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2型糖尿病并发肾病大鼠模型的制备
糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)的主要慢性并发症,因其导致尿毒症死亡者约占糖尿病病人的27%～31%[1].糖尿病肾病的动物模型一般采用大剂量STZ腹腔注射的方法,但与2型糖尿病肾病的病理变化仍存在一定差距.本文用小剂量STZ腹腔注射,饲以高脂饲料,单侧肾切除相结合的方法收到较为满意的结果.
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氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏一氧化氮系统基因表达的影响
我们于2001年4～7月应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了单侧肾切除糖尿病大鼠肾脏一氧化氮合酶(NOS)3种异构体(神经元型bNOS、诱导型iNOS、和内皮型ecNOS)的mRNA表达,并观察了血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏一氧化氮(NO)系统基因表达影响,为其临床应用提供依据.
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糖尿病大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ2型受体及细胞因子mRNA表达初步研究
近年来,已有研究表明血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)拮抗了几乎大多数血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)的生物学作用.我们应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了8周单侧肾切除糖尿病大鼠肾皮质AT2受体mRNA表达,同时检测了大鼠肾皮质转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及Ⅳ型胶原的mRNA表达.且用放免法检测了大鼠肾皮质血管紧张素Ⅱ含量,探讨其意义.
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单侧肾切除术后对侧肾脏成石状况分析
目的 探讨单侧肾切除术后对侧肾脏成石状况及特点.方法 回顾性分析2010年6月至2016年6月收治的1 048例行单侧肾切除术患者的病例资料.男596例,女452例.肾切除时年龄16 ～ 87岁,平均58.7岁.213例合并代谢综合征,532例合并代谢综合征组分.164例既往有泌尿系结石病史.对1 048例患者术后对侧肾脏的成石状况进行随访,分析对侧肾脏继发结石的特点,比较不同性别、年龄、合并症和泌尿系结石既往史患者肾切除术后对侧肾脏的成石差异.结果 本研究1 048例患者随访0.5 ～6.0年,平均3.2年.89例术后对侧肾脏发生结石,发生率为8.5％,高于我国普通人群泌尿系结石的发生率(1％～5％).男性和女性肾切除后对侧肾脏结石的发生率分别为9.1％(54/596)和7.7％ (35/452).＜30岁者肾切除后对侧肾脏结石的发生率为8.6％(3/35);30 ～49岁者为12.5％(34/272);50 ～69岁者为7.3％(37/504);≥70岁者为6.3％(15/237).合并代谢综合征组分者肾切除后对侧肾脏结石的发生率为12.2％(65/532),合并代谢综合征者的发生率为19.7％ (42/213),不合并代谢综合征组分者的发生率为4.7％(24/516).既往有泌尿系结石病史者肾切除后对侧肾脏结石的发生率为30.5％(50/164),既往无泌尿系结石病史者为4.4％(39/884).结论 单侧肾切除术后对侧肾脏结石形成的风险增加,合并代谢综合征及既往有泌尿系结石病史者尤为明显.
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蛋白尿肾损伤过程中凝血酶敏感蛋白表达的意义
为进一步探讨尿蛋白致肾损伤的机制,我们通过免疫组织化学染色及Northern杂交等方法,观察牛血清白蛋白(BSA)诱导的单侧肾切除大鼠肾损伤过程中,不同时间点蛋白尿对肾组织凝血酶敏感蛋白-1(TSP1)、纤维连接蛋白(FN)核酸及蛋白表达的影响及其意义.
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柴苓方及其有效成分治疗实验性肾炎的研究
传统中药柴苓汤张仲景<伤寒论>中著名方剂小柴胡汤及五苓散的合方,在临床广泛用于治疗慢性肾脏病,疗效确切.为了进一步澄清柴苓汤的作用机制,我们利用四种不同的动物模型验证了柴苓汤对实验性肾炎的治疗作用,从12味中药中,我们筛选出柴胡为治疗肾炎的主要中药.并从柴胡中分离出药效学活性强的部分-柴胡皂甙-d.进而就柴胡皂甙-d对大鼠单侧肾切除加单克隆抗体1-22-3所致进行性系膜增生性肾小球肾炎的作用及其机制进行了研究.以下是我们所采用的实验方法和结果.
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高脂饮食对单侧肾切除大鼠留存肾内转化生长因子β1表达的影响
目的:观察高脂血症对单侧肾切除大鼠留存肾内转化生长因子β1表达的影响.方法:选取雌性SD大鼠,随机分为4组:正常组,单侧肾切除组,高脂组,高脂+单侧肾切除组.观察各组大鼠血脂、尿蛋白和肾功能变化,肾脏病理学改变,肾组织转化生长因子β1和Ⅳ型胶原的表达.结果:高脂+单侧肾切除组大鼠血总胆固醇、低密度脂蛋白、血肌酐和尿蛋白明显升高,内生肌酐清除率显著降低(0.71±0.18 vs 1.17±0.24,P＜0.01),在血脂升高和肾功能损害同时,肾组织内TGF-β1 mRNA(1.24±0.18 vs 0.78±0.11,P＜0.01)和TGF-β1蛋白(2.88±0.37 vs 1.39±0.09,P＜0.01)显著上调,Ⅳ型胶原表达增加,细胞外基质产生增多.结论:高脂血症可通过上调肾切除术后留存肾内TGF-β1表达,导致留存肾功能损害进行性恶化,加速肾硬化进程.
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单侧肾切除联合 STZ 诱导糖尿病肾病大鼠模型构建影响因素分析
目的：：探讨单侧肾切除联合 STZ 诱导 SD 大鼠糖尿病肾病(DN)造模过程中的注意事项及动物成模后的病理改变。方法：健康雄性大鼠24只,随机分为2组：假手术组(S 组)和糖尿病肾病模型组(DN 组)。DN 组采用左侧肾切除,术后2周腹腔注射 STZ 方法建立大鼠 DN 模型,以造模后72 h 非空腹血糖达到16.8 mmol/L 为模型成立标准。观察 DN 大鼠体重、饮水量、进食量、尿量和血糖变化,于成模后4周处死动物,测定血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)含量,观察肾组织形态学变化。结果：与 S 组相比, DN 组大鼠于成模后体重增速明显放缓(P <0.01),进食量和饮水量增加,24 h 尿量增多(P <0.01),非空腹血糖维持在成模标准之上。DN 组大鼠 BUN 和 SCr 含量较 S 组大鼠明显升高,肾脏病理切片提示 DN组大鼠肾皮质细胞明显受损。结论：单侧肾切除联合 STZ 诱导可以建立稳定的大鼠 DN 模型。
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两种糖尿病肾病大鼠模型的比较
目的:比较两种糖尿病肾病大鼠模型的优劣.方法:采用单侧肾切除合并尾静脉注射链尿佐菌素(Streptozotocin,STZ)(STZ加单侧肾切除组)及单纯腹腔注射链尿佐菌素(STZ)(STZ组)两种方法,分别将Wister大鼠造成糖尿病肾病大鼠模型,然后检测二种方法在空腹血糖,尿β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)及尿微量白蛋白(albulin,Alb)的排出量方面的差异.结果:STZ组空腹血糖(33.59mmol/L)明显高于STZ加单侧肾切除组(16.12mmol/L);STZ+单侧肾切除组β2-微球蛋白,尿微量白蛋白的排出量较STZ组有明显增加,其病理改变也较明显.结论:STZ合并单侧肾切除更符合糖尿病肾病的病理改变.
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局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病动物模型的研究进展
局灶节段性肾小球硬化型阿霉素肾病动物模型是较好模拟人类局灶节段性肾小球硬化(FSGS)的经典动物模型.此模型的建立与动物品系,阿霉素的给药剂量、次数及途径,单侧肾切除或单侧肾动脉钳夹术,造模周期等因素有密切关系.建立统一的该模型评价标准体系,并研究其发病机制,对深入探究如何从发病机制方面干预其病理进程具有重要意义.
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肾脏切除对对侧健肾结石发病影响的研究
目的 分析肾脏切除对对侧健肾结石发病的影响.方法 选取我院收治的88例单侧肾脏切除术后对侧健肾结石病人为观察组,同期收治的88例单侧肾脏切除术后未发肾结石病人为对照组,并选取同期来我院进行健康检查的健康志愿者88例为健康组,分析和比较三组病人的临床资料,单因素和Logistic多因素分析单侧肾脏切除病人术后对侧健肾结石发生的相关因素.比较观察组、对照组、健康组术后1天、7天、1个月、3个月和6个月的肾小球滤过率.结果 观察组病人不同时间点的肾小球滤过率术后1天、7天、1个月、3个月、6个月分别为53.51±13.78、54.23±18.90、55.33±20.67、56.75±21.71和55.89±18.99(单位:ml·min-11.73 m-2,下同),对照组分别为71.78±19.06、72.24±20.66、73.67±22.16、78.98±23.32和77.66±20.09,健康组为(105.11±17.75),对照组病人不同时间点的肾小球滤过率低于健康组(P<0.05).单因素分析结果显示,泌尿系结石既往史、合并高血糖、合并高血压、合并高尿酸血症、合并血脂紊乱与单侧肾脏切除病人术后对侧健肾结石发生有密切相关性(P<0.05).Logistic多因素分析结果显示,合并泌尿系结石既往史(95％CI:2.397～4.184,P<0.05)、合并高血糖(95％CI:2.025～3.987,P<0.05)、合并高血压(95％CI:2.017～4.812,P<0.05)、合并高尿酸血症(95％CI:2.485～4.128,P<0.05)、合并血脂紊乱(95％CI:2.593～3.717,P<0.05)为单侧肾脏切除病人术后对侧健肾结石发生的危险因素(P<0.05).结论 单侧肾脏切除术后病人肾小球滤过率降低,合并泌尿系结石既往史、高血糖、高血压、高尿酸血症、血脂紊乱会增大病人对侧健肾结石发病率.
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高脂喂养加单侧肾切除制作小鼠糖尿病肾病模型研究
目的 探讨高脂喂养加单侧肾切除制作糖尿病肾病(DN)模型的可行性.方法 8 周龄的MKR 小鼠(骨骼肌特异性Insulin/IGF-1 双受体缺失的转基因小鼠)60 只,雌雄各半,随机分为3 组,每组20 只.空白组(基础饲料喂养),高脂组(高脂饲料喂养),模型组(高脂饲料喂养+单侧肾切除组).造模后第1、2、4、6、8 周测体质量、空腹血糖、尿微量白蛋白(UmAlb).8 周后心脏采血处死各组小鼠留取血标本及肾组织分别进行血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)的检测及光镜和电镜下观察肾脏病理学改变.结果 与空白组比,8 周时,高脂组、模型组两组血糖明显升高(P<0.01),而两组之间比较,血糖无明显变化(P>0.05).模型组UmAlb、Cr、BUN 较空白组、高脂组明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01),且肾质量(KW),肾/体质量(KW/BW)较空白组显著增大,病理变化明显.结论 高脂饲料喂养加单侧肾切除的MKR 小鼠是一个良好的糖尿病肾病模型.
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大鼠肾脏组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白增龄性的表达变化
肾脏是衰老较快的器官之一,随年龄的增长出现肾小球肥大、系膜增生、肾小球硬化和肾小管-间质纤维化等病理变化.但这一现象的分子机制并不完全清楚.研究发现,雷帕霉素可显著抑制糖尿病肾病早期及单侧肾切除后代偿性的.肾小球肥大[1,2],并且它还能减轻蛋白尿相关的肾小管-间质的炎性反应及纤维化[3].
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健康大鼠单侧肾切除后肾脏的代偿功能观察
目的 观察正常大鼠摘肾后生理变化和代偿侧肾脏的病理变化,为肾移植的进一步推进与发展提供理论依据.方法 采用尿肌酐检测试剂盒检测尿肌酐;考马斯亮蓝法检测尿蛋白;自动生化仪检测肾功能;PAS特殊染色方法观察肾脏病理变化.结果 2～3月龄、7～9月龄和10～12月龄的肾切组大鼠的尿蛋白/肌酐比值于术后1个月显著升高(P<0.001),其中2～3月龄和7～9月龄雄性肾切组的术后2个月降至正常,雌性肾切组的术后3个月降至正常,而10～12月龄的均在术后3个月降至正常;4～6月龄肾切组的与正常组的比较无明显差异(P>0.05).结论 单侧肾切除术后1～2个月为关键期,直接关系到大鼠术后的近期和远期的安全性;年龄幼小或老年者单侧肾切除后肾脏损伤的风险大;雄性大鼠代偿功能较好.
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单侧肾切除STZ诱导糖尿病肾病大鼠动物模型研究
目的 探讨单侧肾切除STZ诱导大鼠糖尿病肾病(DN)造模过程中的注意事项.方法 通过单侧肾切除并腹腔空腹给STZ以建立大鼠糖尿病肾病模型.术后1周给药,给药72h后检测血糖,同时观察糖尿病大鼠8周和12周肾脏病理切片和电镜片的变化.血糖达到16.7 mmol/L为造模成功.结果 经过4批实验,正确处理造模过程中注意事项,成功复制出糖尿病大鼠模型.8周和12周肾脏病理切片和电镜片均提示显著变化.结论 按有关注意事项,可完成单侧肾切除STZ诱导大鼠DN造模.
