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孤啡肽对创伤应激大鼠下丘脑组织中IL-1β mRNA水平的影响
孤啡肽(Orphanin FQ,OFQ)是1995年底新发现的神经肽,是阿片受体样受体的内源性配体.本室已往的研究结果表明侧脑室注射(icv)OFQ可阻断创伤应激介导的免疫抑制效应,本实验采用以单碱基突变模板作为内标的逆转录-聚合酶链式反应技术,观察icv OFQ对创伤应激大鼠下丘脑组织IL-1β mRNA水平的影响.
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血管紧张素对雄性大鼠下丘脑g-谷氨酰转肽酶活性与GnRH 含量的影响
近年来的研究表明,血管紧张素II(AngII)能促进下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌.在人和动物的下丘脑组织中含有丰富的g-谷氨酰转肽酶(GGT),其作用是促进氨基酸转运至细胞内,参与肽类或蛋白质的合成.本实验旨在观察雄性大鼠侧脑室注射不同剂量的AngII,下丘脑组织GGT活性与GnRH含量的变化,以探讨两者间的关系.
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大鼠抑郁性神经症模型下丘脑单胺类神经递质研究
我们在建立大鼠抑郁性神经症模型的基础上,应用高效液相色谱-EC法观察其下丘脑内单胺类神经递质的变化,旨在进一步探讨抑郁性神经症的发病机理.材料和方法 (1)动物模型:动物为成年SD雄性大鼠,体重180~220 g(南京中医药大学动物实验中心提供).首先用Open-Field法作行为学评分[1],选择得分相近的20只大鼠随机分为对照组和模型组,每组10只.模型组每笼饲养1只,对照组每笼饲养5只.模型组共接受21天各种不同的应激,包括冰水游泳(4 ℃,5 min)、热应激(45 ℃,5 min)、禁水(24 h)、夹尾(1 min)、电击足底(电压50 mV,每隔30 s刺激1次,每次持续10 s,共15次)、摇晃(1次/ s,5 min)、禁食(24 h)和昼夜颠倒等刺激,平均每种刺激各进行2次.(2)试剂:去甲肾上腺素(NE)酒石酸盐,多巴胺(DA)盐酸盐,5-羟色胺(5-HT)盐酸盐,3,4-二羟基苯乙二醇(DHPG),3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇(MHPG),3,4-羟基苯乙酸(DOPAC),高香草酸(HVA),5-羟吲哚乙酸(5-HIAA),3,4二羟基苯甲胺氢溴酸盐(DHBA),半胱氨酸(以上均为SIGMA公司产品),乙二胺-四乙酸二钠(EDTA,分析纯),辛烷基磺酸钠(东京化成工业株式会社产品),无水乙酸钠(分析纯),柠檬酸(分析纯),二正丁胺(化学纯),高氯酸(分析纯),甲醇(一级品,高效液相色谱专用).实验用水为重蒸馏水.(3)仪器:高效液相色谱仪由岛津LC-10A系列组成.(4)样品制备及测定:动物造模后立即断头处死,并同批处死对照组.取大鼠大脑,置于冰皿上,按Glowinski法分离下丘脑[2],称重后测定1 g下丘脑组织的MHPH、NE、DHBA、DOPAC、DA、5-HIAA、HVA、5-HT的含量(ng),计量单位以ng/g表示.
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成人重组人生长激素替代疗法的新进展
后天获得性生长激素(GH)缺乏是因肿瘤或继发于外科手术和/或放疗造成的垂体或下丘脑组织破坏.尽管儿童GH缺乏的诊断标准、治疗和临床表现已经完善建立,但成人GH缺乏的诊断标准和临床表现仍是目前的重点研究课题.现已证明,获得性GH缺乏会造成身体成分的改变,以及骨密度、脂肪代谢、心血管系统功能和体质状态等多方面的变化,而使用低剂量重组人生长激素(RHGH)能够逆转成人GH缺乏造成的临床表现.新技术的应用确保了这一点.
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血管紧张素Ⅱ对雄性大鼠下丘脑GGT活性的影响
目的观察雄性大鼠脑室微量注射不同剂量血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对下丘脑内侧基底部组织(MBH)γ谷氨酰转肽酶(GGT)活性变化的影响.方法应用速率法分析测定MBH处GGT活性.结果脑室微量注射不同剂量0.03.0.06、0.12μg AngⅡ 20μl,60分钟后使MBH处GGT活性分别为1.62±0.16、1.68±0.17、2.84±0.23(IU×10-3/10mg湿重组织),脑室注射0.12 μg Ang Ⅱ GGT活性与盐水对照组[1.41±0 14(IU×10-3/10 mg湿重组织)]相比差异显著(P<0.05),而0.03μg和0.06 μg Ang Ⅱ对下丘脑GGT活性无明显影响.此作用可被AngII的AT1受体拮抗剂Sar-alasin所阻断.结论 Ang Ⅱ使MBH处GGT活性增强,并存在剂量依从性关系,说明AngⅡ可能通过增加下丘脑组织GGT的活性,促进氮基酸转运至下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元内,参与GnRH蛋白质的合成,从而使下丘脑GnRH肽含量增加,促进GnRH神经元的分泌.Saralasin可翻转AngⅡ使GGT活性增加的作用,提示AT1受体可能参与介导AngII与GGT之间的相互作用.
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神经降压素在消化道疾病中的临床意义
1973年Carraway和Leeman从牛的下丘脑组织中分离P物质时,意外发现了一种能使皮下血管扩张和短暂降低血压的物质,由于该物质首先于神经组织中被发现,并具有降低血压的作用,因而被命名为神经降压素(NT).NT是一种脑肠肽,85%存在于胃肠道,对消化道疾病的发生、发展具有一定作用,本文就其研究现状和临床意义作一综述.
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褪黑素腹腔注射对小鼠胸腺及脑组织褪黑素受体的调节作用
1 材料和方法1.1 材料 C57小鼠(购自中科院生化所动物房),3周龄,用药组小鼠每天腹腔注射褪黑素(Mel)0.01、0.05、0.1、0.5 mg/kg,共2周.然后处死动物,取出胸腺和脑组织,液氮冻存.对照组小鼠每天腹腔注射等量生理盐水.1.2 膜受体制备取出冷冻的胸腺、下丘脑组织在0℃环境中解冻.解冻的组织加10倍体积(W/V)的Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L,pH 7.4)匀浆;匀浆液经高速低温离心(44 000×g,25 min,4℃)后弃上清, 用Tris-HCl缓冲液洗涤并离心1次.提取粗制的膜组织, 加Tris-HCl缓冲液制成膜制备样品,用Lowry法测定膜蛋白浓度.
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限制活动慢性应激大鼠脑组织NO、NOS含量变化的研究
慢性应激对脑海马损害已得到证实[1,2].急性应激障碍和创伤后应激障碍(PTSD)表现出记忆、学习等认知障碍及行为障碍,可能与脑边缘系统功能受损有关.病理生理机理尚不清楚,氧自由基对脑细胞毒性作用可能参与发病[3].近些年来研究说明NO是体内重要的自由基,在中枢神经系统具有重要的生理和病理作用,在生理情况下参与信息传递,在病理情况下对神经细胞具有毒性作用.本研究通过建立应激大鼠模型,检测大脑额叶、海马、下丘脑组织NO含量和NOS活力的变化,探讨其在应激过程中及应激障碍发病中的作用.
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解热醒神注射液对内毒素性发热家兔下丘脑cAMP及IL-1β含量的影响
目的:观察解热醒神(JRXS)注射液对内毒素(endotoxin, ET)性发热1 h家兔体温、下丘脑(hypothalamus, HP)环一磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量的影响.方法:20只新西兰家兔随机分为4组.NS组:NS 1.5 mL/kg iv;JRXS组:JRXS 1.5 mL/kg iv; ET组:ET 0.5 μg/kg iv; JRXS+ET组:JRXS 1.5 mL/kg iv, 30 min后,ET iv(剂量同ET组),观察1 h后,穿刺小脑延髓池抽取脑脊液,然后取下丘脑组织,并分别按cAMP(上海中医药大学同位素室)及IL-1β放免试剂盒(中国人民解放军总医院科技开发中心产品)说明书进行含量测定.观察指标:平均体温变化曲线;大体温上升高度(△T℃);体温反应指数(thermal response index, TRI);下丘脑、脑脊液的cAMP含量;下丘脑的IL-1β含量.所有实验数据用均数±标准差(眘)trtJRXS(P0.05)JRXSETJRXS+ETT(0.10.13)TRI10.36.62cAMP(1.36.27) nmol/gcAMP(14.40.69) nmol/LIL-1(2.90.37) ng/gETT(0.40.11)TRI11.78.79cAMP(2.90.40) nmol/g cAMP(32.10.51) nmol/LIL-1(6.08.79) ng/g(P0.01)cAMPcAMPIL-1(r1=0.918P0.05r20.926P0.05r3=0.868P0.01)JRXScAMP\,IL-1
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桂枝汤对发热及低温大鼠下丘脑PGE2含量及COX活性的影响
目的与方法:采用放免法及下丘脑中PGE2含量及COX活性进行同步检测,以期探明桂枝汤对体温双向调节作用与下丘脑组织中PGE2含量及COX活性的关系.结果:在酵母诱导发热大鼠中,桂枝汤对大鼠体温升高有显著的降低作用,在安痛定诱致的低体温大鼠中,桂枝汤对大鼠体温降低有显著的回升作用,给药后体温及体温变化差值与模型组比较均有显著差异,表明桂枝汤可使高、低体温动物分别向正常水平方向进行调节.在对不同体温状态大鼠发挥解热或抗低温作用的同时,桂枝汤对酶母诱导发热大鼠下丘脑中异常增高的PGE2含量有显著的降低作用,而对安痛定诱致的低体温大鼠下丘脑中异常降低的PGE2含量又有显著升高的作用.但桂枝汤对两种模型大鼠下丘脑细胞中COX活性影响不明显.结论:桂枝汤双向调节体温的作用机理可能部分是通过影响下丘脑组织中PGE2含量来实现的.但PGE2含量增减不依赖于下丘脑细胞中的COX,由于COX是PGE2生成中重要的限速酶,因此我们认为下丘脑中刺激体温变化的PGE2,来自自分泌(下丘脑细胞自身合成后分泌至胞外,再刺激分泌细胞)的可能性相对较小.
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川芎挥发油解热作用及其对家兔下丘脑单胺类神经递质含量的影响[ HT5”SS
目的:探讨川芎挥发油(CH)解热作用及其机理.方法:采用家兔内毒素发热模型,腹腔注射高、中、低三个剂量CH,观察家兔直肠温度变化,然后以荧光分光光度法测定家兔下丘脑单胺类神经递质含量.结论:各剂量组均有明显的解热作用(P<0.01)且在发挥解热作用的同时高剂量组家兔下丘脑组织中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)含量增高(P<0.05),去甲肾上腺素(NE)含量变化不明显,5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量减少(P<0.05).结论:CH具有解热作用,其机理之一,可能是CH引起下丘脑组织中5-HT含量的改变从而导致了NE与5-HT的比值改变,以及DA含量的改变,终使体温调定点趋于正常.讨论:体温调节的单胺学说认为5-HT和NE在量上的动态平衡可保持体温的相对恒定.并且5-HT和NE的变化与体温变化之间存在种属差异.本实验结果表明,川芎挥发油在发挥解热作用的同时,能使家兔下丘脑5-HT含量升高,这与文献报道的大鼠结果不一致,作者认为可能是种属差异引起的.同时NE含量变化不明显,5-HT与NE的比例关系发生明显变化,这可能是其解热作用机理之一.5-HIAA含量的降低,可能是由于川芎挥发油抑制了单胺氧化酶使5-HT代谢率降低所致.