第三军医大学学报杂志
Journal of third military medical university 제삼군의대학학보
- 主管单位： 第三军医大学
- 主办单位： 第三军医大学
- 影响因子： 1.01
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1000-5404
- 国内刊号： 50-1126/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
磁共振引导高强度聚焦超声消融犬肾上腺的可行性研究
目的 探讨磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)引导高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIFU)体外消融肾上腺的可行性.方法 16只体质量9～13 kg的健康杂种犬,随机分为对照组(n=4)、相对低能量HIFU消融组(声功率200 W组,n=6)、相对高能量HIFU消融组(声功率400 W组,n=6),在MRI引导下消融左侧肾上腺.术后利用MRI增强造影,观察肾上腺消融情况以及周围脏器损伤情况.术后每天动态监测各组血液中皮质醇、醛固酮激素的含量.5d后处死实验犬,对左侧肾上腺进行大体及病理学观察,评估200、400W声功率下肾上腺消融面积以及消融比的差异.结果 HIFU消融术后犬生命体征平稳,MRI增强造影可见消融区域肾上腺信号明显减低,周围脏器组织未见明显信号异常.大体观察可见左侧肾上腺头部和尾部出血、肿胀及部分液化,消融区域皮肤及肾上腺周围脏器均未见明显损伤.病理检查可见消融区域肾上腺出现凝固性坏死灶,与周围组织分界清楚.400W组消融灶数量要明显多于200 W组的消融灶.200 W组消融灶面积为(1.8±0.3)cm2,消融比率为(40.3±18.1)％；400 W组消融灶面积为(2.7 ± 0.6)cm2,消融比率为(60.3±23.3)％,2组间消融面积和消融比率差异有统计学意义(P＜0.05).术后第1天与对照组相比,血液中皮质醇及醛固酮出现一过性升高,第2天开始出现下降趋势,第4～5天趋于稳定.2声功率组激素含量从第3天开始均与对照组存在统计学差异(P＜0.05).结论 MRI引导HIFU技术可以实现活体动物肾上腺消融,消融范围可控,在肾上腺疾病外科无创治疗方面可能有应用前景.
-
川芎嗪对IL-1β诱导的兔原代软骨细胞iNOS表达和NO合成的影响
目的 观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对IL-1β( interleukin-1β,IL-1β)诱导的兔原代软骨细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达及一氧化氮(NO)合成的影响.方法 体外培养兔软骨细胞,用甲苯胺蓝染色检测蛋白多糖,免疫荧光检测兔原代软骨细胞Ⅱ型胶原；用IL-1β 10 ng/ml和(或)不同浓度(5、10、15、20 μg/ml)川芎嗪共培养兔原代软骨细胞48 h后,RT-PCR和免疫组化检测iNOS基因及蛋白表达；用硝酸还原法检测细胞培养上清液NO的表达.结果 软骨细胞呈三角形或多角形,蛋白多糖表达于细胞质中,Ⅱ型胶原主要表达于细胞质,少见于细胞核.与对照组比较,IL-1β单独作用软骨细胞iNOS和NO的表达显著增加(P＜0.01)；IL-1β和川芎嗪联合作用后,软骨细胞iNOS和NO的表达较IL-1β单独作用显著降低(P＜0.05,P＜0.01),但仍显著高于对照组(P＜0.01).结论 川芎嗪能有效抑制IL-1β诱导兔软骨细胞iNOS的表达和NO的合成.
-
掺氮TiO2-xNx薄膜托槽生物相容性的实验研究
目的 制备掺氮TiO2-xNx薄膜托槽并评价薄膜托槽的生物相容性.方法 采用射频磁控溅射法在直丝弓金属托槽原材料试样表面制备锐钛矿相掺氮TiO2-xNx薄膜:①将薄膜材料(薄膜托槽组)和普通托槽材料(普通托槽组)分别缝合于大鼠颊黏膜2侧,2周后肉眼观察和组织学评价薄膜的口腔黏膜刺激性；②分别用薄膜材料(薄膜托槽组)、普通托槽材料(普通托槽组)浸提液和生理盐水(生理盐水组)给小鼠灌胃1周,观察小鼠的临床毒性体征、体质量增长率和重要脏器组织学变化以评价薄膜材料的短期全身毒性作用；③薄膜材料对兔血的溶血实验评价材料的溶血性；④分组同②,各组小鼠在24h内给予对应液灌胃2次,制备小鼠骨髓涂片评价薄膜材料可能的致畸致突变作用.结果 大鼠饮食、活动如常,薄膜托槽组的口腔黏膜与普通托槽组组织学表现一致,表明薄膜托槽无明显口腔黏膜刺激作用；短期全身毒性实验中,3组小鼠体质量增长率差异无统计学意义(P＞0.05),所有动物未观察到明显的临床毒性体征,病理解剖也未观察到明显异常,表明薄膜托槽无明显短期全身毒性作用；溶血实验中,薄膜托槽组溶血率＜5％,未发现红细胞破象,表明薄膜试样不引起急性溶血；微核实验中生理盐水组、薄膜托槽组和普通托槽组的微核率分别为1.48‰、2.08‰和2.16‰,均低于5‰,且两两之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 掺氮TiO2-xNx薄膜托槽无口腔黏膜刺激性、无短期全身毒性、无溶血性以及无遗传毒性,具有良好的生物相容性.
-
不同量骨水泥强化新型空心椎弓根螺钉的体外生物力学研究
目的 探讨自行设计的可注射骨水泥椎弓根螺钉(bone cement injectable canulated pedicle screw,CICPS)在注入不同量骨水泥时的骨水泥弥散情况及生物力学稳定性.方法 按临床置钉标准程序将CICPS、韩国DTPSTM椎弓根螺钉和普通椎弓根螺钉植入骨质疏松松质骨模型(骨密度0.16 g/cm3,n=7)中,分别加压注射不同体积骨水泥(1、2、3、5ml)增强2种空心螺钉,普通螺钉作为对照组.X线、CT观察骨水泥弥散形态；大轴向拔出力实验分析骨水泥使用量与大轴向拔出力之间的关系；比较3种螺钉生物力学稳定性的特点.结果 X线观察螺钉均未发生骨水泥向后泄漏.X线、CT三维重建显示骨水泥从CICPS 3个侧孔中流出,分布均匀；而骨水泥主要从韩国DTPSTM椎弓根螺钉的近端侧孔流出,远端侧孔较少.CICPS各组(1、2、3、5 ml)大轴向拔出力分别为(140.3±15.9)、(197.1±9.8)、(215.4±10.7)、(237.0±23.6)N；DTPSTM各组(1、2、3、5 ml)大轴向拔出力分别为(114.3±17.7)、(180.5±13.6)、(207.2±30.0)、(291.3±25.1)N.经骨水泥增强的空心椎弓根螺钉大轴向拔出力显著高于普通螺钉[(28.5±4.0)N,P＜0.05].空心螺钉大轴向拔出力随骨水泥使用量的增加而增大.骨水泥使用量为1、2、3 ml时,CICPS的生物力学稳定性显著高于DTPSTM(P＜0.05).骨水泥使用量为5ml时,DTPSTM的生物力学稳定性高于CICPS(P＜0.05).结论 在骨质疏松椎体模型中,骨水泥增强可显著增加CICPS的锚定作用；骨水泥使用量在1～3ml的情况下,其稳定性优于同类产品.
-
亚致死剂量脉冲电场对HeLa细胞恶性生物学行为的影响
目的 研究亚致死剂量脉冲电场(pulse electric fields,PEFs)作用后HeLa细胞恶性生物学行为变化,探讨不可逆性电穿孔消融治疗是否有促进残留肿瘤细胞增殖、侵袭、转移的潜在可能.方法 利用电场强度为500、750、1000 V/cm的亚致死剂量PEFs分别作用于HeLa细胞,取正常野生株HeLa细胞作为对照.采取CCK8比色法检测细胞活性反映HeLa细胞增殖能力；基质胶黏附实验、Transwell小室体外侵袭实验和细胞迁移实验分别检测电场作用后HeLa细胞对基质的黏附能力、体外侵袭能力和细胞迁移能力的改变.结果 不同场强亚致死剂量PEFs作用后12、24、48、72 h,HeLa细胞的增殖与对照组比较无显著改变.场强为500、750、1000 V/cm的PEFs作用后,对HeLa细胞黏附抑制率分别为9.38％、30.21％和42.70％.对照组、500 V/cm组、750 V/cm组和1000V/cm组:体外侵袭穿透基质胶的细胞数分别为(104.17±4.59)、(101.82±5.76)、(78.39±6.18)、(67.91±5.94),其中750 V/cm组、1000 V/cm组明显少于对照组(P＜0.05)；细胞划痕修复率分别为(53.46±8.07)％、(48.75±9.13)％、(36.49±7.36)％、(30.58±5.91)％,对照组显著高于750 V/cm组和1000 V/cm组(P＜0.05).亚致死剂量PEFs对细胞的黏附、侵袭和迁移能力均呈现不同程度的抑制作用,其抑制效应和电场强度呈剂量依赖关系.结论 体外实验中亚致死剂量PEFs对HeLa细胞的增殖无显著影响,但能够对HeLa细胞的侵袭和转移能力产生不同程度的抑制作用.提示不可逆性电穿孔在体外即使不能一次性彻底消融HeLa细胞,短期内也不会促进残留细胞的恶性生物学行为.
-
选择性雌激素受体调节剂对MC3T3-E1细胞生长分化的调节
目的 探讨选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator,SERM)——雷洛昔芬对小鼠颅顶成骨细胞MC3T3-E1分化的调节及其机制.方法 体外培养MC3T3-E1细胞,10-7 mol/L的雷洛昔芬和雌激素受体拮抗剂ICI-182780刺激细胞,另设空白对照组,24、48、72 h后检测各指标.MTT法检测细胞增殖；微量酶标法检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性；实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞内β-catenin,雌激素受体α、β(estrogen receptorα、β,ERα、ERβ)mRNA的表达.结果 MC3T3-E1细胞分别加入10-7 mol/L的雷洛昔芬和ICI-182780后,相对于对照组,雷洛昔芬处理组的促细胞增殖作用较强,在24h增殖率高,达(55.93±10.88)％；ALP活性增加,在48 h活性增加率高,为(30.881±5.614)％；β-catenin、ERα和ERβ mRNA的表达均增高,有统计学意义(P＜0.05).ICI-182780组的促细胞增殖率、ALP活性降低；β-catenin、ERα和ERβ mRNA的表达均降低,有统计学意义(P＜0.05).结论 雷洛昔芬可能通过上调β-catenin、ERα和ERβ mRNA的表达促进MC3T3-E1细胞的增殖分化,而ICI-182780则下调β-catenin、ERα和ERβ mRNA的表达抑制MC3T3-E1细胞的增殖和分化.
-
福辛普利对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化的作用
目的 探讨福辛普利对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化的作用,以及对瘦素和脂联素血清水平和在白色脂肪组织中基因表达水平的影响.方法 将40只健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠适应性饲养1周后,随机分为正常对照组(NC组,普通饮食+生理盐水灌胃)、模型组(HC组,高脂饮食+生理盐水灌胃)、药物对照组[NF组,普通饮食+福辛普利3.6 mg/(kg,d)灌胃]和药物干预组[HF组,高脂饮食+福辛普利3.6 mg/(kg·d)灌胃],每组10只.喂养24周后处死,检测各组大鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白( low-density lipoprotein,LDL)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)、瘦素和脂联素的血清水平,比较各组大鼠脂肪组织瘦素和脂联素mRNA水平以及肝组织的胶原蛋白(collagen)Ⅰ蛋白表达和病理改变.结果 与HC组(ALT:91.30±30.71；TG:2.25±0.31；LDL:1.53±0.31；TGF-β:125.95±8.23；HA:165.72±29.13；瘦素:130.61±35.56；脂联素:5.97±2.19)相比,HF组血清ALT(50.20±12.13,P＜0.05)、TG(1.09±0.34,P＜0.01)、LDL(1.16±0.13,P＜0.05)、TGF-β(72.55±23.2,P＜0.01)、HA(90.13±27.42,P＜0.01)和瘦素(31.74±36.35,P＜0.05)水平显著降低,脂联素(21.60±8.43,P＜0.01)水平显著升高；脂肪组织的脂酸素mRNA水平显著升高,而瘦素的mRNA水平变化无显著意义(P＞0.05)；肝组织collagen Ⅰ蛋白表达显著降低(P＜0.05)；福辛普利能减轻肝细胞脂肪变性、炎症浸润和纤维化程度.结论 福辛普利可能通过下调血清瘦素水平,上调脂联素的血清水平和其在脂肪组织的基因表达,对非酒精性脂肪性肝炎大鼠具有保肝和抗肝纤维化作用.
-
共培养下后交叉韧带成纤维细胞中MMPs的基因表达
目的 研究后交叉韧带(posterior cruciate ligament,PCL)成纤维细胞与滑膜细胞共培养下,2种细胞之间的交流对PCL成纤维细胞中基质金属蛋白酶MMP-1、2、3表达及活性的影响.方法 分为共培养组和单培养组:①用显微镜观察共培养24 h后细胞的活性和迁移率.②分别培养6h后,提取总RNA,逆转录PCR；实时荧光定量PCR对人后交叉韧带成纤维细胞MMP-1、2、3基因的表达进行半定量和定量分析.③共培养处理1、2、3d后收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性.结果 共培养使PCL细胞和滑膜细胞较单层细胞培养迁移率分别增高了(43.1±0.1)％和(76.2±0.2)％(P＜0.01).与单培养相比,共培养组明显增加了MMP-2的基因表达,但降低了MMP-1、3的基因表达.酶谱结果表明共培养增加了MMP-2活性(P＜0.05).结论 共培养能够促进细胞的迁移以及调节细胞中MMP-1、2、3的表达情况.
-
S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9的构建及其对U251细胞生长的影响
目的 构建S100A9真核表达载体pEGFP-N3-S100A9,观察其对胶质瘤细胞系U251内S100A9基因表达及细胞生长的影响.方法 应用RT-PCR和DNA重组技术构建pEGFP-N3-S100A9融合蛋白表达载体,并用双酶切、测序进行鉴定,用脂质体转染胶质瘤细胞系U251细胞.荧光显微镜下动态观察U251细胞绿色荧光的变化；培养24h后提取转染细胞的总RNA及总蛋白.通过荧光定量PCR (qRT-PCR)观察其mRNA表达情况,Western blot检测其蛋白表达情况,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 酶切鉴定与S100A9全长基因长度一致(345 bp)；测序证实重组质粒中含有一与GenBank上登录的S100A9基因(NM_002965)序列完全一致的片段,表明成功构建真核表达载体；荧光显微镜下转染U251细胞可见绿色荧光蛋白表达,12h后逐渐增多,24 ～48 h达高峰,且稳定表达较长时间；24 h后通过qRT-PCR检测到mRNA表达,Western blot检测到14 × 103目的蛋白表达(P＜0.05),其增殖能力明显增强(P＜0.01),且引起细胞G1期减少,S期增加(P＜0.05).结论 成功构建真核表达载体pEGFP-N3-S100A9,转染到U251细胞后能有效上调S100A9基因的mRNA及蛋白的表达、促进细胞增殖.
-
大鼠阴茎脚交叉损伤对勃起功能障碍的影响
目的 探讨阴茎脚交叉损伤对勃起功能障碍的影响.方法 选用生殖期雄性Wistar大鼠135只,采用抓阄法随机分为阴茎脚交叉切断组(n=25)、阴茎脚交叉切断+单侧坐骨海绵体肌切断组(n=25)、单侧坐骨海绵体肌切断组(n=25)、双侧坐骨海绵体肌切断组(n=25)、假手术组(n=25)及正常组(n=10).选用育龄期未孕雌性Wistar大鼠,随机与上述各组一一配对饲养,分别观察2个月,了解各组雌鼠受孕情况,并通过雌鼠受孕情况间接推断其配对雄鼠勃起功能障碍.结果 阴茎脚交叉切断组雄鼠死亡3只,有效配对雌鼠22只,均受孕,受孕率100％；阴茎脚交叉切断+单侧坐骨海绵体肌切断组雄鼠死亡2只,有效配对雌鼠23只,均未受孕,受孕率0％；单侧坐骨海绵体肌切断组雄鼠死亡4只,有效配对雌鼠22只,21只受孕,受孕率95.5％；双侧坐骨海绵体肌切断组雄鼠死亡3只,有效配对雌鼠24只,均未受孕,受孕率0％；假手术组雄鼠死亡2只,有效配对雌鼠23只,均受孕,受孕率100％；正常组无死亡,配对雌鼠10只,均受孕,受孕率100％.正常组、假手术组、单侧坐骨海绵体肌切断组及阴茎脚交叉切断组之间两两比较差异均无统计学意义(P＞0.05),阴茎脚交叉切断组与阴茎脚交叉切断+单侧坐骨海绵体肌切断组及双侧坐骨海绵体肌切断组比较差异有统计学意义(P＜0.05),阴茎脚交叉切断+单侧坐骨海绵体肌切断组与双侧坐骨海绵体肌切断组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 单纯切断阴茎脚交叉不会导致勃起功能障碍,阴茎脚交叉切断+一侧坐骨海绵体肌切断会导致勃起功能障碍.
-
基于MRI的人脑海马结构的形态测量
目的 为与海马结构形态改变相关的疾病提供线性测量指标.方法 选取重庆医科大学附属第一医院放射科51例经诊断无病变成人头部磁共振图片,观测海马体积、高度、宽度、长度等线性指标,数据经标准化处理后分析各线性指标与海马体积的相关性.结果 数据经方差齐性检验后,运用单因素方差分析显示:标准化海马头体积、标准化海马体体积、标准化海马尾体积、标准化海马体积、标准化海马头长度、标准化海马体长度、标准化海马尾长度、标准化海马纵轴长度、标准化海马宽度、标准化颞角宽度性别间差异显著(女性＞男性,P ＜0.05,P＜0.01)；钩回间距、颞角宽度性别差异显著(男性＞女性,P ＜0.05,P＜0.01)；标准化海马头长度、标准化海马尾长度左右差异显著(右侧＞左侧,P＜0.05)；标准化海马体长度、标准化海马纵轴长度左右差异显著(左侧＞右侧,P＜0.05).利用Pearson相关分析显示:标准化后与海马体积相关程度为密切的线性指标依次是海马宽度、海马纵轴长度、颞角宽度、海马尾体积.结论 ①海马结构形态存在性别及侧别上的差异；②海马宽度、纵轴长度等线性测量数据可以作为研究海马形态变化的初步筛选指标.
-
2种剂量131I治疗Graves病的前瞻性随机对照研究
目的 观察2种剂量131I治疗Graves病的临床疗效、影响因素及并发症发生情况.方法 将652例符合入选标准的Graves病患者随机分为2组,分别按照甲状腺放射性活度60～100 μCi(2.22 ～3.70 MBq)/g(小剂量组)、80～ 120 μCi(2.96～4.44 MBq)/g(常规剂量组)计算给予131I治疗剂量.随访12个月,观察2组一次性有效率及治疗后甲减发生率.8例浸润性突眼患者131I治疗后给予强的松0.5 mg/kg治疗1个月.结果 治疗有效率:小剂量组为80.0％,常规剂量组为82％,2组比较差异无统计学意义(P＞0.05).小剂量组甲状腺功能减退发生率显著低于常规剂量组(12.1％ vs 16.8％,P＜0.05).治疗结局与患者临床特征、甲状腺摄碘率、抗体水平、血浆激素水平之间均无显著相关性(P＞0.05).所有无浸润性突眼患者未发生新发眼病,8例患浸润性突眼患者眼部症状无加重.结论 小剂量与常规剂量131I治疗甲亢一次性有效率无差别,而甲减发生率明显降低.适当调低常规治疗剂量治疗甲状腺功能亢进可能更加合理.
-
hsa-miR-200a对HEC-1B人子宫内膜腺癌细胞系增殖与凋亡的影响
目的 探讨hsa-miR-200a对人子宫内膜腺癌HEC-1B细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制.方法 应用荧光实时定量PCR(FQ-PCR)法检测hsa-miR-200a在人子宫内膜腺癌细胞HEC-1B中的表达水平；人工合成hsa-miR-200a模拟物、抑制剂,分别转染HEC-1B细胞；采用MTT法、流式细胞仪检测上调及抑制hsa-miR-200a的表达对HEC-1B细胞增殖活性与凋亡的影响；运用生物信息学分析hsa-miR-200a指向的与增殖和凋亡相关的靶基因;Western blot、FQ-PCR检测转染前后靶蛋白及其mRNA的表达水平.结果 子宫内膜腺癌细胞HEC-1B表达hsa-miR-200a; FQ-PCR检测hsa-miR-200a模拟物、抑制剂转染HEC-1B细胞成功；MTT法检测结果表明hsa-miR-200a抑制剂转染组中细胞增殖抑制明显；流式细胞仪检测结果表明hsa-miR-200a抑制剂转染组中细胞凋亡增加；生物信息学分析结果表明hsa-miR-200a调控的靶基因是SON、Pdcd4、磷酸酶-张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)；靶蛋白PTEN在转染模拟物组表达下调,抑制剂组中表达上调,且转染前后靶基因mRNA水平无显著变化,而蛋白SON、Pdcd4的表达量没有显著变化.结论 HEC-1B细胞中hsa-miR-200a表达与PTEN蛋白表达呈负相关,表明hsa-miR-200a可能通过调节PTEN蛋白表达水平从而影响HEC-1B细胞的增殖与凋亡.
-
CIP2A在喉癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)在喉癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系和对预后的影响.方法 采用免疫组化方法检测61例喉癌标本(包括40例对应癌旁正常组织),9例不典型增生和8例喉乳头状瘤中CIP2A的表达,结合临床病理资料进行分析.结果 CIP2A在正常癌旁组织中低表达或不表达,在喉鳞状细胞癌中的表达比在喉乳头状瘤和不典型增生中明显增高(P＜0.05).61例喉癌中,CIP2A阴性表达11例(18.0％),弱阳性13例(21.3％),阳性25例(41.0％),强阳性12例(19.7％),其阳性程度与喉癌的年龄、性别、吸烟和嗜洒无关(P＞0.05),而与肿瘤的分级分期、淋巴转移、组织分化程度和预后相关(P＜0.05).喉癌中CIP2A表达越高,其预后越差,高表达组总生存率和无瘤生存率低于低表达组(P＜0.05).结论 CIP2A参与喉癌的发生、发展过程,对评估喉癌预后有重要作用,可能成为喉癌治疗的有效分子靶标之一.
-
HuH7细胞系CD13+CD133+HCC细胞分选及CSCs特性分析
目的 探讨CD13、CD133双荧光标志流式细胞术(fluorescence activated cell sorter,FACS)分选人肝癌HuH7细胞系CD13+ CD133+ HCC细胞方法及癌干细胞(cancer stem cells,CSCs)特征.方法 CD13、CD133双标志,采用FACS从人肝癌HuH7细胞系分选出CD13+ CD133+ HCC、CD13+ CD133- HCC、CD13- CD133+ HCC、CD13- CD133- HCC等4种细胞亚群；通过CD13+ CD133+ HCC细胞生长曲线,细胞周期,形成肿瘤球和裸鼠体内成瘤能力,及对5-FU、吡柔比星化疗药物的敏感性研究,分析CD13+ CD133+ HCC细胞是否具有CSCs生物学特征.结果 人肝癌HuH7细胞系CD13+ CD133+HCC细胞占23.8％,3.1％分选为CD13+ CD133+ HCC细胞,78.45％的CD13+ CD133+ HCC细胞处于G0/G1期；CD13+CD133+ HCC细胞增殖明显快于其他3个细胞亚群；在裸鼠103个CD13+ CD133+ HCC细胞就可以成瘤,而1.0×105个CD13- CD133- HCC只有2只成瘤(2/5),干细胞培养CD13+ CD133+ HCC细胞8～15 d形成肿瘤球；CD13+ CD133+ HCC细胞对5-FU和吡柔比星具有抵抗特性,而其他3个亚群较易于杀灭.结论 CD13、CD133双标志FACS从HuH7分选的CD13+ CD133+ HCC细胞具有CSCs特征,可能成为HCC治疗靶细胞.
-
联合BOLD和DECS技术脑功能区定位辅助语言相关区脑肿瘤手术的应用
目的 利用BOLD和DECS技术进行语言功能区定位,实现语言功能区保护下肿瘤的大程度切除.方法 对15例语言相关功能区脑肿瘤患者,利用血氧依赖功能磁共振(BOLD-fMRI)技术和(或)术中唤醒麻醉下皮层直接电刺激(DECS)定位技术进行脑语言功能区定位；对所获定位资料进行个体化评估,术中辅助保护语言功能区,在神经导航指引下切除肿瘤.结果 15例患者成功获取了术前BOLD语言区图像,评估后其中6例患者实现了术前BOLD和术中DECS技术联合定位语言功能区.全组病例在保护语言区条件下病变全切除10例,次全切除3例,大部分切除2例.术后语言功能明显改善6例,无变化5例,短暂性感觉性失语2例,语言功能障碍明显加重2例.结论 术前BOLD-fMRI结合术中唤醒麻醉下皮层电刺激的方法可客观定位脑语言功能区,导航辅助保护语言功能区条件下切除肿瘤,在保护语言功能的同时大化切除肿瘤组织,提高患者术后生活质量.
-
TNF-α、IL-8与急性重症胰腺炎肺损伤中PMNs凋亡延迟的相关性研究
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)在急性重症胰腺炎(acute severe pancreatitis,ASP)合并急性肺损伤中中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMNs)凋亡延迟的相关性及其机制.方法 选取雄性SD大鼠48只,穿刺胆胰管并注入3.5％牛磺胆酸钠制作ASP合并急性肺损伤大鼠模型,分为牛磺胆酸钠注射后3、6、12 h及对照组.病理检测胰腺及肺组织；于预定时相取支气管灌洗液,密度梯度离心分离PMNs,流式细胞仪测定PMNs凋亡、坏死比例；ELISA检测灌洗液中TNF-α及IL-8的含量；检测NF-κB在肺组织中的表达.结果 ALI大鼠肺灌洗液中PMNs凋亡、坏死比例增加,凋亡延迟.支气管-肺泡灌洗液中的TNF-α及IL-8的含量较对照组显著增加,灌洗液中细胞TNF-α及IL-8 mRNA表达增加,不同干预时间组间具有显著差异,具有时间依赖效应；肺组织中NF-κB的表达显著增加.结论 TNF-α、IL-8在ASP合并急性肺损伤中可能发挥一定的作用.
-
左旋棉酚通过细胞自噬下调Namalwa细胞中B淋巴细胞刺激因子的表达
目的 探讨左旋棉酚[ (-)-gossypol]下调Namalwa细胞中B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)的可能机制.方法 采用CCK8、台盼蓝活细胞染色检测左旋棉酚在体外对Namalwa细胞的生长抑制作用,吖啶橙( acridine orange,AO)染色观察经左旋棉酚处理后细胞自噬的形态特征,Western blot检测细胞中BLyS和自噬蛋白微管蛋白轻链3(LC3)的表达情况.结果 左旋棉酚对Namalwa细胞有明显的增殖抑制作用,并且具有时间和剂量依赖性；AO染色后细胞内可观察到明显的细胞自噬小体；Western blot结果显示,左旋棉酚可下调Namalwa细胞中BLyS的表达,并上调LC3Ⅱ蛋白的表达；自噬特异性抑制剂3-methyladenine(3-MA)可显著抑制左旋棉酚对BLyS的下调与LC3Ⅱ的上调作用.结论 左旋棉酚可能通过诱导细胞自噬来下调B淋巴细胞中BLyS的表达,从而抑制细胞生长.
-
趋化因子与干扰素治疗慢性乙肝病毒学应答的相关性
目的 探讨血清趋化因子水平和慢性乙型病毒性肝炎患者聚乙二醇干扰素治疗病毒学应答之间的相关性.方法 纳入基因型为B型的慢性乙肝患者36例,于首次干扰素治疗前采血,检测血清CXCL9、CXCL10、CCL3 、CCL5浓度.患者均接受聚乙二醇干扰素α-2a 180 μg每周1次治疗,随访治疗3、6个月的疗效.结果 二元Logistic回归分析发现,仅治疗前血清CXCL9及AST是早期病毒学应答的独立预测指标.将患者分为血清CXCL9≥39.51 ng/L和血清CXCL9＜39.51 ng/L2组.治疗3个月时,两组的早期病毒学应答率分别为78.95％ (15/19)和23.53％(4/17),两组间差异有显著性(P＜0.05)；治疗6个月时,维持应答率在两组分别为63.16％(12/19)和11.76％(2/17),两组间差异有显著性(P＜0.05).结论 CXCL9表达水平较高的患者经聚乙二醇干扰素治疗后病毒学应答率较高,可能有利于指导慢性乙型肝炎患者的个体化用药.
-
RI基因真核表达载体的构建及其对人脐静脉内皮细胞的影响
目的 构建融合表达载体pcDNA3.1-RI,并检测核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因与血管生成素(angiogenin,ANG)的关系及对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及迁移能力的影响.方法 用RT-PCR方法扩增RI基因,酶切后将其插入pcDNA3.1,构建融合表达载体pcDNA3.1-RI,在脂质体介导下转染HUVECs,RT-PCR检测RI、ANG基因的mRNA表达水平；Western blot检测RI、ANG、MMP-2、MMP-9的表达水平；CO-IP法检测ANG和RI的相互作用,MTT法检测细胞的增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 真核表达质粒构建成功；转染pcDNA3.1-RI组细胞RI基因的mRNA及蛋白的表达较2个对照组(转染pcDNA3.1空载体组和未转染质粒组)均呈显著性增加(P＜0.05),而ANG基因的mRNA及蛋白的表达均降低(P＜0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达水平亦降低(P＜0.05)；CO-IP法检测到ANG和RI在细胞内能结合；转染pcDNA3.1-RI质粒到HUVECs细胞后细胞的增殖活力明显降低(P＜0.05),G0～G1期比例明显增加,S期减少.结论 成功构建的真核表达质粒能显著增加RI基因及其蛋白水平的表达,RI可以直接在转录水平上降低ANG的表达,在细胞内与ANG结合,从而影响内皮细胞的增殖、迁移能力.
-
64层CT心脏成像诊断主动脉-左心室隧道1例
主动脉-左心室隧道(aorta-left ventricular tunnel,ALVT),是主动脉根部有一跨过主动脉瓣与左心室相通的异常管道[1].本病罕见,临床表现多样,易误诊、漏诊[2].本院采用64层CT心脏成像成功诊断主动脉-左心室隧道1例,现报告如下.
-
内科胸腔镜诊治胸膜腔疾病的围术期护理
近年来,内科胸腔镜手术因其创伤小、痛苦少、术后恢复快等优点而广泛开展[1-2].我们采用日本OLYMPUS LTF240型软硬结合可弯曲电子内科胸腔镜对231例胸腔积液患者行内科胸腔镜检查,早期明确诊断,取得满意效果.报告如下.
-
抑郁状态与2型糖尿病形成各阶段代谢指标的相关性分析
近年来,随着人民生活水平的提高,以及社会竞争压力导致应激源增多,使糖尿病和抑郁患病率在全球范围内呈现出明显的上升趋势[1],世界卫生组织已将糖尿病归类为与生活方式有关的非传染性慢性疾病,并强调心理应激在其发病中的重要作用[2].流行病学资料显示糖尿病合并抑郁症的人群日益增加,抑郁症患者罹患糖尿病的几率明显高于一般人群[3].探讨糖尿病发病机制的佳研究方法是家系研究.本试验通过家系研究了解2型糖尿病发病自然史中不同病理阶段的抑郁状态,以及抑郁状态与各代谢指标的相关性.
-
慢性阻塞性肺疾病患者联合检测同型半胱氨酸、C反应蛋白水平变化及其意义
研究发现慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期(AE-COPD)患者血清及痰中CRP[1]显著升高,并与病情发展严重程度呈正相关,说明CRP在COPD发病过程中贯穿始终,从而在COPD患者气道炎症的发生发展过程及气流阻塞中起至关重要的作用[2].高同型半胱氨酸(Hcy)是心、脑及外周血管疾病的独立危险因素.研究发现COPD患者的血浆Hcy明显升高[3].本研究拟观察血清CRP、同型半胱氨酸水平在COPD的急性发生过程中的变化及同时检测这两个指标的意义.
-
Nordy微泡抗肿瘤血管治疗的超声造影及微血管密度分析
目的 探讨超声造影对兔VX2肿瘤组织抗血管生成治疗效果的评估价值.方法 40只VX2肿瘤模型新西兰大白兔随机分为实验组与对照组.实验组抗肿瘤血管生成治疗后与对照组同时进行超声造影,然后均进行免疫组化微血管密度( microvessel density,MVD)测定,再进行相关分析.结果 模型兔超声造影后,实验组超声造影大回声强度比为(117.10±9.71)％,显著低于对照组[(2 240.42±1 670.51)％,P＜0.01]；上升时间、达峰时间实验组显著高于对照组(P＜0.01).实验组与对照组治疗前后MVD变化差异具有显著性差异(P＜0.01).模型兔超声造影后得到的相关造影参数大回声强度比与MVD呈正相关,上升时间及达峰时间与MVD呈负相关(r=0.6794、-0.6154、-0.6977).结论 超声辐照携载Nordy药物微泡抗肿瘤血管生成治疗有效,同时超声造影能间接反映肿瘤血管生成的变化.
-
MMP3-1171 5A/6A位点基因多态性与COPD严重程度的关系
目的 探讨MMP2和MMP3基因多态性与COPD易感性的关系.方法 用聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法检测80例健康人和109例COPD患者MMP2(-735C/T)和MMP3(-1171 5A/6A)各位点等位基因和基因型.结果 MMP2和MMP3基因型及等位基因频率分布在COPD组和对照组间差异均无统计学意义(均P＞0.05),但MMP3 6A/6A基因型在Ⅲ～Ⅳ级COPD患者中出现频率较高,与重度、极重度COPD的发病风险相关,OR值为2.677(1.177～6.088).结论 MMP3(-1171 5A/6A)位点6A/6A基因型可能与重度、极重度COPD的发病风险相关联,MMP2(-735 C/T)位点基因多态性与COPD易感性无关.
-
星状神经节阻滞联合小针刀松解术治疗33例颈型脑供血不足
目的 探讨星状神经节阻滞联合枕后小针刀松解术治疗的临床效果.方法 按照试验纳入标准抽取33例脑供血不足患者,进行干预前后配对研究.通过星状神经节阻滞联合枕后小针刀松解术对患者进行干预.结果 治疗后患者经颅脑血流多普勒检测基底动脉收缩期血液流速(basilar artery-velocity of the systolic wave,BA-Vs)改善率为34.5％(10/29)；其中男性改善率为18.2％(2/11),女性改善率为44.4％ (8/18),二者比较,差异无统计学意义(P＞0.05).患者治疗后较治疗前血液流速改变(-2.62±8.43)cm/s,差异无统计学意义(P＞0.05)；男性治疗后血液流速改变(-6.36±9.34) cm/s,与治疗前比较,差异有统计学意义(P＜0.05),而女性未见明显改变(P＞0.05).患者主诉临床症状均有较明显的改善.结论 星状神经节阻滞联合枕后小针刀松解术能改变部分患者基底动脉血液流速,改善患者自觉症状.
-
131I治疗Graves病的远期效果随访研究
目的 了解131I治疗Graves病(简称GD)的远期效果和不良反应发生情况.方法 对接受131I治疗的516例GD患者进行6年随访,对治愈率和并发症发生率进行统计分析.结果 在访的516例患者中,384例行1次治疗,132例行2次治疗,1次治愈率89.8％,2次治愈率84.1％,总治愈率88.4％；甲减发生率1次治疗为24.5％,2次治疗为30.3％.1次、2次治疗治愈率及甲减发生率均无统计学意义(P＞0.05).结论 131I治疗GD安全、有效；甲减是其主要的不良反应；2次治疗不增加甲减的发生率,故1次治疗未愈者可考虑行2次131I治疗.
-
一期手术重建治疗膝关节脱位合并多发韧带损伤
目的 探讨膝关节脱位合并多发韧带损伤急性期行一期韧带重建术后近期疗效.方法 2005年1月至2011年12月,对39例膝关节脱位患者采用一期同种异体肌腱移植重建前后交叉韧带,锚钉缝合修复内侧副韧带,部分股二头肌腱重建修复外侧副韧带损伤.术后早期康复锻炼.结果 患者术后均未发生关节内感染.全部切口Ⅰ期愈合.术后均获至少12个月随访.2例患膝较健侧屈曲缺失25°,其余膝关节活动度恢复正常.膝关节Lysholm评分为82～95分,平均87.6分.后抽屉试验Ⅰ度阳性6例,Lachman试验阳性(Ⅰ度)6例,内、外翻试验及前抽屉试验均为阴性.结论 对外伤性膝关节脱位合并多发韧带损伤于急性期一期重建,近期疗效满意.
-
HPLC法测定活络镇痛胶囊中欧前胡素的含量
目的 建立测定活络镇痛胶囊巾欧前胡素含量的高效液相色谱法.方法 采用DiamonsilTM C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm)；流动相:甲醇-水(55∶45)；检测波长:300 nm；流速:1.0 ml/min.结果 欧前胡素在0.120～0.600 μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999)；欧前胡素平均回收率98.11％,RSD为0.93％(n=6)；重现性较好:6次测定结果平均值为0.182 mg/粒,RSD为1.68％；精密度和稳定性的相对标准偏差RSD分别为0.09％和0.51％.结论 高效液相色谱法操作简便,重现性好,结果准确可靠,适用于该药的质量控制.
-
H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定
目的 获取H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白的多克隆抗血清,制备NS1蛋白的多克隆抗体.方法 利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白GST-NS1,采用Glutathione-sepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白.纯化的GST-NS1蛋白以不同剂量皮下注射免疫BALB/c小鼠,收集抗血清,采用Protein A-sepharose和CNBr-sepharose 4B亲和层析从抗血清中纯化抗NS1蛋白的多克隆抗体.Western blot和免疫荧光法鉴定多克隆抗体的特异性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体的效价.结果 SDS-PAGE结果表明,融合蛋白GST-NS1以可溶形式表达,诱导4h的表达量占细菌可溶性蛋白的32.6％,融合蛋白的纯度达到90％以上.Western blot分析显示,亲和层析制备的多克隆抗体对NS1蛋白具有高度特异性.ELISA结果表明,皮下注射25、50、100 μg GST-NS1融合蛋白的BALB/c小鼠血清光密度D(450)值均明显增高(P＜0.01),其滴度达到1∶3200.免疫荧光观察到病毒感染的A549细胞中,有内源性NS1蛋白的表达.结论 成功地从抗血清中制备出NS1蛋白的多克隆抗体,制备的抗体具有高度特异性.
-
地榆升白片在结核化疗中的应用评价及共识
结核病是危害人类健康的重大慢性传染性疾病.目前,全球已有20亿人感染结核菌,活动性结核患者数达1500万,每年新发结核患者达800～1000万,有180万人因结核病死亡.我国结核病发病人数占全球的14.3％,位居第2,是全球22个结核病高负担国家之一.
