中的动态演变。
方法：选取5周龄SD雄性大鼠70只，行腹腔胰岛素耐量试验（IPITT），适应喂养1W后，随机分为普通饮食组（对照组）30只和糖尿病组（DM组）40只，后者给予高脂饮食喂养，各组按照不同的处死时间点分别继续分为1、4、9、14、21周组。按照高脂饮食4 W联合一次小剂量STZ腹腔注射的方式建立2型糖尿病模型。各组大鼠处死前行超声心动图检查，检测观察左室舒张末内径（LVEDd）、左室射血分数（LVEF）、室间隔厚度（IVSd）、舒张期末左室后壁厚度（LVPWd）二尖瓣E/A及E’/A’等指标；行心导管检测，评估左室舒张末压（LVEDP）。经腹主动脉取血检测血糖、血脂、BNP。提取心肌组织蛋白行蛋白免疫印迹检测STAT3（Tyr705）和JAK2磷酸化程度，活化caspase3、Bcl-2、Bax的表达情况。进行H&E、Masson及天狼星红染色，以及免疫组化检测Ⅰ型、Ⅲ型胶原及TUNEL法检测细胞凋亡等形态学实验。 -
双氢青蒿素对实验性小鼠肝纤维化的抑制作用
目的：探讨双氢青蒿素对胆总管结扎引起的小鼠肝纤维化的抑制作用及其作用机制。方法50只C57 BL-6小鼠随机分为假手术组（ n ＝10）、模型组（ n ＝20）和治疗组（ n ＝20）。模型组：采用胆总管结扎的方法建立小鼠肝纤维化模型；治疗组：在胆总管结扎术后第3周开始以20μg／g的双氢青蒿素灌胃，1次／d，共12次。假手术组：只是分离出胆总管，置线不结扎并缝合腹腔后第3周开始以等剂量的DMSO 0．9％氯化钠溶液灌胃，1次／d，共12次。3组的肝组织切片经HE和天狼猩红染色法观察其组织学病理变化；Western blot方法检测Ⅰ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）蛋白的表达水平。结果经HE和天狼星红染色法结果证实小鼠肝纤维化动物模型的成功建立。模型组小鼠肝内出现灶状坏死，汇管区纤维组织和胆总管明显增生，肝组织中Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA含量增加，与假手术组相比其差异有统计学意义（ P ＜0．05）。治疗组经过双氢青蒿素治疗后，小鼠肝内纤维组织增生降低，肝组织中Ⅰ型胶原蛋白和α-SMA含量降低，与模型组比较差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论双氢青蒿素具有抗肝组织纤维化作用，提示可作为一种新型抗肝组织纤维化药物。
-
运动训练能够抑制异丙基肾上腺素诱导的心脏炎症反应
目的：明确运动训练能否抑制β－肾上腺素受体激动剂异丙基肾上腺素（ isoprenaline，ISO）诱导的小鼠心脏炎症反应。方法：将成年C57雄性小鼠分为10组（n＝6），分别为安静对照组、安静给ISO 1 h组、24 h组、3 d组和7 d组、跑步训练对照组、跑步训练给ISO 1 h组、24 h组、3 d组和7 d组。 ISO组均为给予ISO 5 mg／kg皮下注射，跑步训练组为应用小鼠跑步机训练6周，速度12 cm／s，时程90 min，每周运动5天。应用超声心动图、心重胫骨长度比、HE染色、天狼星红染色、免疫组织化学染色、ELISA和Western blot等方法，观察心脏中炎症因子表达水平及炎症反应的变化情况。结果：（1）小鼠呼吸代谢系统测得跑步状态下75％大氧耗量对应速度为12 cm／s，ISO对小鼠氧耗量没有影响。（2）跑步训练给ISO 1 h组及24 h组与安静给ISO 1 h组及24 h组相比，IL－18和IL－6蛋白含量均显著降低（ P＜0．05）；跑步训练给ISO 3 d组与安静给ISO 3 d组相比IL－18和IL－16蛋白水平均明显降低的同时，IL－1β蛋白水平亦明显降低（ P＜0．01）；跑步训练给ISO 7 d组与安静给ISO 7 d组相比， IL－18、IL－1β和IL－6蛋白水平均明显降低，而且TNF－α也明显降低（P＜0．05）。（3）在给予ISO 24 h后，跑步训练组与安静组相比心脏TGF－β1蛋白水平即明显降低（ P＜0．01）；跑步训练给ISO 3 d组与安静给ISO 3 d组相比，心脏切片免疫组化Mac－3染色显示巨噬细胞浸润面积明显减少（P＜0．01），同时心脏TGF－β1蛋白水平明显降低（P＜0．05）。（4）跑步训练给ISO 7 d组和安静给ISO 7 d组相比心脏纤维化面积明显减少（P＜0．05），心脏组织中羟脯氨酸含量明显降低（P＜0．01），I型胶原产生明显减少（P＜0．05）。结论：运动训练能够抑制ISO诱导的小鼠心脏炎症反应。
-
6种活血中药及芎芍胶囊对ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块胶原沉积及其代谢的影响
目的:探讨6种常用活血中药及芎芍胶囊对于ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样斑块胶原沉积及其代谢的影响.方法:6-8周龄ApoE基因缺陷鼠100只,雌雄各半,体重18-20g.基础饲料喂养6-8周后,改为"西方膳食类"饲料(含脂肪21%(wt/wt)、胆固醇0.15%(wt/wt))继续喂养13周,随机分成9组:模型组、对照组(辛伐他汀)、丹参组、赤芍组、川芎组、三七组、酒大黄组、桃仁组、和芎芍胶囊组,灌胃给药13周.无菌条件下取出心脏和主动脉,10%甲醛固定,脱水,常规石蜡包埋切片.苦味酸-天狼星红染色,在偏振光下,观察Ⅰ、Ⅲ型胶原;免疫组化染色检测主动脉根部动脉粥样斑块及周围血管壁MMP-1、TIMP-1,利用IPP图像分析软件计算Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化.IPP图像分析软件计算表达阳性面积及阳性面积占总面积比.
-
IGF－1对糖尿病大鼠肝纤维化的作用及其机制
目的：探讨胰岛素样生长因子1（insulin－like growth factor－1，IGF－1）对糖尿病大鼠肝纤维化的作用。方法：腹腔注射链脲佐菌素（ STZ）制备糖尿病大鼠模型，实验分为正常对照组、模型组和IGF－1治疗组。造模第10周行腹腔注射IGF－1（1500 ng／kg）治疗2周，第12周后测定血糖、血清AST、ALT、透明质酸等；采用HE、Masson和天狼星红染色观察肝损伤和纤维化程度，免疫组织化学和Western bolt法分别检测肝组织中α－SMA和GRP78的表达。结果：IGF－1治疗组与糖尿病组相比肝功能明显改善，且透明质酸和胶原纤维表达显著减少；糖尿病组肝组织α－SMA高表达，但是IGF－1治疗组α－SMA和GRP78的表达量较糖尿病组明显降低。结论：IGF－1对糖尿病大鼠纤维化肝脏具有保护作用，其机制与抑制肝星状细胞的活化和肝细胞内质网应激有关。
-
苦味酸-天狼星红染色观测脱细胞真皮基质胶原亚型的变化
目的:研究脱细胞真皮基质异体移植后不同时期胶原亚型的变化.方法:移植脱细胞真皮基质于大鼠背部皮肌下,分别于术后1、2、3、4、8、16、24周切取标本,切片常规HE染色,并行苦味酸-天狼星红染色分析Ⅰ/Ⅲ型胶原比例.结果:HE染色,2周,成纤维细胞(FB)增多,新生胶原增加;4周,见不到典型的FB;8周,胶原纤维排列平行.苦味酸-天狼星红染色,偏振光显微镜下见脱细胞真皮基质胶原支架具有明显的层次感.0点、1、2、3、4、8、16、24周Ⅰ/Ⅲ型胶原比例分别为2.88±0.15、2.81±0.27、2.22±0.28、1.96±0.17、1.85±0.23、2.02±0.22、2.43±0.27、2.73±0.25(F=16.84).2、3、4和8周数值与0点相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:苦味酸-天狼星红染色可观测脱细胞真皮基质胶原亚型动态变化;脱细胞真皮基质胶原亚型不同时期呈现规律性升降.
-
骨延长区组织愈合过程中胶原变化的偏光显微镜观察
目的观察骨延长区骨组织修复过程中胶原变化特点及规律. 方法健康新西兰白兔27只,制成左胫骨中段骨延长模型,于术后第5天以1.5 mm/d延长,共延长14 d.于延长结束时,延长结束后7、14、21、30、40、50、60和70 d分批处死动物,取材(n=3).石蜡包埋切片,饱和苦味酸天狼星红染色,偏光显微镜观察新骨组织的胶原变化. 结果延长区胶原变化主要有以下特点:①在延长结束时及延长结束后的早期纤维组织中,除Ⅲ型胶原外,还含有大量Ⅰ型胶原;②在软骨组织中有Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原;③假性生长板中存在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原;④骨延长区新骨再生与修复的后期Ⅰ型胶原占绝对优势. 结论骨延长区的骨组织修复是在牵张应力下进行的,其胶原变化显示出与骨折愈合不同的特点;饱和苦味酸天狼星红染色后,在偏光显微镜下可清晰地区分Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型胶原,为研究骨组织修复过程中胶原变化的分型提供了新的方法.
-
还原型辅酶Ⅱ氧化酶2（Nox2）介导缺血/再灌注损伤
缺血/再灌注损伤（IRI）和活性氧的生成可引发移植物功能延迟恢复（DGF），我们推测还原型辅酶Ⅱ氧化酶2（Nox2）在此过程中起重要作用。我们用野生型和Nox2（-/-）小鼠IRI模型和具有DGF的患者体外验证这个假设。在缺氧条件下，Nox2（-/-）小鼠的近端小管上皮细胞减少了基质金属蛋白酶-2（MMP2）、波形蛋白和热休克蛋白27（HSP27）的表达。两组小鼠IRI后4周和6月的血尿素氮和肌酐水平均显著增加，提示急慢性肾功能损伤的进展。在第4周，Nox2（-/-）小鼠肾纤维化（a平滑肌肌动蛋白，天狼星红染色）和氧化应激（二氢乙锭，羟基壬烯醛）显著地减少，证实Nox2的氧化和促纤维化作用。运用基因组学分析IRI的分子学特征，结果表明Nox2（-/-）小鼠缺氧反应、氧化应激、纤维化和炎症反应显著减弱。移植前的供肾组织活检免疫组化分析显示，肾移植术后发生肾功能延迟恢复的患者比未发生肾功能延迟恢复的患者明显有更高的Nox2水平和更严重的血管损伤。这些研究表明，Nox2介导了IRI的形成，并且Nox2水平越低，相应的炎症反应、氧化应激以及纤维化程度越轻。
