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原代细胞永生化的研究进展
现代生物技术一般包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,细胞培养更具有特殊的作用和价值.有学者研究发现,由于永生化细胞在体内可多次传代,具有相对稳定的增殖特性和功能状态,将其作为细胞工程和组织工程等研究领域的标准细胞,促进了体外实验的标准化和科学化[1].费氏病毒学[2]指出,原代细胞的培养是直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,更有利于进行病原体感染的体内微环境、抗病毒药物筛选等研究,但是原代细胞只具有2~3次的复制繁殖传代周期,对开展细胞研究具有一定的局限.原代细胞永生化技术在未来的成功应用,不仅为生物制品的研究与开发提供了有力工具,而且也为难培养病毒的体外培养、疾病的诊断与治疗提出了新的思路[3].
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EB病毒相关胃癌研究进展
世界范围内约10%的胃癌组织中可检测到EBV,研究显示:EBV感染能使原代培养的正常胃上皮细胞永生化,EBV相关胃癌是由一个EBV感染的细胞单克隆增殖形成,提示EBV感染在EBV相关胃癌的发展中起重要作用.本文就EBV相关胃癌的诊断、病毒存在形式和基因表达、影响其发生发展的协同因素以及EBV对上皮细胞的生长促进作用作一综述.
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EB病毒潜伏膜蛋白LMP1有关信号传导通路的研究进展
EB病毒的致癌性与细胞源性基因和潜伏感染基因有关,其中潜伏膜蛋白(latent membrane protein,LMP)家族LMP1、LMP2A、LMP2B可干扰信号传导通路并诱导B细胞转化.在EB病毒潜伏感染期所表达的核蛋白和膜蛋白中,LMP1因为能够诱导啮齿动物纤维母细胞系的癌基因转化而引起人们的广泛兴趣.人们发现LMP1高表达与细胞高活性之间有密切关系,如纤维母细胞系癌基因转化、抗凋亡蛋白上调和细胞表面标志及细胞因子产生、上皮细胞分化抑制等[1].LMP1能使啮齿动物的成纤维细胞永生化,失去接触抑制功能,锚定非依赖性生长并对裸鼠产生致瘤性[2].自1995年以来,关于LMP1信号传导的研究取得了重要进展,然而LMP1是通过何种途径引起这些效应,目前尚未完全明了,其信号传导过程仍然是目前研究的重要课题.
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端粒酶检测技术新进展
近年来,随着端粒酶结构、功能及调控的深入研究,人们对端粒酶在细胞永生化以及肿瘤癌变进程中的作用有了新的认识.探索端粒酶的作用机制,不同角度分析肿瘤发生机制,对各种端粒酶检测技术的摸索具有重要的现实意义.
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端粒酶检测技术在肿瘤诊断中的应用
近年来,有关端粒和端粒酶的研究异常活跃.随端粒酶结构、功能及调控的深入研究,人们对端粒酶在细胞永生化及癌变中的作用有了新的认识.端粒酶检测技术对恶性肿瘤的早期诊断、预后判断及治疗监测具有重要的临床意义.
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端粒酶的研究进展
端粒/端粒酶系统可以调节细胞的增殖.通过抑制端粒酶的活性而抑制细胞的增殖,是一种肿瘤治疗的策略;通过激活端粒酶的表达而促进细胞增殖,可以治疗某些退形性疾病.近年来对此系统的研究成为热点,本文就端粒酶的作用、调节及其与肿瘤、细胞永生化方面进行综述.
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端粒酶与肿瘤
1引言端粒酶(Telomerase)在绝大多数恶性肿瘤细胞中呈现活性,与肿瘤细胞永生化密切相关.端粒酶除了可被作为一种肿瘤标记物而用于诊断恶性肿瘤外,更有意义的是有希望通过抑制端粒酶而治疗几乎所有恶性肿瘤.有关端粒酶及其在肿瘤诊治方面的研究是目前肿瘤学研究领域热的课题之一.
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端粒酶及幽门螺杆菌感染与胃黏膜癌变的相互关系
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染是慢性胃炎的主要病因,与胃癌发生也密切相关,但其确切的致病机制未明.端粒酶的激活是细胞永生化和无限增殖的重要条件.研究表明,幽门螺杆菌感染与端粒酶活性具有相关性,人们推测Hp感染可能是端粒酶激活的一个启动因子.现就端粒酶、幽门螺杆菌感染与胃黏膜癌变之间的相互关系作扼要综述.
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端粒酶在细胞永生化及肿瘤诊断中的作用
端粒酶是一种新的肿瘤标记物,细胞永生化是细胞获得持续生长增殖能力的特性,永生化的细胞有无限增殖生长性,可长期传代.综观国内外的研究情况,端粒酶在肿瘤的诊断上尚有可观的价值,已成人类的研究热点,现已确知在85%的人肿瘤组织中发现了端粒酶活性的表达,因此,已把端粒酶作为肿瘤基因诊断的指标和治疗的新靶点.
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人端粒酶逆转录酶基质金属蛋白酶-7 mRNA在胃肠癌患者外周血中的表达及意义
人端粒酶逆转录酶(HTERT)是端粒酶的主要成分之一,其表达与端粒酶的激活密切相关,在细胞永生化中发挥重要作用[1]。基质金属蛋白酶-7(MMP-7)是基质金属蛋白酶家族成员之一,具有强大的基质降解活性和广泛的底物特异性,参与肿瘤的发展、浸润和转移过程[2]。我们应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胃肠癌患者外周血HTERT及MMP-7mRNA,探讨其对早期发现胃肠癌患者血液微转移的临床意义。
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端粒酶研究在实体瘤诊治中的应用 : 针对端粒酶进行肿瘤基因治疗可能会引起肿瘤基因治疗的一场革命
1 概述 端粒 ( Telomere) 是真核细胞染色体末端的特殊 DNA- 蛋白质结构 , 其作用是保护和稳定染色 体末端 . 研究提示 , 端粒 DNA的长度与细胞的寿命 , 或细胞癌化密切相关 . 端粒酶为一种核糖 蛋白酶 , 端粒的合成是以一段 RNA为模板 , 端粒酶通过反转录过程合成端粒片断并使其连结于 染色体的端粒末端 [1]. 端粒酶的发现揭示了自然界如单细胞生物是如何处理 " 复制末端问题 " . 癌细胞的永生化是肿瘤细胞区别于正常细胞的重要特性之一 , 也是肿瘤生长和转移的关 键 . 自从 1989年 Morin首次在人的癌细胞中发现端粒酶以来 , 肿瘤细胞永生化的 " 端粒 - 端粒 酶 " 假说已为越来越多的研究结果所证实 .
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衰老小鼠端粒酶活性的测定及意义
近年的研究表明,端粒酶激活是细胞永生化和增殖的必要条件,人类衰老及肿瘤的发生发展过程中伴随着细胞染色体末端端粒及端粒酶活性的变化.目前,国内外有大量文献报道端粒酶参与了肿瘤的发生发展,85%以上的人类肿瘤细胞表达了端粒酶活性,而有关衰老时组织端粒酶活性的变化国内研究较少.
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Epstein-Barr病毒(EBV)及其介导的细胞永生化
Epstein-Barr病毒(EBV)因其与众多肿瘤的相关性以及其在体外能使B淋巴细胞永生化形成淋巴母细胞样细胞系(LCLs)的特性而成为近年来细胞永生化研究的热点之一。研究表明,EBV主要是通过其潜伏蛋白激活细胞因子与其受体相互作用的途径而使细胞永生化的,但是病毒蛋白的具体作用机制尚无定论。本文综述了EBV生物学特性方面近年来的研究成果,并以LCLs为切入点初步探讨了EBV介导的细胞永生化。
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端粒酶与肿瘤关系的研究进展
自人们认识到真核生物染色体的端区及端粒酶在维持细胞永生化上的重要意义以来,对端粒酶进行了大量的深入研究.端粒酶在癌细胞恶性表型中的作用,以及端粒酶在机体衰老过程中扮演何种角色,为何某些肿瘤在老年人群发病率高,一直是研究的焦点.本文对近年来有关端粒酶与肿瘤的研究进展作一简要介绍.
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谷胱甘肽-S-转移酶-π和端粒酶在食管癌及癌前病变组织中的表达
谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是一组有多种生理功能的同功酶,在保护细胞免受细胞毒性物质和致癌剂损害方面起重要作用.研究表明,端粒酶的激活与细胞永生化、癌变关系极为密切[1].我们采用免疫组化和TRAP-银染法检测GSTπ和端粒酶在食管癌及癌前病变组织中的表达.
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胃癌及癌前病变组织端粒酶催化亚单位mRNA的表达及其临床意义
目前,国内外关于胃癌的发病机制有诸多研究,端粒和端粒酶是近年来肿瘤基础研究的热点之一.端粒酶是一种逆转录酶,能以自身RNA为模板,合成端粒重复序列加至染色体末端,因此在细胞永生化和癌变过程中可能起到重要作用.研究表明,端粒酶在胃癌组织中高表达,在癌前病变组织里有所表达,但两者显著不同[1-5].本文检测了胃癌及癌前病变患者端粒酶催化亚单位(hTERT)的表达,藉以了解端粒酶在胃癌发生发展过程中所起的作用.
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内镜下双重染色和端粒酶活性检测在食管癌早期诊断中的价值
食管癌的早期诊断目前主要依靠内镜检查,但其活检存在一定局限性,而内镜下食管黏膜染色不仅可以确切地获得病变形态学的判断,并且有利于正确选择活检部位.研究表明,端粒酶的激活参与了细胞永生化和癌变的过程[1].Kim等[2]为检测端粒酶活性提供了一种灵敏度很高的端粒重复序列扩增法(TRAP法),但内镜活检组织端粒酶时的部位选择带有一定的主观性.为克服此缺陷,我们采用内镜下美蓝-卢戈液双重染色配合端粒酶活性检测的方法诊断食管癌,探讨报道如下.
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16型人乳头瘤病毒E6、E7基因延长人黑素细胞生命期的初步研究
16型人乳头瘤病毒(HPV16)E6/E7基因能有效地使人上皮细胞、角质形成细胞永生化,为探讨HPV16E6/E7对黑素细胞的影响,本研究用Lipofectamine转染法将HPV16E6/E7基因导入正常人黑素细胞,观察其对黑素细胞生命期的影响,并就其意义进行了初步探讨.
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细胞永生化机制及不同细胞永生化方法研究进展
永生化细胞是一种在理化刺激、基因突变、病毒感染等外界刺激下,可以在体外无限增殖的不衰老细胞株。细胞永生化机制有放射性因素、端粒-端粒酶激活、病毒基因转染及抑癌基因受抑制等学说。作者在总结细胞永生化原理的基础上阐述不同组织细胞永生化的技术方法及生长状态。
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阻断癌发展的途径
美国得克萨斯大学西南医学中心及国立癌症研究所试验小组经过两年的实验,从转移癌中发现了一条防止易感性癌细胞的途径。在分子生物学及细胞学家的一系列实验中阻止一种名为端粒酶的物质可以防止癌生长。该实验来自于一名31岁有Li-Fraumeni综合征(LFS)遗传倾向的妇女,她有p53基因改变,正常时该基因可以杀伤细胞,LFS病人的p53基因丧失作用使细胞发生癌变。LFS细胞因为有发生癌变的倾向在实验中被利用,在实验室正常人的细胞转变为癌细胞很少见。研究人员将细胞暴露于靶向分子的物质上,观察发生在端粒酶化学途径关键位置上的变化。发现两例病人导致细胞永生化,正常细胞没有死亡。其中一例至少8次癌变,当用第二种抗端粒酶物质时,该类细胞至少3次癌变。这是第一次证明了阻断端粒酶可以防止癌症。以往的研究抑制端粒酶能够阻断癌细胞生长。在正常的人类细胞中DNA片段叫端粒,其位置在真核染色体末端,随着每次细胞分化而缩短,当该片段变得太短时细胞就停止分化。端粒酶停止缩短,能够使细胞无限制的复制,对大约90%的人类癌症能表现其端粒酶水平的升高。这项实验证明了潜在的抗端粒酶抑制剂防止癌症的途径。Berkeley国家实验室高级研究员Judith Campisi医生说,研究人员报告的这项工作对有遗传倾向的乳腺癌妇女来说,指明了一种发展化预防战略的潜在方法。端粒酶抑制剂在其他治疗实验中,不仅可以治疗完全成熟的癌细胞,也可以用于预防高危人群。黎彬摘译自www2.cancer.com,施忠道审校