白藜芦醇对自发性高血压大鼠主动脉重塑的影响及机制探讨

目的 观察白藜芦醇对自发性高血压大鼠(SHR)动脉重塑的影响,探讨白藜芦醇是否通过ACE2/Ang(1-7)/Mas轴抗动脉重塑.方法 将72只大鼠分为血压正常(WKY)组、SHR组、低剂量白藜芦醇干预SHR(SHLR)组、高剂量白藜芦醇干预SHR(SHHR)组,每组18只;WKY组、SHR组给予1ml生理盐水灌胃;SHLR组给予白藜芦醇2.5mg/(kg·d)+1 ml生理盐水灌胃;SHHR组给予白藜芦醇5 mg/(kg·d)+1 ml生理盐水灌胃;第8周、12周、16周时处死6只大鼠,取动脉血及主动脉组织,评估动脉结构及动脉纤维化;并测定血浆中转化生长因子β1(TGF-β1)、血管紧张素(Ang1-7)的含量以及动脉组织中血管紧张素转化酶2(ACE2)、Mas受体、TGF-β1 mRNA的表达.结果 与WKY组相比,SHR组血压明显升高(P＜0.05),且SHR组血管壁动脉中膜厚度显著增厚,SHLR组和SHHR组SHR动脉中膜厚度明显降低(P＜0.05);SHLR组和SHHR组动脉中膜胶原纤维含量明显减少(P＜0.05);低剂量和高剂量白藜芦醇干预能明显降低SHR大鼠血浆TGF-β1含量(P＜0.05),却能显著升高血浆Ang1-7含量(P＜0.05);低剂量和高剂量白藜芦醇干预使ACE2 mRNA表达明显升高(P＜0.05),Mas受体mRNA的表达与ACE2相似,TGF-β1mRNA表达明显降低(P＜0.05).结论 白藜芦醇对自发性高血压大鼠具有抗动脉重塑的作用;白藜芦醇通过调节ACE2-Ang1-7-Mas轴发挥抗动脉重塑作用.

久强脑立清促进自发性高血压大鼠脑内降钙素基因相关肽和突触素Ⅰ的表达

目的研究久强脑立清(JNQ)对自发性高血压大鼠(SHR)脑内降钙素基因相关肽(CGRP)和突触素Ⅰ表达的影响.方法大鼠随机分为4组:Wistar组、SHR组、JNQ低剂量SHR组、JNQ高剂量SHR组.给药3周后,用免疫组织化学的方法检测CGRP和突触素Ⅰ在海马齿状回、CA1区和大脑皮层的表达变化.结果与Wistar组比较,SHR组CGRP和突触素Ⅰ在海马齿状回、CA1区和大脑皮层的表达均降低,给予低剂量JNQ后能够增加CGRP在大脑皮层的表达,高剂量JNQ既能够增加CGRP在海马齿状回、CA1区和皮层的表达,还能增加突触素Ⅰ在海马CA1区的表达.结论JNQ可能通过上调CGRP的表达来改善SHR脑内的微循环,通过上调突触素Ⅰ的表达来增强SHR中枢神经系统的调控功能.

血管紧张素转换酶短发夹RNA对自发性高血压大鼠的降压效果

背景 高血压是多基因遗传病,与基因表达异常有关.因此.寻找一种长期有效的、通过调节体内基因表达而控制高血压的基因疗法,可能是解决高血压的终临床方案.目的 用RNA干扰技术下调血管紧张素转换酶(ACE)表达,观察其对自发性高血压大鼠(SHR)血压及肾脏表达ACE的影响.方法 SHR随机分为3组:空白对照组(注射生理盐水);病毒对照组(注射对照腺病毒:Ad5-EGFP);治疗组(注射表达ACE基因特异性短发夹RNA的重组腺病毒载体:Ad5-EGFP-ACE-shRNA);同时设WKY正常血压对照组(注射生理盐水).以上各组大鼠均于实验的第1天单次尾静脉注射给药.干预前后检测尾动脉压及心率的变化.于注射后第3天,取主动脉、肺、心肌、肾脏组织,荧光显微镜下观察对Ad5-EGFP-ACE-shRNA的吸收情况.并用RT-PCR及Western blot法检测肾组织中ACE mRNA及蛋白的表达.结果 治疗组尾动脉压于注射后第3天明显下降(19.0±3.2)mmHg,第13天时下降(22.1±3.3)mmHg,降压作用至少可持续14天,而空白对照和病毒对照组血压则持续升高.主动脉、肺、心肌、肾脏组织在荧光显微镜下可见大量绿色荧光表达.治疗组与空白对照和病毒对照组相比,治疗组肾组织中ACE mRNA(分别下降61.1%、62.3%)及蛋白(分别下降56.2%、53.3%,P<0.05)与WKY组差异无统计学意义(P>0.05).结论 RNA干扰可在mRNA水平有效抑制ACE的表达,对SHR起到明显持久的降压作用.RNA干扰技术可能成为高血压病基因治疗的一种新策略.

自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2 mRNA转录及其蛋白表达

目的 观察不同月龄自发性高血压大鼠(SHR)肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)mRNA转录及其蛋白表达,初步探讨ACE2在高血压发生、发展过程中的可能作用.方法 雄性SHR 1月龄组(S1)、2月龄组(S2)、3月龄组(S3)、6月龄组(S6)和9月龄组(S9)共5组,每组各6只,各组均有相应月龄匹配的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作对照.采用RBP-Ⅰ型大鼠血压心率测定仪测量大鼠尾动脉收缩压(SBP);逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肾脏ACE2 mRNA的转录水平;免疫组化染色结合计算机图像分析方法 测定肾脏ACE2蛋白的表达水平.结果 1)SHR的SBP随着月龄的增加而上升,6月龄后趋于稳定.2)SHR和WKY肾脏ACE2蛋白和mRNA水平均随着月份的增加而增加,3月龄时达高峰,6月龄后趋于稳定;且SHR肾脏ACE2蛋白和mRNA水平均低于同龄的WKY.S1肾脏髓质内侧部ACE2免疫染色阳性面积百分比较皮质和髓质外侧部高,与1月后的分布相反.结论 1)SHR肾脏ACE2 mRNA和蛋白的表达水平比WKY大鼠低.2)大鼠肾脏ACE2 mRNA和蛋白的表达具有时间和部位分布上的差异.

氯沙坦对自发性高血压大鼠心脏血管紧张素转换酶2-血管紧张素(1～7)-MAS-ERK通路的影响

目的 探讨氯沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)心肌中血管紧张素转换酶2(ACE2)-血管紧张素(1～7)[Ang(1-7)]-MAS-ERK通路的影响.方法 30周龄SHR随机分为SHR组(,n=11)、氯沙坦组[氯沙坦灌胃30mg/(kg·d),n=12],以Wistar大鼠(WKY)作正常对照(n=12).处理12周后,应用放射免疫法检测大鼠血浆及心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素(1～7)[Ang-(1-7)3水平;采用RT-PCR法检测各组大鼠心肌血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2和MAS受体mRNA水平;采用Western blot法检测ACE、ACE2和磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK1/2)蛋白表达水平.结果 用药12周后,氯沙坦组血压明显低于SHR组[(164.3±21.6)比(241.3±24.5)mm Hg,P<0.013;SHR组心肌ACE mRNA和蛋白表达水平显著高于WKY组,而ACE2 mRNA和蛋白表达、心肌MAS受体mRNA表达水平明显低于WKY组,差异有统计学意义(P<0.01);氯沙坦组ACE2mRNA和蛋白表达、MAS mRNA表达水平高于SHR组(P<0.01),心肌磷酸化ERK1/2蛋白相对水平低于SHR组.结论 SHR心肌存在ACE/ACE2比例失衡,血管紧张素受体拮抗剂改善心室重构,可能与ACE2-Ang[(1-7)]-MAS-ERK通路有关.

高血压实验动物模型

建立适当的动物模型是开展疾病的发病机制、治疗和预防等研究的重要工具.高血压是遗传因素和环境因素相互作用而形成的多因素疾病,根据模型制作方法的不同,高血压实验动物模型主要包括3类:自发性高血压、诱发性高血压和基因工程高血压动物模型[1].本文对近年来国内外高血压动物模型的制作及其应用进行总结,为高血压疾病的发病机制和防治研究提供参考.

氯沙坦对自发性高血压大鼠肾脏组织Bax、Bcl-2表达的影响情况

目的：探讨氯沙坦对自发性高血压（SHR）大鼠肾脏组织Bcl-2相关性蛋白X（Bax）和B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）表达的影响。方法选取近交系雄性SHR大鼠30只和Wistar-Kyoto雄性大鼠15只， SHR大鼠随机分为氯沙坦组（n=15）和SHR阳性对照组（n=15），氯沙坦组按氯沙坦30 mg/kg灌胃，SHR阳性对照组按0.9%氯化钠溶液10 ml/kg灌胃，Wistar-Kyoto大鼠作为正常对照组，按0.9%氯化钠溶液10 ml/kg灌胃，每日清晨灌胃，连续灌胃8周。比较各组大鼠尾动脉收缩压，采用免疫组化染色法检测两组Bax和Bcl-2蛋白表达，采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测Bax和Bcl-2 mRNA表达水平。结果氯沙坦组给药第4周和8周尾动脉收缩压明显低于给药前收缩压水平（P＜0.05）；氯沙坦组给药第4周和8周尾动脉收缩压低于SHR阳性对照组（P＜0.05）；氯沙坦组和正常对照组Bcl-2平均光密度分别为（0.19±0.01）和（0.20±0.02），明显高于SHR阳性对照组（P＜0.05），而Bax平均光密度分别为（0.12±0.02）和（0.13±0.01），明显低于SHR阳性对照组（P＜0.05）；氯沙坦组和正常对照组Bax和Bcl-2平均光密度比较差异无统计学意义（P＞0.05）；Bcl-2和Bax mRNA相对表达量在氯沙坦组和正常对照组间差异比较无统计学意义（P＞0.05），SHR阳性对照组患者的Bcl-2相对表达值显著高于氯沙坦组和正常对照组，而Bax mRNA相对表达值显著低于氯沙坦组和正常对照组（P＜0.05）。结论氯沙坦对SHR大鼠有明显的降压作用，可抑制Bax基因及蛋白表达，而促进Bcl-2基因及蛋白表达。

MMP-2、MMP-3、TIMP-1及氯沙坦与氨氯地平在老年前期自发性高血压大鼠肾硬化中的作用及其机理探讨

目的探讨MMPs/TIMPs与高血压性肾损害的关系.方法将SHR随机分为3组,每组10只.氨氯地平10 mg·kg-1·d-1或氯沙坦30 mg·kg1·d-1治疗3个月,为实验组;以模型SHR为空白对照组.同时以10只WKY大鼠为健康对照组.测量治疗前、后血压变化,血尿素氮、肌酐和24 h尿蛋白定量,观察Ⅳ型胶原(CoⅣ)、层连蛋白(LM)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在肾组织中的表达.结果①SHR血压显著增高;肾功能明显受损;肾组织病理改变显著.肾小球细胞外基质(ECM)成分(如:CoⅣ、LM)及TIMP-1表达增多;MMP-3、MMP-2表达减少;②治疗后,血压明显降低;肾功能损害减缓;肾组织病理改变减轻.肾组织中CoⅣ、LM、TIMP-1表达减少;MMP-3、MMP-2表达增多.结论氯沙坦与氨氯地平能延缓高血压性肾损害,改善已失调的MMPs/TIMPs比例;减少ECM在肾小球中的聚积,具有延缓高血压性肾硬化的作用.

依那普利和氯沙坦对自发性高血压大鼠肾脏环核苷酸水平的影响

1资料与方法14周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)18只,相同周龄的雄性大鼠WKY6只.共分4组,WKY对照组以等量蒸馏水灌胃,SHR随机分为依那普利组、氯沙坦组、SHR对照组3组,分别以依那普利(15mg@kg-1@d-1)、氯沙坦(37.5 mg@kg-1@d-1)、等量蒸馏水灌胃.

缬沙坦和螺内酯对自发性高血压大鼠心肌胰岛素样生长因子-1的影响

氯沙坦和雷米普利及其联合应用对自发性高血压大鼠心肌细胞内钙离子浓度的影响

增殖抑制基因与增殖性心血管疾病的研究进展

陈光慧等应用相差显像技术将年龄和性别相匹配的自发性高血压(spontaneously hypersensitive rat,SHR)大鼠和正常的Wistar Kyoto(WKY)大鼠的基因表达概要相比较,得到了一种新的基因.

缬沙坦对自发性高血压大鼠肾脏核因子-κB蛋白表达的影响/阿尔马尔治疗慢性肾衰竭合并高血压患者的疗效观察

缬沙坦对自发性高血压大鼠肾脏核因子-κB蛋白表达的影响/血压的自由度

慢性脑缺血对大鼠神经行为学和脑白质病理学变化的影响

目的 观察慢性脑缺血及脑缺血合并高血压对大鼠脑白质行为学和病理学的变化的影响. 方法 5个月龄的正常Wistar雄性大鼠30只及自发性高血压Wistar雄性大鼠20只,随机分为单纯缺血组12只,假缺血组9只,空白对照组9只;高血压+缺血组11只,单纯高血压组9只.采用双侧颈总动脉结扎法制作慢性前脑缺血模型.术后3个月用Morris水迷宫记录缺血前后大鼠空间记忆能力.免疫组化染色检测皮质下白质区髓鞘碱性蛋白(MBP)、高分子量神经丝蛋白(NF-H)和神经胶质酸性蛋白(GFAP)的表达情况. 结果 术后3个月结果:①单纯缺血组、单纯高血压组、高血压+缺血组的逃避潜伏期均较假缺血组及空白对照组延长(P<0.01);单纯缺血组与单纯高血压组相比,差异无统计学意义;高血压+缺血组比单纯缺血组及单纯高血压组逃避潜伏期延长趋势更明显.②与假缺血组比较,单纯缺血组、单纯高血压组、高血压+缺血组皮质下白质GFAP阳性细胞数增多,MBP、NF-H阳性细胞数均减少,差异有统计学意义(P<0.01);单纯缺血组与单纯高血压组比较,差异无统计学意义.高血压+缺血组GFAP阳性细胞增多、MBP、NF-H阳性细胞减少趋势均较单纯缺血组和单纯高血压组明显. 结论 慢性脑缺血可导致大鼠空间记忆能力下降;脑白质GFAP表达增多,MBP、NF-H表达减少可能参与其病理生理过程;高血压可以明显加重上述改变.

自发性高血压大鼠颅内动脉瘤瘤壁血管平滑肌细胞增殖活性的研究

目的 探讨自发性高血压大鼠(SHR)颅内动脉瘤形成过程中瘤壁血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖活性.方法 将180只成年雄性大鼠按照随机数字表法均分为对照组与5个实验组(包括1个月组、2个月组、3个月组、4个月组以及5个月组).实验组采用经背部入路双侧肾动脉后支结扎和左侧颈总动脉结扎建立SHR颅内动脉瘤模型.测定各组大鼠的尾动脉血压,行磁共振血管成像检查观察大鼠的颅内动脉瘤形成情况.取动脉瘤标本,采用HE染色观察动脉瘤的形态学改变,免疫组化方法检测瘤壁增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL染色测定瘤壁VSMC的凋亡情况.以Western blot方法检测瘤壁α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、β微管蛋白以及骨桥蛋白(OPN)的表达,通过实时定量PCR法检测瘤壁SM22α和高血压相关基因(HRG-1) mRNA的表达.结果 1个月组、2个月组、3个月组、4个月组、5个月组血压逐渐升高,且均高于术前和对照组的血压(均P ＜0.05).4个月组和5个月组可见动脉瘤形成.HE染色可见SHR颅内动脉内膜破坏、消失,中膜层VSMC数目减少,血管壁变薄.与对照组相比,各实验组的动脉壁组织中的PCNA阳性细胞率均明显增高(均P ＜0.05),其中4个月组高,5个月组有所下降.实验组颅内动脉壁VSMC的凋亡率自1个月组至5个月组逐渐升高,且均明显高于对照组(均P＜0.05).实验组颅内动脉壁α-SMA和β微管蛋白的表达自1个月组至5个月组逐渐下降,且均明显低于对照组(均P ＜0.05);与对照组相比,各实验组OPN的表达均明显增高(均P＜0.05),其中4个月组高,5个月组则开始下降.实验组颅内动脉壁VSMC的SM22α和HRG-1的mRNA自1个月组至5个月组逐渐下降,且均明显低于对照组(均P＜0.05).结论 SHR颅内动脉瘤形成过程中瘤壁VSMC具有增殖活性,且颅内动脉瘤的形成与瘤壁VSMC的增殖活性减弱、VSMC数量减少密切相关.

+Gz暴露后自发性高血压大鼠收缩压的变化及替米沙坦的影响

目的 观察正加速度(+Gz)暴露后自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)收缩压(systolic blood pressure,SBP)的变化及替米沙坦的影响.方法 28只8周龄雄性SHR及14只8周龄雄性Wistar Kyoto大鼠(WKY)随机分为6组:SHR+ Gz暴露组(SHR+ Gz)7只,SHR对照组(SHR-C)7只,替米沙坦治疗SHR+ Gz暴露组(TT-SHR+Gz)7只,替米沙坦治疗SHR对照组(TT-SHR-C)7只,WKY+ Gz暴露组(WKY+ Gz)7只,WKY对照组(WKY-C)7只.+Gz暴露采取+5 Gz持续10 s和+9Gz持续10 s交替3次进行,+Gz作用总时间94 s,Gz增长率为1 Gz/s.休息20 min后,重复暴露1次,连续进行7d暴露.对照组大鼠不进行+Gz暴露.结果 替米沙坦治疗后,两组服药大鼠SBP降低至正常水平.每日+ Gz暴露后1h,WKY+ Gz大鼠SBP与WKY-C大鼠相比无明显变化.SHR+ Gz大鼠从+ Gz暴露的第1天至第7天,暴露后1h的SBP始终高于SHR-C大鼠(P＜0.01).TT-SHR+Gz大鼠在+ Gz暴露开始后的第1,2天,暴露后1h的SBP出现了一过性下降,第3天以后该现象消失.每日+Gz暴露后6h,两组SHR的SBP均可恢复至每日+Gz暴露前水平.结论 SHR在+Gz暴露后可产生明显的SBP升高反应,替米沙坦可抑制该反应,可能具有心血管保护作用.

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压和细胞色素P450表氧化酶2C11基因表达的影响

目的 研究阿托伐他汀降低自发性高血压大鼠(SHR)血压的作用是否与其调节细胞色素P450表氧化酶2C11(CYP2C11)基因表达的作用有关.方法 18只SHR随机分为SHR模型组、阿托伐他汀50和10 mg·kg-1组;6 只Wistar-Kyoto大鼠(WKY)作为正常对照组.阿托伐他汀ig给药,每日1次,共10 周.分别于给药前和给药后每2 周测量大鼠尾动脉收缩压(SBP);RT-PCR和Western 印迹法分别检测心、肝、肾及主动脉组织中CYP2C11 Mrna和蛋白质表达;ELISA方法检测尿液中14,15-二氢二十碳三烯酸(DHET)含量;并测定血脂含量.结果 阿托伐他汀50 mg·kg-1组在给药后第6～10周和10 mg·kg-1组在给药后第10周SBP明显低于SHR模型组.在CYP2C11 Mrna和蛋白质表达中,SHR模型组心、肾和主动脉均明显高于WKY组;给药10 周后,阿托伐他汀50 mg·kg-1组的4 种组织和10 mg·kg-1组的心、肾和主动脉的表达明显高于SHR模型组.治疗前SHR各组尿液中DHET的含量均显著高于WKY组,给药后阿托伐他汀50 mg·kg-1组的含量明显高于SHR模型组;同时,阿托伐他汀50 mg·kg-1组血脂水平明显低于SHR模型组.结论 阿托伐他汀可上调CYP2C11基因的表达,并增加其代谢产物表氧化二十碳三烯酸,这可能是其降低血压的作用机制之一.

人参茎叶皂苷预适应对自发性高血压大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究人参茎叶皂苷(GSLS)预适应对自发性高血压大鼠(SHR)心肌缺血再灌注损伤(I-R)的保护作用及可能机制.方法 SHR于I-R造模前每日1次灌胃给予GSLS 50和100 mg·kg-1,连续3周,于缺血40 min和再灌注30 min内测定大鼠血压、心功能和心脏血流动力学指标,生化方法 测定心肌ATPase酶、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和NO含量,镉血红素饱和法测定心肌和肝脏金属硫蛋白(MT)含量,免疫组化方法 测定细胞热休克蛋白70(HSP70)表达.结果 GSLS 50和100 mg·kg-1预适应组显著改善I-R损伤SHR的心率、左室内压峰值和左室内压大变化速率(±dp/dtmax),明显提高心肌ATPase 活性,减少LDH漏出,提高心肌SOD活性,增加NO含量,降低MDA含量,增加心肌和肝脏MT含量,增加心肌HSP70阳性细胞百分数.结论 GSLS预适应对心肌I-R损伤具有保护作用,其作用机制与改善SHR心肌舒缩功能,改善心肌代谢,增强抗氧化活性和诱导内源性心肌保护物质的释放有关.

4月龄自发性高血压大鼠主动脉功能性α1肾上腺素受体亚型没有改变

大量动物实验和流行病学调查结果表明,交感-儿茶酚胺系统与高血压的发病和病理过程存在密切关系.α1肾上腺素受体(α1-AR)作为内源性儿茶酚胺的靶受体, 在介导血管收缩过程中占有重要地位. 现已明确α1-AR分为α1A, α1B和α1D 3种亚型,在正常Wistar大鼠介导主动脉收缩的α1-AR主要为α1D亚型[1～3].本文采用离体主动脉收缩功能实验,观察4月龄自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)介导主动脉收缩的功能性α1-AR亚型是否有改变.