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小粒径磁共振成像超敏感纳米对比剂的研制及初步动物实验
目的 制备一种小粒径磁共振成像(MRI)超敏感的纳米对比剂并进行初步动物实验,探讨其用于分子影像学研究的可行性.方法 利用聚乙二醇(PEG)引发ε-己内酯(CL)开环聚合与自组装技术制备嵌段聚合物PEG-b-PCL,在其疏水性内核负载单颗粒超顺磁性氧化铁(SPIO)制成纳米对比剂.应用透射电子显微镜测量该纳米对比剂的粒径,原子吸收法测量其SPIO负载率,多平面回波SE序列测量T2值并计算横向弛豫率R2,同时对其进行磁学性质测量.将纳米对比剂由鼠尾静脉注射入Balb/c裸鼠体内,利用MRI于注射前、注射后1、3、6、12、24 h共6个时间点进行扫描,观察其在裸鼠体内的分布特点及循环时间.结果 制备的纳米对比剂粒径为(38±3)am,Fe3O4含量为37.0％,横向弛豫率R2为110 Fe(mmol/L)-1·s-1;磁学性质测定结果表明其具有超顺磁性.经外周静脉注射后,主要分布于肝脏,且循环时间长,与注射前相比,1 h信号强度明显降低(498±60比120±32,P＜0.05),至24 h降低至88+28(P＜0.05).结论 负载单颗粒SPIO的聚合物纳米对比剂粒径小、MRI超敏感,具有成为MRI对比剂并用于分子靶向成像的潜能.
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脉冲电场对聚己内酯组织工程血管支架上细胞黏附的影响
目的 检测在一定水平的脉冲电场刺激的作用下,细胞在支架上的黏附、生长情况,并与传统静态细胞培养下的细胞作比较,从而探究脉冲电场刺激对细胞的生长率、黏附率所产生的影响.方法 构建聚己内酯(PCL)纳米纤维支架,将人内皮祖细胞接种于已缝有PCL的电刺激反应器上,按照0V、1V、2V、4V的电压分组,分别反应1h、2h,采用HE切片、电镜、MTT等方法,观察细胞在PCL上的黏附情况及细胞活力.结果 通过脉冲电场刺激的方法,细胞黏附效率得以进一步提高,与传统静态培养下的细胞相比,经过脉冲电场刺激的细胞更易在PCL支架表面黏附与生长,而50 Hz,2V/cm的条件即是诱导细胞黏附的佳环境条件.结论 脉冲电场刺激的应用在组织工程学方面具备良好的发展潜力.
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金纳米粒子生物毒性的研究进展
金纳米材料(gold nanoparticles,GNPs)是稳定的贵金属纳米材料之一,纳米级别的金纳米材料具有宏观金粒子所不具备的物理性质,如量子效应、小尺寸效应、表面效应、光学效应等.金纳米材料的形式表现多种多样,如球形、星形、棒状、壳状等,在免疫检测、细胞成像、光热治疗、放疗增敏等生物医学领域具有广阔的应用前景[1-3].然而,由于纳米材料与常规物质的理化性质不同,其生物安全性越来越受到重视.
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纳米粒介导ROCK-Ⅱ-siRNA基因治疗阿尔茨海默病的体内研究
目的 探讨海马内注射PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA纳米复合物对阿尔茨海默病模型小鼠(SAMP8)学习、记忆、认知及海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的影响.方法 6月龄SAMP8 15只小鼠分为治疗组(8只)及阴性对照组(7只),另选5只SAMPR1鼠作为正常对照组.治疗组给予PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA,N/P＝50、阴性对照组给予PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-Scr,正常对照组给予生理盐水,给药均为海马注射,3 d给药1次,给药5次.30 d后各组进行Morris水迷宫检测行为学改变,免疫组织化学检测海马ChAT的表达.结果 PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA治疗组与阴性对照组相比,定位航行试验潜伏期显著缩短[第1天:(37.02±3.30)s vs.(40.68±3.59)s,t =2.77,P ＜0.01;第3天(23.00±2.70)s vs.(31.35±1.80)s,t =3.35,P ＜0.01],穿越目的 象限区域次数明显增加(4.50±1.68 vs.2.41±0.76,t =1.97,P =0.096),目的 象限停留距离比值(0.66±0.25 vs.0.34±0.05,t =2.49,P ＜0.05)及时间比值(0.57±0.13 vs.0.30±0.04,t =3.95,P ＜0.01)都较阴性对照组提高,海马组织ChAT活性也增加(CA1区阳性率0.32±0.08 vs.0.17±0.01,t =25.21,P ＜0.01;CA3区阳性率 0.32± 0.02 vs.0.16±0.01,t =17.91,P ＜0.01),差异具有统计学意义.治疗组与正常对照组相比,Morris水迷宫结果及海马组织ChAT活性无统计学差异.结论 脑内注射PEG-PEI/ROCK-Ⅱ-siRNA纳米复合物能提高SAMP8鼠的学习和记忆能力,这种作用可能通过增加海马组织ChAT含量而得以实现.
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生物活性玻璃对牙髓细胞血管生长因子作用的体外研究
目的 体外观察、比较新型纳米生物活性玻璃nano-58S和传统生物活性玻璃45S5对人牙髓细胞增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的作用,以期为进一步研究生物活性玻璃是否可在牙髓再生的组织工程学中发挥作用奠定基础.方法 实验组用45S5 (45S5组)、nano-58S(nano-58S组)生物活性玻璃浸提液培养人牙髓细胞,空白对照组用达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium,DMEM)培养,每组3孔.培养人牙髓细胞1、2、3d分别采用甲基噻唑基四唑法观察浸提液对细胞增殖的影响,用实时荧光定量反转录PCR和酶联免疫吸附测定法检测VEGF、bFGF基因表达水平和蛋白分泌量.结果 人牙髓细胞培养第2天,45S5组、nano-58S组细胞增殖率分别为空白对照组的(134.5±5.0)％和(146.3±19.8)％,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05)；45S5组和nano-58S组在第1天VEGF蛋白分泌量分别为(189.29±4.64)和(216.18±14.67) ng/L,均显著高于空白对照组[(159.03±11.69) ng/L] (P＜0.05),nano-58S组VEGF蛋白分泌量显著高于45S5组(P＜0.05)；两个实验组的bFGF蛋白分泌量亦显著高于空白对照组(P＜0.05)；45S5组和nano-58S组的VEGF基因表达量在第1天分别为(1.70±0.19)和(1.63±0.42),均显著高于空白对照组(1.00 +0.02) (P ＜0.05)；bFGF基因相对表达量在第3天分别为(1.49±0.02)和(2.30±0.04),亦均显著高于空白对照组(1.29 ±0.04) (P＜0.05).结论 生物活性玻璃可促进人牙髓细胞的增殖及VEGF、bFGF的基因表达和蛋白分泌,nano-58S比45S5的促进作用更显著.
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一种新型的表面增强拉曼散射基底的制备及其在大肠杆菌BL21检测中的应用
目的：研制一种新型的拉曼增强液态基底，采用免标记表面增强拉曼散射（ surface-enhanced Raman scat-tering，SERS ）技术快速检测大肠杆菌。方法采用改进后的Stober方法制备360 nm二氧化硅纳米球（ SiO2），在其表面结合不同粒径Au＠Ag，制备纳米复合物（ SiO2-Au＠Ag）。通过透射电镜（ TEM）、紫外可见（ UV-Vis）分光光度仪对所制备的纳米结构进行分析表征。以对巯基苯胺（ PATP）为待检分子，筛选出SERS效果佳的SiO2-Au＠Ag。以此纳米复合物检测不同浓度PATP，并通过简单混合培养的方法检测大肠杆菌。结果透射电镜拍摄图片显示，随着Au＠Ag 粒径增大，结合到SiO2表面的Au＠Ag 聚集度也增加。紫外光谱显示，随着Au＠Ag 粒径增大， Au＠Ag和SiO2-Au＠Ag大吸收峰红移。通过实验，SiO2-100 nm Au＠Ag检测PATP的灵敏度为10-10 mol／L，低可检测的大肠杆菌的浓度为105 CFU／ml。结论在该实验范围内，SiO2-Au＠Ag的SERS效应随着SiO2表面结合的Au＠Ag粒径增大而增大。 SiO2-100 nm Au＠Ag具有强的SERS效应。
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Pluronic/SWCNTs纳米复合物的制备及对罗丹明123在Caco-2细胞摄取影响的初步研究
目的:优化Pluronic/SWCNT纳米复合物的制备工艺,并考察其对小肠P-gp药泵的抑制作用.方法:采用超声法制备Pluronic/SWCNT自组装纳米复合物,以水分散性、分散粒径、形态等为指标进行制备工艺优化.以Caco-2细胞为模型,考察其对P-gp底物罗丹明123(R-123)在Caco-2细胞摄取的影响.结果:优化工艺为以10 mg·mL-1 Pluronic F127(或F68)为分散剂,采用探头超声分散法,功率为260 W,超声40次(单次超声时间为3s).所制备的纳米复合物Pluronic F127/SWCNT-COOH可在不同程度上促进R-123在Caco-2细胞的摄取.结论:不同组成的Pluronic/SWCNTs纳米复合物促进了P-gp底物R-123的小肠跨膜吸收,应该具有一定的P-gp药泵抑制作用,其制备方法科学、简单、稳定性好.
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BACE1-siRNA纳米复合物对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆和相关蛋白表达的影响
目的:探讨尾静脉注射分枝状聚谷氨酸-聚丙烯亚胺-乳铁蛋白/β分泌酶小干扰RNA(MP-PPI-Lf/BACE1-siRNA)纳米复合物对阿尔茨海默病模型小鼠学习、记忆能力和β分泌酶(BACE1)、p淀粉样蛋白(Aβ)的蛋白表达量的影响.方法:将24只6月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、MP-G1.0PPI组、MP-G1.0PPI-Lf(20:1)组和MP-G1.0PPI-Lf(40:1)组,每组6只.模型组给予生理盐水,其他3组分别多次通过尾静脉注射纳米复合物,同月龄同背景C57BL/6J小鼠6只作为正常对照组.给药后1周,各组进行Morris水迷宫实验检测行为学改变,蛋白质印迹法(Western blotting)检测脑组织中BACE1和Aβ的蛋白表达量.结果:与模型组相比,MP-G1.0PPI-Lf(20∶1)组和MP-G1.0PPI-Lf(40∶1)组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,游泳距离明显减小(P＜0.05);穿越平台的次数增加,但无显著性差异.同时,MP-G1.0PPI组的BACE1及Aβ的蛋白表达量有显著性下降(P＜0.05);MP-G1.0PPI-Lf(20∶1)组和MP-G1.0PPI-Lf(40∶1)组的蛋白表达量降低更为明显,结果有显著性差异(P＜0.01).结论:尾静注射MP-PPI-Lf/BACE1-siRNA纳米复合物能提高阿尔茨海默病模型小鼠的学习和记忆能力,同时可使BACE1及Aβ的蛋白表达量下降.
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高密度脂蛋白和低密度脂蛋白纳米复合物作为抗癌靶向药物载体的研究进展
高密度脂蛋白和低密度脂蛋白,作为人体内源性的脂蛋白颗粒,具有毒性低、选择性高、安全性良好、能够避免人体网状内皮系统的识别清除等特点.其作为纳米靶向给药载体的研究受到广泛关注,本文主要介绍了近年来基于这两类脂蛋白以及重组脂蛋白作为靶向给药载体在抗癌领域的新研究进展.
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抗肿瘤腺病毒纳米复合物的研究进展
腺病毒载体相对于其他基因载体具有转导效率高,宿主范围广的优点,广泛应用于癌症的基因治疗中.临床试验已证明腺病毒瘤内注射可有效治疗原发性肿瘤,但难以满足静脉注射治疗转移性肿瘤的需求.传统的腺病毒静脉注射后易被肝脾细胞摄取,存在体内免疫原性强、血液半衰期短、肿瘤靶向性差的问题.采用聚合物或纳米材料对腺病毒进行表面修饰,构建腺病毒纳米复合物,是解决以上问题的新方法.本文综述了用于静脉注射治疗癌症的腺病毒纳米复合物的研究进展.
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具有还原敏感可断裂的疏水尾链的新型阳离子脂质用于siRNA递送的研究
为了获得更高的转染效率和更低的毒性,本研究合成了一种新型的人字形阳离子脂质 (2ss HLL),它由亲水性天冬氨酸和两条还原敏感可断裂的疏水油酸尾链组成.通过siRNA和基于2ss HLL的脂质体间的静电相互作用,成功制备了粒径约150 nm的均匀的球形阳离子纳米复合物.从评估结果可以看出,该纳米复合物在Hep G2细胞试验中表现出较好的细胞摄取和较低的细胞毒性.RT-PCR分析结果表明,2ss HLL/si EGFR纳米复合物可表现出与Lipofectamine2000相类似的对靶mRNA显著的下调效应.这些增强的siRNA基因沉默效率可能归因于还原响应性断裂所诱导的疏水尾链的分离.在还原环境中观察到的纳米复合物的粒径和siRNA释放的变化也证实了上述的机制.由此,我们认为氧化还原响应型2ss HLL将有可能成为siRNA递送的潜在纳米载体.
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壳聚糖修饰对细胞摄入和细胞毒性的影响
目的 研究精氨酸或十六烷基修饰壳聚糖对其细胞摄入和细胞毒性的影响及作用机制.方法 用α-32P-dATP标记质粒DNA,分别与十六烷基化壳聚糖和精氨酸修饰的壳聚糖通过复凝聚方法形成壳聚糖DNA纳米复合物.采用血管平滑肌A10细胞进行摄入测试,并用β液闪计数仪检测结果.用MTT方法对壳聚糖DNA纳米复合物的细胞毒性进行评价.结果 经32P标记的DNA与不同修饰的壳聚糖复合所形成的纳米复合物粒径约为55.9～174.9 nm,zeta电位约为1.8～10.8 mV.细胞摄入实验显示通过精氨酸或十六烷基修饰的壳聚糖与DNA形成的纳米复合物更易于进入细胞.其中十六烷基化壳聚糖DNA纳米复合物(HCNC)在N/P为1∶1时细胞摄入量高,精氨酸修饰的壳聚糖DNA纳米复合物(ACNC)细胞摄入次之,与未经修饰的壳聚糖DNA纳米复合物(UCNC)相比,差异具有显著性(HCNC、ACNC比UCNC高1.3倍,P＜0.05).细胞毒性实验显示,修饰后的壳聚糖纳米复合物的毒性远远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine 2000.结论 两种修饰对壳聚糖DNA纳米复合物的血管平滑肌细胞摄入有明显促进作用,其作用机制各不相同;同时其细胞毒性远小于商品化的细胞转染试剂Lipofectamine 2000.
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叶酸修饰的载质粒磁性纳米复合物靶向鼻咽癌的基因转染作用
目的 探讨偶联叶酸(FA)的载质粒PEG-PEI(-FA)-Alg-氧化铁磁性纳米复合物对叶酸受体(FR)阳性鼻咽癌(NPC)细胞的分子靶向能力及基因转染效率.方法 体外实验采用铁染色和透射电镜方法观察FR阳性NPC细胞HNE-1及FR阴性NPC细胞CNE-2吞噬磁性纳米复合物的情况,并通过观察两种细胞内质粒绿色荧光蛋白(GFP)表达及流式细胞仪分析该磁性纳米复合物的基因转染效率；体内实验采用MRI、铁染色及透射电镜观察尾静脉注射磁性纳米复合物后,同时荷HNE-1及CNE-2两种瘤的同一裸鼠种植瘤细胞吞噬磁性纳米复合物的情况.结果 体外实验显示,HNE-1细胞能有效摄取磁性纳米复合物,细胞内见较强GFP表达,基因转染效率为40.0％±3.0％.而CNE-2细胞不能有效摄取磁性纳米复合物,细胞内仅见很少量的GFP表达,基因转染效率为4.5％±1.5％.体内实验显示,HNE-1种植瘤细胞能有效的吞噬磁性纳米复合物,而CNE-2种植瘤内吞噬的磁性纳米复合物很少.结论 偶联FA的载质粒PEG-PEI (-FA)-Alg-氧化铁磁性纳米复合物具有良好的分子靶向性及较高的基因转染效率.
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叶酸靶向共载TFPI-2及顺铂磁性纳米复合物的制备及其对鼻咽癌HNE-1细胞的靶向性和体外抑制效应
目的 制备叶酸靶向共载组织因子途径抑制物2(TFPI-2)及顺铂磁性纳米复合物,探讨其对鼻咽癌HNE-1细胞的靶向性和体外抑制效应.方法 通过酰胺化反应合成叶酸靶向高聚物叶酸-聚乙二醇-聚乙烯亚胺(FA-PEG-PEI),采用静电吸附技术,将其与本课题组前期制备的载顺铂磁纳米粒(MNP-CDDP)及TFPI-2质粒混合,得到终产物FA-PEG-PEI/MNP-CDDP/TFPI-2.核磁氢谱验证高分子聚合物的合成.动态光散射(DLS)及透射电镜(TEM)观测其粒径、电荷及形态.邻二氮菲法及邻苯二胺法测定纳米复合物中铁及顺铂(CDDP)的含量.琼脂糖凝胶电泳分析载体FA-PEG-PEI/MNP-CDDP与TFPI-2质粒的结合情况.普鲁士蓝铁染色法及荧光显微镜观察磁性纳米复合物对鼻咽癌(NPC)细胞的分子靶向性.Western印迹检测磁性纳米复合物转染HNE-1细胞后TFPI-2蛋白的表达情况.Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞计数试剂盒、流式细胞技术检测复合物对HNE-1细胞增殖、凋亡的影响.结果 核磁氢谱在FA、PEG和PEI相应的频率上可见特征吸收峰.DLS测得产物FA-PEG-PEI/MNP-CDDP/TFPI-2复合物平均粒径为141.1 nm,平均电荷为21.5 mV.透射电镜下可见纳米微粒有良好的分散性,但粒径大小不太均匀.铁含量与顺铂载药量分别为116.2 μg/ml及92.88μg/ml.琼脂糖凝胶电泳显示,当载体FA-PEG-PEI/MNP-CDDP与TFPI-2质粒质量比≥1时,载体能完全吸附质粒,并且有效保护质粒免受DNA酶的消化作用.铁染色和荧光显微镜观测可见叶酸受体(FR)阳性HNE-1细胞内蓝染磁颗粒及绿色荧光点比FR阴性CNE-2细胞显著增多(P＜0.05).HNE-1细胞被载TFPI-2质粒的复合物转染后,TFPI-2蛋白的表达量比空白载体组及单纯质粒组明显增高(P＜0.05).复合物对HNE-1细胞有明显的体外抑制效应,抑制率及凋亡率分别为64.00％及49.61％,明显高于载体组(8.19％,9.26％)、单载质粒组(40.35％,19.85％)、单载顺铂组(56.15％,36.46％),均P＜0.05.结论 采用酰胺化反应和静电吸附技术成功合成了FA-PEG-PEI/MNP-CDDP/TFPI-2磁性纳米复合物,该复合物对鼻咽癌HNE-1细胞具有良好的靶向性及体外抑制效应.
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“药辅合一”茶多酚-蜂毒肽纳米复合物的制备及抗肿瘤研究
目的 制备具有协同抗肿瘤作用的茶多酚-蜂毒肽纳米复合物(EMN),并考察其抗肿瘤活性.方法 通过拜耳反应合成了多聚表没食子儿茶素没食子酸酯(polyEGCG),1H-NMR和MS表征其结构和相对分子质量.通过正交试验优化EMN的制备工艺,并考察在不同pH值条件下蜂毒肽(Mel)的体外释放.通过流式细胞仪比较异硫氰酸荧光素(FITC)标记的Mel和EMN的细胞摄取情况.MTT法考察polyEGCG和Mel在B16F10和A549细胞的协同抗肿瘤效应.结果 合成的polyEGCG用1H-NMR和MS确证了结构,正交试验优化的EMN佳制备工艺为将0.5 mg/mL polyEGCG溶液逐滴加入到lmg/mL等体积的Mel溶液中,边滴加边搅拌,室温孵育30 min,即得.体外释放实验表明EMN释放具有酸响应性.摄取实验表明Mel和EMN均能被肿瘤细胞摄取,摄取量相当.MTT实验结果表明,polyEGCG和Mel联合使用的协同系数(CI)小于1.0,具有协同抗肿瘤效果.结论 采用自组装的方式制备EMN,工艺简单,粒径适宜,且具有协同抗肿瘤的效果,值得深入研究.
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聚甲基丙烯酸甲酯/纳米蒙脱土复合义齿基托材料的制备及耐磨性能分析
目的:制备聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)/纳米蒙脱土(MMT)复合义齿基托材料并进行摩擦磨损实验.方法:利用悬浮聚合法制备PMMA/MMT复合物;用红外光谱图(FT-IR)、X射线衍射图谱(XRD)表征其纳米复合结构的形成;通过摩擦磨损实验并与临床常规义齿基托材料进行比较了解复合材料的耐磨性能.结果:悬浮聚合法可以成功制备PMMA/MMT复合物.复合材料表现出高摩擦、低磨损的性能.结论:MMT的加入可以提高复合材料的耐磨性能.
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新型液态氟碳纳米脂质微球超声造影剂的制备及显像实验研究
目的 制备液态氟碳(perfluorooctylbromide,PFOB)纳米脂质微球并探讨其对大鼠肝脾实质的超声显像效果、安全性及相关机制.方法 采用高压均质技术制备PFOB纳米脂质微球,用透射电镜观察微球形态、分布,用激光粒度和电位分析仪测定微球粒径及表面电位.经大鼠尾静脉注射微球后行超声显像,同时监测大鼠生命体征变化.肝脾实质为感兴趣区,应用DFY超声图像定量分析系统评价造影效果,建立时间一强度曲线.大鼠肝脾冰冻切片探讨微球增强肝脾超声显像的相关机制.结果 PFOB微球为实心球形结构,粒径极小且分布均匀;造影后约10 S肝实质回声增强,达峰时间约在注射微球后3～4min,持续增强约1 h;脾实质较肝实质增强时间更长,效果更显著,第2 d仍持续增强;实验过程中大鼠生命体征未见明显变化;微球在肝脾组织内大量分布聚集可能是其增强肝脾显影的机制之一.结论 PFOB微球是一种安全有效的新型超声造影剂,有潜在的开发应用价值.
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FTC-CD133纳米微粒抑制肝癌干细胞耐药性的研究
目的 制备包裹乳腺癌耐药蛋白(BCRP/ABCG2)多药转运体的特异抑制剂FTC且连接CD133抗体的纳米微粒,并评价其特性和治疗作用.方法 运用复乳蒸发法制备以聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)为载体的包封订C的载药纳米微粒,通过碳化二亚胺法在其表面连接CD133抗体,得到纳米微粒FTC-PLGA-NP-C;分析制备得到的纳米微粒的粒径分布、FTC包封率、载药量和纳米微粒的抗体连接效率;CD133+免疫磁珠法分选出CD133+ SP细胞,MTT法检测CD133+ SP细胞的增殖能力,Western blotting检测SP细胞中ABCG2的表达;荧光显微镜下观察FTC-PLGA-NP-C与CD133+SP细胞的结合效率;将CD133+ SP细胞加入不同浓度的FTC-PLGA-NP-C纳米微粒,Western blotting检测其ABCG2的表达;以同体积PBS为对照,在CD133+ SP细胞中加入FTC-PLGA-NP-C纳米微粒,同时加入阿霉素,HPLC检测孵育不同时间后细胞内阿霉素的浓度.裸鼠腋下荷瘤,成瘤后尾静脉注射FTC-PLGA-NP-C或者0.9％氯化钠溶液,48 h后再由尾静脉注射阿霉素,测量瘤体直径,并采用高效液相色谱法检测裸鼠肿瘤组织中阿霉素的浓度.结果 FTC-PLGA-NP-C呈规则球形,粒径分布为60 ～ 120 nm,载药量为11.27％,包封率为37.18％,与CD133 SP细胞有较好的结合能力;Western blotting检测显示ABCG2在CD133+ SP细胞中表达,且随着FTC-PLGA-NP-C纳米微粒剂量的增加,ABCG2的表达量逐渐降低,到4 mg/ml FTC-PLGA-NP-C时已几乎检测不到ABCG2的表达.从24 h开始,PBS中CD133 SP细胞内阿霉素浓度很快下降至1 μg/ml及以下;而FTC-PLGA-NP-C中CD133+ SP细胞内阿霉素浓度一直维持在2～3 μg/ml.生理盐水组小鼠瘤体直径为(1.845-±0.076) cm,高于FTC-PLGA-NP-C组的(1.238±0.072) cm (t=5.802,P＜0.001);生理盐水组瘤内阿霉素浓度为(2 005±0.154) μg/ml,低于FTC-PLGA-NP-C组的(3.853±0.261) μg/ml(t=6.088,P＜0.001).结论 制备的载药纳米微粒FTC-PLGA-NP-C可较好地靶向肝癌干细胞,并抑制其耐药蛋白ABCG2的表达,降低肿瘤细胞对常规治疗药物的耐药性,提高化疗药物的治疗效果.
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淫羊藿苷/载明胶纳米复合物-PLGA缓释系统的制备及工艺优化
目的:制备淫羊藿苷(ICA)@明胶纳米粒(GNPs)-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA) (ICA@GNPs-PLGA)缓释系统,并对制备工艺进行优化.方法:采用二步去溶剂法和 S/O/W 乳化溶剂挥发法制备 ICA@GNPs-PLGA缓释系统,检测投放的PLGA和纳米复合物的质量比和 ICA的投入量等不同因素对微球包封率(EE)的影响以优化制备工艺.扫描电镜(SEM)观察纳米复合物和微球的表面特征;高效液相色谱法(HPLC)测量微球 EE及其体外释放结果.结果:所制备的复合微球和纳米复合物均为白色粉末状;SEM下微球和纳米复合物表面光滑、圆整,粒径较为均一,粒径分布范围分别为4~12 μm和150~200 nm.当 GNPs投入量为6 mg,PLGA在二氯甲烷(DCM)中的临界浓度为0.5%~1.0%;当 GNPs的质量上升至12 mg时, PLGA在DCM中的临界浓度升至1.0%~2.0%;当PLGA的浓度低于0.25%时,无完全包封的复合微球可以形成.在临界浓度内,ICA@GNPs-PLGA微球的 EE高于(62.00±1.25)%,且 EE和 ICA的投入量呈负相关关系(P<0.05).24 h时内微球累积释放率低于5.47%,40 d时累积释放率为65.21%.结论:采用优化的制备工艺可以制备出粒径分布较窄、载药率较高、低突释和长期释放的 ICA@GNPs-PLGA微球缓释系统.
关键词： 淫羊藿苷 纳米复合物 微球 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 缓释 -
三种不同表面活性剂对羟基磷灰石纳米颗粒的表面修饰的比较
目的:本研究旨在通过不同方法修饰羟基磷灰石纳米颗粒并检测其稳定性及分散性.方法:首先采用水合热合成法制备羟基磷灰石纳米颗粒,然后用透射电镜(TEM)和场发射扫描电镜(SEM)对其表面形态结构进行表征.我们首次用溴化十六烷三甲基铵(CTAB),PEG2000和人血清对羟基磷灰石纳米颗粒通过共价结合或表面吸附的方式进行表面嫁接,并利用透射电镜,傅里叶红外光谱(FT-IR)和X射线衍射(XRD)对新合成的这三种纳米羟基磷灰石复合物的形貌,结构和晶粒粒径进行表征.对这三种羟基磷灰石纳米颗粒悬浮液的时间沉降曲线进行分析.在分散性上通过检测这三种羟基磷灰石复合物悬浮液在不同pH值下的Zeta电位并绘制Zeta-pH曲线.结果:我们发现CTAB修饰的羟基磷灰石纳米颗悬浮液的悬浮稳定性佳,其次是PEG2000,后是人血清.在pH=7.0时,CTAB修饰的羟基磷灰石纳米颗粒的zeta电位值是25.68 mV,而PEG2000修饰的Zeta电位是4.32mV,人血清修饰的Zeta电位是-13.23mV.结论:CTAB表面修饰的羟基磷灰石纳米颗粒相对于其它两种表面活性剂复合物具有更好的分散性和悬浮稳定性,与DNA/RNA结合能力更强.本课题的结果给羟基磷灰石纳米颗粒载体的应用提供了一种新的选择,有望利用亲和力更高的基因载体实现基因治疗,具有广阔的应用前景.
