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B7-2和PD-L1 mRNA表达在慢性乙型肝炎免疫耐受中的意义
T淋巴细胞介导的细胞免疫反应是乙型肝炎病毒(HBV)感染的主要免疫反应,而T细胞的活化依赖于双信号的刺激,第一信号来自抗原,第二信号由共刺激分子提供.B7-2(CD86)和PD-L1(B7-H1)是正负共刺激分子的代表,B7-2组成型表达于抗原提呈细胞上,上调速度非常快,迅速促进T细胞的分化和产生效应[1];PD-L1被广泛地诱导性表达在身体各器官组织中,对免疫应答起负性调控作用,减弱T细胞的免疫应答,是诱导免疫耐受和T细胞凋亡的主要共刺激分子[2].
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结节病患者HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1等位基因多态性
结节病是多系统受累的非干酪性类上皮细胞肉芽肿性疾病.病因尚不清楚,目前认为,结节病主要是遗传易感人群暴露于原因未明的可传播因素,引起过度的细胞免疫反应导致肉芽肿所致~[1].人类白细胞抗原(HLA)具有多态性,是人体免疫功能的细胞分子学基础.在不同的种族研究中发现,结节病与HLA基因有一定的相关性~[2].本研究对华东地区汉族结节病患者进行HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1基因分型,探讨HLA基因多态性与汉族结节病的相关性.
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肾移植受者接种流感疫苗后的免疫应答
一般认为肾移植受者接种流感疫苗可能会导致其产生抗HLA抗体或提高抗HLA抗体的效价.为了评估肾移植受者接种流感疫苗的安全性,法国研究者在2005~2006年流感季节选择了66例稳定的肾移植受者和19位健康自愿者接种流感疫苗,分别测定接种疫苗当天和30 d以后受试者体内抗HLA抗体的水平,同时测定流感特异性抗体水平和评估T细胞免疫反应情况.
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HCV HVR1相关基因诱导小鼠免疫反应的比较
目的 对小鼠进行两种基因免疫方法的比较:分别以真核质粒pcDN3.1(+)为载体和以伤寒减毒活菌苗为载体,携带丙肝病毒高变区1(HVRI)相关模拟表位的DNA序列,诱导细胞免疫应答,以寻找较好的疫苗免疫途径.方法 根据HCV HVR1模拟表位的肽序列合成DNA序列,并将其连接到pcDN3.1(+)(pcDN3.1-SP)真核质粒上,然后用重组质粒转化伤寒减毒活菌苗Ty21a(Ty21a-SP).Ty21a-SP和peDN3.1-SP分别经口服和肌注免疫小鼠后,杀鼠、分离脾细胞,脾细胞经混合肽刺激后,用流式细胞仪检测CD8+IFN-γ+细胞;用非放射性MTS法检测细胞增殖反应;以非放射性LDH法检测CTL反应.结果 对小鼠用pcDN3.1-SP和Tyr21a-SP免疫后,取脾淋巴细胞经混合肽刺激后,明显增殖,CD8+IFN-γ+淋巴细胞比例增高,并诱导较强的CTL反应,但pcDN3.1-SP免疫后的上述反应较Ty21a-SP免疫弱.结论 使用伤寒减毒活菌苗作为载体进行基因免疫有利于产生细胞免疫反应.
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利用体内电脉冲增强治疗型HBV DNA疫苗细胞免疫反应的研究
目的:研究在初次免疫和加强免疫阶段分别使用不同的免疫模式能否增强HBV DNA疫苗的细胞免疫反应.方法:肌内注射10 μg HBV DNA疫苗的Balb/c小鼠根据电脉冲实施时间的不同选择两种免疫模式,DNA+EP或EP+3 d+DNA,按在初次免疫和加强免疫阶段免疫模式的不同组合次序进行分组.各组小鼠在实施加强免疫后第14天取脾细胞做抗原特异的IFN-γ ELISPOT检测和FACS分析.结果:在初次免疫和加强免疫阶段使用不同免疫模式的实验组与采用相同免疫模式的实验组相比,诱导的特异性IFN-γ T细胞频数和IFN-γ的CD8+T细胞百分比均增加了4倍以上,差异有高度统计学意义(P<0.01),而分别在初次免疫和加强免疫阶段实施的两种免疫模式的不同次序产生的细胞免疫效果之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:在初次免疫和加强免疫阶段利用体内电脉冲实施不同的免疫模式能显著增强HBV DNA疫苗在动物体内的细胞免疫效果.
关键词: HBVDNA疫苗 体内电脉冲 初次免疫-加强免疫策略 细胞免疫反应 -
慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病的临床特征、诊断及治疗
慢性炎性脱髓鞘性多发性神经根神经病(CIDP)是一种累及运动和感觉,可不对称或对称,近端及远端均可受累的病情进展超过2个月的脱髓鞘性多发性神经病[1].CIDP的临床表现与急性炎症性脱髓鞘性多神经根神经病(AIDP、GBS)相似,免疫治疗有效,提示该病有免疫介导的发病机制,与周围神经抗原的细胞免疫反应及体液免疫反应相关.许多对CIDP大样本的研究及诊断标准的相继提出,提高了对CIDP的认识,指导了诊断与治疗.
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断指移植手功能重建手术的外周T淋巴细胞分析
断指移植手术过程中常常遇到术后自身免疫系统无征兆发病,发病机制目前认为是由于自身免疫系统对外源或者内源移植的排斥反应.近年来,断指移植手术与免疫细胞学的关相关性倍受关注.有相关文献认为,断指移植手术术后免疫排斥反应与自身的T淋巴细胞免疫反应密切相关[1].本研究针对断指移植所产生的免疫排斥反应病例进行相应的临床分析与治疗,并对免疫排斥反应机制提出一些补充.
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炎症性肠病模式识别和信号传导机制障碍
炎症性肠病(IBD)的病因与发病机制迄今仍未明确.但目前较普遍的观点认为,IBD是在先天,如易感基因;与后天,如分娩(经阴道分娩或剖腹产)和婴儿喂养方式(母乳或人工喂养)、生活方式(尤其是西方生活方式)以及个人卫生等因素影响下肠道抗原物质(如肠道细菌,尤其是共生菌,与食物等)触发产生不适当免疫反应(失去免疫耐受),而导致肠道黏膜(或全层)以侵袭性细胞免疫反应为主的持续炎症性病变.
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川芎平喘合剂对哮喘患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响
目的:探讨川芎平喘合剂治疗哮喘的临床疗效及对患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响.方法:选取中医辨证为风哮夹瘀型且符合慢性持续期支气管哮喘诊断的患者,随机分为对照组和治疗组.对照组采用西医常规治疗(吸入沙美特罗/氟替卡松吸入剂),治疗组在对照组基础上加服川芎平喘合剂,疗程均为1个月.监测治疗前后两组中医证候积分、哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能,检测外周血γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平及转录因子T-bet、结合蛋白-3(GATA-3)的mRNA表达变化,评价临床疗效.结果:两组中医证候积分均较治疗前显著下降(P<0.01),ACT评分、肺功能指标[1秒用力呼气容积占预计值%(FEV1%)、大呼气峰流量占预计值%(PEF%)]均较治疗前明显升高(P<0.01),且治疗组的改善作用均优于对照组(P<0.01或P<0.05);两组血清IFN-γ、T-bet mRNA均明显升高(P<0.01),血清IL-4、GATA-3 mRNA均明显降低(P<0.01),且治疗组对IFN-γ/IL-4及T-bet/GATA-3的调节作用均显著优于对照组(P<0.05).治疗组总有效率为96.7%,对照组为80.0%,两组总体疗效差异有统计学意义(P<0.05).结论:川芎平喘合剂对哮喘的疗效确切,且可能与调节患者Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3的平衡有关.
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中国HIV-1 BC亚型包膜蛋白gp120核酸疫苗诱导的细胞免疫反应
目的 探讨中国HIV-1 BC亚型包膜蛋白gp120(BC-gp120)诱导的细胞免疫反应.方法 使用前期构建的表达中国HIV-1BC-gp120共识序列的核酸疫苗和pSW3891空载体质粒,通过电转录方式对雌性BALB/c小鼠进行免疫实验,通过T细胞酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测小鼠脾脏分泌γ干扰素(IFN-γ)的T淋巴细胞的数量.结果 以第10号肽(NGTYMFTYMPN)为刺激肽,HIV-1 BC-gp120免疫组分泌IFN-γ的T淋巴细胞数高于空载体组(P<0.05).结论 表达中国HIV-1BC-gp120共识序列的核酸疫苗可以诱导特异性的细胞免疫反应.
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结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧基酶诱导小鼠细胞和体液免疫应答
目的 检测结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)对BALB/c小鼠的免疫保护作用.方法 选清洁级BALB/c小鼠60只,随机分为两组,实验组和对照组.实验组每只小鼠用表达的PEPCK融合蛋白 10μg加弗氏不完全佐剂进行腹腔免疫注射,对照组小鼠仅用弗氏不完全佐剂注射.每隔2w免疫1次,共免疫3次.末次免疫2w后,分别取小鼠脾脏、血清,流式细胞仪检测CD4+和CD8+ T细胞,MTT法检测淋巴细胞对刺激的应答水平,ELISA检测血清各种细胞因子及抗PEPCK抗体.结果 实验组小鼠的脾脏明显大于对照组小鼠的脾脏,且粘连严重,CD4+T细胞增殖明显(73.5±3.69),CD4+/CD8+比值显著升高(5.1±0.98)(P<0.01);且淋巴细胞的应答能力明显强于对照组小鼠;实验组小鼠血清中IFN-γ、IL-12和TNF-α明显高于对照组,血清抗体滴度随免疫次数逐步增高.结论 结核杆菌PEPCK能够有效的刺激机体产生细胞免疫反应和体液免疫反应,尤以细胞免疫反应为主,是很好的抗结核候选疫苗分子之一.
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Ag85A、Ag85B和HspX蛋白特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值
目的:探讨3种结核分枝杆菌保守抗原Ag85A、Ag85B和HspX抗原特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值.方法:收集我院收治的胸腔积液患者30例,根据胸水性质,分为结核性胸膜炎组20例,非结核性胸膜炎组10例.收集胸水样本,分离胸水样本中细胞成分.原核表达、纯化并鉴定结核分枝杆菌Ag85A、Ag85B、HspX蛋白.用Ag85A、Ag85B及HspX蛋白分别刺激2组患者的胸水细胞成分,通过ELISA技术检测IFN-γ表达水平并进行组间比较.结果:Ag85A蛋白刺激后,非结核性胸膜炎组IFN-γ为(15.50±2.41) ng/L,结核性胸膜炎组IFN-γ为(1 775.00±362.86)ng/L; Ag85B蛋白刺激后,非结核性胸膜炎组IFN-γ为(14.89±2.30)ng/L,结核性胸膜炎组IFN-γ为(2 442.50±418.94) ng/L; HspX蛋白刺激后,非结核性胸膜炎组IFN-γ为(14.20±2.30)ng/L,结核性胸膜炎组IFN-γ为(3 570.00±496.41)ng/L;两组比较均P<0.01.结核性胸膜炎组中,不同患者对不同抗原刺激所产生的IFN-γ水平有一定差别.结论:结核性胸膜炎患者胸水中的细胞成分经Ag85A、Ag85B及HspX蛋白刺激后,IFN-γ水平均不同程度明显升高,该方法对结核性胸膜炎有一定的辅助诊断价值.
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Ag85A蛋白特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值
目的:探讨Ag85A蛋白特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值.方法:原核表达、纯化Ag85A蛋白.收集我院收治的胸腔积液患者149例,分为结核性胸膜炎组100例,非结核性胸膜炎组49例,收集胸水样本.ELISA法检测胸水样本上清成分内抗Ag85A抗体表达水平;将Ag85A蛋白刺激胸水样本细胞成分,检测IFN-γ表达水平的变化.结果:2组胸水中抗Ag85A抗体均未明显升高;经Ag85A蛋白刺激后,结核性胸膜炎组IFN-γ表达明显增加,平均(1151.25±217.81)μg/L,非结核性胸膜炎组IFN-γ表达未明显增加,平均(14.00±1.02)μg/L(P<0.01).结论:结核性胸膜炎胸水样本中细胞成分经Ag85A抗原刺激后IFN-γ的表达明显增加,该方法对结核性胸膜炎的辅助诊断有一定的价值.
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肺结核患者细胞因子水平测定的临床研究
肺结核的发生与机体细胞免疫功能失衡有关,多种细胞因子在细胞免疫反应的启动与局部炎症反应的发生发展中起着非常重要的作用.
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一种新型的皮卡(PIKA)佐剂狂犬病疫苗——抢救生命的治疗性疫苗
狂犬病是一种发病凶险、危害极大的人兽共患传染病,病死率100%.全球98%的狂犬病病例集中在亚洲,我国是狂犬病的高发地区,80年代平均年发病人数为5 530例,高年发病数为7 043例.近年保持在3 000例左右,2008年报告3 300例.控制人狂犬病发病死亡的主要措施为伤口处理、接种狂犬病疫苗和注射抗狂犬病免疫血清或免疫球蛋白.许多地方建立了犬伤门诊,伤口处理有较大进步;但现行市售的狂犬病疫苗的质量急待提升;由于生产供应、过敏反应或血源安全和价格昂贵等多种原因,抗血清或免疫球蛋白的使用寥寥无几,狂犬病的控制令人担忧.一种新型的皮卡佐剂狂犬病疫苗,有突出的细胞免疫反应,具有强烈快速的细胞免疫和体液免疫,集现行狂犬病疫苗和抗血清或免疫球蛋白联合作用于一体的高效皮卡狂犬病疫苗,乃众望所归、呼之欲出.
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多发性硬化患者接种TCR CDR2 BV6S1合成肽产生的肽特异性T细胞反应
目的:研究多发性硬化(MS)患者接种免疫肽(TCR CDR2 BV6S1合成肽)产生的肽特异性T细胞反应.方法:5例MS患者40周内接种6次(300 μg/次)佐剂乳化的TCR BV6S1肽,监察安全性和免疫原性,用淋巴细胞增殖测定(LPA)和皮肤迟发性超敏反应(DTH)实验来研究接种免疫肽产生的特异性细胞免疫反应.结果:TCR BV6S1肽耐受性、安全性好,无明显副作用,LPA显示有明显增加,患者DTH实验也呈阳性反应.结论:TCR BV合成肽作为肽疫苗耐受性好,能诱导细胞免疫反应.
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适应性免疫在丙型肝炎病毒持续感染中的作用
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是一种黄病毒属的单股正链嗜肝RNA病毒,是引起慢性肝病的主要病原体.机体在抗HCV感染免疫过程中,固有免疫(innate immunity)与适应性免疫(adaptive immunity)相互依赖,互相协作.