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原发性高血压患者细胞外间质水平及其临床意义
检测血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)的水平与研究其对高血压心肌纤维化患者的临床价值.高血压左心室肥大组35例、高血压不伴左心室肥大组30例及对照组40名,用超声心动图测定左心室重量指数(LVMI),用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定血清PCⅢ、LN和HA.高血压左心室肥大组较高血压不伴左心室肥大组和对照组的血清PCⅢ、LN和HA含量明显增高(P<0.01).结论是血清PCⅢ、LN和HA可以作为高血压左心室肥大患者心肌纤维化的观察指标.
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培养小鼠卵巢表面上皮细胞合成细胞外间质的研究
目的研究培养状态下卵巢表面上皮( ovarian surface epithelium,OSE)的特性. 方法细胞培养,天狼星红-偏振光法,生物素-抗生物素蛋白间接免疫荧光方法,原位杂交. 结果体外培养的OSE可表达Ⅳ型胶原和间质金属蛋白酶-2(matrix met alloproteinase-2,MMP-2)的mRNA,合成、分泌Ⅰ型、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白(laminin,LN ). 结论 OSE在体外培养时,可合成多种细胞外间质(extracellular ma trix,ECM)成分和间质金属蛋白酶(MMP-2),提示OSE细胞可能在排卵和排卵后的伤口修复对 ECM的合成和降解等生理过程中起重要作用.
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子宫颈鳞状细胞癌纤维结合素、层黏蛋白及Ⅳ型胶原的异常表达
目的通过对纤维结合素(Fibronectin,FN)和层黏连蛋白(Laminin,LN)及Ⅳ型胶原蛋白的表达进行检测,探讨基底膜重构与宫颈癌分化程度的关系.方法应用双重免疫荧光染色技术,对正常人及不同分化程度的子宫颈鳞状细胞癌病人子宫颈石蜡包埋组织的FN、LN及Ⅳ型胶原表达进行检测,并应用共聚焦显微镜观察结果.结果正常子宫颈组织中,细胞外间质内Ⅳ型胶原和LN蛋白呈线状环绕于血管及上皮下基底膜内,FN呈细条索分布于基底膜和间质内.子宫颈癌组织中,癌细胞团周围基底膜内的Ⅳ型胶原的线状荧光减弱、断裂甚至缺失,尤其以低分化鳞状细胞癌明显.而FN和LN蛋白表达增多,并与癌细胞分化程度负相关.一些癌细胞浆内可见FN和LN蛋白的阳性染色.结论子宫颈鳞状细胞癌时,基底膜变薄、断裂,Ⅳ型胶原降解.而癌细胞浆及邻近癌组织的间质内,FN及LN表达增多,并与细胞分化程度呈负相关.
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肺腺癌结节MDCT动态增强表现与肿瘤间质特征的相关性
目的 观察肺腺癌结节MDCT动态增强表现与肿瘤间质特征间的关系.方法 收集经手术病理证实肺腺癌结节患者33例,术前均接受MDCT平扫及动态增强扫描.记录结节强化值、对比剂廓清值和结节强化分布形态.通过半自动分割软件计算肿瘤内侵犯性(ISPT)和非侵犯性间质比例(NSPT).结果 肺腺癌结节肿瘤内ISPT与结节强化值间呈正相关(r=0.374,P=0.008). NSPT与对比剂廓清值间呈正相关(r=0.216,P=0.006). CT强化早期,肺腺癌结节实性部分强化形态分布与侵犯性间质分布间具有良好的对应性.结论 肺腺癌结节强化值、对比剂廓清值与肿瘤间质成分明显相关.CT动态增强表现会随着肿瘤内间质比例、分布的不同而变化.
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细胞片技术的应用现状
组织工程的概念先是由化学家Langer及外科医师Vacantil在1980年代后期提出[1].组织工程主要研究组织和器官的再生与形成,利用工程学与生物科学的原理及应用,在一个类似组织与器官形状的生物材料中种入细胞,使细胞在材料上生长成新的组织与器官,以供修复人体的组织缺损.近年来已经通过组织工程方法获得了许多种类的组织[2],例如软骨[3]、心瓣膜[4]和血管[5]等用于修复相应组织、器官.然而,传统组织工程方法仍存在诸多缺点,包括材料在生物体内降解引起的炎症反应[6-7]、细胞附着于材料上的低效性[8]及无法控制的细胞-生物材料间交互作用[9]等,限制了组织工程学的发展和临床应用.为了更好地解决材料与组织生物相容性的问题,日本东京女子大学的Yamato与Okano教授等提出细胞片技术(cell sheet technology,CST)的方法[10-12].细胞片技术将细胞在特殊培养皿培养,获取的过程中不使用任何蛋白水解酶,可生成具有天然的细胞外间质的完整细胞片.
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时间分辨荧光免疫分析检测血清透明质酸方法的建立和临床应用
透明质酸(hyaluronic acid,HA)是肝脏细胞外间质中蛋白多糖的一个组成部分.由肝内间质细胞合成,内皮细胞参与降解.其血清含量对判明肝脏纤维程度,判别有无肝硬化具有一定意义[1].HA目前检测方法主要是放射免疫法(RIA),由于受标记物的稳定性、测量范围、放射性污染等因素的影响,存在一定的局限性.目前国内外尚无运用时间分辨免疫分析技术(TRFIA)检测HA的报道,为此经过探索和研究,我们建立了竞争HA-TRFIA检测方法,并探讨其在肝纤维化及肝硬化诊断中的应用价值.
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系统性红斑狼疮患者转化生长因子β1及其Ⅱ型受体的表达及意义
系统性红斑狼疮(SLE)是一种累及全身的自身免疫性疾病(AID),以B淋巴细胞功能亢进,产生大量自身抗体为特征,目前SLE的启动及疾病维持机制尚不十分清楚.转化生长因子β1(TGF-β1)是人体多种组织细胞的生长调控因子,对细胞外间质基因表达、基质降解、细胞增殖分化和细胞凋亡功能等具有明确作用.转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)基因的缺失及变异可使TGF-β1的信号转导通路受阻,使细胞增殖失去控制,导致细胞异常增殖或免疫失调.本研究测定TGF-β1与TβRⅡ在SLE不同疾病组中的变化,以评价其与SLE活动性之间的关系以及在SLE发病中作用,并为SLE诊断提供有价值的指标.
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关节盘移位后双板区弹力纤维的适应性变化
弹力纤维(elastic fiber, EF)是细胞外间质的一种组成部分,在关节组织中起着维持组织形态,尤其是关节盘和关节软骨形态的作用,双板区的EF还有预防关节盘过度前移和回拉关节盘的作用.我们通过动物模型对关节盘移位后双板区中EF的适应性改变做初步探讨.
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糖尿病视网膜病变细胞外间质和粘附分子的研究进展
细胞外间质(ECM)、粘附分子(AMs)及生长因子(GFs)与糖尿病微血管病变有密切的关系.研究不同阶段糖尿病视网膜病变在基膜、细胞表面等部位ECM、AMs的异常改变有助于了解其发病机制.ECM、AMs成分的改变和交联异常与非酶糖基化导致的糖基化终末产物有关,而许多GFs能诱导和促进此过程的发生和发展.血液ECM成分和AMs的含量测定对于糖尿病微血管病变的早期诊断、病情监测、疗效观察和预后判断都不失为良好的指标.
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子宫颈鳞状细胞癌细胞外间质改变的免疫荧光抗体法研究
目的:通过对细胞外间质(ECM)成分进行检测,探讨间质重构与子宫颈鳞状细胞癌侵袭性生长及播散的关系.方法:应用双重免疫荧光染色技术和激光共聚焦显微镜观察,对正常人及不同分化程度的子宫颈鳞状细胞癌患者的子宫颈石蜡包埋组织切片纤维结合素(FN)、层粘连蛋白(LN)及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白的表达进行检测.结果:正常子宫颈组织中,ECM内可见结构致密的Ⅰ、Ⅲ型胶原和细条索状的FN蛋白表达,Ⅳ型胶原和LN蛋白主要呈线状分布于基底膜内.子宫颈鳞状细胞癌组织中,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原降解,尤以后者为著,表现为Ⅰ、Ⅲ型胶原结构稀疏,排列紊乱,基底膜内Ⅳ型胶原的线状荧光减弱、断裂甚至缺失,间质和癌细胞浆内FN和LN蛋白表达增多,胶原的降解和FN、LN表达与癌细胞分化程度负相关.结论:子宫颈鳞状细胞癌,间质胶原降解,基底膜断裂,FN及LN表达增多,ECM重构,其程度与癌细胞分化程度呈负相关.
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榄香烯对Lewis肺癌小鼠基底膜及细胞外间质影响的实验研究
目的:研究基底膜及细胞外基质与肺癌浸润和转移的相互关系,以及中药榄香烯的抗癌作用机理.方法:以C57BL/6近交系小鼠建立Lewis肺癌模型,将40只小鼠分为正常组、模型组、CTX组及榄香烯组,14天后以放免法及SABC免疫组织化学方法,分别检测各组小鼠血清HA、Col Ⅳ及移植瘤组织LN、FN.结果:榄香烯能降低血清HA、Col IV含量;维持FN在瘤细胞周围基底膜及细胞外基质中的线状表达,降低肿瘤细胞LN表达;与模型组及CTX组比较有显著差别.结论:中药榄香烯与化疗药CTX抗肿瘤作用机理不同,其抑制肺癌转移的部分作用机制是通过保护基底膜和细胞外基质屏障以及降低肿瘤细胞中细胞外基质成分表达而实现的.
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γ-干扰素抗肝纤维化的实验与临床研究
γ-干扰素(γ-IFN)作为一种具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节作用的生物制剂,已在临床应用.近年又发现γ-IFN抗肝纤维化作用,各种不同病因肝纤维化发生的关键是肝星状细胞(HSC)的激活与转化,目前仅发现γ-IFN具有抑制HSC激活、增生和分泌细胞外间质的作用,并且进行了一系列实验与临床研究.
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慢性丙型肝炎患者血清转化生长因子-β1含量测定的临床意义
转化生长因子-β1(TGF-β1)是一种高二聚体多肽,具有促进间质细胞分化和增生,增加细胞外间质的沉积,抑制其降解的作用,是肝纤维化形成过程中一个重要的调控因子,我们采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定了22例慢性丙型肝炎患者血清中的TGF-β1含量,并观察了TGF-β1水平与重组复合α干扰素治疗的关系。1 对象与方法1.1 测定对象:22例慢性丙型肝炎患者均为本院1996年1月至1997年3月内住院患者,病程6个月以上,所有患者血清丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)均阳性,13例患者HCV RNA阳性,所有患者均未检出甲、乙、丁、戊、庚和TTV病毒合并感染,治疗用药为重组复合α干扰素(CIFN)9 μg皮下注射,每周3次,共24周。所有病例于治疗前后抽取不抗凝静脉血3 mL,待血块收缩后,2 000 r/min离心10 min,取上层血清置-80 ℃低温冰箱保存,备用。
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抗肺癌合剂对荷瘤小鼠基底膜及细胞外间质影响的实验研究
目的:观察抗肺癌合剂对荷瘤小鼠基底膜与细胞外间质的影响.方法:采用C57BL/6小鼠50只,雌雄各半,每只小鼠右侧腋窝皮下接种Lewis肺癌瘤细胞悬液0.2mL,24h后随机分为生理盐水组、模型对照组、CTX组和抗肺癌舍剂组,以1.2mg/kg的抗肺癌合剂灌胃,生理盐水组、模型对照组予以等量生理盐水灌胃,每日1次,连续14天;CTX组予以20mg/kg腹腔注射,隔日1次,共给药6次.每天观察动物的一般情况,隔日称重,并观察各组小鼠皮下结节情况;给药结束24h后处死所有动物,处死前,各组小鼠行眼球取血,测血透明质酸、胶原蛋白-Ⅳ;处死剥离肿瘤组织,对接种部位肿瘤组织进行FN和LN免疫组织化学染色,采用图像分析技术检测各组肿瘤组织FN和LN阳性表达的积分光密度.结果:模型对照组Lewis荷瘤小鼠血清中HA及Col Ⅳ含量较正常小鼠显著增高(P<0.01);抗肺癌合剂组能显著降低Lewis荷瘤小鼠血清中HA及ColⅣ含量,与模型对照组比较(P<0.01);而CTX对Lewis荷瘤小鼠血清中HA及ColⅣ含量有显著降低作用;与生理盐水组比较(P<0.01);对HA及ColⅣ未显示出明显的影响.结论:抗肺癌合剂能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和自发肺转移;能降低Lewis肺癌小鼠血清中HA和ColⅣ含量;能使FN在Lewis肺癌小鼠肿瘤周围脂肪组织、肿瘤包膜、血管壁及癌巢间呈断线状或连续线状表达.LN在模型组及CTX组中瘤细胞胞浆中有较高的表达,而抗肺癌合剂可显著降低其表达,显示抗肺癌合剂与CTX具有不同的作用机制.
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紫外线照射在皮肤损伤修复中的作用
紫外线具有抗炎、镇痛、促进再生作用。适当剂量紫外线可刺激表皮细胞增殖,促进免疫因子释放,但大剂量紫外线可导致皮肤老化,角质层增厚,甚至癌变及全身免疫力低下[1]。创伤修复包括受损组织的消除和各种细胞的聚集,局部产生大量的胶原基质,后形成瘢痕。多种细胞、基质成分、血管及多肽生长因子都与创伤修复过程密切相关[2]。一般认为,紫外线照射促进伤口愈合是由于:紫外线的直接杀菌作用;照射后皮肤发生光化学反应,生成皮肤红斑,局部血管扩张、充血、血流加快,组织血流灌注增多,细胞代谢增强;刺激细胞DNA、RNA的合成,促进细胞有丝分裂、生长繁殖[3,4]。研究表明,紫外线照射还能刺激皮肤角朊细胞产生IL-1、IL-6、bFGF、PDGF、TGF和TNF-α等多种细胞因子。这些因子能趋化粒细胞、单核-巨噬细胞系统,刺激成纤维细胞、内皮细胞有丝分裂,促进胶原的合成和分泌,从而起到抗炎,促进肉芽组织生长,加速伤口愈合的作用。 一、紫外线对细胞间基质的作用 胶原是皮肤组织细胞外间质的主要成分,在创伤修复过程中,机体可以通过胶原的合成、降解和吸收对创伤愈合和愈合后的组织进行改造,使组织修复得以完成和完善。纤维连接蛋白参与创伤修复过程的始终,它通过与多种细胞和细胞外基质相互作用,加速创伤修复。
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反映肝纤维化的血清学指标
肝纤维化是多种慢性肝病发展的结果,肝纤维化是肝硬化形成过程中的重要环节,目前诊断肝硬化以组织学检查为可靠,但因肝脏活组织检查取材局限,有创伤,不便常规随访及动态观察,临床应用受到限制.而对于肝脏纤维化标记物的动态检测,对肝硬化的发生、发展、评估有重要临床意义和价值[1].现将近年来有关肝纤维化的血清学指标简介如下.
关键词: 肝纤维化 细胞外间质 细胞因子 金属蛋白酶组织抑制因子-1 -
肝脏疾病的检验与临床诊断意义的分析
肝纤维化是肝硬化前期的必经阶段,目前常规的肝功能试验无法诊断肝纤维化或早期肝硬化。因此肝纤维化的血清标志物在临床上有重要诊断价值。肝纤维化的实质是细胞外间质的结缔组织增生,其成分主要是胶原蛋白,还有各种糖蛋白和蛋白多糖等。
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MMPs在肝纤维化形成与逆转过程中的作用
肝纤维化是机体对慢性损伤的主动性修复反应,以Ⅰ型胶原等细胞外间质(ECM)过多沉积于肝脏为特征.研究表明,基质金属蛋白酶类(MMPs)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)两者的平衡在ECM的合成与降解中发挥重要作用.近年来人们对肝纤维化形成的病理生理学机制,特别是对MMPs及TIMPs在此过程中的表达、作用以及相关的抗肝纤维化策略已经有了更全面、深入的了解,在此我们对MMPs在肝纤维化形成与逆转过程中的作用进行综述.
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MMP-2、MMP-9与脑缺血
细胞外间质(extracellular matrix,ECM)是细胞之间的物质,由多种蛋白质和非蛋白质组成,构成细胞生活的微环境,具有支持、连接、营养和防御等作用。基底膜主要由ECM构成。细胞外基质和基底膜的降解,在一定程度上决定着血管完整性的存在。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)是一组含Zn2+的能降解细胞外间质的蛋白酶,通常在中性条件下发挥活性,有Ca2+参与时活性大。MMPs在基底膜降解中起着主要作用。微血管的完整性在局灶性缺血时被破坏。其中MMP-2和MMP-9与脑血管病联系的研究较多。本文就MMP-2和MMP-9与脑缺血有关的文献综述如下。
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中药复方抗肝纤维化时的实验检测
目的:中药复方在慢性肝病临床治疗抗肝纤维化过程中疗效判断的实验检测.方法:选61例慢性肝炎、肝硬化病人随机分成两组,治疗组31例给中药复方柴胡疏肝散加减治疗3个月,对照组给益肝灵、护肝片治疗3个月.两组病人治疗前后分别测定肝功能及肝纤维化等有关指标.结果:治疗组ALT、SB、γ-G、HA、CⅣ降低较对照组明显(分别P<0.01、P<0.01、P<0.05、P<0.01、P<0.05).结论:中药复方抗肝纤维化治疗有效,采用肝功能及肝纤维化指标检测简单、方便,病人易接受,实验结果能指导临床用药.