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艾滋病病毒长期不进展者、缓慢进展者、高危暴露者以及正常人群APOBEC3G mRNA水平的差异
目的 检测我国中部地区艾滋病病毒(HIV)流行区4类不同人群APOBEC3G(hA3G)mRNA水平的差异并分析其与疾病进程的关系.方法 采集研究人群的静脉全血标本,分离外周血单核细胞(PBMCs),冻存于液氮中;复苏PBMCs,提取总RNA,mRNA体外逆转录为cDNA,应用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测不同人群血标本APOBEC3G mRNA的水平.结果 HIV长期不进展者标本13份,其CD+4T淋巴细胞计数平均为(716±169)个/μl,平均感染时间为(12.5±2.3)年;HIV缓慢进展者标本48份,其CD4+T淋巴细胞计数平均为(233±144)个/μl,平均感染时间为(10.7±2.2)年.HIV长期不进展者APOBEC3G mRNA水平高于正常人群的水平;HIV缓慢进展者APOBEC3G mRNA水平高于高危人群和正常人群的水平.HIV长期不进展者和缓慢进展者的CD4+T淋巴细胞数量与APOBEC3G mRNA水平无相关性.结论 我国中部地区HIV流行区4类不同人群APOBEC3G mRNA水平存在差异,并且HIV长期不进展者和缓慢进展者CD+4T淋巴细胞数量与APOBEC3G mRNA水平无相关性.
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氯化血红素对心肺复苏后大鼠脑红蛋白表达影响
心搏骤停(cardiac arreast,CA)是急救医学较常见的危重症之一,而脑复苏成功与否,是心肺复苏后成功的关键.组织的严重缺血缺氧以及复苏后组织再灌注则是CA后脑组织损伤的主要原因.脑红蛋白(nueorglboin,Ngb)是德国学者Burmester等[1]在2000年发现的一种主要位于脑内神经元的携氧球白,能可逆地结合O2,在脑缺血缺氧时,Ngb在神经元中表达增加,作为一种内源性神经保护因子可保护神经元免受缺血性损害.本实验通过建立窒息型大鼠心肺复苏模型,研究复苏后不同时间点Ngb在mRNA水平表达变化规律,探讨Ngb在CA后脑缺血缺氧损伤病理变化中的作用机制,同时也为氯化血红素(Hemin)防治缺血缺氧性脑损伤提供可靠的实验依据.
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人淋巴细胞H9体外感染HIV-1后APOBEC3G mRNA水平的监测
在体外水平, H9细胞在感染HIV后, APOBEC3G mRNA 水平没有显著变化(P>0.05).结论:HIV-1可能主要通过降低APOBEC3G蛋白的水平而抵抗其抗病毒作用,这比通过降低mRNA水平来抵抗APOBEC3G的抗病毒作用更为快速、有效.
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胃黏膜白细胞介素mRNA水平与幽门螺旋杆菌感染的相关性研究
目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染中胃黏膜白细胞介素mRNA水平。方法选取2010年10月~2013年6月在中山市民众医院接受检查治疗的慢性胃炎患者52例,将收治的HP阳性患者分别采用real-time PCR、PCR-荧光探针法及酶联免疫吸附实验夹心法检测患者胃黏膜白细胞介素mRNA(IL-6、IL-1β)的水平,记录治疗前后mRNA(IL-6、IL-1β)水平,探讨与幽门螺杆菌感染相关性。结果患者胃黏膜白细胞介素mRNA水平随着幽门螺旋杆菌感染加重而升高,尤其是IL-6水平,随着感染程度的不断恶化。同时,治疗前后相比患者的感染程度从降低,其血清与胃黏膜蛋白中的IL-6活性水平降低,而IL-1β水平无明显变化。结论幽门螺杆菌感染对mRNA的影响不显著,而IL-6与幽门螺杆菌的感染有着密切的关系。
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RNA干扰在肝病治疗中的研究进展
RNA干扰(RNAi)是双链RNA(dsRNA)分子在mRNA水平关闭相应序列及基因的表达使其沉默的过程[1].RNAi主要的功能特色在于它可调节和关闭基因的表达,促使mRNA降解或阻止蛋白产物合成,进而调控细胞的各种高级生命活动,其抑制基因表达作用具有高效性和特异性[2].RNAi作为一种快捷方便的工具广泛用于高通量的研究基因功能、基因敲除、基因治疗和基因表达调控领域的研究.现对RNAi在肝病治疗中的新进展作一综述.
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microRNA与心律失常的研究进展
microRNA (miRNA)是Lee于1993年和Reinhart等于2000年在研究线虫的发育调控过程中发现的小分子RNA,广泛存在于植物、线虫及人类的细胞中,其由一系列长21~25个核苷酸单链RNA分子构成,是非编码小分子RNA.多种miRNA在同一细胞的表达使得细胞处在一种内在的miRNA环境中,这个环境控制着成千上万编码基因mRNA水平,使得各种蛋白表达处在一个适合的水平[1].
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无义密码子介导的mRNA降解机制与疾病
无义密码子介导的mRNA降解(nonsenfe mediated mRNAdecay,NMD)现象的发现,早源于1979年美国学者Losson和Lacroute在对酵母菌URA 3基因的研究中观察到无义密码子突变体在mRNA瞬时合成率并非很低的情况下能够降低mRNA水平[1].随着分子生物学的研究进展,NMD机制在酵母、果蝇、线虫以及哺乳动物细胞中都得到了证实.1999年Hentze和Kulozik[2]在
上发表了关于NMD的文章,NMD机制开始引起人们重视.近年来的研究揭示了NMD与人体遗传病和癌症的发生机制有着十分密切的关系[3].本文就NMD机制以及与人类遗传疾病的研究综述如下. | -
影响金黄色葡萄球菌杀白细胞素ED转录表达的培养条件
为探讨影响金黄色葡萄球菌杀白细胞素ED(leukocidin ED,LukED)转录表达的佳培养条件,采用定量反转录-聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测金黄色葡萄球菌Newman菌株lukE在TSB、BHI、YCP、MHB和LB培养基中不同生长阶段(对数生长早期、中期、晚期和平台期)的表达情况.以表达量较低的培养基为基础,分别加入表达量高的培养基的不同成分,分析促进lukED表达的物质.结果显示,lukE mRNA水平在YCP培养基中生长至对数晚期时表达高;YCP组分酵母浸出物、酪蛋白氨基酸及丙酮酸钠均能显著促进lukE转录表达,前两者效果更好.
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结直肠癌组织TROP-2基因mRNA水平及临床意义
大肠癌(结肠癌和直肠癌)是常见的恶性肿瘤,多数患者确诊时已属晚期,故病死率很高。大肠癌转移的发生机理至今仍不甚清楚,如何从分子生物学的角度来探讨这一机制,是目前研究的重点。
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IL-12和IL-17强直性脊柱炎患者的外周血表达水平及两者之间相关性研究
目的 检测强直性脊柱炎( AS )患者白细胞介素-12 (IL-12)、白细胞介素-17(IL-17)在外周血的分子水平和mR-NA相对表达水平,探讨其在AS发病的作用. 方法 采用ELISA、RT-qPCR法,分别检测45例AS患者和45例健康对照者血清IL-12、IL-17分子水平及其在外周血单个核细胞中mRNA相对表达水平. 结果 病例组血清IL-12、IL-17水平显著高于对照组(P<0. 05),病例组IL-12 mRNA、IL-17 mR-NA相对表达含量显著高于对照组( P<0. 05 );IL-12血清水平和IL-12 mRNA分别与IL-17血清水平和IL-17 mRNA呈正相关性. 结论 IL-12 和IL-17 在AS患者中是相关联的分子,可能在AS发病机制中起重要作用.
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肺癌组织中 HMGN5基因的表达水平及与其临床病理特征的相关性分析
目的:探讨高迁移率族核小体结合域5( HMGN5)基因在肺癌组织中的表达水平及与其临床病理特征的相关性分析。方法选择手术切除的肺癌组织标本共75例,同期取20例肺癌患者癌旁正常组织作为对照组;应用RT-PCR法检测HMGN5基因在肺癌组织中的表达;分析HMGN5基因的表达水平与肺癌组织临床病理特征的关系。结果肺癌组HMGN5基因转录mRNA水平明显高于癌旁组,比较差异有统计学意义( P<0.01);肺癌组织中HMGN5基因mRNA水平与患者年龄、性别、病理类型无相关性(P>0.05),而与病理分级、淋巴结转移以及临床分期有明显相关性(P<0.01)。结论肺癌组织中HMGN5基因mRNA呈高水平表达,并与病理分级、淋巴结转移以及临床分期呈显著有关;提示HMGN5基因的表达水平可能与肺癌的发生、发展密切相关。
关键词: 肺癌 高迁移率族核小体结合域5 相关性研究 mRNA水平 -
β-双酮类抗生素对斑马鱼的毒理学作用及相关基因mRNA水平的影响
目的 探讨β-双酮类抗生素对水生鱼类斑马鱼的毒性作用及其机制.方法 将斑马鱼胚胎暴露于一定浓度的诺氟沙星和四环素溶液中,观察毒液对斑马鱼胚胎的影响;21 d毒性试验后用RT-PCR法检测斑马鱼内分泌系统和免疫系统相关基因的mRNA水平.结果 在胚胎发育过程中其死亡率、畸形率和暴露浓度息息相关,随着浓度升高(>50 mg/L),孵化率逐渐降低,死亡率、总畸形率逐渐升高;幼鱼发育畸形主要表现为心包囊水肿、卵黄囊水肿等;盐酸四环素暴露引起斑马鱼VTG1、IL-1β和TNK-α的mRNA的水平升高,且与剂量呈正相关,CYP 1A表达量稍微上升,与对照组差异无统计学意义.结论 斑马鱼内分泌系统和免疫系统相关基因VTG1、IL-1β和TNK-α对β-双酮类抗生素暴露较敏感,有望成为生物标志物,有效评价生态环境.
关键词: β-双酮类抗生素 斑马鱼 mRNA水平 逆转录-聚合酶链反应 -
高迁移率族蛋白A1在前列腺癌及癌旁组织中的差异表达
我们从mRNA水平和蛋白水平半定量检测高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在前列腺癌组织及其相应的癌旁正常前列腺组织中的表达,探讨HMGA1的表达与前列腺癌发生、发展的相关性.一、材料与方法1.材料:选取2004年7月至2007年12月期间在第四军医大学唐都医院泌尿外科行手术切除的40例前列腺癌组织标本,另取40例相应的癌旁正常前列腺组织标本作为对照,置-80℃超低温冰箱中保存备用.
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直肠癌p53基因表达及功能状态的研究
直肠癌的病因尚不清楚,现认为直肠癌是多基因异常积累而致的恶变[1].本研究旨在mRNA水平观察p53及p21基因在直肠癌中表达,了解p53的功能状态.
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SUMO-1基因在胆囊癌中的表达及意义
目的 研究胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达及意义.方法 采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达.结果 在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996、NOZ及胆囊癌标本中均明显高表达,而胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因表达明显低,胆囊癌组织和胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1表达有明显的差异(P<0.001).结论 SUMO-1基因在胆囊癌中高表达,SUMO-1可能为胆囊癌诊断和治疗中的一个潜在的靶点.
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驱铅治疗后铅中毒患者CD3γ和CD3δ及CD3ε链mRNA水平的变化
目的 了解驱铅治疗后铅中毒患者外周血中T细胞受体信号转导分子CD3γ、CD3δ、CD3ε链表达情况.方法 采用实时荧光定量PCR分别检测9例健康人及16例铅中毒患者临床上进行驱铅治疗前后外周血单个核细胞中CD3γ、CD3δ、CD3ε链mRNA水平,以β2微球蛋白(β2M)基因为内参基因,根据相对定量公式2-△Ct×100%计算各基因表达水平.采用Spearman秩相关分析健康人和铅中毒患者驱铅治疗前后CD3γ、CD3δ、CD3ε链mRNA水平相关性.结果 铅中毒患者驱铅治疗前后CD3γ链mRNA水平与健康人相比无明显差异;驱铅治疗前后CD3δ链mRNA水平均显著低于健康人,驱铅治疗后CD3δ链mRNA水平较治疗前更低;驱铅治疗前CD3ε链mRNA水平与健康人相比显著升高,驱铅治疗后CD3ε链mRNA水平有所恢复.健康人中CD3γ链与CD3δ链、CD3γ链与CD3ε链、CD3δ链与CD3ε链均无相关性;铅中毒患者驱铅治疗前CD3γ链与CD3δ链,CD3γ链与CD3ε链,CD3δ链与CD3ε链均呈显著正相关,驱铅治疗后仅CD3δ链与CD3ε链呈显著正相关.结论 铅中毒患者CD3γ、CD3δ、CD3ε链mRNA水平呈不同趋势的改变,提示铅中毒后对机体免疫系统有一定影响并且在不同基因之间存在差异;驱铅治疗后体内铅负荷降低,CD3δ链表达水平仍然与健康人不同,说明驱铅治疗后机体的免疫功能仍存在异常.
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红斑、丘疹及鳞屑性皮肤病
20120166银屑病患者骨髓造血干细胞中干扰素-γ的表达/张振颖(大连医大一附院),于侦,田畔…//中国中西医结合皮肤性病学杂志.-2011,10 (2).-72 ~ 74采用免疫磁珠法分离骨髓造血干细胞,后以实时定量PCR检测.结果:干扰素-γ(IFN-γ)在银屑病和健康对照者的骨髓造血干细胞中均有表达,且前者呈明显高表达,但IFN-γ mRNA水平与银屑病严重程度无相关性.认为造血干细胞中IFN-γ的异常表达可能影响其增殖与分化,进而参与银屑病的发病.