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Daudi细胞系特异性Fab噬菌体抗体库的构建、筛选及鉴定
本研究以人B细胞淋巴瘤Daudi细胞免疫的小鼠脾淋巴细胞RNA出发,用基因克隆技术将B细胞全套κ轻链和重链Fd片段基因克隆出来,组装到表达载体pComb3H-SS内并表达到噬菌体表面,构建出Daudi细胞系特异性Fab噬菌体抗体库.以Daudi细胞为抗原对抗体库筛选后,获得针对B细胞淋巴瘤Daudi细胞系膜抗原的抗体.
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硼替佐米导致多发性骨髓瘤患者急性肾损伤一例
患者女,48岁,以双下肢浮肿3个月,于2010年8月3日入我院肾内科.经检查发现贫血,本-周蛋白(+),怀疑多发性骨髓瘤转入血液科.查体:中度贫血貌,皮肤无黄染及出血点,舌肥大,胸骨无压痛,心、肺未见明显异常,肝脾肋下未及,双下肢浮肿.血常规检查:WBC 4.43×109/L,Hb 82 g/L,PLT 165.4×109/L.尿蛋白(+),血肌酐36 μmol/L(正常参考值35~106 μmol/L),血尿素氮5.9 mmol/L(正常参考值2.1~7.1 mmol/L).IgG 346 mg/dl(正常参考值700~1600 mg/dl),IgA 448 mg/dl(正常参考值70~453 mg/dl),IgM<17.3 mg/dl(正常参考值40~304 mg/dl).血κ轻链0.6 g/L(正常参考值1.7~3.7 g/L),血λ轻链1.66 g/L(正常参考值0.9~2.1 g/L),血κ/λ比值0.36(正常参考值1.35~2.65),尿κ轻链<6.97 mg/L(正常参考值0~8 mg/L),尿λ轻链924 mg/L(正常参考值0~5 mg/L).
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免疫球蛋白在小鼠心肌组织中的表达及其在心肌纤维化组织中的定位
目的 研究免疫球蛋白(Ig)M在小鼠心肌组织中的表达及其在正常小鼠和心肌纤维化小鼠心肌组织中的定位.方法 将C57BL/10小鼠分成3组:正常组、假手术组和实验组(各4只).对实验组小鼠进行埋泵并灌注血管紧张素Ⅱ,对假手术组小鼠进行埋泵并灌注生理盐水,正常组不处理.灌注14 d后,处死小鼠,应用Western Blot和免疫组织化学法检测IgM的表达.结果 在正常小鼠心肌组织和纤维化心肌组织中均检测到IgM蛋白水平的表达.与正常心肌组织对比,心肌纤维化区域的IgM阳性反应减弱,而周围正常心肌组织中IgM阳性反应则加强.结论 心肌细胞内有IgM分子的表达,并且其表达与心肌纤维化相关.
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原发性巨球蛋白血症转化为急性淋巴细胞白血病一例
患者男,55岁.因双下肢水肿1年,发热、头晕、皮肤瘙痒1个月余,于2003年12月19日入院.患者于2002年11月开始无明显诱因出现双下肢水肿,在当地医院检查Ig:IgM 33.5 g/L.B超检查提示肝脾肿大.血象正常.患者1个月后复查IgM 40.1 g/L,骨髓穿刺涂片见淋巴细胞样浆细胞占0.41,当地医院诊断为原发性巨球蛋白血症(WM),给予活血化淤等治疗,效果不佳.患者于2003年2月,就诊上海某医院,血清免疫电泳检测单克隆κ轻链阳性,诊断WM.
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尿κ轻链早期诊断糖尿病肾病的价值初探
目的探讨尿κ轻链(KLC)在早期糖尿病肾病(DN)中的变化及其临床诊断价值. 方法分别以散射比浊法和放射免疫法测定123例2型糖尿病患者尿KLC和尿白蛋白排泄率(UAER). 结果 2型糖尿病组尿KLC高于对照组(P<0.001).糖尿病微量白蛋白尿组尿KLC高于糖尿病正常白蛋白尿组及对照组(P<0.01).早期糖尿病肾病患者大部分同时存在尿KLC和UAER的升高.尿KLC和UAER两种方法诊断早期糖尿病肾病有非常显著关联性,且诊断结果无差别.在9.91 mg/dl水平,尿KLC诊断早期DN有较高的特异性. 结论尿KLC为诊断早期糖尿病肾病肾小管病变指标,因与UAER存在分离现象,和UAER联检可更好地早期诊断和监测糖尿病肾病,建议尿KLC≥9.91 mg/dl为诊断早期糖尿病肾病的界限值.
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多发性骨髓瘤合并NK/T细胞淋巴瘤一例
患者,女,52岁,主因"乏力7个月,加重伴左侧肩胛骨疼痛1个月"于2007年8月7日就诊于中国医学科学院血液病医院.血常规检查:WBC 4.7×10~9/L,Hb 50 g/L,BPC 121× 10~9/L.肾功能:尿素氮15.6 mmol/L,肌酐389 μmol/L,β_2微球蛋白5.8 mg/L;血钙正常,乳酸脱氢酶,白蛋白,免疫球蛋白IgG、IgA、IgM正常;血清免疫固定电泳可见异常κ轻链带,血清及尿轻链定量示κ轻链均增高;X线检查示左侧肩胛骨多发溶骨性骨破坏;髂骨骨髓涂片:增生减低,浆细胞占0.190,可见双核、多核浆细胞.
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以肌肉淀粉样变性为突出表现的多发性骨髓瘤二例
例1,女,60岁。入院9个月前无任何诱因渐出现颌下组织弥漫性增厚、变硬,局部隆起呈肿物样,约2.0 cm×2.0 cm,无充血或疼痛。4个月后肿物明显增大,作活检,病理为脂肪、肌肉组织,后者呈变性改变,经抗炎治疗,肿物无缩小,仍缓慢生长。同时渐出现张口困难,舌体变硬,至入院前1个月,只能吞咽少量全流食物,日尿量约1?000?ml。于1998年2月12日入我院。既往慢性肾盂肾炎、慢性肾功能不全(BUN 8.0~15.0 mmol/L)病史1年半。查体:极度消瘦,神志清晰,语言不清,浅表淋巴结无肿大,重度贫血貌,巩膜无黄染,张口困难,舌体增大,质硬,不能伸吞。颈部舌骨上区弥漫性肿胀,局部肿物4.5?cm×4.5?cm,表面皮肤无异常,质硬,无压痛。心肺无异常。腹部呈舟状,腹壁硬,触诊不满意。双下肢无水肿。四肢肌肉萎缩,质软。双侧膝腱反射减弱。实验室及辅助检查:RBC 2.1×1012/L,Hb 59 g/L,白细胞、血小板正常。尿常规:WBC 5~8/HP,RBC 5~8/HP、蛋白(+)、相对密度<1.005。尿本周蛋白(+),BUN 18.3 mmol/L, CRE 387 mmol/L,二氧化碳结合力14.5 mmol/L,便潜血(++)。血、尿免疫电泳κ轻链阳性,肝功能、心肌酶学正常,骨髓增生活跃,浆细胞0.800,其中幼稚浆细胞占0.050,胞体较大,浆量丰富,余为成熟浆细胞,红、粒、巨三系受抑。心电图示广泛心肌缺血。彩超结果为口底部肌肉组织增厚,心脏室间隔与左室后壁略增厚,搏动减弱,腹壁增厚,双肾缩小,肝、脾无肿大。头颅、脊柱及髂骨X线片可见轻度溶骨性改变。颌下肿物活检病理为肌纤维细胞肌浆凝聚,刚果红染色阳性。临床诊断:多发性骨髓瘤(MM)κ轻链型、骨髓瘤性肾病、系统性淀粉样变性。治疗经过:经用小剂量白消安每日2 mg ×7 d、干扰素300万单位隔日1次×20 d及积极改善肾功能、支持、对症治疗后病情无好转。住院期间曾多次心绞痛发作,扩冠药物治疗无明显好转,于住院第20天出现无尿、柏油样便,BUN 27.1 mmol/L,2 d后血压下降,休克,抢救无效死亡。
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κ轻链在局部免疫应答中起重要作用
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自身免疫病伴M蛋白病5例
[例1] 患者男,46岁.患银屑病20年,于1989年10月住院治疗,住院期间发现尿蛋白+ +++,进一步检查发现本周蛋白阳性,骨髓穿刺示幼浆细胞占有核细胞(去红系)15.6%,浆细胞占5%,且伴形态异常.X线摄片示右第九、十肋骨上各有一指甲大小溶骨性损害.血、尿M 蛋白鉴定:游离κ轻链型M蛋白.诊断:1. 银屑病;2. 多发性骨髓瘤(MM),κ轻链型.
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结节性肺淀粉样变PET/CT显像二例
病例1 患者男,66岁,汉族,因“胸闷、气短、乏力伴双下肢肿1周”入院.血清蛋白电泳提示:IgG伴游离轻链型M蛋白血症.血清免疫固定电泳:γ区出现M条带,血β2-微球蛋白760[正常参考值(以下括号中同)3.2~6.5] mg/L,尿κ轻链8.8(0 ~7.1) mg/L,尿L轻链394 (0~ 3.9) mg/L,尿本周蛋白(+).肝功能、肾功能及肿瘤标志物出现异常.肝功能:总胆红素53.1(5.0 ~28.0)μmoL/L,直接胆红素40.6(0 ~7.0) μmol/L;肾功能:血尿素8.81(1.8 ~7.1) μmol/L,SCr 145(53~106) μmol/L,尿酸430.4( 150~420) μmol/L;肿瘤标志物:铁蛋白1952(16.4~323.0) g/L、CA-125 261.7(<35) kU/L,CEA 18.75(<5) g/L,CA19-9 41(0~35) kU/L.
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多发性骨髓瘤髓外浆细胞瘤一例
患者男,36岁,于2001年5月无明显诱因出现消瘦、乏力,伴午后低热、盗汗,体温高达38℃,至同年10月体重减轻20余斤,外院B超检查示:脾厚55mm,长径正常,下腔静脉后外侧见58mm×22mm实质性占位;腹部CT示:腹主动脉、下腔静脉及胰头周围淋巴结肿大,脾肿大;骨髓细胞学检查示:浆细胞占20%,伴核畸形;血清蛋白电泳示:IgA单株峰,M峰量25.3%,血清总蛋白70g/L,白蛋白/球蛋白0.45,IgG22.8g/L,IgA30g/L,IgM0.57g/L,κ轻链35.5g/L,λ轻链6.43g/L,尿中检出游离κ轻链;全身扁骨X线摄片示:头颅穹隆骨见多个小圆形穿凿样骨质缺损区,确诊为"多发性骨髓瘤(IgA,κ轻链型)".
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核转录因子κB与肾肿瘤
核转录因子κB(nuclear facter of kappa B,NF-κB)作为一种分布广泛的真核细胞转录因子,能与B细胞免疫球蛋白轻链基因的增强子κB序列特异性结合,参与调控多种与细胞凋亡、肿瘤形成和转移有关的基因表达.近年,NF-κB在肾肿瘤发生、发展、治疗中的作用及其机制逐渐成为医学研究的热点.NF-κB初是由Sen等从B细胞的核抽提物中发现的一种核蛋白因子,能与免疫球蛋白κ轻链基因增强子的B位点(GGGACTTCC)结合,调控κ轻链的转录.近年发现它是一种分布和作用均十分广泛的转录因子,不仅存在于B细胞,也存在于T细胞、非淋巴细胞、Hela细胞等多种细胞,能与多种基因的启动子和增强子发生特异性结合,促进相关基因的转录和表达,参与免疫应激、炎症反应、细胞增殖和凋亡等过程.现对NF-κB的信号转导机制及其与肾肿瘤的关系作一综述.
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多发性骨髓瘤本周氏蛋白检测及其临床意义
目的 探讨尿本周氏蛋白电泳、血清本周氏蛋白电泳、血清免疫固定电泳、血清和尿液轻链定量及其比值在多发性骨髓瘤(MM)患者中的临床意义.方法 33例尿本周氏蛋白电泳阳性的多发性骨髓瘤患者血、尿标本分别用血清蛋白电泳、血清本周氏蛋白电泳、血清免疫固定电泳进行检测并分析四种电泳结果 ,同时利用散射免疫比浊法测定患者血清免疫球蛋白浓度及尿液中蛋白及κ、λ轻链的浓度,并计算κ/λ比值.通过与100例非MM病人血、尿检测结果对照,结合电泳结果评价本周氏蛋白检测在MM临床诊断中的意义.结果血清本周氏蛋白电泳结合血清免疫固定电泳可进一步提高MM筛查的阳性率及分型的准确性.尿液和血液中κ、λ的浓度,κ/λ值与对照组相比较,具有显著的统计学差异(P<0.01).结论 尿液κ/λ的比值对尿蛋白阳性病人的本周氏蛋白检出有一定的意义,在用于MM的筛查方面值得进一步探讨.
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35例多发性骨髓瘤患者血清轻链检测及结果分析
目的评价检测多发性骨髓瘤(MM)患者血清轻链含量及其比值的临床意义.方法用速率散射比浊法测定35例MM病人血清中轻链κ、λ含量,并计算κ/λ值.结果骨髓瘤多为κ或λ含量高于或低于甚至等于正常值,但κ/λ值异常.结论轻链蛋白是MM患者肾功能损害的重要致病因素,测定血清或尿液中的轻链含量并计算κ/λ值是诊断MM及判断其预后的重要指标.
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银屑病相关IgA肾病并发肾脏淀粉样变一例
我科收治1例银屑病相关IgA肾病并发肾脏淀粉样变患者,报告如下.患者男,48岁,因水肿3个月,加重1周于2010年9月入院.患银屑病20余年,未系统治疗.查体:颜面水肿,舌体稍大,躯干、四肢薄膜现象及Auspitz征阳性,腹部膨隆,移动性浊音阳性,双下肢水肿.实验室检查:尿蛋白3+,尿蛋白量8.81 g/d,尿κ轻链103.2 mg/d,λ轻链492 mg/d,血总蛋白28.6 g/L,白蛋白10.7 g/L,球蛋白17.9 g/L,BUN 7.59 mmol/L,Scr 87.5 μmol/L,三酰甘油2.1 mmol/L,胆固醇9.78 mmol/L.
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轻链比值和免疫球蛋白含量测定在诊断轻链病中的重要意义
用速率散射比浊测定26例轻链病(Light Chain Disease,LcD)血清、尿液中IgG、A、M和轻链κ、λ含量并计算重链/轻链比值和κ/λ比值.结果表明:血清IgG含量均明显低于正常对照(P<0.01);血清κ或λ含量高于或等于正常对照,但κ/λ比值异常,轻链蛋白总和大于重链蛋白总和;尿液中异常升高的κ或λ轻链含量高于血清同一轻链水平(P<0.01);LcD以λ型多于κ型,λ型血清和尿液中κ/λ比值明显小于1,而κ型血清和尿液中κ/λ比值明显大于2.轻链蛋白是LCD患者肾功能损害的重要致病因素,测定血清、尿液Ig和轻链含量并计算κ/λ比值是诊断LCD和判断预后的重要依据.
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扩增鼠源性mAb和人源性抗体κ轻链基因中引物的作用
目的比较扩增鼠源性mAb和人源性抗体Vκ基因中引物的作用.方法从5株抗HFRS病毒鼠源性mAb杂交瘤细胞系和人PBL中提取细胞总RNA.逆转录后,用不同的引物进行PCR扩增,克隆后测定核苷酸序列并比较不同引物的作用.结果 5株mAb杂交瘤细胞的Vκ基因及人源性抗体的Vκ基因,需采用不同的引物组合才可得到.结论 5'端引物在PCR扩增抗体Vκ基因中起重要作用.
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富含类Auer小体不分泌κ轻链型浆细胞骨髓瘤1例
1 概述 浆细胞骨髓瘤(plasma cell myeloma,PCM)习惯称为多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM).WHO造血和淋巴组织肿瘤分类中采用浆细胞骨髓瘤,这一称谓比较符合该肿瘤的本质和特性.
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以颅骨侵犯为首发表现的κ轻链型多发性骨髓瘤1例报告
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是以骨髓中单克隆浆细胞恶性增殖为特征,分泌大量的单克隆免疫球蛋白和(或)其多肽链亚片段(即M蛋白),进而导致相关器官或组织损伤的恶性肿瘤.MM在我国的发病率约占血液系统恶性肿瘤的10%,是第二位血液系统常见的肿瘤[1,2].且近年来发病呈现上升趋势,其发病高峰年龄为50~60岁,男女比为3∶2.目前其病因、发病机制尚未完全明确,根据临床观察与研究,可能与电离辐射、慢性抗原刺激、病毒感染、基因突变、遗传因素等相关.MM在生物学及临床上都具有明显异质性,故其疗效及预后差异很大.一般进展性MM患者自然病程约6个月,常规化疗患者的中位生存期为3年,新药及干细胞移植后可延长至5年左右.根据多项研究表明,流式细胞术可较准确地区分正常和异常的浆细胞群,从而对MM的诊断及预后有重要的指导意义[3,4].MM多以骨痛、肾功能损害为首发表现,以颅骨侵犯为首发临床表现的MM临床罕见.近期我科收治一例以颅骨侵犯为首发表现的多发性骨髓瘤患者,现报告如下.
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中枢神经系统浸润多发性骨髓瘤一例并文献复习
目的 探讨中枢神经系统(CNS)浸润的多发性骨髓瘤(MM)的临床特征、诊断及效果.方法 报道1例CNS浸润的MM,并对其发病机制、临床特点、诊断、治疗等进行文献复习.结果 CNS浸润的MM发病率低,MM一旦出现CNS浸润其临床特点无明显特异性,诊断有赖于病理活组织检查,无标准治疗方案.结论 发生CNS浸润的MM发病率低,预后不良.